Abstract Alternaria brown spot - ABS (Alternaria alternata) causes lesions on fruits, leaves and branches of mandarins. The cost of fungicide application is high and alternative managements for the control need to be studied. We aimed to evaluate calcium (Ca) nutrition to mitigate the effects of ABS. Murcott IAC 221 tangor plants were nourished with calcium nitrate at three different concentrations (30, 150 and 300 mg Ca L-1), and the N content was standardized in the nutrient solution of the treatments (245 mg L-1 of N) with ammonium nitrate. In vitro and in vivo tests were installed, evaluating the severity and area under the disease progress curve (AUDPC), total proteins, peroxidase (POX), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and hydrogen peroxide (H2O2), during four times. In all evaluations a negative correlation was observed between leaf Ca content and the severity and AUDPC of ABS. On the other hand, there was a positive correlation between N and the occurrence of the disease. In the treatment with the lowest concentration of calcium there was accumulation of H2O2 and hypersensitivity reaction (HR), with low detoxification of H2O2 by CAT. There is potential for use of calcium supply to plants of Murcott IAC 221 tangor as an alternative management against the fungus A. alternata.

Resumo A mancha marrom de alternária – MMA (Alternaria alternata) causa lesões em frutos, folhas e ramos de tangerinas. O custo da aplicação de fungicidas é alto, e manejos alternativos para o controle precisam ser estudados. Objetivou-se avaliar a nutrição com cálcio (Ca), para mitigar os efeitos da MMA. Plantas de tangor Murcott IAC 221 foram nutridas com nitrato de cálcio em três concentrações diferentes (30; 150 e 300 mg Ca L-1), sendo o teor de N padronizado na solução nutritiva dos tratamentos (245 mg L-1 de N) com nitrato de amônia. Testes in vitro e in vivo foram instalados, avaliando-se a severidade e a área abaixo da curva de progresso da doença (AUDPC), proteínas totais, peroxidase (POX), catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e peróxido de hidrogênio (H2O2), durante quatro tempos. Em todas as avaliações, observou-se correlação negativa entre o teor foliar de Ca e a severidade e AUDPC da MMA. Por outro lado, houve correlação positiva entre N e a ocorrência da doença. No tratamento com a menor concentração de cálcio, houve acúmulo de H2O2 e reação de hipersensibilidade (RH), com baixa detoxificação de H2O2 pela CAT. Há potencial para uso do suprimento com cálcio às plantas de tangor Murcott IAC 221 como manejo alternativo contra fungo o A. alternata.

RESUMO A mancha marrom de alternaria (MMA) é uma doença causada pelo fungo Alternaria alternata f. sp. citri, que causa lesões em frutos, folhas e ramos de citros. A ação do patógeno está diretamente relacionada à presença de receptores de toxina em genótipos suscetíveis. O objetivo deste estudo foi caracterizar uma população de híbridos de citros obtidos a partir de cruzamentos controlados entre a laranja Pêra de Abril e o híbrido de tangor Murcott x laranja Pêra (TM x LP 163) para resposta à MMA através da inoculação in vitro de esporos do fungo em folhas jovens destacadas. Um isolado do fungo foi obtido das lesões de frutos de tangor Murcott que exibiram sintomas de MMA. Duzentos e trinta e cinco híbridos foram avaliados, sendo que 70 (30%) apresentaram níveis diferentes de sintomas de doença em folhas destacadas após 72 horas da inoculação com o fungo e 165 (70%) foram assintomáticos. A frequência de segregação observada (165R:70S) e alta herdabilidade (h2g = 0,91) sugerem que poucos genes podem estar envolvidos no controle da herança da resistência à MMA em citros.

