O mamão (Carica papaya) é uma fruta de grande importância econômica em todo o Nordeste brasileiro, região responsável por 60% da produção nacional. Mamoeiros nos estados do Ceará e Rio Grande do Norte são afetados pela doença denominada amarelo letal do mamoeiro, causada pelo papaya lethal yellowing virus (PLYV). Trabalhos anteriores indicaram que o PLYV é um possível sobemovírus. A fim de estimar a variabilidade genética do PLYV, amostras foliares de mamoeiro foram coletadas em outubro de 2008 e de 2009 em regiões produtoras do Ceará, e Rio Grande do Norte. Oligonucleotídeos específicos baseados na sequência de um isolado de PLYV previamente caracterizado foram utilizados para a amplificação via RT-PCR de um fragmento com 900 pb, correspondente à região central do genoma viral. Fragmentos de 21 isolados virais foram clonados e sequenciados. A análise das sequências de nucleotídeos indicou >97% de identidade entre os isolados, entre 94-100% com o isolado de PLYV previamente sequenciado, e uma identidade baixa, porém significativa, com sobemovírus (43-48,5%). Estes resultados sugerem um baixo grau de variabilidade genética entre isolados de PLYV, e estão de acordo com a classificação provisória do PLYV como membro do gênero Sobemovirus. Conclusões de ordem taxonômica, no entanto, só podem ser tiradas após a determinação da sequência genômica completa.

The papaya (Carica papaya) is a fruit crop of great economic importance throughout the Brazilian northeast, which is responsible for 60% of the national output. Papayas in the states of Ceará and Rio Grande do Norte are affected by lethal yellowing disease, caused by papaya lethal yellowing virus (PLYV). Previous work suggested that PLYV is a putative sobemovirus. To assess the genetic variability of PLYV, foliar samples were collected in October 2008 and October 2009 in commercial fields from Ceará and Rio Grande do Norte states, and total RNA was extracted. Specific primers based on the sequence of a previously characterized PLYV isolate were used for the RT-PCR-based amplification of a 900 bp fragment corresponding to the central region of the viral genome. Fragments from 21 viral isolates were cloned and sequenced. Sequence analyses indicated >97% nucleotide sequence identity among the isolates, 94-100% identity with the previously sequenced PLYV isolate, and a lower but significant identity with sobemoviruses (43-48.5%). These results suggest a low genetic variability among PLYV isolates, and are in agreement with the provisional placement of PLYV in the genus Sobemovirus. Definitive taxonomic conclusions, however, can only be drawn after the determination of the full-length genomic sequence.

O vírus do amarelo letal do mamoeiro ("Papaya lethal yellowing virus", PLYV) é responsável por uma das principais doenças do mamoeiro (Carica papaya) no Nordeste brasileiro. O PLYV pode ser transmitido por solo, água, instrumentos de corte contaminados e por inoculação mecânica em condições experimentais. Na presente pesquisa, avaliou-se a transmissão do PLYV por mãos contaminadas e sua presença em embriões de sementes de frutos infetados. O PLYV foi transmitido por mãos contaminadas, e mãos contaminadas e lavadas em água corrente revelando elevada estabilidade. Experimentos com 1.128 embriões de sementes obtidas de frutos infetados com o vírus revelaram a ausência do PLYV, cuja presença foi constatada em 112 tegumentos das 670 sementes analisadas. O PLYV não foi perpetuado por plantio direto de sementes, envolvendo 310 plântulas e 362 mudas, comprovando não ser o mesmo transmitido por semente de forma embrionária. De outra parte, a presença do PLYV foi comprovada por Elisa indireto em 49 de 456 sementes per si testadas.

The "Papaya lethal yellowing virus" (PLYV) is responsible for an important disease of papaya (Carica papaya) in Northeast Brazil. PLYV can be transmitted by soil, water and contaminated cutting instruments, as well as through mechanical inoculation. The objective of the present work was to evaluate the possibility of the virus transmission by contaminated hands, and its presence in the embryos of infected papaya fruit seeds. The virus was transmitted through contaminated hands, thus revealing that PLYV is very stable. Experiments with embryos from 1,128 seeds of infected fruits revealed the absence of PLYV in the embryos from seeds of infected fruits, although the virus was present in 112 out of the 670 seed peel samples analyzed. Direct planting of seeds from infected fruits, involving 310 seedlings and 362 plant-seedlings, did not perpetuate PLYV, demonstrating that the virus is not transmitted in the embryo of the seeds. On the other hand, PLYV was detected by indirect Elisa in 49 out of 456 seeds per si.

