Resumo O uso inadequado de acaricidas sintéticos selecionou populações resistentes de Rhipicephalus microplus. O presente estudo avaliou a compatibilidade de diferentes propágulos de Metarhizium spp. (conídios, blastosporos e microscleródios), incubando-os com acaricidas sintéticos (amitraz, deltametrina e uma combinação de cipermetrina, clorpirifós e citronelal) por 1 h, 5 h, 10 h e 24 h. Conídios e microescleródios dos isolados testados foram geralmente mais tolerantes a acaricidas sintéticos do que os blastosporos. Este estudo também analisou o efeito in vitro da deltametrina associada a propágulos fúngicos no controle de uma população de fêmeas de R. microplus não suscetíveis a este acaricida sintético. O uso de fungos entomopatogênicos em associação com deltametrina, nesta população de carrapatos, causou maior controle do carrapato do que o uso do fungo ou acaricida sintético isoladamente.

Abstract The inappropriate use of synthetic acaricides has selected resistant Rhipicephalus microplus populations. The present study evaluated the compatibility of different Metarhizium spp. propagules (conidia, blastospores, and microsclerotia) by incubating them with synthetic acaricides (amitraz, deltamethrin, and a combination of cypermethrin, chlorpyrifos, and citronellal) for 1 h, 5 h, 10 h, and 24 h. Conidia and microsclerotia of the tested isolates were usually more tolerant to synthetic acaricides than blastospores. Our study also analyzed the in vitro effect of deltamethrin associated with fungal propagules for controlling a population of R. microplus females that were not susceptible to this synthetic acaricide. The use of entomopathogenic fungi in association with deltamethrin in this tick population caused a greater tick control than did the use of the fungus or the synthetic acaricide separately.

Resumo Este estudo teve como objetivo caracterizar quimicamente os óleos essenciais (OE) de Cinnamomum zeylanicum (canela) e Eremanthus erythropappus (candeia) e avaliar sua atividade acaricida, juntamente com a de seus principais compostos e do derivado de acetato de cinamila, sobre Rhipicephalus microplus. Os compostos do óleo essencial foram identificados por cromatografia gasosa. Foram realizados o Teste de Pacote de Larvas (TPL), em concentrações variando de 0,31 a 10,0 mg/mL, e o Teste de Imersão de Adultos (TIA), em concentrações entre 2,5 e 60,0 mg/mL. (E)-cinnamaldeído e α-bisabolol foram os principais compostos nos OE da canela (86,93%) e da candeia (78,41%), respectivamente. No TPL, os OEs de canela e candeia, e os compostos (E)-cinnamaldeído, α-bisabolol e acetato de cinamila resultaram em 100% de mortalidade nas concentrações de 2,5, 2,5, 5,0, 10,0 e 10,0 mg/mL, respectivamente. No TIA, valores percentuais de controle >95% foram observados para OE de canela e candeia, (E)-cinnamaldeído e α-bisabolol nas concentrações de 5,0, 60,0, 20,0 e 20,0 mg/mL, respectivamente, enquanto o acetato de cinamila apresentou baixa atividade. Conclui-se que os OEs e seus compostos apresentaram alta atividade acaricida, enquanto o derivado acetilado do (E)-cinnamaldeído apresentou menor atividade acaricida em fêmeas ingurgitadas de R. microplus.

Abstract This study aimed to chemically characterize the essential oils (EOs) of Cinnamomum zeylanicum (cinnamon) and Eremanthus erythropappus (candeia) and evaluate their acaricidal activity, together with that of their major compounds and cinnamyl acetate derivative, against Rhipicephalus microplus. Essential oil compounds were identified through gas chromatography. The larval packet test (LPT) at concentrations ranging from 0.31 to 10.0 mg/mL and the adult immersion test (AIT) at concentrations between 2.5 and 60.0 mg/mL were performed. (E)-cinnamaldehyde and α-bisabolol were the major compounds in cinnamon (86.93%) and candeia (78.41%) EOs, respectively. In the LPT, the EOs of cinnamon and candeia and the compounds (E)-cinnamaldehyde, α-bisabolol and cinnamyl acetate resulted in 100% mortality at concentrations of 2.5, 2.5, 5.0, 10.0 and 10.0 mg/mL respectively. In the AIT, percentage control values > 95% were observed for cinnamon and candeia EOs, (E)-cinnamaldehyde and α-bisabolol at the concentrations of 5.0, 60.0, 20.0, and 20.0 mg/mL, respectively, whereas cinnamyl acetate showed low activity. We conclude that EOs and their compounds showed high acaricidal activity, whereas the acetylated derivative of (E)-cinnamaldehyde presented less acaricidal activity on R. microplus engorged females.