ABSTRACT Alternaria brown spot (ABS) disease is caused by the fungus of Alternaria alternata f. sp. citri, which causes injury in leaves, branches and fruits of citrus. The action of the pathogen is directly related to the presence of toxin receptors in susceptible genotypes. The objective of this study was to characterize a population of citrus hybrids obtained from controlled crosses between Pêra de Abril sweet orange and the hybrid of Murcott tangor x Pêra sweet orange (TM x LP 163) for response to ABS through the in vitro inoculation of fungal spores in young detached leaves. The fungus was isolated from the lesions of Murcott tangor fruits that exhibited ABS symptoms. Two hundred thirty-five hybrids were evaluated, and 70 (30%) showed different levels of disease symptoms on detached leaves after 72 hours of inoculation with the fungus, and 165 (70%) were asymptomatic. The frequency of segregation observed (165R:70S) and high level of heritability (h2g = 0.91) suggest that few genes may be involved in controlling the inheritance of ABS resistance in citrus.

RESUMO A mancha marrom de alternária (MMA), causada por Alternaria alternata, que produz uma toxina específica ao hospedeiro (Host Specific Toxin – HST) é uma doença de grande importância nos pomares de tangerinas no mundo. A doença afeta tangerinas, alguns de seus híbridos interespecíficos e pomelos, sendo que no Brasil, as principais variedades plantadas, a tangerina Ponkan e o tangor Murcott, são altamente suscetíveis ao fungo, que também é saprofítico alternativo, se reproduz nos pomares, sendo seus esporos facilmente disseminados pelo vento. Para esse trabalho, foram selecionados híbridos de citros, obtidos por cruzamentos dirigidos, por apresentarem características agronômicas que os tornam potenciais novas variedades de laranjas e tangerinas, tanto para a citricultura industrial, quanto de mesa. Esses híbridos foram avaliados quanto à resposta à MMA por meio da inoculação com A. alternata in vitro e in vivo, uma etapa imprescindível para a liberação de novas variedades. Foram selecionados mais de trinta genótipos resistentes ou que apresentaram poucos sintomas da doença. A seleção de variedades resistentes à doença é de grande importância econômica, pois além de diminuir os custos de produção, aumentados sobremaneira com a utilização do controle químico, contribui para a diminuição de inóculo no campo.

ABSTRACT Alternaria brown spot (ABS), caused by Alternaria alternata, which produces a host-specific toxin (HST), is a very important disease in mandarin orchards worldwide. This disease affects mandarin, their hybrids and grapefruits. The main varieties cultivated in Brazil, Ponkan mandarin and Murcott tangor, are highly susceptible to the fungus, which is also an alternative saprophyte that reproduces in the orchards and has its spores easily spread by the wind. For this study, citrus hybrids obtained from directed crossing were selected for their agronomic traits, which make them potential new varieties of sweet orange and mandarins both for industrial citriculture and for fresh fruit market. These hybrids were evaluated for their response to ABS by means of A. alternata inoculation in vitro and in vivo, an indispensible step for the release of new varieties. More than 30 genotypes that were resistant or had few symptoms of the disease were selected. Selection of varieties resistant to the disease is of great economic importance, since it reduces the production costs, rather increased due to chemical control, and also contributes to the inoculum decrease in the field.

A mancha marrom de altenária, ou MMA (Alternaria alternata), é a doença fúngica mais importante das tangerinas no mundo. Observações de campo revelaram a ocorrência de lesões de MMA em folhas feridas pela lagarta-minador-dos-citros (LMC). Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a relação entre a LMC e MMA. Folhas jovens de plantas de tangor Murcott e folhas destacadas de 16 diferentes variedades de tangerinas com e sem lesões, causadas por CLM, foram inoculadas com A. alternata. Os sintomas da MMA foram subsequentemente quantificados através da contagem do número de lesões, e a área da lesão foi estimada utilizando uma escala diagramática. A presença de danos da LMC agrava a severidade de Alternaria alternata nas variedades de tangerina suscetíveis.