Amostras foliares de Crotalaria paulinea apresentando mosaico foram coletadas em São Luiz, MA, e enviadas ao Laboratório de Virologia Vegetal da UFC. As amostras foram testadas por Elisa indireto, contra anti-soros para Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV) e Cucumber mosaic virus (CMV) e por dupla difusão em àgar contra anti-soro para Cowpea severe mosaic virus (CPSMV). As amostras reagiram somente com o anti-soro para CPSMV, indicando ser C. paulinea mais um hospedeiro natural do vírus. Extratos das folhas de C. paulinea foram inoculados em plantas de caupi (Vigna unguiculata subsp. unguiculata) mantidas em casa de vegetação. Dez dias após a inoculação, as plantas passaram a exibir sintomas de mosaico e a presença do CPSMV foi confirmada por sorologia. Nos estudos de gama de hospedeiros, envolvendo oito espécies botânicas, o isolado de CPSMV obtido de C. paulinea (CPSMV-Cp) infetou sistemicamente somente cultivares de caupi. Estudos de reações de RT-PCR revelaram a presença de uma banda no gel de agarose de 594 pb para o CPSNV-Cp semelhante às de outros isolados de CPSMV. O CPSMV-Cp foi multiplicado em caupi cv. Pitiúba e purificado por clarificação com n-butanol, precipitação viral com PEG e ultracentrifugação. A preparação purificada apresentou um espectro de absorção ultravioleta típico de núcleoproteína com uma razão A260/A280 de 1,7. Coelho da raça Nova Zelândia Branca imunizado com a preparação viral purificada, produziu anti-soro policlonal reativo com CPSMV em dupla difusão em àgar. Este é o primeiro relato sobre a infecção natural de CPSMV em C. paulinea.

Leaf samples from Crotalaria paulinea showing mosaic were collected in the city of São Luiz, MA and sent to the Plant Virus Laboratory at the UFC. The leaf samples were tested by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) against antisera specific to Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV) and Cucumber mosaic virus (CMV) and by gel double-diffusion against antiserum to Cowpea severe mosaic virus (CPSMV). The samples reacted only with the antiserum to CPSMV indicating that C. paulinea is one more natural host of the virus. Leaf extracts from infected C. paulinea were mechanically inoculated in cowpea (Vigna unguiculata subsp. unguiculata) plants maintained in greenhouse. Ten days after inoculation, the plants started to exhibit mosaic and the presence of CPSMV was confirmed by serology. In a host range study involving eight plant species, the CPSMV isolate obtained from C. paulinea (CPSMV-Cp) infected only cowpea cultivars. The results of RT-PCR revealed a band in the agarose gel of 594 pb for CPSMV-Cp similar to those of other CPSMV isolates. The CPSMV-Cp was increased in cowpea cv. Pitiuba and purified by clarification using n-butanol, virus particle precipitation with polyethylene glycol (PEG) and ultra centrifugation. The purified virus preparation presented an ultraviolet light absorption spectrum typical of nucleoprotein, with a ratio A260/A280 equal to 1.7. A White New Zealand rabbit immunized with the purified virus preparation produced polyclonal antiserum reactive to CPSMV in agar double-diffusion. This is the first report about natural infection of C. paulinea by CPSMV.

Visando selecionar acessos e progênies de melancia (Citrullus spp.) como fontes de resistência aos potyvirus: Papaya ringspot virus tipo watermelon (PRSV-W), Watermelon mosaic virus (WMV) e Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV), oito genótipos foram avaliados, sendo seis dos acessos (87-019, 87-029, 91-080, PI-244018, 91-043 e PI-195927) e dois do acesso PI-244019 (PI-244019A e PI-244019B) do Banco Ativo de Germoplasma (BAG) de cucurbitáceas do Nordeste brasileiro, da Embrapa Semi-Árido em Petrolina-PE. Também foram avaliadas progênies endogâmicas e de polinização livre derivadas desses acessos. As avaliações foram realizadas em de casa de vegetação, mediante inoculações mecânicas, e avaliação por Elisa, no Laboratório de Virologia Vegetal da UFC. As plantas não infetadas foram selecionadas e cultivadas na Estação Experimental de Bebedouro na Embrapa Semi-Árido em Petrolina-PE, onde ocorreram inoculações naturais de vírus por vetores. Foram constatadas plantas não infetadas com o PRSV-W nos acessos 87-019, PI-244019A, 91-080, PI-244018, PI-244019B e PI-195927; plantas não infetadas com o WMV nos acessos 87-019 e 87-029 e plantas não infetadas com o ZYMV nos acessos PI-244019A, 87-029, 91-080, 91-043, PI-244019B e PI-195927. As progênies apresentaram comportamento diferenciado, com percentagem de plantas selecionadas variando de 20 a 100% nas progênies avaliadas para resistência a PRSV-W e 60 a 100% nas progênies avaliadas para resistência a WMV. Nenhuma das progênies testadas apresentou resistência ao ZYMV, evidenciando possível diferença entre a resistência ao PRSV-W e ao WMV apresentada nas progênies e a resistência apresentada ao ZYMV, visto que as progênies foram submetidas ao mesmo número de autofecundações.