Resumo No presente trabalho, os efeitos de dois diferentes produtos foram avaliados - Metarril® SP Organic (conídios secos) e Metarril® SC Organic (conídios concentrados em óleo vegetal) - para ovos, larvas e fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus. Três concentrações (108, 107 e 106 conídios mL-1) para cada produto foram preparadas em água + Tween® 80 0,1% (v/v); os bioensaios foram realizados para todos os estágios de R. microplus por imersão nas suspensões (Metarril® SP) ou formulações (Metarril® SC). Metarril® SP não afetou os parâmetros biológicos das fêmeas, demonstrando assim baixa eficácia; para ovos e larvas, foram observadas discretas diminuições na eclodibilidade e na população de larvas. Apesar de um atraso na germinação, Metarril® SC apresentou melhores resultados; para as fêmeas, foram detectadas reduções no Peso da Massa de Ovos (PMO) e no Índice de Produção de Ovos (IPO). Para os ovos, a concentração de 108 conídios mL-1 aumentou o Período de Incubação (PI), reduziu o Período de Eclosão (PE) e também o da eclodibilidade em até 61%; para larvas, 107 e 108 conídios mL-1 atingiram 99,6 e 100% de mortalidade larval, respectivamente, 10 dias após a exposição fúngica. Com isso, estudos adicionais que envolvem o uso de formulações à base de óleo para carrapatos, como Metarril® SC, precisam ser realizados, especialmente para controlar os estágios mais suscetíveis (ovos e larvas).

Abstract The effects of two different products - Metarril® SP Organic (dry conidia) and Metarril® SC Organic (emulsifiable concentrated conidia in vegetable oil) - on eggs, larvae and Rhipicephalus microplus engorged females were here explored. Three concentrations (108, 107, and 106 conidia mL-1) for both products were prepared in water + 0.1% Tween® 80 (v/v); afterward, bioassays were carried out for all R. microplus stages by immersion in suspensions (Metarril® SP) or formulations (Metarril® SC). Metarril® SP suspensions showed low efficacy and did not affect biological parameters of treated engorged females; for eggs and larvae, only slight decreases in hatchability and larvae population were observed. Despite a delay in germination, Metarril® SC presented better results; for females, reductions in Egg Mass Weight (EMW) and Egg Production Index (EPI) were reported. On eggs, 108 conidia mL-1 increased Incubation Period (IP), shortened Hatching Period (HP) and decreased hatchability by up to 61%; for larvae, 107 and 108 conidia mL-1 reached 99.6 and 100% larval mortality respectively, 10 days after fungal exposure. Thus, further studies involving the use of oil-based formulations for ticks such as Metarril® SC need to be performed, especially to control the most susceptible stages (eggs and larvae).

Resumo O presente estudo verificou o potencial patogênico de nematoides (NEP) do gênero Heterorhabditis (H. bacteriophora - isolado HP88 e H. baujardi - isolado LPP7) para estágios imaturos de Stomoxys calcitrans em laboratório. Todas as concentrações de NEPs da cepa HP88 causaram mortalidade larval média maior que 90% após quatro dias. Concentrações mais elevadas da cepa LPP7 (≥50 NEPs/larva) eliminaram mais de 70% após seis dias, com a concentração 200 NEPs/larva atingindo níveis de 93,3%. A mortalidade larval em todas as concentrações de NEPs (25, 50, 100, 150, and 200 NEPs/larva) para ambas as cepas foi significativa (p<0,05), quando comparadas aos respectivos grupos controle. Concentrações de H. bacteriophora HP88 obtiveram LC50 de 0,36 NEP/larva e LC90 de 29,1; enquanto H. baujardi LPP7 obteve LC50 de 39,85 e LC90 de 239,18. O isolado H. bacteriophora HP88 propiciou maior inibição da emergência de adultos, quando comparado à resposta obtida com H. baujardi LPP7. NEPs não provocaram mortalidade considerável quando aplicados diretamente sobre pupas. O conjunto de resultados observados indica os nematoides entomopatogênicos do gênero Heterorhabditis (estirpes HP88 e LPP7) como uma alternativa promissora no controle da mosca dos estábulos.