Alternaria brown spot, or ABS (Alternaria alternata), is the most prevalent fungal disease of tangerines in the world. Field observations have revealed ABS lesions on leaves wounded by the citrus leaf miner (CLM). Thus, the objective of this study was to assess the relationship between CLM and ABS. Leaves from young Murcott tangor plants and detached leaves from 16 different varieties of tangerines with and without lesions caused by CLM were inoculated with A. alternata. The symptoms of the plants were subsequently quantified by counting the number of lesions, and the lesion area was estimated using a diagrammatic scale. The presence of CLM damage aggravates the severity of Alternaria alternata fungus infections in susceptible tangerine varieties.

Desde 1997, o Centro APTA Citros Sylvio Moreira/IAC conduz um amplo programa de melhoramento genético de citros via cruzamentos dirigidos. Destes cruzamentos, alguns híbridos de tangerina com laranja vêm sendo selecionados para qualidade de fruta e potenciais novas variedades. Com isso, frutos de um híbrido entre tangor Murcott (TM) e laranja Pera (LP), denominado TMxLP 290, foram submetidos a análises físico-químicas e teste sensorial de aceitabilidade, a fim de avaliar a aceitação de tal variedade pelo mercado consumidor. Foram analisados os parâmetros físico-químicos: sólidos solúveis, acidez total titulável, ratio, rendimento de suco, índice de cor, número de sementes e massa do fruto. Aliado a essas análises, realizou-se o teste sensorial de aceitação com 50 provadores não treinados, que avaliaram a aceitabilidade do fruto e do suco do híbrido TMxLP 290, com o auxílio de uma escala hedônica de nove pontos. As amostras de suco e de fruto foram servidas em copos e pratos descartáveis, respectivamente, à temperatura ambiente e na presença de água potável para lavar o palato entre a degustação de uma amostra e outra. Tais avaliações permitiram constatar que as amostras processadas (suco) e in natura (fruto) apresentaram 84% e 81% de aprovação, respectivamente, evidenciando boa aceitação pelos provadores. Contudo, a intenção de compra por parte do consumidor foi excelente, sendo que 70% dos provadores comprariam o suco e 88% comprariam o fruto. Dessa forma, conclui-se que o híbrido TMxLP 290 é um produto com potencial para atender às expectativas do mercado consumidor.

Since 1997, the Centro APTA Citros Sylvio Moreira / IAC conducts a broad program of genetic improvement of citrus via controlled crosses. These crosses, some with hybrids of sweet orange and mandarin have been selected for fruit quality and potential new varieties. With this, the fruit of a hybrid between Murcott tangor (TM) and Pera sweet orange (LP), called TMxLP 290, underwent physical and chemical analysis and sensory acceptability test in order to evaluate the acceptance of such variety to the consumer market. We analyzed the physicochemical parameters of soluble solids, titratable acidity, ratio, juice yield, color index, number of seeds, fruit mass, but such tests alone are not sufficient to provide information about the product acceptance. Then allied to these analyzes, we carried out the sensory acceptance test with 50 untrained panelists, who evaluated the acceptability of the fruit and the juice of the hybrid TMxLP 290, with the aid of a nine-point hedonic scale. Samples of juice and fruit were served in disposable cups and plates, respectively, at room temperature and in the presence of potable water to rinse the palate between tasting samples and one another. Such evaluations have found that the samples processed (juice) and fresh (fruit) had 84% and 81% approval respectively, indicating good acceptance by the tasters. However, purchase intent among consumers was excellent, with 70% of the tasters would buy the juice and 88% would buy the fruit. Thus we conclude that the hybrid TMxLP 290 is a product with the potential to meet the expectations of the consumer market.