Six watermelon (Citrullus spp.) accessions (87-019, 87-029, 91-080, PI-244018, 91-043 and PI-195927) and two samples (PI-244019A and PI-244019B) from the acession PI-244019B from Embrapa Cucurbit Germplasm Bank in Petrolina-PE, Northeast of Brazil were evaluated in an attempt to select accessions and progenies of watermelon as sources of resistance to Papaya ringspot virus type watermelon (PRSV-W), Watermelon mosaic virus (WMV) and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV). Endogamic and open pollinated progenies from these accessions were also evaluated for resistance to PRSV-W, WMV and ZYMV. The evaluations were carried out in a greenhouse at the Plant Virus Laboratory of the Federal University of Ceará where the plants were mechanically inoculated and serological screened by Elisa. The selected plants were grown in the Experimental Station of Bebedouro in Petrolina-PE, where the virus inoculations were made, naturally, by vectors. According to the results, plants were not infected by PRSV-W in the following accessions: 87-019, PI-244019A, 91-080, PI-244018, PI-244019B and PI-195927; plants were not infected by WMV in the accessions: 87-019 and 87-029; and plants were not infected by ZYMV in the accessions: PI-244019A, 87-029, 91-080,91-043, PI-244019B and PI-195927. The progenies showed differentiated behavior with the percentage of selected plants ranging from 20 to 100% for PRSV-W and 60 to 100% for WMV. The progenies evaluated against ZYMV did not show resistant plants. Therefore, it can be postulated that resistance for PRSV-W and WMV in the progenies differs from that for ZYMV, since all progenies were submitted to the same number of self-pollinations.

O caupi (Vigna unguiculata) é uma importante leguminosa cultivada principlamente por pequenos agricultores da região Nordeste. Doenças ocasionadas por vírus podem constituir o principal fator limitante da produção do caupi, destacando-se, nesse aspecto, o mosaico severo, causado pelo Cowpea severe mosaic virus (CpSMV), família Comoviridae, gênero Comovirus. A resistência tem sido considerada como a melhor alternativa no controle dessa virose e diversas fontes promissoras têm sido relatadas, como as cultivares Macaibo e CNC 0434, e a linhagem L254.008. As investigações sobre a base genética da resistência ao CpSMV nesses materiais têm conduzido a resultados semelhantes, sendo a resistência herdada como uma característica monogênica recessiva. No entanto, até então, nenhum trabalho havia investigado o alelismo dos genes de resistência dessas fontes. No presente trabalho foram realizados estudos visando esclarecer essa questão nas três fontes de resistência; 'Macaibo', 'CNC0434' e L254.008. Plantas dos referidos genótipos foram cruzadas de maneira direta e recíproca originando seis populações F1 e F2. Inoculações controladas dessas populações com o isolado CpSMV-Re1 permitiram concluir que o gene de resistência de 'Macaibo' é o mesmo de 'CNC-0434', distinto daquele encontrado na linhagem L254.008.