Abstract The present study verified the pathogenic potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) of the genus Heterorhabditis (Heterorhabditis bacteriophora, isolate HP88 and Heterorhabditis baujardi isolate LPP7) to immature stages of Stomoxys calcitrans in the laboratory. All EPN concentrations of the H. bacteriophora HP88 strain caused mean larval mortality greater than 90% after four days. Higher concentrations of the H. baujardi LPP7 isolate (≥50 EPNs/larva) eliminated more than 70% of larvae after six days with the concentration 200 EPNs/larva reaching mortality levels of 93.3%. The larval mortality at all concentrations of EPNs (25, 50, 100, 150, and 200 EPNs/larva) for both strains was significant (p<0.05) when compared to the respective control groups. Concentrations of H. bacteriophora HP88 yielded an LC50 of 0.36 EPN/larva and LC90 of 29.1; while H. baujardi LPP7 yielded an LC50 of 39.85 and LC90 of 239.18. H. bacteriophora HP88 provided greater inhibition of the emergence of adults when compared to the response obtained with H. baujardi LPP7. EPNs did not cause considerable mortality when applied directly to pupae. The set of observed results suggests that the EPNs of the genus Heterorhabditis, isolates HP88 and LPP7, are a promising alternative in the control of the stable fly.

Este estudo teve como objetivos avaliar as características antimicrobianas de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) contra os isolados CG138, CG228 e ESALQ986 de Beauveria bassiana sensu lato (Balsamo-Crivelli) Vuillemin, 1912 (Hypocreales: Cordycipitaceae). Ovos, larvas e pupas de S. calcitrans foram expostos a estes mesmos isolados. Após análise estatística, foi verificado que os estágios imaturos de S. calcitrans não foram susceptíveis aos isolados utilizados, independentemente do método de exposição utilizado. O teste de difusão em meio sólido mostrou que quando o isolado CG138 foi exposto a macerado de larvas houve redução do desenvolvimento fúngico. A análise dos perfis cromatográficos mostrou que o macerado ou muco de larvas do grupo controle e dos grupos expostos ao isolado CG138 apresentaram diferenças nos perfis. Um desenvolvimento reduzido do isolado CG138 na cutícula de larvas foi observado pela microscopia eletrônica de varredura.

This study had the aims of evaluating the antimicrobial characteristics of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) larvae against the fungal isolates CG138, CG228 and ESALQ986 of Beauveria bassiana sensu lato (Balsamo-Crivelli) Vuillemin, 1912 (Hypocreales: Cordycipitaceae). S. calcitrans eggs, larvae and pupae were exposed to these same isolates. Statistical analysis showed that the immature stages of S. calcitrans were not susceptible to the fungal isolates used, regardless of the exposure method. Diffusion test on solid culture medium reveled that macerated S. calcitrans larvae exposed to isolate CG138 reduced CG138 fungal development. The analysis of the chromatographic profiles indicated that the macerate or mucus of larvae of the control group and the groups exposed to the isolate CG138 presented different profiles. Reduced development of the isolate CG138 on the larvae cuticle was observed by means of scanning electron microscopy.

A microbiota presente em larvas de Stomoxys calcitrans pode auxiliar na sua sobrevivência em ambientes contaminados, devido à produção de substâncias inibidoras. Métodos bacteriológicos de identificação, reação em cadeia da polimerase (PCR) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) foram utilizados para detectar uma bactéria naturalmente presente no muco e macerado de larvas de S. calcitrans. A atividade antifúngica foi baseada nos resultados obtidos no teste de difusão em meio sólido artificial. A bactéria foi identificada como Stenotrophomonas maltophilia e apresentou atividade antifúngica contra os isolados CG 138, CG 228 e ESALQ 986 deBeauveria bassiana sensu lato. Estes resultados sugerem que a microbiota larval é um fator que pode comprometer o uso de B. bassiana s.l. no controle biológico de larvas de S. calcitrans.

