ABSTRACT: Surface contamination by pathogenic and deteriorating microorganisms is a constant concern in the food industry. Therefore, in this study we evaluated the antimicrobial activity of silver nanoparticles (AgNPs), produced using the essential oil of Lippia origanoides Kunth and ethanolic extract of Hymenaea martiana Hayne, against bacteria used in milk processing. For this, AgNPs were synthesized and their antimicrobial activity was evaluated for minimum inhibitory and bactericidal concentrations, time-kill, interference on the biofilm, and application on the surfaces of different materials. AgNPs showed bacteriostatic and bactericidal activity against Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus aureus (ATCC 33591), Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Choleraesuis (ATCC 10708), Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella spp.,andPseudomonas aeruginosa,and interfered with biofilm formation more than with consolidated biofilms. A 1hour period was sufficient to reduce the bacterial cells, whereas a Minimum Duration for Killing (MDK) of 99% was reached after approximately 30 min. AgNPs were effective against bacteria attached to stainless steel and polyethylene, but ineffective on tile surfaces. Thus, owing to the growing microbial resistance and the need to develop new products based on the concepts of green chemistry, these AgNPs are presented as a new possibility for cleaning processes in the food industry.

RESUMO: A contaminação de superfícies por micro-organismos patogênicos e deteriorantes é uma preocupação constante na indústria de alimentos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de nanopartículas de prata (AgNPs) produzidas utilizando óleo essencial de Lippia origanoides Kunth e extrato etanólico da Hymenaea martiana Hayne, frente a bactérias de importância na contaminação em áreas de processamento do leite. Para isso, as AgNPs foram sintetizadas e sua atividade antimicrobiana foi avaliada através das concentrações inibitória e bactericida mínimas, tempo de morte, interferência sobre o biofilme, e por fim, a sua aplicação sobre superfícies de diferentes materiais. As AgNPs apresentaram atividade bacteriostática e/ou bactericida frente à Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus aureus (ATCC 33591), Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Choleraesuis (ATCC 10708), Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella spp. e Pseudomonas aeruginosa, e interferiram na formação do biofilme mais do que sobre o biofilme consolidado. O tempo de uma hora foi o suficiente para reduzir as populações bacterianas, enquanto o Minimum Duration for Killing MDK 99% foi atingido próximo a 30 minutos. As AgNPs foram eficientes contra bactérias aderidas ao inox e ao polietileno. Assim, tendo em vista a crescente resistência microbiana e o desenvolvimento de novos produtos baseados nos conceitos da química verde, essas nanopartículas de prata apresentam-se como uma nova possibilidade de uso nos processos de higienização da indústria de alimentos.

RESUMO: Considerando a necessidade de terapias alternativas para a mastite bovina, uma inflamação, normalmente de causa infecciosa, de alta prevalência e de alto impacto econômico nas fazendas leiteiras, avaliou-se a eficácia antimicrobiana, in vivo, de uma formulação intramamária à base de polipirrol (PPy) solúvel, um polímero condutor promissor para aplicações biomédicas, especialmente como potente antibacteriano. Neste ensaio, quartos mamários de vacas holandesas sadias (n = 8) foram inoculados com Staphylococcus aureus e tratados, por via intramamária, com formulação experimental à base de PPy solúvel (5%) e com formulação comercial à base de sulfato de gentamicina. O efeito desses tratamentos foi avaliado com a realização de lactoculturas, da Contagem Bacteriana Total (TBC), da Contagem de Células Somáticas (SCC) e da análise da composição do leite das amostras obtidas de quartos mamários, em sete momentos experimentais. Avaliação hematológica dos animais também foi realizada. A aplicação intramamária de três doses da formulação experimental à base de PPy solúvel resultou em maiores log/mL da TBC e da SCC quando comparadas ao grupo controle positivo e ao grupo que recebeu sulfato de gentamicina. A administração da formulação experimental não induziu alterações na composição do leite e nos parâmetros hematológicos. Alguns fatores farmacocinéticos e farmacodinâmicos do PPy solúvel podem ser atribuídos a ineficácia antimicrobiana da pomada experimental. Outras pesquisas devem ser realizados em prol do desenvolvimento de formulações que permitam a atuação antibacteriana do PPy solúvel no ambiente intramamário de vacas leiteiras.