Cowpea (Vigna unguiculata) is an important vegetable crop in Northeast Brazil and has been traditionally cultivated by small farmers. Virus diseases are considered to be the main factor in yield limiting cowpea yield in the region. The severe mosaic disease caused by Cowpea severe mosaic virus (CpSMV), family Comoviridae, genus Comovirus, seems to be one of the most prevalent diseases responsible for high losses. Resistant cultivars may be considered the best alternative for disease control, and several promising sources of resistance such as Macaibo, CNC 0434 cultivars, and the line L 254.008 have been reported. More recent investigations into the genetic basis of these resistant plant genotypes have pointed to similar results, and the inheritance of this resistance has been recognized as monogenic recessive. On the other hand, any research aimed to investigate if the resistance genes are alleles or not. In the present investigation a test was conducted to elucidate this question. Plants of the genotypes Macaibo, CNC 0434 and L 254.008 were bred in reciprocal and direct ways producing six populations. Evaluation of those cowpea genotypes using one isolate of CpSMV indicated that the resistance gene of Macaibo is the same as that for CNC 0434 and distinct from the gene L 254.008 found in that line.

No período de maio de 2003 a março de 2004, foram coletadas amostras foliares de plantas de melancia (Citrullus lanatus) de 21 campos de cultivo de cucurbitáceas, no Estado de Roraima. As amostras exibiam diferentes sintomas de vírus e foram levadas para o Laboratório de Virologia Vegetal da Universidade Federal do Ceará para serem testadas por "enzyme linked immunosorbent assay" (Elisa)-indireto, contra anti-soros específicos para Cucumber mosaic virus (CMV), Papaya ringspot virus estirpe melancia (PRSV-W), Watermelon mosaic virus (WMV) e Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV). Nos testes de Elisa, utilizou-se o conjugado universal, anti-imunoglobulina (IgG) de coelho produzida em cabra conjugada à enzima fosfatase alcalina. Todas as amostras foram testadas, também, por dupla difusão contra o anti-soro para Squash mosaic virus (SqMV). Os resultados indicaram a presença do PRSV-W em 84,2% das amostras coletadas em maio de 2003, em 7,1% das amostras coletadas em dezembro de 2003 e em 55,6% das amostras coletadas em março de 2004. A presença do ZYMV foi observada em 10,5% das amostras coletadas em maio de 2003, 21,4% das amostras coletadas em dezembro de 2003 e em 25,9% das amostras de março de 2004. O WMV foi detectado somente em oito das amostras coletadas em março de 2004 (29,6%). Os resultados desta pesquisa confirmam a ampla dispersão do PRSV-W em cultivos de cucurbitáceas no território brasileiro e a preocupante expansão do ZYMV em razão dos elevados prejuízos que o mesmo tem causado em outras partes do mundo.

Leaf samples were collected from watermelon plants (Citrullus lanatus) from 21 different fields in the state of Roraima from May/2003 to March/2004. The samples were sent to the Plant Virus Laboratory of the Federal University of Ceará, to be tested by indirect enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) against antisera specific to Cucumber mosaic virus (CMV), Papaya ringspot virus strain watermelon (PRSV-W), Watermelon mosaic virus (WMV) and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV). The Elisa tests were processed using the universal conjugate, anti-imunoglobulim (IgG) from rabbit produced in goat, conjugated to alkaline phosphatase. All samples were also tested by double immunodifusion against antiserum specific to Squash mosaic virus (SqMV). The presence of PRSV-W was detected in 84.2% of the samples collected in May/2003, in 7.1% of the samples collected in December/2003 and 55,6% in March/2004. The presence of ZYMV was detected in 10.5% of the samples collected in May, in 21.4% in December/2003 and in 25.9% in March/2004. The WMV was detected only in eight of the samples collected in March/2004 (29.6%). These results confirm the world widespread dispersion of PRSV-W in cultivated cucurbit fields in Brazil and rise a concern about the ZYMV expansion, which has caused serious yield lost in other parts of the world.

Em razão da freqüente ocorrência de infecção mista, na natureza, o presente trabalho objetivou estudar o efeito da interação de diferentes espécies de potyvírus em meloeiro (Cucumis melo), melancia (Citrullus lanatus) e abobrinha (Cucurbita pepo). Foram usados os seguintes vírus da família Potyviridae, gênero Potyvirus: Papaya ringspot virus (PRSV); Watermelon mosaic virus, (WMV) e Zucchini yellow mosaic virus, (ZYMV). Os efeitos na sintomatologia das infecções duplas e simples de PRSV, WMV e ZYMV foram avaliados em três híbridos de meloeiro, duas variedades de melancia e abobrinha 'Caserta', em experimentos de casa de vegetação. Os três vírus, isoladamente ou em todas as duplas combinações possíveis, foram inoculados, em plantas dos híbridos de meloeiro Hy Mark, Gold Mine e Orange Flesh, variedades de melancia Crimson Sweet e Charleston Gray e abobrinha 'Caserta', usando-se dez plantas de cada híbrido ou variedade, por combinação de vírus. As inoculações foram efetuadas por meio de extratos de folhas com infecção simples dos respectivos vírus. As plantas inoculadas com cada vírus isoladamente e suas respectivas combinações foram observadas quanto ao aparecimento de sintomas durante 30 dias após as inoculações. Amostras foliares das plantas inoculadas foram, também, testadas por ELISA indireto contra os anti-soros correspondentes para cada vírus. As infecções duplas em meloeiro, melancia e abobrinha revelaram, através da avaliação sintomatológica, que existem interações sinérgicas entre PRSV, WMV e ZYMV. As infecções duplas envolvendo o ZYMV apresentaram alta severidade, exibindo sintomas não encontrados em infecções simples, apesar da severidade nas infecções isoladas do ZYMV.

