Os microrganismos promotores de crescimento de plantas, como os fungos micorrízicos, têm sido muito utilizados na agricultura, por auxiliarem os vegetais na absorção de nutrientes e de água, influenciando no crescimento destes. Objetivou-se com este trabalho verificar os efeitos da associação micorrízica de Glomus clarum e Glomus etunicatum no crescimento inicial dos porta-enxertos Limão- cravo, Citrumelo swingle e Tangerina sunki. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado,em arranjo fatorial 3 x 4, com cinco repetições, correspondendo a três porta-enxertos, quatro manejos, sendo os manejos: adubação mineral (ADB), inoculação com Glomus clarum (IGC), inoculação com Glomus etunicatum (IGE) e Controle. As mudas foram produzidas em estufa, utilizando como substrato vermicomposto de minhoca, distribuído em sacos de polietileno, depositando-se três sementes de cada porta-enxerto/saco. A inoculação com os fungos micorrízicos foi realizada no momento da semeadura (45 esporos de cada espécie/saco). A adubação mineral foi dividida em dois momentos: aplicação de fósforo antes da semeadura (40g de superfosfato simples/saco); aplicação de nitrogênio (1,7g dissolvidos em 40 mL de água), parcelado em oito aplicações de 5 mL da solução, via água de irrigação, manualmente, de forma semanal; e micronutrientes (B, Cu, Fe, Mn e Zn), aplicados com pulverizador manual, quinzenalmente. Foram avaliados altura, diâmetro do caule, número de folhas, massa seca da parte aérea e colonização, e dependência micorrízica. Verificou-se interação significativa entre os porta-enxertos e os manejos aplicados neste estudo, para a maioria das variáveis avaliadas. Limão cravo e Citrumelo swingle obtiveram maior altura, e o manejo que conferiu maior altura, aos porta-enxertos foram o ADB e o IGE. O maior diâmetro do caule foi atingido pelo Citrumelo swingle, e o manejo que proporcionou maior diâmetro foi o de IGE. Limão cravo apresentou dependência micorrízica moderada para Glomus clarum e marginal para G. etunicatum. A colonização micorrízica não apresentou interação significativa entre os porta-enxertos e os manejos com inoculação. A associação micorrízica de G. clarum e G. etunicatum não se apresentou como o melhor manejo para o crescimento das plantas de Limão-cravo, Citrumelo swingle e Tangerina sunki, quando comparado com a adubação mineral. No entanto, a inoculação de fungos micorrízicos proporcionou um efeito positivo na absorção de alguns nutrientes pelos porta-enxertos, especialmente, de K, Mg, N e P.

Abstract Plant growth promoting microorganisms, such as mycorrhizal fungi, have been widely used in agriculture because they help plants in the absorption of nutrients and water, influencing their growth. The objective of this work was to verify the effect of the mycorrhizal association of Glomus clarum and Glomus etunicatum on the initial growth of the rootstocks Rangpur lime, Swingle citrumelo and Sunki mandarin. The experimental design was completely randomized with a 3 x 4 factorial arrangement, with five replications, corresponding to three rootstocks, four managements: mineral fertilization, inoculation with G. clarum (IGC), inoculation with G. etunicatum (IGE) and Control. The seedlings were produced in greenhouse, using as substrate the vermicompost earthworm, distributed in polyethylene bags, depositing three seeds of each rootstock / bag. The inoculation with mycorrhizal fungi was carried out at the time of sowing (45 spores of each species / bag). The mineral fertilization was divided into two phases: phosphorus application before sowing (40g of single superphosphate / bag); nitrogen application (1.7 g dissolved in 40 ml of water), divided in eight applications of 5 ml of the solution, via irrigation water, manually and weekly; and micronutrients (B, Cu, Fe, Mn and Zn), sprayed manually every two weeks. The following parameters were evaluated: height, stem diameter, number of leaves, shoot dry mass, colonization and mycorrhizal dependence. There was a significant interaction between the rootstocks and treatments applied in this study for most of the evaluated variables. Rangpur lime and Swingle citrumelo obtained higher height and the management that conferred higher height to the rootstocks was the mineral fertilization and IGE. The largest diameter of the stem was reached by Swingle citrumelo and the management that provided the largest diameter was the inoculation with G. etunicatum. Rangpur lime presented moderate mycorrhizal dependence for G. clarum and marginal for G. etunicatum. Mycorrhizal colonization did not show a significant interaction between rootstocks and the management with inoculation. The mycorrhizal association of G. clarum and G. etunicatum was not presented as the best management for the growth of Rangpur lime, Swingle citrumelo and Sunki mandarin, when compared to the mineral fertilization. However, the inoculation of mycorrhizal fungi provided a positive effect on the uptake of some nutrients by the rootstocks, especially K, Mg, N and P.