ABSTRACT: Given the need for alternative therapies for bovine mastitis, an infectious disease of high prevalence and significant economic impact in dairy farms, this study evaluated the in vivo antimicrobial efficacy of an intramammary formulation based on soluble polypyrrole (PPy), a promising conductive polymer for biomedical applications, especially as an effective antimicrobial agent. In this assay, mammary quarters of healthy Holstein Friesian cows (n = 8) were inoculated with Staphylococcus aureus and treated, via the intramammary route, with an experimental formulation based on soluble PPy (5%) and a commercial formulation based on gentamicin sulfate. The effect of these treatments was evaluated based on milk cultures, Total Bacterial Count (TBC), Somatic Cell Count (SCC), and milk composition analysis of mammary quarter samples in seven experimental moments. In addition, hematological evaluations of the animals were also performed. The intramammary application of three levels of the experimental formulation based on soluble PPy resulted in higher log/mL of the TBC and SCC compared to a positive control group and a group that received gentamicin sulfate. The experimental formulation did not induce changes in milk composition or in hematological parameters. Certain factors related to pharmacokinetics, such as the type of carrier used in the formulation and the pharmacodynamics of soluble PPy, may have contributed to the antimicrobial ineffectiveness of the experimental formulation. The results of this study neither define nor decrease the antimicrobial potential of soluble PPy. Further research is required to develop formulations that enable the antibacterial action of soluble PPy in the intramammary environment of dairy cows.

RESUMO: O objetivo desta revisão foi abordar a aplicabilidade da nanotecnologia na medicina veterinária, com ênfase nas pesquisas no Brasil de 2013 a 2020. Primeiramente, apresentam-se os aspectos gerais da aplicabilidade da nanotecnologia em medicina veterinária e, posteriormente, apontam-se as pesquisas envolvendo nanociência realizadas no Brasil, no período estudado. A nanotecnologia é o campo da ciência capaz de organizar a matéria em estruturas de nanoescala (1 a 100 nm), permitindo inovações em diferentes áreas, incluindo biotecnologia, agricultura, diagnóstico de doenças, indústria de alimentos e vestuário, eletrônica e terapias farmacológicas. Na medicina veterinária, diversos estudos estão sendo realizados no mundo, principalmente nas áreas que envolvem a busca de novas opções de tratamento e o desenvolvimento de imunoterapia, bem como no diagnóstico de doenças. No Brasil, está claro que o uso da nanotecnologia na medicina veterinária ainda é incipiente, mas pode ser considerada uma área em crescimento. Além disso, vários pontos devem ser refletidos e pesquisados, incluindo alguns efeitos adversos e implicações para validar o uso seguro da nanotecnologia na medicina veterinária. Nesta revisão, destaca-se a nanotecnologia como uma alternativa promissora no atual contexto de inovação tecnológica brasileira, envolvendo saúde animal, o diagnóstico e o potencial uso terapêutico no controle de doenças em medicina veterinária. Em relação às perspectivas futuras, acredita-se que maiores investimentos em ciência e tecnologia são fatores fundamentais a contribuir para o avanço e fortalecimento da nanotecnologia no Brasil.

ABSTRACT: The purpose of this review was to address the applicability of nanotechnology in veterinary medicine, with an emphasis on research in Brazil from 2013 to 2020. Firstly, we introduced to the general aspects of applicability of nanotechnology in veterinary medicine, and lately we pointed the research involving nanoscience performed in Brazil, in the studied period. Nanotechnology is the field of science that has the capacity to organize matter in nanoscale structures (1 to 100 nm), enabling innovations in different areas including biotechnology, agriculture, disease diagnosis, food and clothing industry, electronics, and pharmacological therapies. In veterinary medicine, several studies are being carried out in the world, mainly in the areas that involve search of new treatment options and the development of immunotherapy, as well as in the diagnosis of diseases. In Brazil, it is clear that the use of nanotechnology in veterinary medicine is still incipient, but it can be considered a growing area. In addition, several points have to be reflected and researched, including some adverse effects and implications to validate the safe use of nanotechnology in veterinary medicine. Therefore, this review highlighted the nanotechnology as a promise alternative in the current context of Brazilian technological innovation involving animal health, as well as a possible diagnostic tool and highlighting its potential therapeutic use in disease control in veterinary medicine. Regarding future perspectives, we believed that greater investment in science and technology could contribute to the advancement and strengthening of nanotechnology in Brazil.

