Abstract Mitochondrial complex I (CI) deficiency is the most common oxidative phosphorylation disorder described. It shows a wide range of phenotypes with poor correlation within genotypes. Herein we expand the clinics and genetics of CI deficiency in the brazilian population by reporting three patients with pathogenic (c.640G>A, c.1268C>T, c.1207dupG) and likely pathogenic (c.766C>T) variants in the NDUFV1 gene. We show the mutation c.766C>T associated with a childhood onset phenotype of hypotonia, muscle weakness, psychomotor regression, lethargy, dysphagia, and strabismus. Additionally, this mutation was found to be associated with headaches and exercise intolerance in adulthood. We also review reported pathogenic variants in NDUFV1 highlighting the wide phenotypic heterogeneity in CI deficiency.

Estudos fenológicos auxiliam na compreensão dos ecossistemas florestais e na avaliação da disponibilidade dos recursos para fauna, melhorando o entendimento das relações entre as plantas e seus polinizadores e dispersores. O presente estudo tem por objetivo descrever as fenofases reprodutivas de espécies vegetais de uma área de mata ciliar e correlacioná-las com as variáveis climáticas. A fenologia reprodutiva foi analisada quinzenalmente durante um ano, sendo registrada a ausência ou presença de flores/frutos. A fenofase de floração ocorreu durante todo o ano de estudo, apresentando incremento do número de espécies em outubro, novembro e dezembro, tendo no mês de novembro o pico de floração da comunidade estudada. A frutificação ocorreu também durante todo o ano de estudo, com acréscimo de espécies frutificando em junho e uma leve queda nos meses de agosto e setembro. Os dados obtidos neste estudo, quando comparados com outros estudos em diferentes áreas da Mata Atlântica, indicam um padrão sazonal para a fenofase de floração e uma variação na disponibilidade dos frutos ao longo do ano, assim como nos picos de frutificação. Desta maneira, estudos que observam os eventos de floração e frutificação in loco são importantes, visto que contribuem com informações sobre as épocas reprodutivas das espécies para utilização em projetos de restauração ambiental e, desta forma, amenizar a situação de degradação das matas ciliares.

Phenological studies assist in forest ecosystems comprehension and evaluation of resource availability for wildlife, as well as in improving the understanding of relationships between plants and their pollinators and dispersers. This study aims to describe the reproductive phenophases of riparian plant species and correlate them with climatic variables. The reproductive phenology was analyzed biweekly throughout one year, recording the absence or presence of flowers/fruits. The flowering phenophase occurred throughout the year, with an increase in number of species in blossom in October, November, and December. The flowering peak of the community was observed in November. The fruiting phenophase also occurred throughout the year and showed an increase of species fruiting in June with a slight decrease in August and September. The data obtained in this study, when compared with other studies in different Atlantic Rainforest areas, indicates a seasonal pattern for the flowering phenophase and a variation in fruit availability throughout the year as well as in the fruiting peaks. Therefore, studies that observe flowering and fruiting events in loco are of main importance because they provide information on reproductive seasons of species for use in environmental restoration projects and thus alleviate the situation of degradation of riparian forests.

O emprego correto de plantas para fins terapêuticos pela população requer o uso daquelas selecionadas por sua eficácia e segurança, com base na tradição popular e/ou cientificamente validadas como medicinais. Bidens pilosa L. é uma espécie que ocorre amplamente em regiões tropicais sendo conhecida no Brasil pelo nome popular "picão-preto". Quatro agentes da pastoral da Saúde foram identificadas na região de Criciúma/SC por possuírem maiores informações de cunho popular sobre Bidens pilosa. A pesquisa ocorreu por meio de entrevista, onde foram compiladas informações sobre o conhecimento do "picão-preto", manuseio, farmacógeno, proporção farmacógeno/ solvente, técnica de preparo, formas de uso/posologia, indicações e restrições de uso. A forma farmacêutica utilizada variou significativamente, assim como a posologia. A análise de informações coletadas mostra a ação antiinflamatória como principal indicação terapêutica.

The correct use of plants for therapeutic purposes requires selection of those showing efficacy and safety based on the popular tradition and/or scientific validation. Bidens pilosa L. is a species that widely occurs in tropical regions and is known in Brazil as "picão-preto". Four agents from the Health Pastoral Service were identified in the region of Criciuma, Santa Catarina State, for their popular knowledge of Bidens pilosa. The study was conducted by means of interview which provided data concerning the knowledge of "picão preto", handling, used plant part, plant/solvent proportion, preparation methods, administration route/dosage, indication and restrictions. The pharmaceutical form, as well as the posology, was significantly variable. Analysis of the collected data showed anti-inflammatory action as the main therapeutic indication.

