ABSTRACT Hippeastrum goianum (Ravenna) Meerow, Amaryllidaceae, is an endemic species from the Cerrado, Brazil; there are only few studies about its chemistry or biological activity. This study aimed to investigate the occurrence of lycorine in extracts from in vitro H. goianum plantlets, as well as evaluate a possible inhibition of acetylcholinesterase. The ethanol extract of plantlets produced by in vitro seed germination and micropropagation of bulblets was obtained from seedlings from in vitro germination, while the ethanol extract micropropagtion of bulblets was obtained from a subculture of those seedlings. The presence of lycorine was detected in only in the micropropagation of bulblets. The micropropagation of bulblets was more active than the plantlets produced by in vitro seed germination, with an IC50 of 114.8 ± 0.95 µg/ml and IC50 386.00 ± 0.97 µg/ml, respectively. These results showed that both in vitro germination and micropropagation of H. goianum can lead to the biosynthesis of lycorine. Moreover, the micropropagation led to improved anticholinesterase activity.

O objetivo deste trabalho foi adaptar a aplicação de testes de condutividade elétrica e lixiviação de potássio para avaliar a viabilidade de embriões de coqueiro 'Anão Verde do Brasil de Jiqui' (AVeJBr) criopreservados. Os embriões zigóticos foram excisados, esterilizados e submetidos a quatro tratamentos crioprotetores combinados a três tempos de incubação (12, 16 e 20 horas), o que totalizou 12 tratamentos. O pré-tratamento de embriões zigóticos maduros de coco AVeJBr com crioprotetor contendo 1,75 mol L-1 de sacarose + 15% de glicerol por 12 e 16 horas promoveu menor umidade dos embriões e maior viabilidade em testes de condutividade elétrica e lixiviação de potássio. Amostras com dez embriões são suficientes para análise de condutividade elétrica em embriões zigóticos de coqueiro AVeJBr criopreservados ou não. O período de embebição de 4 a 8 horas é promissor para a análise da condutividade elétrica em embriões zigóticos maduros de coco AVeJBr não criopreservados.

The objective of this work was to adapt the application of electrolytic conductivity and potassium leaching tests to assess the viability of cryopreserved embryos of 'Anão Verde do Brasil de Jiqui' (AVeJBr) coconut. The zygotic embryos were excised, sterilized and subjected to four cryoprotectant treatments combined with three incubation times (12, 16 and 20 hours), totaling 12 treatments. The pre-treatment of mature zygotic embryos of AVeJBr coconut using a cryoprotectant with 1.75 mol L-1 of sucrose + 15% glycerol for 12 and 16 hours promoted lower embryo humidity and increased viability in electrolytic conductivity and potassium leaching tests. Samples with ten embryos are sufficient for electrolytic conductivity analysis in cryopreserved or non-cryopreserved AVeJBr coconut zygotic embryos. The 4 to 8 hour imbibition period of the embryos is promising for the electrolytic conductivity analysis of non-cryopreserved mature zygotic embryos of AVeJBr coconut.

O objetivo deste trabalho foi ajustar os protocolos de cultivo in vitro de embriões zigóticos e de aclimatação de plântulas de coqueiro-anão-verde do Brasil de Jiqui (Cocos nucifera L.). Os embriões zigóticos maduros, colocados assepticamente em meio de cultura líquido Y3 suplementado com 27,8 mg L-1 de Fe2SO4.7H2O e 60 g L-1 de sacarose, apresentaram maior germinação e formação de plântulas normais. As plântulas transferidas para meio indutor de enraizamento Y3, gelificado e suplementado com 1 mg L-1 de ANA, 0,5 mg L-1 de BAP e 2,5 g L-1 de carvão ativado, apresentaram incremento do desenvolvimento radicular e da parte aérea. Na fase de aclimatação, o substrato composto por areia lavada e pó de casca de coco seco, na proporção de 1:1, proporcionou maior sobrevivência das plântulas (58,33%), maior crescimento da parte aérea (39,08 cm) e maior número de folhas (6,33). Os protocolos estabelecidos para o cultivo in vitro de embriões zigóticos e a aclimatação de coqueiro-anão-verde de Jiqui podem ser utilizados no intercâmbio e conservação de germoplasma.