RESUMO: A caprinocultura leiteira é um setor produtivo em crescimento, devido à alta demanda dos produtos lácteos considerados nutritivos e hipoalergênicos. Em consequência disso, são exigidas medidas de segurança na cadeia produtiva a fim de fornecer produtos inócuos ao consumidor. No entanto, os conceitos de biosseguridade ainda são incipientes na caprinocultura brasileira. Desta forma, este estudo tem a finalidade de revisar as principais medidas de biosseguridade aplicadas à caprinocultura leiteira e sugerir um programa que contemple estas medidas visando promover a saúde e o bem-estar animal. Além disso, a biosseguridade propicia a sustentabilidade do meio ambiente e potencializa melhorias neste setor agropecuário. Salienta-se que um programa de biosseguridade (PB) é composto por um conjunto de medidas e procedimentos de atenção à saúde do plantel, aplicados em todas as etapas da criação animal, interagindo com diversos setores que compõe o sistema produtivo, além de propiciar a implantação de um conjunto de políticas e normas operacionais, com o objetivo de proteger os rebanhos contra a introdução de qualquer agente infeccioso potencialmente patogênico. O PB necessita de planejamento, execução, monitoramento, auditorias, atualizações, bem como demanda de compreensão dos procedimentos e da sensibilização de todos os envolvidos nos processos da cadeia produtiva. Adicionalmente, inclui programas de educação continuada de todos os indivíduos e a elaboração de planos de contingência para situações emergenciais específicas. As informações incluídas neste estudo fornecerão aporte às propriedades de caprinocultura de leite para a implementação de ações que promovam melhorias na produtividade deste setor agropecuário.

ABSTRACT: The goat milk industry has unquestionably grown in recent years due to the high demand for dairy products, which are considered nutritious and hypoallergenic. As a result, security measures are required in the production chain to provide consumers with safe products, although the concept of biosecurity is still incipient in Brazilian goat farming. Therefore, this study aimed to review the main biosecurity measures applied to dairy goat farms and suggest a program that contemplates these measures to promote animal health and welfare, given that biosecurity bolsters environmental sustainability and improves this agricultural sector. Biosecurity programs (BP) are composed of a set of measures and procedures aimed at herd health and applied in all stages of animal husbandry, interacting with different sectors that make up the production system and providing a set of policies and operational norms to protect herds against potentially pathogenic agents. Thus, BP require planning, execution, monitoring, audits, updates, understanding of the procedures, and awareness of those involved in the production chain. In addition, it includes continuing education programs and the development of contingency plans for specific emergencies. The information included in this study provides input to dairy goat farms to implement practices that improve the productivity of this agricultural sector.

Abstract Some species of Lactobacillus have demonstrated beneficial health effects being applied in the production of food supplements. Thus, the incorporation of viable cells as encapsulated probiotics represents an essential condition to be considered in new strategies for the controlled release of microorganisms. Herein, the massive encapsulation of Lactobacillus paracasei is provided by the use of alternative electrospinning technique. Is spite of the high voltage required for the production of fibers, a high density of viable cells is observed into the polymeric electrospun web, allowing the controlled release at targeted pH (characteristic of Eudragit® L100 polymer support). The reported procedure circumvents typical drawbacks of degradation of microorganisms under adverse conditions (storage, package and low pH) and preserves its biologic action after complete release from polymer fibers.

Abstract The development of polypyrrole-based nanocomposites as alternative antibacterial agents represents a promising strategy to be applied against the prevailing multi-resistant bacteria. Herein, it is reported the most recent development of antibacterial materials based on the combination of polypyrrole and different fillers (metal nanoparticles, carbon nanotubes, and polysaccharides) and strategies to improve their action (such as light and electrical stimulus). The synergistic interaction of electrostatic forces provided by charged polypyrrole combined with the permeation of nanoparticles through the cell wall favors the leakage of cytoplasmic components and reinforces the antibacterial activity of the resulting material, observed in all-organic composites of polypyrrole and chitosan that reached superior performance against Escherichia coli (108 CFU) or metal-polymer composites (polypyrrole-palladium) with an outstanding performance against different types of bacteria. The development of binary and ternary composites is explored to potentialize the antibacterial synergy of components.

Resumo Considerando o potencial terapêutico de plantas medicinais como alternativas à antibioticoterapia, a pesquisa visa avaliar a atividade antimicrobiana de Commiphora leptophloeos contra isolados de Staphylococcus spp. de leite de ruminante com mastite subclínica. Para isso, foi elaborado o extrato etanólico bruto da casca e folhas de Commiphora leptophloeos, sendo as mesmas caracterizadas quimicamente por HPLC-DAD-MS e por MALDI-TOF. Os extratos foram então avaliados quanto aos seus efeitos antimicrobianos contra 60 isolados de Staphylococcus spp pela técnica de microdiluição em caldo para determinação da concentração bactericida mínima. Além disso, os extratos foram avaliados quanto à sua capacidade de interferir na formação do biofilme e com o biofilme já consolidado. Apesar de todos os extratos testados terem apresentado ação antimicrobiana, valores menores de CBM foram registrados para o extrato da casca na concentração 781,2 µg/mL (25/60). Os extratos da casca e das folhas foram capazes de interferir nos estágios iniciais da formação do biofilme, mas não ocorreu interferência do extrato no biofilme consolidado. Houve alta sensibilidade do isolados testados quando submetidos a extratos de folhas e casca de Commiphora leptophloeos, bem como a capacidade de extratos interferirem na formação de biofilme, indicando seu potencial uso na terapia de mastite de ruminantes.

