RESUMO Polihidroxibutirato (PHB) é um biopolímero produzido intracelularmente e acumulado como reserva de energia por muitos microrganismos, sendo o principal, a bactéria Cupriavidus necator. Logo, é necessário realizar a extração dos grânulos intracelulares do interior das células. A extração química do PHB com clorofórmio e hipoclorito de sódio é eficiente, porém, utilizam-se elevadas quantidades de clorofórmio, solvente tóxico e volátil. Assim, faz-se necessário o estudo de novas tecnologias para a extração do PHB, buscando tornar o processo viável tecnologicamente, visto que este biopolímero é um importante candidato para substituição de polipropileno (PP). Diante desse contexto, este trabalho objetivou avaliar o processo de extração do PHB por meio das larvas de Zophobas morio Fabricius, comparado ao processo químico tradicional. O PHB foi sintetizado pela bactéria Cupriavidus necator em frascos de Erlenmeyer com 300 mL de meio mineral contendo glicose e frutose como fontes de carbono. O cultivo foi conduzido por 24 h a 30 °C e 150 rpm. A biomassa obtida do cultivo foi submetida à extração química (dispersão de clorofórmio/hipoclorito de sódio) e biológica, sendo, para isto, utilizada em uma mistura 2:1 (m/m) de farelo de trigo para biomassa úmida contendo PHB como fonte de alimentação das larvas de Zophobas morio Fabricius. O PHB obtido pelos dois processos foi caracterizado por termogravimetria (TG), calorimetria diferencial exploratória (DSC), espectroscopia na região do infravermelho com transformada de Fourier - reflexão total atenuada (FTIR/ATR), difratometria de raios-X (DRX) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Verificou-se que a amostra extraída pelo método biológico (PHB_EB), quando comparada com a amostra extraída pelo método químico (PHB_EQ), apresentou a mesma estrutura química e que a metodologia biológica usando larvas apresentou-se mais rápida e eficiente, garantindo a extração do PHB com elevada pureza e estabilidade térmica, com reduzida quantidade de solvente, tornando este processo mais ambientalmente amigável.

ABSTRACT Polyhydroxybutyrate (PHB) is an intracellularly produced biopolymer accumulated as an energy reserve by many microorganisms, being the main producer the bacterium Cupriavidus necator. Therefore, it is necessary to extract intracellular granules from the inside of cells. PHB chemical extraction with chloroform and sodium hypochlorite is efficient, but high amounts of chloroform, toxic and volatile solvent are used. Thus, it is necessary to study new technologies for the extraction of PHB, seeking to make the process technologically, since this biopolymer is an important candidate for polypropylene replacement (PP). In this context, this study aimed to evaluate the PHB extraction process from larvae Zophobas morio Fabricius. PHB was synthesized by the bacterium Cupriavidus necator in Erlenmeyer flascks with 300 mL of mineral medium containing glucose and fructose as carbon sources. The culture was conducted for 24 h at 30 °C and 150 rpm. Biomass obtained from cultive was submitted to chemical extraction (dispersion chloroform/sodium hypochlorite) and biological, and for this, used in a mixture 2:1 (m/m) of the wheat meal with cells containing PHB as a feeding source of the larvae of Zophobas morio Fabricius. PHB obtained by the two recovery processes were characterized by thermogravimetry (TG), exploratory differential calorimetry (DSC), infrared spectroscopy with Fourier transform - total attenuated reflection (FTIR/ATR), X-ray diffractometry (XRD) and scanning electron microscopy (SEM). It was found that the sample extracted by the biological method (PHB_EB) , when compared with the sample extracted by the chemical method (PHB_EQ), presented the same chemical structure, and that the biological methodology using larvae was faster and more efficient, guaranteeing the extraction PHB with high purity and thermal stability, with reduced amount of solvent, making this process more environmentally friendly.