The objective of this work was to improve the protocols for culture and acclimatization of green dwarf coconut palm (Cocos nucifera L.). Mature zygotic embryos, cultivated in vitro aseptically in Y3 liquid medium culture, supplemented with 27.8 mg L-1 of Fe2SO4.7H2O and 60 g L-1 of sucrose, presented higher germination and normal plantlets formation. The plantlets transferred to Y3 semi-solid medium culture supplemented with 1 mg L-1 of ANA, 0.5 mg L-1 of BAP and 2.5 g L-1 of activated charcoal, promoted better root and shoot development. In the acclimatization phase, the 1:1 substrate composed of washed sand and coconut coir dust provided higher survival of plantlets (58.33%), larger growth of the aerial part (39.08 cm) and larger number of leaves (6.33). The established protocols for in vitro culture of zygotic embryos and acclimatization of green dwarf coconut palm plantlets can be applied to germplasm exchange and conservation.

Este estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de formação de calos a partir de tecidos originários do eixo embrionário de embriões zigóticos de coqueiro (Cocos nucifera L.) em diferentes concentrações de 2,4-D. O experimento foi instalado em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4x5 (4 concentrações de 2,4-D x 5 segmentos do eixo embrionário). Os eixos embrionários foram excisados longitudinalmente dos embriões zigóticos e, em seguida, submetidos à assepsia com hipoclorito de sódio (0,2%) por dois minutos, lavados com água destilada estéril e imersos por dois minutos em solução de ácido cítrico estéril (100 mg.L-1). Os eixos embrionários foram então seccionados em cinco segmentos correspondentes às posições A, B, C, D e E, e transferidos para placas de Petri contendo meio de cultura Y3, suplementado com quatro concentrações de 2,4-D (10-4; 1,36x10-4; 3,62x10-4 e 4,52x10-4 M), sacarose (50 g.L-1), carvão ativado (2,5 g.L-1) e vitaminas de Morel e Wetmore, mantidos em ambiente escuro, em temperatura de 25 ± 2ºC. Após 15 dias de inoculação, os segmentos A e B apresentaram 97,5% de explantes com calos friáveis na concentração de 10-4 M de 2,4-D, e 92,5% e 80%, respectivamente, na concentração de 1,36x10-4 M. O segmento E, em ambas as concentrações, apresentou 60% de calogênese. Após 30 dias de inoculação, os segmentos A e B apresentaram 100% e 97,5% de calogênese na concentração de 10-4 M, e 90% e 80%, respectivamente, na concentração de 1,36x10-4 M. Em ambas as concentrações, o segmento E apresentou de 55 a 57,5% de formação de calos. As concentrações de 2,4-D que melhor induzem calogênese, são as de 10-4 e 1,36x10-4 M. Os segmentos A, B e E apresentaram maior competência para calogênese.

The ability of callus formation from the embryo axes of coconut in different concentrations of 2,4-D was evaluated. The experimental design was completely randomized in a 4x5 factorial scheme (4 concentrations of 2,4-D x 5 segments of the embryogenic axis). The axes were excised longitudinally out of zigotic embryos and were then disinfected with sodium hipocloride (0.2%) for two minutes, washed with sterile distilled water, and soaked for two minutes in a solution of sterile citric acid (100 mg.L-1). The embryogenic axes were split in five segments corresponding to positions A, B, C, D and E, and transferred to Petri dishes containing the culture media Y3, suplemented with four concentrations of 2,4-D (10-4; 1.36x10-4; 3.62x10-4; 4.52x10-4 M), sucrose (50 g.L-1), activated charcoal (2.5 g.L-1) and vitamins of Morel and Wetmore. The Petri dishes were incubated in a dark atmosphere under the temperature of 25 ± 2ºC. After 15 days of inoculation, the segments A and B in the concentration of 10-4 M of 2,4-D presented 97.5% of explants with friable callus, and 92,5% and 80%, respectively, in the concentrations of 1.36x10-4 M of 2,4-D. The E segment, in both concentrations, presented 60% of callus formation. After 30 days of inoculation, the segments A and B promoted 100% and 97.5% in the concentration of 10-4 M, and 90% and 80%, respectively, in the concentrations of 1.36x10-4 M. The E segment promoted 55% to 57.5% of callus induction in both concentrations.