Abstract Considering the therapeutic potential of medicinal plants as alternatives to antibiotic therapy, the research aims to evaluate the antimicrobial activity of Commiphora leptophloeos against isolates of Staphylococcus spp. from the milk of ruminants with subclinical mastitis. For this, the crude ethanolic extract from the bark and leaves of Commiphora leptophloeos was prepared, with these being chemically characterized by HPLC-DAD-MS and by MALDI-TOF. The extracts were then evaluated as to their antimicrobial effects against 60 isolates of Staphylococcus spp. through the broth microdilution technique to determine the minimum bactericidal concentration. In addition, the extracts were evaluated as to their ability to interfere with biofilm formation and with the already established biofilm. Although all tested extracts showed antimicrobial action, lower MBC values were recorded for the bark extract in the concentration 781.2 µg/mL (25/60). The extracts of the bark and leaves were able to interfere with the initial stages of biofilm formation, but there was no interference of the extract on the established biofilm. There was a high sensitivity of Staphylococcus spp. isolates from subclinical mastitis cases in ruminants when subjected to the extracts from bark and leaves of Commiphora leptophloeos, as well as regarding the ability of extracts to interfere in biofilm formation, indicating their potential in the use for ruminant mastitis therapy.

Resumo O presente trabalho objetivou avaliar a eficácia in vitro de desinfetantes comerciais frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite em cabras e, relacionar a resistência observada com a presença do gene icaD. A microdiluição em caldo foi utilizada para avaliar a atividade antimicrobiana in vitro dos desinfetantes, enquanto a técnica de vermelho congo para a avaliação da produção de biofilme e amplificação do gene icaD. Todas as amostras avaliadas foram sensíveis aos desinfetantes, com as seguintes faixas de atividade: amônia quaternária (0,13 - 21,33 µg/ml), clorexidina (4,00 - 313,00 µg/ml) e iodo (190,00 - 12500,00 µg/ml), no entanto o desinfetante a base de hipoclorito de sódio não apresentou atividade bactericida na faixa de concentração 15,0 a 0,03 µg/ml. O gene icaD apresentou frequência de 14,7% nos isolados. O teste exato de Fisher apontou efeito significativo da relação entre o valor da concentração bactericida mínima do desinfetante à base de amônia quaternária e a presença/ausência do gene icaD (P<0,01). Os desinfetantes comerciais com os princípios ativos amônia quaternária, clorexidina e iodo, apresentaram atividade in vitro até mesmo em concentrações inferiores às preconizadas pelos fabricantes o que torna necessária a realização periódica da avaliação do perfil de sensibilidade dos desinfetantes.

Abstract This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of commercial disinfectants on Staphylococcus spp., isolated from mastitis cases in goats, and to associate the observed resistance with the presence of the icaD gene. Broth microdilution was employed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of the disinfectants, whereas the Congo Red technique was used for the evaluation of biofilm production and amplification of the icaD gene. All evaluated samples were sensitive to disinfectants, with the following ranges of activity: quaternary ammonium (0.13 - 21.33 µg/ml), chlorhexidine (4.00 - 313.00 µg/ml) and iodine (190.00 - 12500.00 µg/ml); however, the sodium hypochlorite-based disinfectant showed no bactericidal activity in the concentration range from 15.0 to 0.03 µg/ml. The icaD gene presented a frequency of 14.7% in the isolate samples. Fisher’s exact test showed a significant effect of the relation between the minimum bactericidal concentration value of the quaternary ammonium-based disinfectant and the presence/absence of the icaD gene (P <0.01). Commercial disinfectants with quaternary ammonium, chlorhexidine and iodine active ingredients presented in vitro activity even at concentrations lower than those recommended by the manufacturers. Therefore, the periodic evaluation of the sensitivity profile of the disinfectants must be performed.