Abstract Candida infection is an important cause of morbidity and mortality in immunocompromised patients. The increase in its incidence has been associated with resistance to antimicrobial therapy and biofilm formation. The aim of this study was to evaluate the efficacy of tea tree oil (TTO) and its main component – terpinen-4-ol – against resistant Candida albicans strains (genotypes A and B) identified by molecular typing and against C. albicans ATCC 90028 and SC 5314 reference strains in planktonic and biofilm cultures. The minimum inhibitory concentration, minimum fungicidal concentration, and rate of biofilm development were used to evaluate antifungal activity. Results were obtained from analysis of the biofilm using the cell proliferation assay 2,3-Bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide (XTT) and confocal laser scanning microscopy (CLSM). Terpinen-4-ol and TTO inhibited C. albicans growth. CLSM confirmed that 17.92 mg/mL of TTO and 8.86 mg/mL of terpinen-4-ol applied for 60 s (rinse simulation) interfered with biofilm formation. Hence, this in vitro study revealed that natural substances such as TTO and terpinen-4-ol present promising results for the treatment of oral candidiasis.

Objective: to evaluate the antifungal activity of a-terpinen on planktonic cultures and biofilm of Candida albicans. Material and Methods: first, Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Fungicidal Concentration (CFM) of a-terpinen were determined. Nystatin was used as a positive control. Biofilm of Candida albicans was developed and, after treatment with different concentrations of a-terpinen, was quantified in CFU/mL, in addition to metabolic activity of the cells being evaluated by XTT. Results: the lowest concentration able to inhibit the growth (MIC) was 0.2% for a-terpinen and 4 µg / mL for Nystatin. Results showed that from the concentration 0.05% of α -terpinen and 2 µg / mL of Nystatin, there was a decrease of Candida albicans when compared to the control, in planktonic culture. CFM was 0.2% for α -terpinen and 8 µg / mL for Nystatin. Regarding the quantification, effective concentrations were α-terpinen (0.1%) and Nystatin (128 µg/mL), and in the XTT test, α-terpinen (0.1%) and Nystatin (256 µg/mL) decreased metabolic activity when compared to control. Conclusion: Thus, it can be stated that a-terpineol may be an alternative for the treatment of fungal infections.

Objetivo: avaliar a atividade antifúngica do a- terpinen sobre culturas planctonicas e biofilme de Candida albicans. Material e Métodos: Primeiramente, foi determinada a Concentração Inibitória MÃnima (CIM) e a Concentração Fungicida MÃnima (CFM) do a-terpinen sobre microrganismos planctônicos. A Nistatina foi utilizada como controle positivo. Biofilme de Candida albicans foi desenvolvido e, após o tratamento com diferentes concentrações de α-terpinen, foi quantificado em UFC/mL, além da atividade metabólica das células ser avaliada por XTT. Resultados: a menor concentração capaz de inibir o crescimento (CIM) foi 0,2 % para o a-terpinen e 4 µg/mL para a Nistatina. Na CIM, os resultados mostraram que a partir da concentração 0,05 % de α-terpinen e 2 µg/mL de Nistatina houve diminuição de C.albicans quando comparado ao controle. A CFM foi para a-terpinen 0,2 % e Nistatina 8 µg/mL. Na quantificação as concentrações eficazes foram de α-terpinen (0,1%) e Nistatina (128µg/mL), e no teste do XTT, observou-se que α -terpinen (0,1%) e Nistatina (256µg/mL) diminuem a viabilidade quando comparado com o controle. Conclusão: Assim, pode-se afirmar que α -terpineol pode ser uma alternativa para tratamento de infecções fúngicas.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade antifúngica do Terpinen4-ol associado à nistatina em biofilmes simples e misto, formados por Candida albicans e Candida tropicalis, bem como o efeito do terpinen-4-ol na adesão em células orais e atividade enzimática. As concentrações inibitórias mínimas e as concentrações fungicidas mínimas do terpinen-4-ol e da nistatina em Candida albicans e Candida tropicalis foram determinadas pelo método de microdiluição em caldo, juntamente com a atividade sinérgica (método do tabuleiro de “xadrez”). Biofilmes simples e misto foram preparados usando o modelo de placa de microtitulação estática e quantificados por unidades formadoras de colônias (CFU/mL). O efeito do Terpinen-4-ol na adesão de Candida albicans e Candida tropicalis em co-cultura com queratinócitos orais (NOK Si) foi avaliado, bem como a atividade enzimática, medindo o tamanho da zona de precipitação, após o crescimento em ágar fosfolipase, protease e hemolisina. O terpinen-4-ol (4.53 mg mL-1) e a nistatina (0,008 mg mL-1) conseguiram inibir o crescimento de biofilmes e um efeito antifúngico sinérgico foi demonstrado com a associação de fármaco, reduzindo a concentração inibidora de nistatina até 8 vezes em biofilme simpes de Candida albicans e 2 vezes em biofilme misto. Uma pequena diminuição na adesão de Candida tropicalis em células NOK Si foi mostrada após o tratamento com terpinen-4-ol e a nistatina teve um efeito maior para ambas as espécies. Para a atividade enzimática, as drogas não apresentaram ação. O efeito potencializado pela combinação de terpinen-4-ol e nistatina e a redução de adesão evidenciam seu potencial como agente anti-fúngico.