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) ou guaçatonga é uma árvore nativa do México, da América Central, e da América do Sul, com grande importância ecológica, farmacológica, e comercial. No entanto, como a maioria das espécies nativas de interesse medicinal no Brasil, a guaçatonga não é cultivada comercialmente, sendo obtida por extrativismo. O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de testar um protocolo de propagação vegetativa de guaçatonga por meio da estaquia, visando identificar qual a melhor estação do ano para o enraizamento de estacas e avaliar o efeito da utilização do regulador vegetal ácido indolbutírico (AIB). No outono, inverno e primavera de 2007, e no verão de 2008, estacas caulinares semilenhosas de 12-14 cm de comprimento e com duas folhas foram preparadas e tratadas com AIB (0, 1000, 2000 e 3000 mg L-1), em solução alcoólica, através da imersão rápida por 10 segundos da base das estacas, e foram plantadas em tubetes contendo substrato Plantmax HT® em casa-de-vegetação sob nebulização intermitente. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com 4 repetições, 4 tratamentos, e 16 estacas por parcela. Todos os experimentos foram avaliados após 90 dias, sendo que para dois deles (primavera 2007 e verão 2008) prolongou-se o tempo de permanência em casa-de-vegetação para melhor desenvolvimento das raízes. Foram avaliados os parâmetros: porcentagem de estacas enraizadas, porcentagem de estacas vivas (com calos e sem raízes, sem calos e sem raízes), porcentagem de folhas retidas, porcentagem de estacas mortas, número de raízes, comprimento das três maiores raízes (cm), e média da massa seca das raízes (mg). Não ocorreu enraizamento nas estacas retiradas no outono e no inverno. Com as estacas retiradas na primavera obteve-se 39,1% de enraizamento. Estacas coletadas no verão não responderam como o esperado, apresentando, após 240 dias, 6,3% de enraizamento no tratamento com 3000 mg L-1 de AIB. O AIB até 3000 mg L-1 não estimulou o enraizamento de estacas de guaçatonga e a melhor estação do ano para a estaquia é a primavera.

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae), or "guaçatonga", is a tree native to Mexico and Central and South America, with great ecological, pharmacological and commercial relevance. Similarly to most native species of medicinal interest in Brazil, "guaçatonga" is not commercially cultivated and is obtained by means of extraction. The aim of this study was to test a protocol for the vegetative propagation of "guaçatonga" by means of stem cutting, identifying the best season for stem rooting and assessing the effect of using the growth regulator indolebutyric acid (IBA). In the fall, winter and spring 2007 and summer 2008, semi-hardwood cuttings with 12-14 cm length and two leaves were prepared and treated with IBA (0, 1000, 2000 and 3000 mg L-1), in alcohol solution, by rapidly immersing for 10 seconds the base of cuttings and planting them in tubes containing Plantmax HT® in greenhouse under intermittent nebulization. Experimental design was completely randomized with 4 replicates, 4 treatments and 16 cuttings per plot. All experiments were evaluated after 90 days, and for two of them the time of maintenance in greenhouse was prolonged in order to improve root development. The following parameters were evaluated: percentage of rooted cuttings, percentage of live cuttings (with callus and without roots, without callus and without roots), percentage of retained leaves, percentage of dead cuttings, number of roots, length of the largest roots (cm) and mean dry mass of roots (mg). There was no rooting on cuttings collected during the fall and the winter. For cuttings collected in the spring, 39.1% rooting was obtained. Cuttings collected in the summer did not show the expected results, presenting after 240 days 6.3% rooting when treated with 3000 mg L-1 IBA. Up to 3000 mg L-1, IBA did not stimulate the rooting of "guaçatonga" cuttings and the best season for cutting is spring.