RESUMO: Este estudo teve como objetivo realizar a triagem fitoquímica preliminar e testar a atividade antimicrobiana do extrato hidroalcoólico bruto das folhas de Sphagneticola trilobata. A identificação das classes de metabólitos secundários presentes no extrato foi realizada através da cromatografia em camada delgada analítica (CCDA). Para determinar a quantidade de fenóis e flavonoides totais foram utilizados os métodos espectrofotométricos de Folin-Ciocalteu e complexação com AlCl3, respectivamente. Para avaliar a atividade antimicrobiana foram testadas culturas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus spp., Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium, Klebsiella pneumoniae isoladas de pele humana e culturas de Staphylococcus spp. isoladas de pele de cães pelo método de microdiluição em caldo. Na triagem fitoquímica foi verificada reação positiva para a presença de derivados antracênicos, mono, sesqui e diterpenos. As análises colorimétricas mostraram conteúdos de fenóis totais e flavonoides totais de 21,7 ± 0,009 miligramas de equivalentes de ácido gálico por grama de amostra e 0,23 ± 0,005 miligramas de equivalentes de catequina por grama de amostra, respectivamente. Na análise microbiológica, o extrato hidroalcoólico das folhas de Sphagneticola trilobata apresentou atividade antimicrobiana frente às culturas de Staphylococcus spp., Escherichia coli, Serratia marcescens e Enterococcus faecalis. Todas as culturas de Staphylococcus spp. isoladas de pele de cães foram sensíveis ao extrato. Conclui-se que o extrato hidroalcoólico bruto das folhas de Sphagneticola trilobata possui entre seus metabólitos secundários os flavonoides e terpenoides que contribuíram com a atividade antimicrobiana frente às bactérias isoladas de pele de diferentes origens.

ABSTRACT: This study aimed to perform phytochemical analysis and to test the antimicrobial activity of the crude hydroalcoholic extract obtained from the leaves of Sphagneticola trilobata. Classes of secondary metabolites present in the extract were identified through phytochemical screening using analytical thin-layer chromatography. Antimicrobial activity was evaluated by testing cultures of Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Staphylococcus spp., Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium, and Klebsiella pneumoniae isolated from human skin and those of Staphylococcus spp. isolated from dog skin using the broth microdilution method. In the phytochemical screening, classes of anthracenic derivatives and mono-, sesqui-, and diterpenes were identified. Colorimetric analysis showed total phenol and total flavonoid contents of 21.7 ± 0.009 mg of gallic acid equivalents per gram of sample and 0.23 ± 0.005 mg of catechin equivalents per gram of sample, respectively. Microbiological analysis revealed that the hydroalcoholic extract of S. trilobata exhibited antimicrobial activity against cultures of Staphylococcus spp., E. coli, S. marcescens, and E. faecalis isolated from human skin and those of Staphylococcus spp. isolated from dog skin. Thus, crude hydroalcoholic extract of leaves of S. trilobata contained flavonoids and terpenoids as secondary metabolites, which contributed to its antimicrobial activity against skin bacteria isolated from different sources.

RESUMO: Prototheca spp. tem sido relatado como um patógeno ambiental causador de mastite bovina em vários países. A formação de biofilme é um fator associado a diferentes graus de virulência desenvolvidos por muitos microrganismos, incluindo Prototheca zopfii. O presente estudo teve como objetivo comparar duas condições de crescimento e dois corantes para determinar a combinação mais adequada para avaliar qualitativa e quantitativamente a produção de biofilme por P. zopfii. A formação de biofilme foi avaliada em microplacas de poliestireno sob condições estáticas e dinâmicas de crescimento e coloração com cristal violeta ou azul de algodão. Todos os isolados de P. zopfii de vacas com mastite foram caracterizados como produtores de biofilme, independentemente das condições de crescimento e coloração. O corante azul de algodão demonstrou ser o método mais adequado para classificar a intensidade de produção de biofilme de P. zopfii.

ABSTRACT: Prototheca spp. have been reported as an emergent environmental mastitis pathogen in several countries. Biofilm formation is a significant factor associated with different degrees of virulence developed by many microorganisms, including Prototheca spp. The present study aimed to compare two growth conditions and two staining dyes to determine which combination was more appropriate to evaluate qualitatively and quantitatively the production of biofilm by P. zopfii. Biofilm formation was evaluated in polystyrene microplates under static and dynamic growth conditions and staining with crystal violet or cotton blue dye. All P. zopfii isolates from cows with mastitis were classified as biofilm-producers in all growth conditions and staining. The cotton blue dye proved to be more appropriate method to classify the intensity of P. zopfii biofilm production.