Considering the frequent natural occurrence of mixed infection of two or more viruses in the same plant, the present research was developed with the objective of studying the symptomatological effects of mixed virus infections in melon (Cucumis melo), watermelon (Citrullus lanatus) and zucchini (Cucurbita pepo). The following virus species from the family Potyviridae genus Potyvirus were used in the study: Papaya ringspot virus (PRSV), Watermelon mosaic virus (WMV), and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV). The symptomatological effects were evaluated in double and single infections in three melon hybrids Hy Mark, Gold Mine and Orange Flesh, two watermelon varieties Crimson Sweet and Charleston Gray and zucchini 'Caserta'. In greenhouse experiments, PRSV, WMV and ZYMV alone and in all possible double combinations were inoculated in ten-day-old melon, watermelon and zucchini plants, using ten plants of each hybrid or variety per virus combination. Inoculations were performed using leaf extracts from plants infected with each virus. Leaf samples from each virus combination were tested by ELISA against antisera specific for the respective viruses. The symptomatological effects in double virus infections revealed the existence of synergistic interactions between PRSV, WMV and ZYMV in melon, watermelon and zucchini. The double infections involving ZYMV showed severe symptoms and symptoms not present in ZYMV single infection.

The Northeast of Brazil presents great potencial for melon (Cucumis melo) and watermelon (Citrullus lanatus) production. Melon fruit with white spots and watermelon fruits showing chlorotic spots were demonstrated to be caused by Watermelon mosaic virus-2, through indirect enzyme linked-immuno sorbent assay.

O Papaya ringspot virus (PRSV) é o agente causal da mancha anelar, principal doença do mamoeiro (Carica papaya) no mundo. O Brasil é o maior produtor desta fruteira, sendo responsável por aproximadamente 40% da produção mundial. A resistência a este vírus, obtida em mamoeiros transgênicos expressando o gene da proteína capsidial (cp) do PRSV, mostrou-se dependente do grau de homologia entre a seqüência do transgene expresso pela planta e o gene cp do vírus invasor, de forma isolado-específico. Dessa forma, quando se objetiva produzir mamoeiros transgênicos com amplo espectro de resistência ao PRSV, é importante o conhecimento do grau de homologia deste gene entre os diversos isolados presentes em uma área geográfica específica onde o mamoeiro será cultivado. O objetivo do presente estudo foi avaliar o grau de homologia entre o gene cp de diversos isolados brasileiros de PRSV. O mamoeiro e o PRSV encontram-se presentes em diversos ecossistemas brasileiros. Doze isolados de PRSV, coletados em oito estados de quatro regiões geográficas, foram utilizados neste estudo. As seqüências do gene cp destes isolados foram comparadas entre si e com o gene utilizado para gerar mamoeiros transgênicos para o Brasil. Um grau de homologia médio de 97,3% para as seqüências de nucleotídeos foi observado entre os isolados brasileiros. Quando comparado com 27 isolados de outras regiões, em uma árvore de homologia, os isolados brasileiros foram agrupados com os isolados australianos, havaianos, e os da América Central e do Norte. Um grau de homologia médio de 90,7% foi observado entre os 40 isolados analisados.