A espinheira-santa (Maytenus muelleri - Celastraceae) é a planta medicinal nativa do Sul do Brasil, cujas folhas são tradicionalmente utilizadas pela medicina popular para o tratamento de úlceras e outros problemas gástricos. Existem poucos trabalhos publicados sobre a produção de mudas e técnicas de propagação vegetativa da espécie. A propagação de espinheira-santa por estaquia poderia ser um método eficiente para obtenção de material homogêneo, com características genéticas desejáveis, produzido a partir de plantas matrizes selecionadas. O presente trabalho teve por objetivo estudar os efeitos da aplicação de ácido indol butírico (AIB), em solução e em pó, no enraizamento de estacas de espinheira-santa coletadas nas quatro estações do ano (abril/2005 a janeiro/2006), bem como averiguar, por meio de análises anatômicas e histoquímicas das estacas, a presença de possíveis impedimentos à iniciação do enraizamento adventício. Estacas provenientes de ramos de plantas matrizes de seis anos cultivadas da Estação Experimental do Canguiri, Pinhais, PR, foram coletadas e tratadas com AIB (0, 1500, 3000 mg L-1 ou mg kg-1), em solução alcoólica (50% v/v) e em talco. Aos 365 dias foram avaliadas as porcentagens de estacas enraizadas e mortas, número e comprimento médio de raízes formadas por estaca. Análises anatômicas e histoquímicas com lugol e cloreto férrico foram realizadas. A estação mais promissora para o enraizamento foi o verão/2006 com 62,50% para o tratamento controle, devido à menor lignficação dos ramos no período de intenso crescimento vegetativo. O número médio de raízes formadas por estaca foi de 6,94 (solução) e o comprimento médio de raízes formadas/estaca chegou a 4,82 cm nesta mesma estação. As concentrações de AIB aplicadas não foram eficientes na indução radicial, independentemente do modo de aplicação. Foi detectada a presença de uma camada quase contínua de fibras e braquiesclereídes, a qual constitui barreira anatômica à indução radicial. Os testes histoquímicos revelaram a presença de amido e de compostos fenólicos nas estacas, em todas as estações do ano. A dificuldade ou demora no enraizamento não pode ser justificada pela falta de reservas de amido nos tecidos das estacas, mas pode ser justificada pela presença de compostos fenólicos, possivelmente do grupo dos monofenóis, que causam a degradação do AIA, interferindo negativamente na indução do enraizamento.

"Espinheira-santa" (Maytenus muelleri - Celastraceae) is a medicinal plant native to Southern Brazil, the leaves of which are traditionally used in popular medicine for the treatment of stomach ulcers and other gastric problems. There are few published studies about seedling production and vegetative propagation techniques for this species. The propagation of "espinheira-santa" by cuttings could be an efficient method to obtain homogeneous material, with desirable genetic characteristics, produced from selected mother plants. This paper aimed to study the effects of indolebutyric acid (IBA) application, in solution and in powder, on the rooting of "espinheira-santa" cuttings, collected in four seasons (April/2005 to January/2006), as well as to investigate, by means of cutting anatomical and histochemical analyses, the presence of possible impediments to adventitious rooting initiation. Cuttings from branches of six-year mother plants grown at "Estação Experimental do Canguiri", Pinhais, Paraná State, Brazil, were collected and treated with IBA (0, 1500, 3000 mg L-1 or mg kg-1) in alcoholic solution (50% v/v) and in powder. After 365 days, the percentages of rooted and dead cuttings, the number and mean length of roots/cutting were evaluated. Anatomical and histochemical analyses were performed with lugol and ferric chloride. The most promising season for rooting was Summer/2006, with 62.50% of rooting for the control treatment, due to the lesser lignification degree of branches in intense vegetative growth period. The mean number of roots/cutting was 6.94 (solution) and the mean length of roots/cutting was 4.82 cm in that same season. The applied IBA concentrations were not efficient in inducing root growth, regardless of the application method. An almost continuous layer of fibers and stone cells was detected, constituting an anatomical barrier for rooting induction. The histochemical tests revealed the presence of starch and phenolic compounds in cuttings, in all seasons. The difficulty or delay in rooting cannot be justified by the absence of starch reserve in the cutting tissues but by the presence of phenolic compounds, possibly of the group of monophenols, which cause IAA degradation, negatively affecting rooting induction.

A antracnose, causada por Colletotrichum sublineolum tem sido uma das mais destrutivas doenças que afetam a cultura do sorgo no Brasil. Este estudo teve como objetivo caracterizar linhagens selvagens e mutantes em relação à morfologia, produção de conídios e mating type. Uma alta variabilidade entre as linhagens foi observada em relação ao crescimento radial e produção de conídios ovais e falcados. Setores foram liberados espontaneamente por algumas linhagens, o que confirma a alta instabilidade genética deste patógeno. Genes ligados a característica mating type foram amplificados por PCRs utilizando os primers SKCM1, NcHMG e HGMgram, demonstrando que ambos os idiomorfos estão presentes nesta espécie. Todas as linhagens estudadas foram auto-estéreis. Não foi possível detectar correlação entre o fenótipo auxotrófico mutante e as características morfológicas avaliadas.