RESUMO Fungos do gênero Trichoderma são importantes promotores de crescimento vegetal, por aumentarem a eficiência na utilização de nutrientes e atuarem como agentes de biocontrole. Objetivou-se a seleção de isolados de Trichoderma spp. com potencial de solubilização de fosfato e sua aplicação como promotores de crescimento em interação com preparados homeopáticos, em tomateiro cereja. Dentre 16 isolados de Trichoderma spp. obtidos em solos de áreas de produção orgânica de tomateiro testados in vitro, em conjunto com um produto comercial (Trichodermil®), dois apresentaram produção de ácido indolacético e solubilização de fosfato. O Trichoderma “R” foi o isolado de maior índice de velocidade de crescimento micelial, com duas vezes mais esporos do que o produto comercial. Um experimento in vivo também foi conduzido em estufa, para verificar o potencial de isolados de Trichoderma spp. e preparados homeopáticos no crescimento de tomateiro cereja, utilizando-se delineamento experimental em blocos casualizados, em esquema fatorial 4 x 3, com três isolados de Trichoderma e dois preparados homeopáticos (Phosphorus 6CH e Carbo vegetabilis 6CH) + tratamento sem homeopatia. Avaliou-se a área foliar e a massa seca das folhas e das raízes. Verificou-se que o isolado “R”, identificado como Trichoderma asperellum, foi eficiente na promoção de crescimento do tomateiro cereja, ao passo que os preparados homeopáticos aplicados não apresentaram efeito.

ABSTRACT Trichoderma fungi are considered relevant plant growth promoters for increasing the efficiency in the use of nutrients, as well as acting as biological control agents. This study aimed to select Trichoderma spp. isolates with potential for phosphate solubilization and their application as growth promoters in interaction with homeophatic preparations, in cherry tomato. Among 16 Trichoderma spp. isolates obtained from soils of organic tomato growing areas tested in vitro, together with a commercial product (Trichodermil®), two of them showed the ability for indole-3-acetic acid production and phosphate solubilization. The Trichoderma “R” had the highest mycelial growth speed index and presented twice as much spores than the commercial product. An in vivo experiment was also conducted in a greenhouse, in order to observe the potential of Trichoderma spp. isolates and homeophatic preparations on the cherry tomato growth promotion, using a randomized block experimental design, in a 4 x 3 factorial arrangement, with three Trichoderma isolates and two homeopathic preparations (Phosphorus 6CH and Carbo vegetabilis 6CH) + treatment without homeopathic preparation. The leaf area and dry mass of leaves and roots were determined. It was possible to observe that the isolate “R”, identified as Trichoderma asperellum, was effective in the cherry tomato growth promotion, while the homeopathic preparations applied did not show any effect.