Abstract The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of Terpinen-4-ol associated with nystatin, on single and mixed species biofilms formed by Candida albicans and Candida tropicalis, as well as the effect of terpinen-4-ol on adhesion in oral cells and the enzymatic activity. The minimum inhibitory concentrations and minimum fungicide concentrations of terpinen-4-ol and nystatin on Candida albicans and Candida tropicalis were determined using the microdilution broth method, along with their synergistic activity (“checkerboard” method). Single and mixed species biofilms were prepared using the static microtiter plate model and quantified by colony forming units (CFU/mL). The effect of Terpinen-4-ol in adhesion of Candida albicans and Candida tropicalis in coculture with oral keratinocytes (NOK Si) was evaluated, as well as the enzymatic activity by measuring the size of the precipitation zone, after the growth agar to phospholipase, protease and hemolysin. Terpinen-4-ol (4.53 mg mL-1) and nystatin (0.008 mg mL-1) were able to inhibit biofilms growth, and a synergistic antifungal effect was showed with the drug association, reducing the inhibitory concentration of nystatin up to 8 times in single biofilm of Candida albicans, and 2 times in mixed species biofilm. A small decrease in the adhesion of Candida tropicalis in NOK Si cells was showed after treatment with terpinen-4-ol, and nystatin had a greater effect for both species. For enzymatic activity, the drugs showed no action. The effect potentiated by the combination of terpinen-4-ol and nystatin and the reduction of adhesion provide evidence of its potential as an anti-fungal agent.

RESUMO: Objetivo: Artigo metodológico com o objetivo de descrever a construção de um questionário de frequência alimentar (QFA) digital autoaplicado, desenvolvido para as coortes de nascimentos de Pelotas de 1982 e 1993. Métodos: O instrumento foi criado com base em QFAs anteriormente utilizados nas duas coortes em acompanhamentos nos anos de 2004 e 2008. O QFA foi elaborado incluindo 88 alimentos e/ou preparações cujas frequências foram agrupadas em categorias desde o valor mínimo de consumo de nunca ou < 1 vez/mês até o máximo de ≥ 5 vezes/dia. As opções fechadas relativas à porção foram construídas considerando recordatórios de 24 horas (R24Hs) anteriormente aplicados à subamostra da coorte de 1993. Três alternativas de porção foram construídas: igual, menos ou mais. A porção igual foi descrita com base no percentil 50 do consumo de cada alimento, obtido a partir das distribuições das porções constantes nos R24H. Fotos das porções relativas ao percentil 50 de cada alimento foram também incluídas ao formato do programa. Resultados: Esse QFA digital incluiu alimentos e preparações que atendem aos objetivos das pesquisas atuais. A aparência do programa foi atrativa à equipe de trabalho e também aos participantes do estudo. O tempo médio de aplicação de 12 minutos e a facilidade de preenchimento possibilitaram que vários participantes respondessem às questões ao mesmo tempo. Além disso, o instrumento dispensou a necessidade de entrevistador e a dupla entrada de dados em programa específico. Conclusão: Recomenda-se o uso dessa mesma estratégia em outros estudos, adaptando-a aos diferentes contextos e situações.