The microbiota present in Stomoxys calcitrans larvae may assist their survival in contaminated environments through production of inhibitory substances. Bacteriological identification methods, the polymerase chain reaction (PCR) and scanning electron microscopy (SEM) were used to detect a bacterium naturally present in mucus and maceratedS. calcitrans larvae. The antifungal activity was determined based on the results from disk diffusion tests on an artificial solid medium. The bacterium was identified as Stenotrophomonas maltophilia and presented antifungal activity againstBeauveria bassiana sensu lato isolates CG 138, CG 228 and ESALQ 986. This result suggests that the larval microbiota is a factor that can compromise the use of B. bassiana s.l. fungus for biological control of S. calcitrans larvae.

Introduction During a diagnostic evaluation of canine visceral leishmaniasis (VL), two of seventeen dogs were found to be co-infected by Leishmania (Viannia) braziliensis and Leishmania (Leishmania) chagasi. Methods Specific polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism-PCR (RFLP-PCR) assays were performed. Results PCR assays for Leishmania subgenus identification followed by RFLP-PCR analysis in biopsies from cutaneous lesions and the spleen confirmed the presence of Leishmania (Viannia) braziliensis and Leishmania (Leishmania) chagasi in those fragments. Conclusions This report reinforces the importance of using serological and molecular techniques in the epidemiological surveillance of canine populations in endemic areas in which both diseases are known to co-exist. In such cases, a reassessment of the control measures is required.

O estudo teve como objetivo avaliar a viabilidade de Heterorhabditisamazonensis isolado RSC-5 após exposição a diferentes carrapaticidas utilizados no controle de Rhipicephalusmicroplus. Foram constituídos seis tratamentos, cada um composto por um produto, sendo cada grupo com 75.000 nematoides (NEPs) em suspensão de 20 mL de solução de diferentes carrapaticidas, em concentração comercial. O controle foi formado por 75.000 NEPs e 20 mL de água destilada, e todos os grupos foram mantidos em câmara climatizada a 25°C. A avaliação do percentual de sobrevivência e infectividade em lagartas Galleria mellonella foi realizada 24 e 72 horas após o início do experimento. A mortalidade de lagartas no teste de infectividade foi analisada após 72 e 120 horas. Com 24 horas de exposição, o percentual de sobrevivência de H. amazonensis RSC-5 não foi significativamente reduzido (p > 0,05) somente na exposição ao princípio ativo deltametrina. O mesmo foi observado no período de 72 horas em relação à associação clorpirifós + cipermetrina + butóxido de piperonila + citronelal. Não foi constatada sobrevivência de nenhum juvenil infectivo nos grupos expostos à associação clorfenvinfós + diclorvós. A exposição ao clorfenvinfós resultou em percentual de sobrevivência inferior a 50% após 72 horas. O potencial de infectar lagartas de G. mellonella foi reduzido apenas no grupo tratado com o princípio ativo clorfenvinfós. Dessa forma, é possível concluir que o princípio ativo clorfenvinfós e a associação clorfenvinfós + diclorvós não foram compatíveis com H. AmazonensesRSC-5, causando redução no percentual de sobrevivência e infectividade dos juvenis desse nematoide. Os outros produtos foram compatíveis, não causando redução na infectividade do isolado testado.

The aim of this study was to assess the viability of Heterorhabditisamazonensis strain RSC-5 after exposure to different acaricides used for Rhipicephalusmicropluscontrol. Six treatment groups were formed, one for each product. Each group was composed of 75,000 nematodes in a 20 mL solution of different acaricides, at commercial concentration. The control group was formed by the same number of nematodes in 20 mL of distilled water. All the groups were kept in a climate-controlled chamber at 25°C. The percentage of survival and infectivity in Galleria mellonella caterpillars were determined 24 and 72 hours after the beginning of the experiment. The mortality of the caterpillars in the infectivity test was assessed 72 and 120 hours. After 24 hours of exposure, only the active ingredient deltamethrin did not significantly reduce the survival percentage of H. amazonensis RSC-5 (p > 0.05). The same was observed after 72 hours of exposure to the combination of chlorpyriphos + cypermethrin + piperonyl butoxide + citronellal. There was no survival of infective juveniles in the groups exposed to the combination of chlorphenvinphos + dichlorvos. The exposure to chlorphenvinphos for 72 hours resulted in 50% of mortality. The potential to infect G. mellonella caterpillars was only reduced in the group treated with the active ingredient chlorphenvinphos. Chlorphenvinphos and the combination of chlorphenvinphos + dichlorvos were not compatible with H. amazonensisRSC-5, causing a reduction in the survival and infectivity of juveniles of this nematode, while the other products were compatible, causing no reduction in the infectivity of this isolate.