Os frutos cítricos são afetados por diversas doenças, especialmente as fúngicas, as quais afetam a produtividade e a qualidade, principalmente quando se visa ao mercado de frutas frescas, seja para o mercado interno, seja para a exportação. Dentre as doenças fúngicas que ocorrem na fase de pós-colheita, destaca-se o bolor verde, causado por Penicillium digitatum. As medidas de controle baseiam-se, principalmente, no tratamento de frutos com diferentes combinações de fungicidas no packing-house. Devido às restrições quanto à presença de resíduos de fungicidas em frutos de citros e ao crescente desenvolvimento de linhagens resistentes dos patógenos a tais fungicidas, torna-se necessária a busca de alternativas de controle, como o controle biológico. Portanto, este trabalho teve por objetivos: (i) verificar o efeito antagônico de agentes de controle biológico (ACBs), sendo 06 isolados de Saccharomyces cerevisiae e 13 isolados de Bacillus subtilis contra P. digitatum; (ii) estudar as interações in vitro entre ACBs e o fitopatógeno; (iii) verificar o efeito da integração dos antagonistas com bicarbonato de sódio e cera de carnaúba no controle do bolor verde. Os resultados mostraram que a maioria dos isolados bacterianos e todos os isolados de levedura inibiram o crescimento micelial do fitopatógeno. Somente um isolado de Bacillus subtilis (ACB-84) foi capaz de inibir a germinação de P. digitatum com 72% de inibição, enquanto ACB-K1 e ACB-CR1 (S. cerevisiae) foram os mais eficientes com inibições de 78 e 85,7%, respectivamente; a adição de sacarose (a 0,5%) favoreceu ainda mais a inibição da germinação dos conídios pelos isolados da levedura. Os resultados de controle in vivo mostraram a viabilidade de S. cerevisiae ACB-K1 e ACB-CR1 para o controle de P. digitatum, em frutos de lima-ácida 'Tahiti' e laranja 'Hamlin', respectivamente; a associação de bicarbonato de sódio com agentes de biocontrole não resultou em melhorias no controle curativo do bolor verde; cera de carnaúba (18% de SST) favoreceu a atividade antagonística de S. cerevisiae, e tal efeito dependeu da variedade dos frutos cítricos em estudo e do isolado da levedura utilizado para o biocontrole.

Citrus fruits are affected by diverse diseases, mainly the fungal infections, which affect productivity and quality, especially when it targets the market of fresh fruit. Among the fungal diseases that occur in postharvest, there is the green mold caused by Penicillium digitatum. The control measures are based mainly in the treatment of fruits with different combinations of fungicides in packing-house. Due to restrictions on the presence of residues of fungicides in citrus fruits and the increasing development of resistant strains of pathogens to the fungicide used, it is necessary to search for control alternatives such as biological control. Therefore, this study aimed to: (i) verify the antagonistic effect of biological control agents (BCA), being 13 isolates of Bacillus subtilis and 06 isolates of Saccharomyces cerevisiae against P. digitatum, (ii) study in vitro interactions between pathogen and BCA (iii) determine the effect of integration of antagonists with sodium bicarbonate and carnauba wax in the control of green mold. The results showed that the majority of the isolates, and all yeast isolates inhibited the mycelial growth of the phytopathogen. Only one isolate of B. subtilis (ACB-84) was able to inhibit the germination of P. digitatum (72% of inhibition), whereas ACB-K1 and ACB- CR1 (S. cerevisiae) were the most effective with inhibition from 78 and 85.7% respectively. The addition of sucrose (0.5%) favored the inhibition of conidia germination by the yeast isolates. The results from the in vivo control showed the viability of S. cerevisiae ACB-K1 and ACB-CR1 to control P. digitatum in 'Tahiti' lime fruits and orange 'Hamlin' fruits, respectively. The combination of sodium bicarbonate and biocontrol agents did not result in improvements in the curative control of the green mold. Carnauba wax (18% of TSS) favored the antagonistic activity of S. cerevisiae, and this effect depended on the variety of fruits in the study and of the yeast isolate used for the biocontrol.

No presente, foi avaliada a influência do amendoim-forrageiro cv. Amarillis e da gramínea coastcross nas entrelinhas de plantas de laranjeira 'Natal' quanto à produção e liberação de ascósporos de G. citricarpa, e consequente controle da mancha-preta dos frutos cítricos. Os tratamentos avaliados foram: 1- cultivo convencional, sem utilização de fungicidas; 2- cultivo convencional, com utilização de fungicidas; 3- gramínea coastcross, e 4- amendoim forrageiro entre as linhas das plantas. O monitoramento de ascósporos deu-se mediante armadilhas caça-esporos do tipo Quest Volumetric Spore System™. Um total de 33 inspeções foi realizado semanalmente, a partir do final de agosto até início de setembro do ano seguinte. A quantificação da doença deu-se mediante utilização de escala diagramática de notas, sendo também determinada a porcentagem de frutos com padrão comercial. A gramínea coastcross foi o melhor tratamento em reduzir o número de ascósporos liberados, diferindo, estatisticamente, do convencional, porém não dos demais tratamentos. Cultivo intercalar e cultivo convencional associado com aplicações de fungicida foram os mais eficientes quanto à redução da severidade de sintomas da mancha-preta, diferindo do tratamento- -testemunha, sem emprego de fungicida. Esses tratamentos foram os que também proporcionaram a maior porcentagem de frutos com padrão comercial, sendo de 89% a 91%, enquanto no cultivo convencional, sem uso de fungicidas, foi de 73%.