A produção de tangerinas alcança expressão econômica em alguns estados brasileiros, principalmente em São Paulo, Paraná, Rio Grande do Sul e Minas Gerais. Nos últimos anos, um interesse crescente pelas mexericas tem sido observado no estado de São Paulo, possivelmente pela inviabilidade econômica de manterem-se pomares das principais variedades comerciais para frutos de mesa, tangerina Ponkan e tangor Murcott, devido à alta suscetibilidade à mancha marrom de alternária (MMA). O objetivo deste trabalho foi caracterizar 33 acessos de mexericas do Banco Ativo de Germoplasma de Citros do Instituto Agronômico de Campinas (BAG Citros IAC), visando selecionar variedades com boas características físico-químicas como massa, altura e largura de frutos, cor da casca, rendimento de suco, acidez, sólidos solúveis e Ratio e resistência à MMA para que possam ser comercializadas em outros períodos do ano, em comparação com a variedade mexerica Rio IAC 194, padrão desse grupo, cuja maturação é de meia-estação. Os resultados demonstraram que cerca de 85% dos acessos de mexerica avaliados em campo e in vitro apresentaram resistência à MMA. Selecionaram-se cinco acessos precoces e 11 mais tardios que a Rio IAC 194 como boas alternativas para a ampliação do período de safra de mexericas no estado de São Paulo.

The mandarin production achieves economic expression in some Brazilian states, mainly in São Paulo, Paraná, Rio Grande do Sul and Minas Gerais. In recent years a growing interest in these mandarins has been observed in São Paulo, possibly due to the economic viability of maintaining the orchards of the main commercial varieties, Ponkan mandarin and Murcott tangor, due to high susceptibility to alternaria brown spot (ABS). The objective of this study was to characterize 33 accessions of willowleaf mandarins to ‘Banco Ativo de Germoplasma de Citros’ of the Instituto Agronômico de Campinas (‘BAG Citrus IAC’), to select varieties with good horticultural characteristics as mass, height and width of fruit, skin color, juice content, acidity, soluble solids and Ratio, and tolerance to ABS and that can be marketed in other periods of the year in comparison with the Rio IAC 194 mandarin, standard variety - which ripening is half station. The results showed that to about 85% of the mandarin accessions evaluated in the field and in vitro were resistant to ABS. Was selected five hits early and later eleven more than Rio IAC 194, which can be good alternatives for the extension of the period of harvest of mandarins in the State of Sao Paulo.

Nos países que abastecem o mercado internacional de frutas cítricas frescas, há uma grande preocupação em se estudar os efeitos de possíveis cruzamentos entre variedades, para que as características desejáveis, como o baixo número de sementes, ou mesmo a ausência delas, não sejam alteradas. Desta forma, o presente trabalho objetivou avaliar a influência da polinização por outras variedades de citros na formação de sementes, em frutos da variedade apirênica clementina Nules. Foram realizadas polinizações controladas em 2007 e 2008, com pólen das variedades de laranja Pêra, Valência e Natal; tangores Ortanique e Murcott; tangelo Nova; e tangerina Ponkan. Também foi avaliada a formação de sementes a partir da autopolinização, em flores de clementina Nules. Os frutos colhidos foram avaliados quanto ao número de sementes, massa de fruto (g), diâmetros transversal e longitudinal (cm). Verificou-se compatibilidade com todas as variedades avaliadas e que a polinização cruzada promoveu a formação de sementes. Frutos de clementina Nules oriundos de polinização cruzada apresentaram maior tamanho e massa que os oriundos da autopolinização. Flores isoladas de clementina Nules (autopolinizadas) produziram frutos sem sementes, evidenciando a necessidade de isolamento, desta cultivar, para a obtenção de frutos apirênicos.

In countries that supply the international market with fresh citrus fruits, there is a great concern about studying the effects of possible crosses between varieties, so that the desirable characteristics, such as the low number of seeds, or even the lack of them, are not altered. Thus, the present study aimed at evaluating the influence of pollination by other citrus varieties in the formation of seeds, in fruits of the Nules clementine seedless variety. Controlled pollinations were performed in 2007 and 2008, with pollen from the sweet orange varieties Pêra, Valência and Natal; Ortanique and Murcott tangors; Nova tangelo; and Ponkan mandarin. The formation of seeds from self-pollination was also evaluated in flowers of Nules clementine. The harvested fruits were evaluated for seeds number, fruit mass (g), transversal and longitudinal diameters (cm). Compatibility was observed for all the varieties evaluated and cross-pollination promoted the formation of seeds. Fruits from the cross-pollination of Nules clementine presented higher size and mass than the ones originated from self-pollination. Isolated flowers of Nules clementine (self-pollinated) produced seedless fruits, suggesting the need of this variety for isolation, in order to obtain seedless fruits.