ABSTRACT: Purpose: Methodological paper aiming to describe the development of a digital and self-reported food frequency questionnaire (FFQ), created to the 1982 and 1993 Pelotas Birth Cohorts. Methods: The instrument was created based on FFQs previously applied to subjects belonging to both cohorts in the 2004 and 2008 follow-ups. The FFQ was developed including 88 foods and/or meals where frequencies were clustered from a minimum of never or once/month to a maximum of greater than or equal to 5 times/day. The closed options related to portions were based on a 24-hour recall previously asked to a subsample from the 1993 cohort. Three options for portions were created: equal to, less than or greater than. Equal to portion was described based on the 50 percentile of each food consumed reported in a 24-hour recall. Photographs of portions related to the 50 percentile for each food were also included in the software. Results: This digital FFQ included food and meals based on the needs of current researches. The layout of the software was attractive to the staff members as well as to the cohort members. The responding time was 12 minutes and the software allowed several individuals to use it at the same time. Moreover, this instrument dismissed interviewers and double data entry. Conclusion: It is recommended the use of the same strategy in other studies, adapted to different contexts and situations.

RESUMO: Objetivo: Artigo metodológico com o objetivo de descrever a construção de um questionário de frequência alimentar (QFA) digital autoaplicado, desenvolvido para as coortes de nascimentos de Pelotas de 1982 e 1993. Métodos: O instrumento foi criado com base em QFAs anteriormente utilizados nas duas coortes em acompanhamentos nos anos de 2004 e 2008. O QFA foi elaborado incluindo 88 alimentos e/ou preparações cujas frequências foram agrupadas em categorias desde o valor mínimo de consumo de nunca ou < 1 vez/mês até o máximo de ≥ 5 vezes/dia. As opções fechadas relativas à porção foram construídas considerando recordatórios de 24 horas (R24Hs) anteriormente aplicados à subamostra da coorte de 1993. Três alternativas de porção foram construídas: igual, menos ou mais. A porção igual foi descrita com base no percentil 50 do consumo de cada alimento, obtido a partir das distribuições das porções constantes nos R24H. Fotos das porções relativas ao percentil 50 de cada alimento foram também incluídas ao formato do programa. Resultados: Esse QFA digital incluiu alimentos e preparações que atendem aos objetivos das pesquisas atuais. A aparência do programa foi atrativa à equipe de trabalho e também aos participantes do estudo. O tempo médio de aplicação de 12 minutos e a facilidade de preenchimento possibilitaram que vários participantes respondessem às questões ao mesmo tempo. Além disso, o instrumento dispensou a necessidade de entrevistador e a dupla entrada de dados em programa específico. Conclusão: Recomenda-se o uso dessa mesma estratégia em outros estudos, adaptando-a aos diferentes contextos e situações.