This study highlighted the effect of planting coast-cross grass and forage peanut cv. Amarilis between rows of Natal oranges on spreading of Guignardia citricarpa ascospores and consequent citrus black spot control. Treatments evaluated were: 1- conventional cultivation, free of fungicides; 2- conventional cultivation, using protective fungicides; 3- inter-crop cultivation of coast-cross grass between rows of citrus crops and; 4- inter-cropping cultivation of forage peanut between the rows of citrus crops. Quest Volumetric Spore SystemTM traps were set in order to determine the number of ascospores released. A total of 33 inspections were conducted weekly, from the end of August until early September the following year. A diagrammatic scale was used to determine the severity of the disease as well as the percentage of fruits having a commercial standard. The coast-cross grass was more effective in reducing the number of ascospores produced, whose average statistics were lower than in the conventional treatments, free-fungicides. The inter-crop and conventional cultivation method coupled with fungicide treatment was more effective in reducing the severity of citrus black spot symptoms, and differs statistically from the fungicide-free control method. These methods also resulted in a higher percentage of fruits of a commercial standard, ranging from the 89% through the 91% percentile, and the cultivation, free of fungicides, fell within the 73%.

Caused by Alternaria alternata, Alternaria brown spot (ABS) is a major fungal disease of mandarins in Brazil, causing serious losses in commercial orchards of Ponkan tangerine (Citrus reticulata Blanco) and Murcott tangor [C. sinensis (L.) Osbeck × C. reticulata Blanco]. The response of 31 accessions/genotypes of mandarins and their hybrids to A. alternata, was evaluated in São Paulo state, Brazil. The incidence and severity of the disease in fruit were evaluated in the field, using diagrammatic scale, four times during 2008 and 2009. Based on these data, the area under the disease progress curve (AUDPC) was calculated. In parallel, in vivo and in vitro inoculations with A. alternata were made on leaves to confirm field results. Resistance and susceptibility was evaluated in controlled experiments by counting the number of lesions per leaf using a diagrammatic scale. Most of the genotypes were symptomatic after inoculation with A. alternata with disease most severe on the hybrids Nova, África do Sul, Ponkan and Murcott. Cultivars like Cravo, Nules and Ortanique that have excellent fruit quality and had lower AUDPCs, whereas Fremont and Thomas were highly resistant to the fungus and did not show any symptoms in the field or in controlled inoculations. The attractiveness and pronounced flavor of Fremont and Thomas fruit make them new options for the citriculture.

A habilidade de isolados de Bacillus subtilis e Trichoderma spp. em controlar a mancha preta dos frutos cítricos (MPC) foi avaliada em pomares de laranjeira 'Natal'. O primeiro experimento foi conduzido durante a safra de 2001/2002, no qual foram testados quatro isolados de B. subtilis (ACB-AP3, ACB-69, ACB-72 e ACB-77) aplicados de forma isolada ou em mistura, em intervalos de 28 dias, comparando-se com o tratamento fungicida. Dois outros ensaios foram conduzidos durante a safra de 2002/2003, em que os mesmos quatro isolados de B. subtilis e dois isolados de Trichoderma spp. (ACB-14 e ACB-40) foram testados, sendo os isolados aplicados em intervalos de 28 dias no segundo experimento e em intervalos de 15 dias no terceiro experimento. No primeiro experimento, o tratamento com ACB-69 diferiu estatisticamente do tratamento-testemunha, porém não diferiu dos outros agentes de controle biológico ou da mistura dos isolados de Bacillus. No segundo experimento, os tratamentos com ACB-69 e ACB-AP3 resultaram em menores índices de doença em comparação com o tratamento-testemunha. Entretanto, este resultado não se repetiu no terceiro experimento, em que os isolados foram aplicados em intervalos de 15 dias. A severidade de doença foi alta em ambas as safras avaliadas, e o tratamento com fungicida foi o mais efetivo para o controle da doença.