O objetivo deste trabalho foi confirmar os híbridos obtidos em plantas originadas do cruzamento entre as tangerineiras Citrus deliciosa 'Montenegrina' e C. nobilis 'King', e estimar a similaridade genética entre os híbridos e entre cada híbrido e seus parentais. Vinte e três pares de iniciadores microssatélites foram testados. Quatorze desses pares apresentaram bandas polimórficas entre os parentais. Os iniciadores CCSM 129 e CCSME 52 foram suficientes para identificar os 12 clones nucelares observados na população estudada. A análise da similaridade genética da população (híbridos e parentais) mostrou similaridade média de 0,56. Além dos 12 clones identificados de 'Montenegrina', foram encontrados 25 híbridos, dos quais D18, C32, D06, C05 e D09 são os mais similares a 'Montenegrina'.

The objective of this work was to confirm the hybrids obtained in plants originated from the crossing between the mandarins Citrus deliciosa 'Montenegrina' and C. nobilis 'King', and to estimate the genetic similarity among hybrids, and between each hybrid and its parents. Twenty‑three pairs of microsatellite primers were tested. Fourteen of these pairs showed polymorphic bands between parents. Primers CCSM 129 and CCSME 52 were sufficient to identify the 12 nucellar clones observed in the studied population. Genetic similarity analysis of the population (hybrids and parents) showed 0.56 average similarity. Besides the 12 clones of 'Montenegrina' identified, 25 hybrids were found of which D18, C32, D06, C05 and D09 are the more similar to 'Montenegrina'.

Embora a citricultura seja uma das mais importantes atividades econômicas no Brasil, ela está apoiada em um pequeno número de variedades. Este fato tem contribuído para sua vulnerabilidade, especial no que ser refere a fatores fitossanitários. A obtenção de um maior número de variedades, seja para a indústria seja para o mercado de fruta fresca, tem sido um dos principais objetivos dos programas de melhoramento. O melhoramento genético de citros tem sido ampliado nas últimas décadas em função da possibilidade de associação de ferramentas da biotecnologia e métodos clássicos de melhoramento. O uso de marcadores moleculares para a seleção precoce de plântulas zigóticas em cruzamentos controlados ampliou a possibilidade de seleção de maior número de novas combinações e, em consequência, o estabelecimento de grande número de híbridos em experimentos de campo. Quanto mais rápido novas ferramentas sejam incorporadas ao programa, mais rápido é a possibilidade de obter novos genótipos que possam ser testados como variedades. Características adequadas podem ser incorporadas ou mantidas, enquanto características indesejáveis podem ser excluídas ou minimizadas nos novos genótipos. Copas e porta-enxertos não podem ser considerados separadamente, e a compatibilidade de enxertia, qualidade de fruta e produtividade são características essenciais a serem avaliadas nos últimos estágios do programa. Mapeamento de características quantitativas (QTLs) tem propiciado os programas de melhoramento de várias espécies lenhosas perenes, e em citros é possível mapear várias características com herança quantitativa e qualitativa. A existências de mapas de ligação e QTLs, o desenvolvimento de bibliotecas de ESTs e BACs, assim como o sequenciamento completo do genoma de citros, ampliam a urgência para exploração de tais dados para ampliar os conhecimentos sobre genética do grupo. O volume crescente de informações de genomas de vários outros organismos tem ampliado novas abordagens procurando a integração entre melhoramento, genética e genoma. Seleção assistida por genoma envolve mais que sequenciamento de genes ou genomas completos e tem se tornado uma importante ferramenta nos programas de melhoramento de espécies perenes e anuais. Um grande volume de informações pode ser derivada da análise de genomas. O uso e benefício de tais informações dependerá da base genética do programa de melhoramento.