RESUMO: Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrência e os fatores de risco associados à infecção por Campylobacter spp. em criações de ovinos no estado de Pernambuco, Brasil. Foram coletadas 421 amostras fecais de ovinos procedentes de 20 rebanhos para o isolamento de Campylobacter spp. As espécies Campylobacter fetus subsp. fetus e Campylobacter jejuni foram identificadas por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Para análise dos fatores de risco foi realizada uma análise univariada e posteriormente regressão logística a partir de questionário com perguntas objetivas sobre o manejo higiênico-sanitário e reprodutivo. A ocorrência para Campylobacter spp. foi de 4,5% (19/421; I.C. 2,8% - 7,1%). Das 19 amostras positivas no cultivo, oito (1,9%; I.C. 0,9% - 3,9%) foram classificadas como C. fetus subsp. fetus e sete (1,7%; I.C. 0,7% - 3,6%) como C. jejuni, com co-infecção em quatro amostras (0,95%). O número de focos identificados foi de 35,0% (7/20) das criações de ovinos que apresentavam pelo menos um animal positivo. Na análise de regressão logística não foi identificada nenhuma das variáveis como fator de risco. Este é o primeiro registro da infecção por Campylobacter spp. em rebanhos ovinos no Nordeste do Brasil, concluindo-se que a infecção ocorre nesses rebanhos. Dessa forma, se faz necessário à implementação de medidas de controle e prevenção, para impedir a propagação do agente entre as criações, evitando prejuízos para ovinocultura e riscos para saúde pública, uma vez que a campilobacteriose é considerada uma zoonose emergente.

ABSTRACT: The objective of this study was to determine the occurrence and risk factors associated with Campylobacter spp. infection in sheep in the State of Pernambuco, Brazil. A total of 421 fecal samples were collected from 20 herds for the isolation of Campylobacter spp. The species Campylobacter fetus and Campylobacter jejuni were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). To analyze the risk factors, logistic regression was conducted through a questionnaire about the hygienic-sanitary and reproductive management. The occurrence of Campylobacter spp. was 4.5% (19/421; C.I. 2.8 to 7.1%). Of the 19 positive samples isolated, eight (1.9% CI 0.9 to 3.9%) were classified as C. fetus subsp. fetus and seven (1.7% CI 0.7 to 3.5%) as C. jejuni, with co-infection in four samples (0.95%). The number of identified focuses was 35.0% (7/20) of the sheep herds that had at least one positive animal. The logistic regression analysis did not identify any of the variables as a risk factor. This appears to be the first report of infection with Campylobacter spp. in sheep herds in northeastern Brazil. Thus it is necessary to implement measures for control and prevention avoid damage to sheep production and risk to public health, since campylobacteriosis is considered an emerging zoonosis.

Resumo Objetivando determinar o perfil de sensibilidade às drogas antimicrobianas de bactérias presentes em carpas, foi utilizado o teste de sensibilidade de difusão em disco Kirb Bauer modificado. Foram avaliados 60 isolados bacterianos, analisados e encontrados os seguintes gêneros: Staphylococcus spp. (27), Streptococcus spp. (03), Aeromonas spp. (15), Proteus spp. (04), Acinetobacter spp. (05), Pseudomonas spp. (01) e Enterobacteriaceae (05). O perfil de sensibilidade observado foi de: amicacina (35%), amoxicilina (65%), apramicina (32%), ceftiofur (37%), doxicilina (32%), enrofloxacina (15%), josamicina (75%), lincomicina (37%), nitrofurantoina (60%), ácido nalidíxico (32%), novobiocina (82%), penicilina (70%) e sulfozotrim (40%). O índice de resistência múltipla às drogas antimicrobianas médio variou de 0,33 para Streptococcus spp até 0,71 para bactérias da família Enterobacteriaceae. Dessa forma, o maior perfil de resistência às drogas antimicrobianas testadas foi observado para novobiocina, enquanto que o menor foi observado para a enrofloxacina. Os isolados bacterianos obtidos de carpas apresentaram resistência múltipla às drogas testadas, sendo três isolados resistentes a todos os antimicrobianos testados.

Abstract The present work has the purpose to determine the susceptibility pattern to antimicrobial drugs of bacteria isolates from carps, using Kirb Bauer modified disk diffusion test. We analyzed 60 bacterial isolates from these groups: Staphylococcus spp. (27), Streptococcus spp. (03), Aeromonas spp. (15), Proteus spp. (04), Acinetobacter spp. (05), Pseudomonas spp. (01) and Enterobacteriaceae (05). The percentual of susceptibility was: amikacine (35%), amoxyciline (65%), apramycin (32%), ceftiofur (37%), doxycyline (32%), enrofloxacin (15%), josamycin (75%), lyncomicin (37%), nitrofurantoin (60%), nalidixic acid (32%), novobiocin (82%), penicillin (70%) and trimethoprim: sulfamethoxazole (40%). The multiple resistance ratios to antimicrobial drugs were from 0.33 to Streptococcus spp. to 0.71 Enterobacteriaceae bacteria. Thus, the highest resistance profile of the antimicrobial drugs tested was observed for novobiocin, while the lowest was observed for enrofloxacin. Bacterial isolates from carp showed multiple resistance to the drugs tested, with three isolates resistant to all tested antimicrobials.