The ability of isolates of Bacillus subtilis and Trichoderma spp. to control citrus black spot (CBS) was investigated in ´Natal´ sweet orange orchards. The first experiment was conducted during the 2001/2002 season and four isolates of B. subtilis (ACB-AP3, ACB-69, ACB-72 and ACB-77), applied every 28 days, alone or in combination were tested and compared with fungicide treatments. Two other experiments were carried out during the 2002/2003 season, where the same isolates of Bacillus and two isolates of Trichoderma (ACB-14 and ACB-40) were tested being applied every 28 days in the second experiment, and every 15 days in the third experiment. In the first experiment, the treatment with ACB-69 differed statistically from the control, but did not differ from other biological control agents or mixture of Bacillus isolates. In the second experiment, the treatments with ACB-69 and ACB-AP3 resulted in smaller disease index compared with the control treatment. However, this result was not repeated in the third experiment, where the isolates were applied every 15 days. Disease severity was high in both evaluated seasons and the fungicide treatment was the most effective for disease control.

O setor citrícola enfrenta sérios problemas representados por doenças de flores e frutos jovens que, além de diminuir a produtividade, depreciam os frutos pelo aspecto que conferem aos mesmos. Tais doenças são representadas, principalmente, pela mancha preta dos frutos cítricos (MPC) e pela queda prematura dos frutos cítricos (QPFC), onde a medida predominante de controle é a pulverização com produtos químicos. Entretanto, os custos financeiros e ambientais de aplicações com tais produtos, aliado às crescentes restrições à presença de resíduos, estão a exigir o estudo de novas alternativas. Entre estas, o controle biológico surge como alternativa importante. Sabendo-se que, o conhecimento da biodiversidade dos seres vivos é importante para determinação de suas funções potenciais, o presente trabalho teve por objetivo estudar a diversidade genética, através de marcadores moleculares AFLP, de 32 isolados de B. subtilis com a finalidade de se encontrar, dentre os mesmos, um (ou mais isolados) que apresentasse maior similaridade com o isolado ACB-69, o qual apresenta potencial para o controle da doença. Diante disso, os resultados obtidos neste trabalho, permitiram concluir que: a) os isolados de B. subtilis estudados agruparam-se no filograma de distância genética, independente da procedência ou do hospedeiro; b) os isolados ACB-69 e ACB-83, com potenciais para o controle da queda prematura dos frutos cítricos, compartilham da mesma ancestralidade, o que pode ser inferido pela metodologia aplicada; c) em termos biológicos; o isolado ACB-83 merece mais estudos quanto à viabilidade de controle de doenças de citros, como a queda prematura dos frutos cítricos e a manha preta dos frutos cítricos, sob condições de campo.

The Brazilian citriculture faces with severe problems concerning blooming and young fruit diseases, which cause crop losses and fruit depreciation for market. Such diseases are represented by the postbloom fruit drop (PFD) and by the black spot of citrus (CBS) whose control measures are predominantly through chemical products. However, the economical and environmental disadvantages associated with chemical treatments besides the increasing restrictions on the residuals of pesticides are strong factors that demand new control measures. Among them, the biological control stands out as being an important alternative. Former studies were carried out in laboratory and field conditions aiming at knowing the potentiality of Bacillus subtilis isolates in the control of the above mentioned diseases. Among the tested isolates, the ACB-69 showed the higher control efficiency. This project was undertaken in order to study, by means of AFLP molecular markers, the genetic diversity of 32 isolates of B. subtilis with the aim of discovering isolates as efficient as ACB-69, which could show a comparable control when tested under natural conditions of the disease occurrence. It was found from the results gathered here that: (i) the studied isolates of B. subtilis were grouped in the phylogram of a genetic distance, regardless of the precedence or host; (ii) the isolates ACB-69 and ACB-83, with potential for the control of the postbloom fruit drop, share the same ancestry, which is inferred by the methodology employed here; (iii) in biological terms, the isolate ACB-83 demands additional studies concerning its feasibility on the control of both diseases in field conditions.

