Resumo A citricultura é uma atividade agrícola de grande expressão mundial, ocupando posição de destaque no Brasil entre as frutíferas com elevado volume e valor de produção para o mercado interno de frutas frescas e para exportação de suco concentrado. Considerando as limitações de ordem técnica do agronegócio dos citros, principalmente as ameaças fitossanitárias, os avanços no sistema de produção de mudas e de material básico de citros nas duas últimas décadas foram essenciais para garantir a competitividade e eficiência da citricultura brasileira. A implementação e aprimoramento de normas e técnicas envolvendo a produção de mudas e material básico em ambientes protegidos de vetores de doenças como clorose variegada dos citros e huanglongbing no Estado de São Paulo, proporcionou o estabelecimento de um sistema produtivo de referência mundial. São apresentados e discutidos nesta revisão os aspectos mais relevantes destas mudanças, envolvendo técnicas de propagação, variedades copa e porta-enxerto, caracterização e certificação genética, legislação e manejo para produção de material de propagação e muda, bem como as ferramentas de gestão do viveiro.

Abstract Citriculture is an important agricultural activity worldwide, occupying a relevant position in Brazil among fruit tree production for both the fresh fruit market and the processing industry for concentrated orange juice export. Recent advances in the country’s citrus nursery tree production system have been essential to guarantee the efficiency and competitiveness of Brazilian citriculture. The implementation of strict laws and regulations to produce trees in protected environments and improvements in production techniques for basic citrus propagation materials and nursery trees in São Paulo state has excluded the insect vectors of destructive diseases such as citrus variegated chlorosis and huanglongbing, making this an innovative reference system for citrus propagation around the globe. The main aspects of these advances are presented and discussed in this review, including advances in propagation techniques, scion and rootstock selection, genetic characterization and certification, tree size standards, cultural practices such as irrigation and fertilization for the production of citrus propagation materials and nursery trees, and nursery management tools.

RESUMO A utilização de promotores preferencialmente expressos em tecidos vegetais específicos é uma estratégia desejável na busca por resistência a patógenos que colonizam tais tecidos. A bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus (Las), associada à doença huanglongbing (HLB) em citros, coloniza o tecido floemático. Alguns promotores, além de conferir expressão específica em certos tecidos, podem também responder diferencialmente à presença de patógenos. O objetivo deste estudo foi verificar se a presença de Las poderia modular a ativação dos promotores de floema AtPP2 (Arabidopsis thaliana phloem protein 2), AtSUC2 (A. thaliana sucrose transporter 2) e CsPP2 ( pCitrus phloemrotein 2), conhecidos por expressão específica em floema de Citrus sinensis. Plantas de laranja ‘Hamlin’ (Citrus sinensis L. Osbeck) transformadas com o gene reporter uidA (GUS) sob controle dos promotores AtPP2, AtSUC2 e CsPP2 foram infectadas para avaliar a interdependência entre a expressão dos transgenes e concentração de Las. Plantas foram inoculadas com Las por meio de Diaphorina citri e dezoito meses após, a concentração de bactéria e expressão do gene uidA foram determinadas por qPCR e RT-qPCR, respectivamente. A expressão do gene reporter dirigida pelo promotor AtSUC2 foi forte e positivamente correlacionada com a concentração de Las. Portanto, este promotor contém características desejáveis quanto à especificidade de expressão e indução específica por patógeno para a produção de plantas transgênicas tolerantes a Las.

ABSTRACT The use of promoters preferentially expressed in specific plant tissues is a desirable strategy to search for resistance for pathogens that colonize these tissues. The bacterium Candidatus Liberibacter asiaticus (Las), associated with huanglongbing disease (HLB) of citrus, colonizes phloem vessels. Some promoters, besides conferring tissue-specific expression, can also respond to the presence of the pathogen. The objective of the present study was to verify if the presence of Las could modulate the activation of the phloem-specific promoters AtPP2 (Arabidopsis thaliana phloem protein 2), AtSUC2 (A. thaliana sucrose transporter 2) and CsPP2 ( pCitrus phloemrotein 2), known to be expressed in Citrus sinensis phloem. ‘Hamlin’ sweet orange plants (Citrus sinensis L. Osbeck) transformed with the uidA (GUS) reporter gene under the control of AtPP2, AtSUC2 and CsPP2 promoters were infected to evaluate the interdependence between transgene expression and the concentration of Las. Plants were inoculated with Las by Diaphorina citri and eighteen months later, bacterial concentration and uidA expression were determined by qPCR and RT-qPCR, respectively. Reporter gene expression driven by AtSUC2 promoter was strongly and positively correlated with Las concentration. Therefore, this promoter combines desirable features of both tissue-specificity and pathogen-inducibility for the production of transgenic plants tolerant to Las.