Although the citriculture is one of the most important economic activities in Brazil, it is based on a small number of varieties. This fact has contributed for the vulnerability of the culture regarding the phytosanitary problems. A higher number of varieties/genotypes with potential for commercial growing, either for the industry or fresh market, has been one of the main objectives of citrus breeding programs. The genetic breeding of citrus has improved, in the last decades, due to the possibility of an association between biotechnological tools and classical methods of breeding. The use of molecular markers for early selection of zygotic seedlings from controlled crosses resulted in the possibility of selection of a high number of new combination and, as a consequence, the establishment of a great number of hybrids in field experiments. The faster new tools are incorporated in the program, the faster is possibility to reach new genotypes that can be tested as a new variety. Good traits should be kept or incorporate, whereas bad traits have to be excluded or minimized in the new genotype. Scion and rootstock can not be considered separately, and graft compatibility, fruit quality and productivity are essential traits to be evaluated in the last stages of the program. The mapping of QTLs has favored breeding programs of several perennial species and in citrus it was possible to map several characteristics with qualitative and quantitative inheritance. The existence of linkage maps and QTLs already mapped, the development of EST and BAC library and the sequencing of the Citrus complete genome altogether make very demanding and urgent the exploration of such data to launch a wider genetic study of citrus. The rising of information on genome of several organisms has opened new approaches looking for integration between breeding, genetic and genome. Genome assisted selection (GAS) involves more than gene or complete genome sequencing and is becoming an import support in breeding programs of annual and perennial species. An huge information amount can be derivate from genome analysis. The use and benefit of such informations will depend on the genetic basis of the breeding program.

A severidade da mancha-marrom de alternária nos pomares brasileiros de tangerinas tem causado sérias preocupações aos citricultores, devido aos prejuízos em plantios comerciais de variedades suscetíveis, como a tangerina Ponkan e o tangor Murcott. Para avaliar a resposta de diferentes genótipos ao fungo, foram realizadas inoculações de Alternaria alternata in vitro e in vivo, em 54 diferentes genótipos de tangerinas e seus híbridos, selecionados no Banco Ativo de Germoplasma de Citros do Centro APTA Citros Sylvio Moreira, do Instituto Agronômico, em Cordeirópolis-SP, visando a encontrar variedades resistentes. Para isso, inicialmente, testes de patogenicidade foram realizados com dez isolados de A. alternata para a seleção dos mais agressivos. Posteriormente, foram realizadas inoculações em folhas destacadas e em plântulas e, aos dois (in vitro) e três (in vivo) dias após, fez-se a contagem do número de lesões/folha e a estimativa da severidade da doença com auxílio de escala diagramática (in vivo). A maior parte dos genótipos apresentou sintomas da doença, porém com diferentes graus de suscetibilidade. Genótipos como a tangerina Sul da África e o tangelo Orlando foram os mais suscetíveis. Por outro lado, o grupo das satsumas e mexericas, assim como algumas tangerinas mostraram-se resistentes, indicando novas opções para a citricultura nacional.

The confirmation of a new disease in the Brazilian tangerine orchards, the alternaria brown spot, has been concerning citrus growers because of the serious damages to commercial crops of susceptible varieties, such as Ponkan tangerine and Murcott tangor. In this research, in vitro and in vivo inoculations of Alternaria alternata fungus were held in 54 different varieties of the tangerine group selected from the Citrus Germoplasm Bank of Centro APTA Citros Sylvio Moreira, Instituto Agronomico, Cordeirópolis, State of São Paulo, Brazil, aiming to find varieties with more resistance. First, a pathogenicity test with ten different A. alternata isolates was made to select the most aggressive one. After this, inoculations in detached leaves and seedlings were held and, approximately two (in vitro) and three (in vivo) days after, the number of lesions in each leaf was counted, and the disease severity estimated with diagrammatic scale help (in vivo). More than a half of varieties showed symptoms of the disease, however with different levels of susceptibility. Varieties like South African tangerine and Orlando tangelo were the most susceptible; on the other hand the satsumas and willow leaf group and some tangerines, like Thomas and Fremont, showed resistance, indicating new options to the brazilian citriculture.