El sector citrícola enfrenta serios problemas representados por enfermedades en las flores y en frutos jóvenes que además de disminuir la productividad, devalúan los frutos por el aspecto que le dan a los mismos. Tales enfermedades están representadas, principalmente, por la mancha negra de los frutos cítricos (MNC) y por la caída prematura de los frutos cítricos (CPFC), donde la medida predominante de control es la pulverización con productos químicos. Entretanto, los costos financieros y ambientales de las aplicaciones con estés productos químicos, sumado a las crecientes restricciones de la presencia de residuos, están a exigir el estudio de nuevas alternativas de control. Entre estas, el control biológico surge como una alternativa importante. Estudios fueron anteriormente realizados, bajo condiciones de laboratorio y de campo, con el objetivo de determinar la potencialidad de aislados de Bacillus subtilis en el control de las enfermedades mencionadas arriba, puesto que, uno aislado, el ACB-69 fue el que presentó la mejor eficiencia de control. Frente a lo anteriormente expuesto y, sabiendo que, el conocimiento de la biodiversidad de los seres es importante para la determinación de sus funciones potenciales, el presente proyecto de investigación tuvo como objetivo estudiar la diversidad genética, a través de marcadores moleculares AFLP, de 32 aislamientos de B. subtilis con la finalidad de se encontrar, dentro los mismos, uno (o más aislados) que presentase mayor semejanza con el ACB-69 y que cuando testado, bajo condiciones naturales de ocurrencia de las enfermedades, si puede encontrar similar control. En función de los resultados experimentales obtenidos, se concluyo que: (a) los aislados de B. subtilis estudiados se agruparon en el filograma de distancia genética, independiente de la procedencia o del huésped; (b) los aislados ACB-69 y ACB-83, con potencial para el control de la caída prematura de los frutos cítricos, comparten la misma ancestralidad, lo que puede ser evaluado por la metodología aplicada; c) en términos biológicos, el aislado ACB-83 merece mas estudios cuanto a la viabilidad de control de las enfermedades caída prematura de los frutos cítricos y de la mancha negra, bajo condiciones de campo.

A severidade da mancha-marrom de alternária nos pomares brasileiros de tangerinas tem causado sérias preocupações aos citricultores, devido aos prejuízos em plantios comerciais de variedades suscetíveis, como a tangerina Ponkan e o tangor Murcott. Para avaliar a resposta de diferentes genótipos ao fungo, foram realizadas inoculações de Alternaria alternata in vitro e in vivo, em 54 diferentes genótipos de tangerinas e seus híbridos, selecionados no Banco Ativo de Germoplasma de Citros do Centro APTA Citros Sylvio Moreira, do Instituto Agronômico, em Cordeirópolis-SP, visando a encontrar variedades resistentes. Para isso, inicialmente, testes de patogenicidade foram realizados com dez isolados de A. alternata para a seleção dos mais agressivos. Posteriormente, foram realizadas inoculações em folhas destacadas e em plântulas e, aos dois (in vitro) e três (in vivo) dias após, fez-se a contagem do número de lesões/folha e a estimativa da severidade da doença com auxílio de escala diagramática (in vivo). A maior parte dos genótipos apresentou sintomas da doença, porém com diferentes graus de suscetibilidade. Genótipos como a tangerina Sul da África e o tangelo Orlando foram os mais suscetíveis. Por outro lado, o grupo das satsumas e mexericas, assim como algumas tangerinas mostraram-se resistentes, indicando novas opções para a citricultura nacional.