Em programas de melhoramento de citros, a caracterização adequada dos recursos genéticos disponíveis é de grande importância, principalmente devido às características biológicas da cultura, como a heterozigosidade, a embrionia nucelar e o longo ciclo reprodutivo. A facilidade com que ocorrem hibridações (interespecíficas e intergenéricas) e a embrionia nucelar favoreceram a formação e a preservação de novas combinações, classificadas como espécies. Neste estudo, marcadores RAPDs foram utilizados para analisar 15 acessos de Citrus spp., sendo quatro variedades de laranjeiras doce (C. sinensis Osbeck), quatro tangerineiras (C. reticulata Blanco, C. nobilis Loureiro, C. sunki Loureiro e C. deliciosa Tenore), uma laranjeira azeda (C. aurantium L.), um pomeleiro (C. paradisi Macf.), uma torangeira (C. grandis Osbeck), uma cidreira (C. medica L.), uma limeira ácida (C. latifolia) e dois híbridos (Citrus clementina T. x (C. tangerina T. x C. paradisi Macf.)). Doze sequências iniciadoras aleatórias foram utilizadas para estudar os 15 genótipos, encontrando-se um grau de similaridade mínimio de 0,81 ("Simple Matching") entre as tangerineiras. Os menores graus de similaridade foram encontrados entre as espécies de Citrus menos aparentadas (C. medica, C. grandis e C. latifolia). As quatro cultivares de laranjeiras doces não puderam ser diferenciadas pelos marcadores RAPD utilizados, apresentando similaridade máxima.

In citrus improvement programs the characterization of the available genetic resources is of great importance, mainly concerning biological characteristics of the culture, as the heterozigosity, nucellar the embriony and long reproductive cycle. Favored by nucellar embriony interespecific and intergeneric hybridizations and genotypes preservation happen easily. RAPDs markers were used to analyze 15 Citrus spp., four sweet orange (C. sinensis Osbeck), (C. medica, C. grandis e C. latifolia), four mandarins (C. reticulata Blanco, C. nobilis Loureiro, C. sunki Loureiro e C. deliciosa Tenore), a sour orange (C. aurantium L.), a grapefruit (C. paradisi Marcf.), a pummelo (C. grandis Osbeck), a cidra (C. medica L.), a lime (C. latifolia) and two hybrids (Citrus clementina T. x (C. tangerina T. x C. paradisi Macf.)). Genetic similarities of 15 Citrus genotypes obtained with twelve random primers, indicated a minimum similarity degree of 0.81 (simple matching) among the mandarins. Lower similarity degrees were obtained among less related Citrus species (C. medica, C. grandis e C. latifolia). The four varieties of sweet oranges (C. sinensis Osbeck) could not be differentiated by RAPD markers, showing maximum similarity.

Amplificações RAPD foram desenvolvidas utilizando-se 25 "primers" de seqüência aleatória e 19 acessos de tangerinas pertencentes ao grupo das Ponkan. Dos 112 produtos de amplificação selecionados somente 32 foram polimórficos, sendo este polimorfismo restrito somente a 5 acessos. Nos 14 acessos restantes não pôde ser detectada qualquer variabilidade genética, sugerindo que estes podem ser propagação clonal da tangerina `Ponkan', tendo os mesmos adquirido diferentes nomes regionais ao longo do tempo. Ou, por outro lado, a técnica RAPD utilizada pode não ter detectado qualquer mutação de ponto que tenha ocorrido nestes materiais ao longo do tempo.

RAPD analysis of 19 Ponkan mandarin accessions was performed using 25 random primers. Of 112 amplification products selected, only 32 were polymorphic across five accessions. The absence of genetic variability among the other 14 accessions suggested that they were either clonal propagations with different local names, or that they had undetectable genetic variability, such as point mutations which cannot be detected by RAPD.