Anthracnose, caused by Colletotrichum sublineolum, has been one of the most destructive diseases affecting sorghum crops in Brazil. This study aimed to characterize wild and mutant strains through morphological and cultural characteristics, conidiation, and mating-type. A high variability was observed among strains when evaluated through radial growth and type of conidia produced. Spontaneous release of sectors by some strains was also observed, confirming the high genetic instability of this pathogen. Mating type genes amplified through PCRs using the primers, SKCM1, NcHMG and HGMgram demonstrated that both idiomorphs are present in this species. All the strains analyzed were self-sterile. It was not possible to correlate the auxotrophic mutant phenotype with the morphological characteristics evaluated.

MicroRNAs (miRNAs) are a class of small endogenous RNAs that play important regulatory roles by targeting mRNAs for cleavage or translational repression. miRNAs act in diverse biological processes including development, cell growth, apoptosis, and hematopoiesis, suggesting their association with cancer. We determined the miRNA expression profile of chronic and acute lymphocytic leukemias (CLL and ALL) using the TaqMan® MicroRNA Assays Human Panel (Applied Biosystems). Pooled leukemia samples were compared to pooled CD19+ samples from healthy individuals (calibrator) by the 2-DDCt method. Total RNA input was normalized based on the Ct values obtained for hsa-miR-30b. The five most highly expressed miRNAs were miR-128b, miR-204, miR-218, miR-331, and miR-181b-1 in ALL, and miR-331, miR-29a, miR-195, miR-34a, and miR-29c in CLL. To our knowledge, this is the first report associating miR-128b, miR-204 and miR-331 to hematological malignancies. The miR-17-92 cluster was also found to be up-regulated in ALL, as previously reported for some types of lymphomas. The differences observed in gene expression levels were validated for miR-331 and miR-128b in ALL and CD19+ samples. These miRNAs were up-regulated in ALL, in agreement with our initial results. A brief target analysis was performed for miR-331. One of its putative targets, SOCS1, promotes STAT activation, which is a known mediator of cell proliferation and survival, suggesting the possibility of an association between miR-331 and these processes. This initial screening provided information on miRNA differentially expressed in normal and malignant B-cells that could suggest the potential roles of these miRNAs in hematopoiesis and leukemogenesis.

Abordaram-se, neste trabalho, aspectos básicos da geoestatística para análise espacial de dados de umidade do solo, com ênfase na análise de semivariograma como metodologia para determinação da dependência espacial. O objetivo consistiu na análise da umidade sob condições de campo, na região de Toledo, PR, em solo argiloso, nas profundidades de 15 e 30cm, sob sistema de manejo plantio direto e preparo convencional do solo; o local da pesquisa foi constituído de duas áreas de 14x14m. Realizou-se, em cada área do experimento, um levantamento por amostragem em uma malha de 64 pontos espaçados 2m, e se utilizou, para análise das amostras, o método convencional (gravimétrico). Os dados foram analisados através da estatística clássica e da geoestatística. Os resultados indicaram baixo coeficiente de variação em todas as coletas de dados, o que indica homogeneidade dos dados. A análise dos semivariogramas indicou dependência espacial da umidade entre moderada e fraca. Os alcances da dependência espacial foram de 5,20 a 10,67m para a umidade do solo. Os valores de umidade estão relacionados com a profundidade em ambos os sistemas de manejo mas as variabilidades não acompanharam esta tendência.

In this work basic aspects of geoestatístics were approached for spatial analysis of soil moisture data, with an emphasis on semivariogram analysis as a methodology for determination of spatial dependence. The objective consisted of moisture analysis under field conditions in Toledo, Paraná State, Brazil, in clayey soils, in depths of 15 and 30cm, under management systems of no tillage and conventional planting. The research site constituted of two areas of 14x14m. In each area of the experiment, sampling in a mesh of 64 spaced points of 2m took place. The data were used for analysis of moisture using the conventional gravimetric method. The data were analyzed through the classic statistics and geostatistics. The results indicated a low variation coefficient in all data collections, which indicates homogeneity of the data. The analysis of the semivariograms showed spatial dependence of the moisture variable as being moderate to weak. The reaches of spatial dependence were from 5.20 to 10.67m for the soil moisture. For this variable, the values are related with depth in both management systems, but the variabilities did not show this tendency.