The confirmation of a new disease in the Brazilian tangerine orchards, the alternaria brown spot, has been concerning citrus growers because of the serious damages to commercial crops of susceptible varieties, such as Ponkan tangerine and Murcott tangor. In this research, in vitro and in vivo inoculations of Alternaria alternata fungus were held in 54 different varieties of the tangerine group selected from the Citrus Germoplasm Bank of Centro APTA Citros Sylvio Moreira, Instituto Agronomico, Cordeirópolis, State of São Paulo, Brazil, aiming to find varieties with more resistance. First, a pathogenicity test with ten different A. alternata isolates was made to select the most aggressive one. After this, inoculations in detached leaves and seedlings were held and, approximately two (in vitro) and three (in vivo) days after, the number of lesions in each leaf was counted, and the disease severity estimated with diagrammatic scale help (in vivo). More than a half of varieties showed symptoms of the disease, however with different levels of susceptibility. Varieties like South African tangerine and Orlando tangelo were the most susceptible; on the other hand the satsumas and willow leaf group and some tangerines, like Thomas and Fremont, showed resistance, indicating new options to the brazilian citriculture.

A queda prematura dos frutos cítricos (QPFC), causada por Colletotrichum acutatum, dados os grandes prejuízos que têm causado aos produtores, constitui-se numa doença de grande importância econômica. O controle da doença é feito predominantemente mediante uso de fungicidas, que eleva o custo de produção e afeta negativamente o meio ambiente. Diante disso, este trabalho teve por objetivo buscar um método alternativo de controle da QPFC, mediante o uso de agentes de biocontrole ou de biofertilizantes. Diferentes concentrações de biofertilizantes (originários de duas fontes distintas e denominados de Bio1 e Bio 2); três isolados de Bacillus subtilis (ACB-69; 72 e 77) e três isolados de Trichoderma spp. (ACB-14; 37 e 39) foram testados, isoladamente ou em combinação, sob condições de laboratório, quanto à capacidade inibitória da germinação de conídios de C. acutatum. Estudaram-se, ainda, a produção de metabólitos termoestáveis por B. subtilis e o efeito sobre a germinação do patógeno. Quinze isolados de B. subtilis foram testados quanto à capacidade de prevenir a infecção por C. acutatum em flores destacadas de lima- ácida 'Tahiti' e, no campo, foram instalados dois experimentos, visando a testar ACBs e biofertilizantes no controle da doença. Verificou-se que o isolado ACB-72 (B. subtilis) e ACB-37 (T. pseudokoningii) foram os que mais inibiram a germinação do patógeno. Quanto à produção de metabólitos termoestáveis, ACB-69 e 77 foram os mais eficientes em produzir substâncias antifúngicas, e em quantidades suficientes para inibirem a germinação do patógeno. A mistura dos quatro isolados de Bacillus (ACBs: 69; 72; 77 e AP3) foi o que apresentou maior porcentagem de inibição (73%). Os biofertilizantes (Bio1 e Bio2), em concentrações acima de 10% e, quando em associação com isolados de Trichoderma spp., promoveram maiores inibições na germinação de C. acutatum. Em testes com flores destacadas, verificou-se que, onde foram aplicados os ACBs 69; 76; 74 e 77, as porcentagens de pétalas sem sintomas de infecção por C. acutatum foram de 83; 92; 92 e 97%, respectivamente. Mediante avaliações a campo, verificou-se a potencialidade de B. subtilis e de biofertilizantes em controlar a doença.

Postbloom Fruit Drop of Citrus (PDF), caused by Colletotrichum acutatum, has caused losses to citrus producers and therefore it is economically very important. This disease is generally controlled by fungicide sprayings, which increase the production cost, and affects the environment. Thus, this work aimed at developing an alternative control method through the use of biocontrol agents, or biofertilizers. Different concentrations of biofertilizers (from two distinct sources and named Bio1 and Bio2), three strains of Bacillus subitlis (BCA-69, 72 and 77) and three isolates of Trichoderma spp. (BCA-14, 37 and 39) were tested, in vitro, alone or in combination, for the inhibitory capacity of conidia germination of C. acutatum. It was studied the production of thermo-stable metabolites by B. subtilis and their effect on the germination of C. acutatum conidia. Under in vivo conditions, 15 isolates of B. subtilis were tested for the ability to prevent C. acutatum infection on 'Tahiti' lime detached flowers and in the field, where two experiments were installed, for testing the BCA and biofertilizers in the control of the disease. It was found that the isolate BCA-72 (B. subtilis) and BCA-37 (T. pseudokoningii) were the most efficient in inhibiting conidia germination. BCA69 and BCA-77 were the most effective in producing anti-fungal substances, and in quantities sufficient to inhibit the germination of C. acutatum. The mixture of four strains of Bacillus (BCA: 69, 72, 77 and AP3) presented the highest percentage of inhibition (73%). Regarding the use of biofertilizers (Bio1 and Bio2), it was observed that concentrations above 10% of the product, when combined with the strains of Trichoderma spp. decreased the pathogen germination. The experiments with detached flowers showed that the flowers where the BCA: 69, 76, 74 and 77 were applied presented 83, 92, 92 and 97% respectively, of the petals without symptoms of infection by C. acutatum. Field tests showed the potential of B. subtilis and biofertilizers in controlling the disease.