Os citros apresentam uma taxonomia muito complexa, principalmente com relação ao número de espécies que constituem o gênero Citrus e os gêneros afins. Genótipos classificados como espécies podem ter sido originados por hibridação interespecífica e preservados por meio da embrionia nucelar. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar uma população de tangerineiras híbridas oriundas do cruzamento das tangerineiras 'Clementina Fina' (Citrus clementina Hort. ex Tan.), genitor feminino, e 'Montenegrina' (Citrus deliciosa Ten.), genitor masculino, utilizando marcadores do tipo microssatélites (SSR). Com 12 pares de primers, foi possível diferenciar 93 acessos do estudo e agrupar a F1 em indivíduos mais próximos do genitor feminino e do genitor masculino. O PIC (Conteúdo de Informação de Polimorfismo) dos primers variou de 0,27 a 0,65. Toda a progênie do cruzamento entre 'Clementina Fina' e 'Montenegrina' analisada neste estudo é híbrida, e os SSRs foram eficientes para identificar híbridos com maior similaridade genética em relação aos genitores, mostrando a existência de variabilidade genética entre as plantas da população estudada.

Citrus have a very complex taxonomy, especially considering the number of species included in genus Citrus and related genera. What is classified as a species may have originated by interespecific hybridization and preserved through nucellar embryony. This research aimed to characterize a population of hybrid tangerines, originated from the cross of 'Clementina Fina' (Citrus clementina Hort. ex Tan.) as female and 'Montenegrina' (Citrus deliciosa Ten.) as male parents, using microsatellite molecular makers. With 12 pairs of primers it was possible to differentiate 93 of the studied accessions and to group F1 individuals nearer to the male or to the female parent. The primers PIC (Polymorphism Information Content) ranged from 0.27 to 0.65. All the analyzed progeny between 'Clementina Fina' and 'Montenegrina' is hybrid, where SSR were efficient in identifying hybrids more similar to the genitors, showing genetic variability among plants of the studied population.

O objetivo deste trabalho foi buscar novas fontes de resistência à leprose-dos-citros, no Banco Ativo de Germoplasma do Centro APTA Citros Sylvio Moreira, Instituto Agronômico, em Cordeirópolis, SP. Foram utilizadas plantas obtidas por sementes de 26 acessos, infectadas com o vírus da leprose-dos-citros (Citrus leprosis virus - CiLV), por meio do seu vetor Brevipalpus phoenicis. O aparecimento de lesões, a partir de 21 dias após a inoculação, foi observado em 11 dos genótipos testados (42,3%). Quinze espécies, entre elas Citrus pennivesiculata e C. celebica, comportaram-se como altamente resistentes, enquanto outras, como C. keraji, foram mais suscetíveis que o padrão C. sinensis. Os dados mostraram grande variação de respostas de Citrus spp. à leprose, com elevado número de espécies resisentes, que podem ser utilizadas como fonte de resistência à doença em programas de melhoramento.

The objective of this work was to prospect for new sources of resistance to leprosis in the Citrus Germplasm Bank of Centro APTA Citros Sylvio Moreira, Instituto Agronômico, in Cordeirópolis, SP, Brazil. Plants obtained through seeds from 26 citrus accessions were mite-infected with Citrus leprosis virus (CiLV). Typical lesions started to appear in 11 genotypes (42.3% of the tested accessions) 21 days after inoculation. Fifteen species, among them Citrus pennivesiculata and C. celebica, behaved as highly resistant, while other genotypes, as C. keraji, were more susceptible than the standard C. sinensis. The data showed a wide variation in the response of Citrus spp. to leprosis, with a large number of resistant species, wich can be used as source of resistance to this disease, in breeding programs.