OBJETIVO: Em locais onde a exposição aos raios do sol durante o inverno é limitada, a densidade mineral óssea (DMO) pode apresentar variações sazonais, elevando-se durante o período do verão e diminuindo durante o inverno. Tem sido sugerido que esta variação pode influenciar a avaliação prospectiva de estudos de DMO. O objetivo deste estudo foi avaliar se a estação do ano está associada a variações nos valores de DMO. MÉTODOS: Estudo transversal, de base clínica, desenvolvido no estado do Rio Grande do Sul (RS). Estudos densitométricos representativos dos períodos do verão/inverno foram selecionados para análise. As densitometrias foram realizadas em aparelho Hologic 4500 através da técnica dual energy X-ray absorptiometry. RESULTADOS/CONCLUSÕES: De 853 exames densitométricos realizados durante um período de 12 meses, 201 foram realizados no verão e 321 no inverno. Os valores de DMO, corrigidos para o peso corporal, não diferiram significamente entre o grupo de indivíduos que realizou o exame no verão ou no inverno (P>0,05). Em conclusão, no RS a estação do ano não afeta os resultados da DMO e não precisa ser levada em conta quando da interpretação dos estudos densitométricos. Este achado, provavelmente, pode ser extrapolado para as demais regiões do Brasil, uma vez que o inverno nestas regiões é menos severo que no RS.

OBJECTIVE: In places where sun exposure during the winter is limited, bone mineral density (BMD) may present seasonal variations, increasing during the summer and decreasing during the winter period. There have been suggestions that this variation could influence prospective evaluations of BMD studies. The aim of this study was to evaluate if the seasons of the year (summer/winter) are associated to variations in BMD values. METHODS: Clinic based cross-sectional study, conducted in the state of Rio Grande do Sul (RS). Densitometric studies representative of the periods of winter/summer were selected. The densitometric studies were realized in a Hologic 4500 unit, using dual energy X-ray absorptiometry. RESULTS/CONCLUSIONS: Of 853 densitometric measurements realized during a 12-month period, 201 were realized in the summer, and 321 in the winter. The BMD measurements, corrected to body weight, did not differ between the group of individuals that were tested in the summer or winter (P>0.05). In conclusion, in RS, the season of the year did not affect the BMD results, and does not need to be taken into account when analyzing densitometry measurements. This finding probably could be extrapolated to other regions of Brazil, since winter in those areas is less severe than in RS.

O objetivo deste estudo foi avaliar a freqüência de osteoporose de acordo com os sítios ósseos avaliados, utilizando um estudo transversal de base clínica. Foram avaliados 610 exames densitométricos em relação a freqüência de osteoporose/osteopenia e concordância do diagnóstico de acordo com o local avaliado. Apesar de alta correlação da DMO entre os sítios ósseos, a freqüência de osteoporose variou de acordo com o sítio avaliado. Osteoporose esteve presente em 14 e 18% dos pacientes, quando considerado o colo do fêmur e fêmur total, e 42 e 30% quando considerados o triângulo do Ward e coluna (p< 0,05). Um quarto das mulheres consideradas em risco aumentado de fratura pelo exame da coluna lombar foi classificado como normal pelo estudo do colo do fêmur; 16% com risco aumentado pelo estudo do colo do fêmur foi classificado como normal no estudo da coluna. Este estudo demonstra que existe discordância nos resultados densitométricos de acordo com a área estudada, afetando a ocorrência de osteoporose. Para julgamento clínico de risco de fratura, a avaliação combinada de dois sítios ósseos é o procedimento mais adequado.

In this study a cross-sectional survey was conducted to evaluate the frequency of osteoporosis according to the site used. Six hundred and ten densitometric exams were analyzed regarding the frequency of osteoporosis/osteopenia according to the bone site. Besides the high correlation of bone density among the different sites analyzed, the frequency of osteoporosis has significantly changed with respect to the bone site examined. Osteoporosis was present in 14% and 18% of the patients when neck or total femur were used for diagnosis, whereas these numbers were 42% and 30% for Ward's triangle and lumbar spine sites, respectively. About 25% of the patients who were considered at risk for bone fracture using the lumbar spine evaluation were considered at no risk when the femoral neck was used as reference; on the other hand, 16% considered at increased risk using the femur were considered at no risk at lumbar spine. In conclusion, the frequency of osteoporosis changes according to the site used. For fracture risk assessment, the use of at least two different bone sites would be the best approach.