ABSTRACT: Purpose: Methodological paper aiming to describe the development of a digital and self-reported food frequency questionnaire (FFQ), created to the 1982 and 1993 Pelotas Birth Cohorts. Methods: The instrument was created based on FFQs previously applied to subjects belonging to both cohorts in the 2004 and 2008 follow-ups. The FFQ was developed including 88 foods and/or meals where frequencies were clustered from a minimum of never or once/month to a maximum of greater than or equal to 5 times/day. The closed options related to portions were based on a 24-hour recall previously asked to a subsample from the 1993 cohort. Three options for portions were created: equal to, less than or greater than. Equal to portion was described based on the 50 percentile of each food consumed reported in a 24-hour recall. Photographs of portions related to the 50 percentile for each food were also included in the software. Results: This digital FFQ included food and meals based on the needs of current researches. The layout of the software was attractive to the staff members as well as to the cohort members. The responding time was 12 minutes and the software allowed several individuals to use it at the same time. Moreover, this instrument dismissed interviewers and double data entry. Conclusion: It is recommended the use of the same strategy in other studies, adapted to different contexts and situations.

Objective Consuming a low-iodine diet (LID) is a widely accepted practice before administering radioiodine (131I) to evaluate and to treat thyroid disease. Although this procedure is well established for the management of patients with differentiated thyroid cancer, its use in patients with benign disease is unclear. So, we aimed to evaluate the influence of a LID on the outcome in patients with Graves’ disease (GD) treated with131I. Subjects and methods We evaluated 67 patients with GD who were divided into 2 groups: one group (n = 31) consumed a LID for 1-2 weeks, and the second group (n = 36) was instructed to maintain a regular diet (RD). Results The LID group experienced a 23% decrease in urinary iodine after 1 week on the diet and a significant 42% decrease after 2 weeks on the diet. The majority (53%) of the patients in the LID group had urinary iodine levels that were consistent with deficient iodine intake. However, there was no difference in the rate of hyperthyroidism’s cure between the LID and the RD groups 6 months after 131I therapy. Furthermore, the therapeutic efficacy did not differ in patients with varying degrees of sufficient iodine intake (corresponding urinary iodine levels: < 10 μg/dL is deficient; 10-29.9 μg/dL is sufficient; and > 30 μg/dL is excessive). Conclusion In the present study, we demonstrated that although a LID decreased urinary iodine levels, those levels corresponding with sufficient or a mild excess in iodine intake did not compromise the therapeutic efficacy of131I for the treatment of GD.

O presente artigo descreve o relato de dois pacientes com carcinoma de paratiroide que apresentavam valores intensamente elevados de cálcio sérico e de PTH, associado a doença óssea e presença de nódulo cervical palpável ao diagnóstico. Ambos foram submetidos à paratiroidectomia, sendo que um evoluiu com metástases pulmonares. Hipocalcemia importante foi observada após a paratiroidectomia em um paciente e somente após remoção cirúrgica das metástases pulmonares em outro. Ambos necessitaram de reposição endovenosa de cálcio, revelando, assim, o estado de fome óssea (FO). A presença da FO usualmente reflete rápida mineralização óssea após correção do hiperparatiroidismo; assim, quanto mais severa a doença óssea previa à cirurgia, maior será a FO observada no pós-operatório desses pacientes. Embora inicialmente considerada um evento indesejável, a FO representa a bem-sucedida remoção cirúrgica do tecido paratiroideano hipersecretor. Fome óssea deve ser esperada no pós-operatório do tratamento cirúrgico bem-sucedido do carcinoma de paratiroide.

We hereby report two patients with parathyroid carcinoma presenting extremely high calcium and PTH levels, severe bone disease, and palpable neck mass at diagnosis. They both underwent parathyroidectomy, and one of them evolved to lung metastasis. Important hypocalcemia was observed after surgery in both: after parathyroidectomy in one patient, and only after surgical removal of the metastasis in the other. Both required intravenous calcium replacement, thus revealing hungry bone syndrome (HBS). HBS usually reflects rapid mineralization after correction of hyperparathyroidism. The more severe the bone disease before surgery, the more prone the patient is to HBS after surgery. Despite being an unfavorable outcome, HBS state suggests that surgical removal of hypersecretory parathyroid tissue was accomplished. In this study, HBS was observed in both patients, who presented severe bone disease prior to surgery. HBS would be expected post-operatively in successful parathyroid carcinoma removal.