The macroarray nylon membrane technology was used to study the differential gene expression of 3.575 ESTs clones from sugarcane libraries. Total RNA was extracted from two varieties, one known as tolerant (SP80-0185) and another known as susceptible (SP70-3370) to the ratoon stunting disease (RSD), after being inoculated with Lefsonia xyli subsp. xyli bacterial extracts, and used as probe. Out of the 3.575 ESTs, 49 showed differential expression levels. Most of the selected ESTs were found in the resistant variety, 41 being induced and 3 being repressed in response to bacterial inoculation. On the other hand, the susceptible variety showed only 5 differentially expressed genes, 2 being induced and 3 being repressed. These results indicate that the tolerance to bacterial infection could be associated to extracellular signal perception because ESTs associated to signal transduction pathways were induced in the variety SP80-185, e.g. plasma membrane H+ ATPase EST. Also, ESTs related to transcription factor expression, such as G-box, OsNAC6, "DNA binding", MYB family, Zinc Finger were induced in the tolerant variety after infection. An EST with high similarity to G-Box binding factor, a cis-DNA sequence present in some plant promoter genes required to signal transduction for environmental signals, was also induced. Even though the susceptible variety had no significant difference in gene expression, a lipase-like EST was repressed when plants were infected. Lipase, a membrane enzyme, is also involved in jasmonate biosynthesis, which plays a major role in plant defense mechanisms. Putative roles for induced and repressed genes in both tolerant and susceptible varieties are discussed here.

Utilizando a técnica de macroarranjos de cDNA em membranas de náilon, analisou-se o perfil de expressão de 3.575 ESTs ("Expressed Sequence Tags") de cana-de-açúcar, oriundas do projeto SUCEST, em duas variedades, uma tolerante (SP80-0185) e outra suscetível (SP70-3370) ao Raquitismo da Soqueira. Foram analisadas amostras foliares de plantas inoculadas com Leifsonia xyli subsp. xyli., agente etiológico do Raquitismo, contrastadas com plantas não inoculadas (controle), para cada variedade, marcadas com sondas de cDNA e hibridizadas contra os macroarranjos. Após as hibridizações e análises estatísticas dos dados foi possível identificar 49 ESTs com expressão alterada, sendo 44 na variedade tolerante (41 ESTs induzidos e 3 reprimidos) e 5 na variedade suscetível (2 ESTs induzidos e 3 reprimidos). Os resultados obtidos sugerem que a tolerância da variedade SP80-0185 de cana-de-açúcar à bactéria fitopatogênica pode estar relacionada com a percepção de sinais extracelulares, visto que ESTs relacionados a vias de transdução de sinais apresentaram expressão gênica induzida na variedade tolerante, os quais codificam para uma EST com similaridade à H+-ATPase da membrana plasmática, fatores de transcrição G-box, OsNAC6, "DNA binding", família MYB e "Zinc Finger" e ainda uma EST com similaridade ao fator de ligação ao G-Box, o qual corresponde a uma seqüência de DNA cis presente em vários promotores de plantas e requerido para o reconhecimento de muitos estímulos ambientais. Na variedade suscetível foi reprimido uma EST com similaridade à lipase. Esta enzima, também de membrana, faz parte da síntese do jasmonato, o qual ativa as defesas vegetais contra patógenos de plantas. Possíveis funções para os genes induzidos ou reprimidos nas cultivares de cana tolerante ou resistente ao Raquitismo são discutidas neste trabalho.