Papaya ringspot virus (PRSV) is the causal agent of the main papaya (Carica papaya) disease in the world. Brazil is currently the world's main papaya grower, responsible for about 40% of the worldwide production. Resistance to PRSV on transgenic plants expressing the PRSV coat protein (cp) gene was shown to be dependent on the sequence homology between the cp transgene expressed in the plant genome and the cp gene from the incoming virus, in an isolate-specific fashion. Therefore, knowledge of the degree of homology among the cp genes from distinct PRSV isolates which are present in a given area is important to guide the development of transgenic papaya for the control of PRSV in that area. The objective of the present study was to assess the degree of homology among the PRSV cp genes of several Brazilian isolates of this virus. Papaya and PRSV are present in many different ecosystems within Brazil. Twelve PRSV isolates, collected in eight different states from four different geographic regions, were used in this study. The sequences of the cp gene from these isolates were compared among themselves and to the gene used to generate transgenic papaya for Brazil. An average degree of homology of 97.3% at the nucleotide sequence was found among the Brazilian isolates. When compared to 27 isolates from outside Brazil in a homology tree, the Brazilian isolates were clustered with Australian, Hawaiian, and Central and North American isolates, with an average degree of homology of 90.7% among them.

As técnicas sorológicas são de grande importância na identificação de vírus, sendo que sua maior limitação na diagnose de viroses vegetais reside na dificuldade da purificação dos vírus para a produção de anti-soros. No presente trabalho, coelhos da raça Nova Zelândia Branco foram, individualmente, imunizados por via oral com extrato de plantas de caupi (Vigna unguiculata) infetadas pelo vírus do mosaico severo do caupi (Cowpea severe mosaic virus, CpSMV) e extrato de folhas de mamoeiro (Carica papaya) infetado com o vírus do amarelo letal (Papaya lethal yellowing, PLYV). Os extratos foram preparados em solução salina 0,15 M, na proporção de 1:1 (p/v), clarificados a uma centrifugação de 10.000 g por 10 min e administrados oralmente aos coelhos em duas séries de cinco doses diárias de 1,0 ml cada, com intervalo de dois dias entre cada série. Os anti-soros obtidos foram avaliados por difusão dupla em agar e ELISA indireto, tendo mostrado-se reativos com extratos de plantas infetadas, sem apresentar reação com extratos de plantas sadias. Embora com títulos baixos, os anti-soros apresentaram excelentes especificidades para extrato de plantas infetadas, criando perspectivas para produção de anti-soros contra vírus de plantas com boa imunogenicidade e de difícil purificação. Trata-se de uma técnica simples, rápida e barata para produção de anti-soro específico para vírus de plantas.

Serological techniques are of great importance for plant virus identification and characterization. The major limiting factor for using these techniques for plant virus identification is the requirement of a good virus purified preparation to be used in immunizing animals for antiserum production. In the present study, two New Zealand rabbits were orally immunized with extracts from cowpea (Vigna unguiculata) plants systemically infected with Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) and with extracts from papaya (Carica papaya) infected with Papaya lethal yellowing virus (PLYV). The leaf extracts were prepared in saline solution 0.15 M in the rate of 1:1 (w/v) and clarified by a centrifugation of 10,000 g for 10 min. The clarified extracts containing the viruses were orally administered to the New Zealand rabbits in two series of five daily doses of 1.0 ml each. The obtained policlonal antisera were shown to be very specific to their respective viruses in double immunodiffusion and indirect ELISA. These seem to be the first antisera specific for plant virus obtained by rabbit oral immunization. The results open up some possibilities for producing antisera to plant viruses of difficult purification. It is a simple, fast and inexpensive method for production of antisera for plant viruses when compared to the traditional techniques that involve rabbit injections with purified virus preparations.

As viroses constituem o principal grupo de doenças do mamoeiro (Carica papaya), ocasionando grandes perdas na produção, podendo chegar à destruição total das plantações afetadas. Embora mais de dez vírus tenham sido constatados infetando naturalmente o mamoeiro, em todo o mundo, no Brasil, até o presente, foram assinaladas apenas as ocorrências do vírus da mancha anelar do mamoeiro (Papaya ringspot virus, PRSV), do vírus do amarelo letal do mamoeiro (Papaya lethal yellowing virus, PLYV) e do vírus da meleira que se encontra em fase de caracterização. A mancha anelar causada pelo PRSV é, inquestionavelmente, o mais importante problema sanitário do mamoeiro. O controle do PRSV mostra-se imprescindível, apesar de bastante difícil, em razão da sua forma de disseminação rápida e eficiente por diversas espécies de afídeos e ausência de resistência genética em C. papaya. Na tentativa de controlar o PRSV, várias medidas já foram testadas, não existindo, até o momento, nenhuma estratégia eficiente e duradoura para seu controle no Brasil. O desenvolvimento de plantas transgênicas de mamoeiro expressando o gene da capa protéica (cp) do PRSV, imunes ao mesmo, abriu nova possibilidade para solução do problema.