Estudos epidemiológicos têm mostrado alta prevalência de transtorno psiquiátrico em pessoas com insônia. Realizamos estudo transversal em amostra de estudantes de medicina, com o objetivo de avaliar a associação entre insônia e positividade na triagem para transtorno psiquiátrico; 302 estudantes foram incluídos (184 homens e 118 mulheres; média da idade = 20.47±1,89 anos). A associação foi testada através da análise de regressão logística. A prevalência de teste positivo na triagem para transtorno psiquiátrico foi 22,19%; e de insônia, 28,15%. Dificuldade para iniciar o sono (OR=3,45), dificuldade para manter o sono (OR=7,61), dormir tarde (OR=1,99) e levantar cedo (OR=1,91) foram as variáveis associadas à possibilidade de transtorno psiquiátrico. Quando consideradas em conjunto, as variáveis "dificuldade em iniciar o sono", "dificuldade em manter o sono", "dormir após 23 h" e "acordar antes das 6 h" apresentaram razão de chance de 5,96 para positividade na triagem para transtorno psiquiátrico. Além disso, dificuldade em manter o sono (OR=2,24) foi associada ao sexo feminino; e dormir tarde (OR=0,43), ao sexo masculino. Esses resultados enfatizam a importância de determinar em que caso a dificuldade com o sono pode ter repercussões clínicas severas ou afetar o desempenho.

Epidemiological research points to the high prevalence of psychiatric disorders among insomniacs. We carried out a cross-sectional study with medical students with the aim of evaluating the association between insomnia and suspicion of psychiatric disorder; 302 medical students were included (184 males and 118 females; mean age = 20.47±1.89 years). The main association was tested by logistic regression analysis. The overall prevalence of positivity in a screening test for psychiatric disorder was 22.19%; and of insomnia, 28.15%. Difficulty initiating sleep (OR=3.45), difficulty maintaining sleep (OR=7.61), falling asleep later (OR=1.99) and waking up earlier (OR=1.91) were associated with suspicion of psychiatric disorder. As a group, the variables difficulty initiating sleep, difficulty maintaining sleep, falling asleep after 11 pm, and waking up before 6 am presented an odds ratio of 5.96 for positivity in the screening for psychiatric disorder. Furthermore, difficulty maintaining sleep (OR=2.24) was associated with "being female," and falling asleep later (OR=0.43) was associated with "being male". These results underscore the importance of determining in what cases difficulty sleeping may have severe clinical repercussions or affect performance.

Várias combinações de reguladores do crescimento foram aplicadas a tecidos jovens de Racosperma mangium com o propósito de induzir a regeneração de brotos adventícios. Cinetina (KIN) e ácido naftalenoacético (NAA), tidiazuron (TDZ) e NAA, N-(chloro-4-piridil)-N´-fenilurea (4-CPPU) e ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) foram adicionados a um meio de base composto por sais minerais, na metade da concentração do meio MS, vitaminas MS e sacarose 2%. Explantes de hipocótilos e cotilédones de plântulas semeadas in vitro foram cultivados nesses meios. A formação de calos foi observada em vários meios. Estruturas organizadas se desenvolveram na presença de diferentes combinações de KIN ou TDZ e NAA quando os calos permaneceram dois a três meses nos mesmos meios. Estudos histológicos mostraram a hypertrofia e hiperplasia das células do parênquima medular e cortical, nos calos formados a partir de hipocótilos como de cotilédones. A formação de células meristemáticas e de elementos traqueais foi observada durante a cultura in vitro. Em certos caso, nódulos de elementos traqueais apareceram. A maior diferenciação de células meristemáticas foi encontrada nos tecidos de cotilédones cultivados na presença de 8,07 µM de 4-CPPU e 1,13 µM de 2,4-D.

In order to achieve adventitious shoot regeneration from young tissues of Racosperma mangium, several combinations of growth regulators were tested. Kinetin (KIN) and a -naphthalenacetic acid (NAA), thidiazuron (TDZ) and NAA or indole-3-butyric acid (IBA), 4-CPPU and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) were added to basic medium composed of MS salts, MS vitamins and 3% sucrose. Sections of hypocotyls and cotyledons of young seedlings were cultivated on these media. Calli developed on different media and, after two to three months, some of them regenerated organized structures. Histological studies revealed hypertrophy and hyperplasy of medular and cortical parenchyma cells of hypocotyl and cotyledon parenchyma. Formation of meristematic cells and traqueary elements from parenchyma was observed during in vitro culture. In some cases, nodules of traqueary elements were formed. The highest differentiation into meristematic cells was found in cotyledon tissues cultured on 4-CPPU (8.07 µM) and 2,4-D (1.13 µM).