RESUMO: Bactérias da espécie Aeromonas hydrophila são patógenos que atacam peixes, causando grandes prejuízos à piscicultura. Entender os perfis de resistência dessa bactéria e a capacidade da mesma em transferir tal resistência é importante para implantação de um manejo adequado na produção de peixes. Os objetivos desse estudo foram analisar a resistência de isolados de Aeromonas hydrophila à antimicrobianos e metais pesados e, correlacionar os perfis encontrados com a presença de plasmídeos. A resistência dos isolados aos antimicrobianos (oxacilina, gentamicina, tetraciclina e ácido nalidíxico) e metais pesados (cádmio, chumbo, cobre e manganês) foi verificada pelas técnicas da Concentração Bactericida Mínima (CBM) e Concentração Inibitória Mínima (CIM). Foi calculado o Índice de Resistência Múltipla aos Antimicrobianos (IRMA). Os plasmídeos foram extraídos por metodologias descritas pela literatura. A relação entre a resistência aos antimicrobianos e metais pesados com a presença de plasmídeos foi determinada pelo teste de Mann-Whitney utilizando o ambiente R. Foi observada alta resistência aos antimicrobianos e metais pesados testados, com exceção à gentamicina e cádmio. No IRMA os isolados apresentaram resistência a todos os perfis de antimicrobianos possíveis. Quatorze isolados apresentaram plasmídeos, mas não foi encontrada relação dos perfis de resistência com a presença destes, o que indica que os genes de resistência a esses compostos estejam presentes no DNA cromossômico. Porém apontam a possibilidade de transferência dos genes de resistência entre os isolados. Estes resultados apontam alta resistência dos isolados e capacidade de transmissão dessa resistência a outras bactérias. A resistência aos metais pesados, pode estar ligada ao uso de fertilizantes nas plantações localizadas próximas as margens do Rio São Francisco.

ABSTRACT: Aeromonas hydrophila is a common fish pathogen that causes extensive damage to aquaculture. To develop and implement a more adequate strategy to farm fish, it is crucial to understand the bacterial-resistance levels and their transference dynamics. The objective of this study was to analyze the resistance profile of isolated Aeromonas hydrophila to antimicrobial agents and heavy metals and draw a correlation of the observed profiles with the presence of plasmids. Resistance of the isolated bacteria to antimicrobial agents (oxacilin, gentamicin, tetracycline, and nalidixic acid) and heavy metals (cadmium, lead, copper, and manganese) was verified using the minimum bactericidal concentration (MBC) and minimum inhibitory concentration (MIC) standards. The Multiple Antibiotic Resistance Index (MAR Index) was calculated. Plasmids were extracted by using a common methodology described elsewhere. Mann-Whitney Test, implemented in the R environment, was used to determine the correlation between resistance and plasmids presence. A high resistance to almost all antimicrobial agents and heavy metals was observed, except to gentamicin and cadmium. The MAR index results showed resistance to all antimicrobial profiles. Of the isolated bacteria, 14 showed the presence of plasmids. However, no correlation was noted between the resistance profile and the plasmid presence for these isolates, indicating that the genes responsible for resistance to microbial agents and heavy metals are present in the cromossomic DNA, which in turn suggested the possibility of gene transfer between the isolated bacteria. The resistance to heavy metals can be linked to heavy utilization of fertilizers along the Sao Francisco River.

Resumo Objetivou-se com este trabalho identificar a ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas (sea, seb, sec e seg) e do gene da toxina 1 responsável pela síndrome do choque tóxico (tst) em isolados de Staphylococcus aureus procedentes de casos de mastite bovina, no estado de Pernambuco, Brasil. Foram analisados 93 isolados e observou-se a presença de genes toxigênicos em 20 (21,6%) deles, dos quais 11 (55,0%) foram positivos para o gene tst, sete (35,0%) para o gene sec e dois (10,0%) para o gene seg. Dentre os 20 isolados que amplificaram na PCR para presença dos genes sec, seg e tst, 16 (80,0%) foram positivos apenas para um gene e quatro (20,0%) foram positivos para dois genes (sec e tst). Das 17 propriedades de onde as amostras tiveram origem, sete (41,2%) apresentaram amostras positivas para pelo menos um dos genes sec, seg e tst. Este é primeiro registro de ocorrência dos genes codificadores das enterotoxinas SEC e TST-1 em amostras de leite de vacas com mastite no estado de Pernambuco, Brasil.