The major disease problems affecting papaya (Carica papaya) throughout the world are caused by viruses. These diseases cause serious reductions in fruit production, even totally destroying affected orchards. Although more than ten different viruses have been registered in papaya world-wide, only three have been identified to date that naturally infect papaya in Brazil: Papaya ringspot virus (PRSV), Papaya lethal yellowing virus (PLYV) and the "meleira" steak disease virus that is being characterized. Ringspot caused by PRSV is unquestionably the most important disease affecting papaya in the world. Control of PRSV in Brazil is necessary but not easy, because it is efficiently transmitted by different aphid species and the absence of resistance in C. papaya. Several measures to control PRSV have been tested in Brazil without great sucess. There is no efficient and durable strategic control available. The development of transgenic papaya plants expressing the PRSV coat protein gene (cp), immune to the virus, has opened up a new efficient and probably, more durable control measure.

Os vírus representam sérios obstáculos para o sucesso da olericultura no mundo inteiro, constituindo a identificação daqueles de maior incidência numa região, papel fundamental para o estabelecimento de estratégias de controle. Visitas de campo foram realizadas a plantios de espécies de cucurbitáceas em áreas produtoras do Maranhão e amostras foliares foram coletadas de 118 plantas com sintomas ou suspeita de sintomas de vírus, sendo 46 de abóbora (Cucurbita moschata), 30 de melancia (Citrullus lanatus), 23 de maxixe (Cucumis anguria), 13 de pepino (C. sativus) e seis de melão (C. melo). Todas as amostras foram testadas contra anti-soros específicos para os principais vírus das famílias Bromoviridae, Comoviridae e Potyviridae que infetam cucurbitáceas no Nordeste, mediante "enzyme-linked immunosorbent assay" (ELISA) indireto e dupla difusão em agar. Os resultados revelaram a identificação sorológica de Papaya ringspot vírus (PRSV) em 64,4% das amostras analisadas, seguido de Watermelon mosaic virus-2 (WMV-2) em 15,2%, Cucumber mosaic virus (CMV) em 6,8%, Squash mosaic virus (SqMV) em 3,4% e Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) em 3,4%. Este levantamento confirma a predominância do PRSV em espécies de cucurbitáceas cultivadas no estado do Maranhão.

Viruses represent serious obstacles for the success of producing vegetables, consisting the correct identification of those that infect cucurbits in a region, a fundamental point for establishing strategies for their control. Surveys were carried out at cucurbit fields in producing areas of the State of Maranhão. Leaf samples were collected from 118 plants showing virus like symptoms, 46 from squash (Cucurbita moschata); 30 from watermelon (Citrullus lanatus); 23 from Cucumis anguria; 13 from cucumber (C. sativus) and six from melon (C. melo). All samples were tested against antisera specific to the main virus species from the families Bromoviridae, Comoviridae and Potyviridae that infect cucurbits in Northeastern Brazil by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and double immunodiffusion technique. The results revealed that Papaya ringspot virus was serologically detected in 64.4% of samples analyzed, followed by Watermelon mosaic virus-2 in 15.2%, Cucumber mosaic virus in 6.8%, Squash mosaic virus in 3.4% and Zucchini yellow mosaic virus in 3.4%. This survey confirmed the prevalence of PRSV in cucurbit species grown in the State of Maranhão.

Soybean plants with symptoms of bud blight were growing close to cowpea with severe symptoms of mosaic associated with blisters in the leaves. A group of plants of both species were collected and used for etiological studies. This kind of symptom in soybeans was common in certain areas of the State of Paraná, induced by tobacco streak ilarvirus. Host range, serological reaction, particle morphology and size, protein and nucleic acid analysis, and transmission by beetles from species Cerotoma arcuata Oliv. showed that the virus involved was cowpea severe mosaic comovirus. This is the first report on the occurrence of this virus in soybean plants in the State of Paraná. Results using indirect ELISA showed that in cowpea the relative virus concentration was higher in green leaf areas than in chlorotic ones. Also, virus concentration, determined through indirect ELISA was much higher in plants kept at diurnal regime of 25º C x 23º C (12 x 12 h) than at 30º C x 28º C.