Leprosis, caused by Citrus leprosis virus, cytoplasmic type (CiLV-C), is the main viral disease in the Brazilian citrus industry. This occurs because of the widespread source of inoculum and the year-round presence of the vector, the tenuipalpid mite Brevipalpus phoenicis, in citrus plants. In addition, while some Citrus species are resistant to CiLV-C, C. sinensis, the main cultivated species in the country, is extremely susceptible to the disease. The main objective of this work was to identify genes in C. sinensis cv. Pêra plants that were differentially expressed after the host was challenged with CiLV-C. In order to accomplish that, cDNA libraries were constructed from healthy and CiLV-inoculated sweet orange leaves. Two hundred and fifty-four genes were found to differ significantly in terms of expression, with 193 of them induced and 61 repressed after inoculation. Here we discuss the possible roles of a sub-set of these genes involved in metabolism, energy, signaling and cell rescue, defense and virulence, and indicate which kind of response may take place in the initial steps of the disease. Although the symptoms induced by CiLV-C in its compatible interaction with sweet orange resemble those of hypersensitive response (HR) in incompatible interactions, our data indicate that, apparently, the manifestation of leprosis symptoms should not be considered HR.

Nearly 65,000 citrus EST (Expressed Sequence Tags) have been investigated using the CitEST project database. Microsatellites were investigated in the unigene sequences from Citrus spp. and Poncirus trifoliata. From these sequences, approximately 35% of the non-redundant ESTs contained SSRs. The frequencies of different SSR motifs were similar between Citrus spp and trifoliate orange. In general, mononucleotide repeats appeared to be the most abundant SSRs in the CitEST database, but we also identify di-, tri-, tetra-, penta- and hexanucleotide repeats. The AG/CT and AAG/CTT were the most common dinucleotide and trinucleotide motifs, with frequencies of 54.4% and 25.2%, respectively. Primer sequences flanking SSR motifs were successfully designed and synthesized. After in silico polymorphism analysis, a subset of sixty-eight primers was validated in different Citrus spp. and Poncirus trifoliata. PCR-amplification revealed polymorphism in citrus with all tested primer pairs and showed the potential of these markers for linkage mapping. Our study showed that the CitEST database can be exploited for the development of SSR markers that can amplify Citrus spp. and related genus for comparative mapping and other genetic analyses.

A leprose dos citros é considerada a principal virose na citricultura brasileira, com maior destaque no Estado de São Paulo, principalmente pelos altos custos demandados para o controle químico do vetor, o ácaro Brevipalpus phoenicis. Além da relevância dessa virose para a citricultura local, sua importância mundial vem sendo ampliada consideravelmente nos últimos anos, principalmente com a disseminação do vírus em novos países da América do Sul e Central. No Brasil, apesar da sua importância econômica e ocorrência por mais de sete décadas, os mais importantes avanços no entendimento das interações do patossistema leprose têm sido obtidos apenas nos últimos dez anos. Essa revisão aborda os diferentes aspectos dessa doença, trazendo um breve histórico da doença, principais características da leprose, alternativas de controle, sua crescente importância econômica na cadeia citrícola nacional, os mais recentes relatos de sua ocorrência em outros países e os novos resultados obtidos pela pesquisa buscando um melhor entendimento das interações entre ácaro, vírus e hospedeiro vegetal.

Citrus leprosis is considered the main viral disease for the Brazilian citrus production, particularly for the State of São Paulo, due to the high costs spent for the chemical control of its vector, the tenuipalpid mite Brevipalpus phoenicis. In addition, its global importance has significantly increased in the last years, with the dissemination of the virus to new countries in South and Central America. In Brazil, despite its economical importance and occurrence for more than seven decades, the most significant advances towards understanding the pathosystem interactions have been obtained only in the last ten years. This review focuses on various aspects of the disease, beginning with a historical view, its main characteristics, alternatives for its control, its increasing economical importance in Brazil and abroad, and the new data on the search for understanding the interactions amongst the mite vector, the virus, and the plant host.