Abstract The objective of this study was to identify the occurrence of genes expressing staphylococcal enterotoxin (sea, seb, sec, and seg) and the toxin gene 1 of toxic shock syndrome (tst) in Staphylococcus aureus coming from cases of bovine mastitis in the state of Pernambuco, Brazil. We analyzed 93 isolates and we observed the presence of toxigenic gene in 20 (21.6%) samples, of which 11 (55.0%) were positive for tst gene, seven (35.0%) for the sec gene, and two (10.0%) for the seg gene. Of the 20 isolates amplified in PCR for the presence of the sec gene, seg and tst, 16 (80.0%) were positive for only one gene and four (20.0%) were positive for two genes (sec and tst). Of the 17 properties from which the samples originated, seven (41.2%) had positive samples for at least one of the genes sec, seg, and tst. This is the first record of the occurrence of the genes encoding the enterotoxin SEC and TST-1 in milk samples from cows with mastitis in the state of Pernambuco, Brazil.

RESUMO: Este trabalho teve como objetivo analisar o potencial das soluções de óxido de zinco e de nitrato de prata como alternativa para antissepsia de tetos de bovinos (in situ), considerando a escassez de literatura a respeito do uso destes compostos na profilaxia de mastites. Primeiramente foram realizados ensaios de microdiluição e CBM (Concentração Bactericida Mínima) a fim de verificar a atividade antimicrobiana das soluções de óxido de zinco e de nitrato de prata sobre 30 isolados de Staphylococcus spp., obtidos de casos de mastite. Todos os isolados apresentaram sensibilidade às duas soluções testadas, mas a solução de nitrato de prata apresentou menores valores de CBMs (3,05 a 97,65 μg/mL), quando comparada as CBMs da solução de óxido de zinco (97,65 a 6.250μg/mL). Posteriormente, foram conduzidos os ensaios de antissepsia dos tetos (in situ) através da imersão dos mesmos nas soluções antimicrobianas testadas. Para isso, foram utilizados 40 tetos (n=40) oriundos de vacas abatidas, os quais foram divididos em 4 grupos de 10 tetos, destinados ao teste das solução de óxido de zinco a 3% (30mg/mL), de nitrato e prata 1% (10mg/mL) e seus respectivos controles. Os tetos foram submetidos à contagem de microrganismos mesófilos na superfície dos tetos (UFC/cm2) antes e após a imersão nas soluções testadas. Como resultado, todas as soluções (de óxido de zinco e de nitrato de prata) apresentaram significativa redução de UFC/cm2 até aos 60 minutos após a imersão (M 0’ a M 60’). A solução de nitrato de prata apresentou redução de UFC/cm2 significativamente maior, quando comparado ao grupo testado com solução de óxido de zinco. Tais resultados validam o potencial das soluções de óxido de zinco e nitrato de prata para utilização no pré e pós-dipping em vacas leiteiras.

ABSTRACT: This study aimed to analyze the zinc oxide and silver nitrate solutions as an alternative antiseptic for cow teats (in situ), considering the lack in the literature about these compounds uses in mastitis prophylaxis. First microdilution tests med and MBC (Minimal Bactericidal Concentration were perfor in order to determine the antimicrobial activity of zinc oxide and silver nitrate solutions over 30 Staphylococcus spp. isolates, obtained from cows with mastitis. All strains tested showed sensitivity to both solutions, but the silver nitrate solution had lower MBC values (3,05 to 97,65ug/ml) compared with zinc oxide solution MBCs (97,65 to 6,250 ug/ml). Subsequently, the antiseptic teat tests were conducted (in situ) by immersing the teats in same antimicrobial solutions tested in the first experiment. Therefore, 40 teats were used (n = 40) originating from slaughtered cows were divided into 4 groups of 10 teats, to test test zinc oxide 3% (30mg/mL) and silver nitrate 1% (10mg/mL) solutions and their respective controls. The teats were submitted to mesophilic count on the teat surface (CFU/cm2) before and after immersion in tested solutions. As a result, all the solutions (zinc oxide and silver nitrate) had a significant reduction in CFU/cm2 until 60 minutes after immersion (M 0’ to 60 M’). Silver nitrate solution showed a reduction of CFU/cm2 significantly higher compared to the group treated with zinc oxide solution. These results validate the potential use of zinc oxide and silver nitrate solutions in dairy cows as a pre- and post-dipping antiseptic.