Este estudo avaliou os efeitos da destruxina A em fêmeas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus, uma vez que essa toxina é uma das prováveis causas da alta mortalidade induzida pelo fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae em artrópodes. Os carrapatos foram imersos ou inoculados com diferentes concentrações de destruxina A. Apesar das doses aplicadas, não houve mortes ou alterações significativas de postura entre os grupos tratados com destruxinas A e os grupos controle. Nenhum outro efeito externo provocado pela destruxina A, tal como paralisia tetânica, foi observado nas fêmeas ingurgitadas de carrapato após o tratamento.

This study evaluated the effects of destruxin A on Rhipicephalus (Boophilus) microplus females, since this toxin is one of the likely causes of high mortality induced by the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae in arthropods. Ticks were immersed or inoculated with different concentrations of destruxin A. Despite the doses applied, there were no deaths or significant alterations in oviposition between the groups treated with destruxin A and the control groups. No other external effect caused by destruxin, such as tetanic paralysis, was observed in these engorged female ticks after the treatment.

Por ser um díptero hematófago, a mosca Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) ocasiona grandes perdas na pecuária brasileira. Atualmente, pesquisas têm sido direcionadas para métodos de controle que reduzam a utilização de inseticidas químicos e que preservem o meio ambiente. Este estudo avaliou o potencial entomopatogênico dos isolados CG 138 e CG 228 de Beauveria bassiana sobre ovos, larvas e pupas de S. calcitrans em condições ambientais e o isolado ESALQ 986 de B. bassiana em ovos, nas mesmas condições. Para cada isolado fúngico, foram utilizadas as concentrações de 2x10(6), 2x10(7) e 2x10(8) conídios ml-1. Os resultados sugerem que os isolados CG 138, CG 228 e ESALQ 986 apresentaram efeito saprofítico, pois não afetaram significativamente o desenvolvimento dos estágios imaturos da mosca dos estábulos, comprometendo dessa forma sua utilização como agente entomopatogênico.

Because it is a hemathofagic diptera, the Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) inflicts great losses in the Brazilian cattle. Nowadays, researches have been directed to the control methods that reduce the use of chemical insecticides and preserve the environment. This study evaluated the entomopathogenic potential of the isolated CG 138 and CG 228 of Beauveria bassiana on eggs, larvae and pupae of S. calcitrans in environmental conditions and the isolated ESALQ 986 of B. bassiana in eggs. For each fungal isolated were used concentrations of 2x10(6), 2x10(7) and 2x10(8) conidia ml-1. The results suggest that the isolated CG 138, CG 228, ESALQ 986 present a saprophytic effect, because they did not affect significantly the development of immature stages of the stable flies, affecting this way its use as entomopathogenic agent.

O presente trabalho foi realizado para verificar a eficácia do fungo Beauveria bassiana em todas as etapas de desenvolvimento de Alphitobius diaperinus e assim saber em que fase ele é mais susceptível ao controle biológico. O fungo B. bassiana, isolado 986, foi testado em duas concentrações (3,4 X 10(6) e 3,4 X 10(8) conídios ml-1) mais um grupo controle. Foram realizadas duas leituras, uma sete e outra quatorze dias após a aplicação dos fungos. Na concentração 3,4 X 10(6), 54% dos ovos tratados estavam inférteis, ocorrendo 54% de mortalidade de larvas tratadas nos estádios I, II e III, 22,5% nos estádios IV, V e VI, 9,5% nos estádios VII e VIII e 24,5% de mortalidade das pupas. Na concentração 3,4 X 10(8), 66,8% dos ovos tratados estavam inviáveis, ocorrendo mortalidade de 56% das larvas tratadas nos estádios I, II e III, 34% nos estádios IV, V e VI, 24,5% nos estádios VII e VIII e 49,5% das pupas. Já no grupo controle, 13,3% dos ovos estavam inviáveis, ocorrendo mortalidade de 10% das larvas nos estádios I, II e III, 4% nos estádios IV, V e VI e 0% de mortalidade nos estádios VII, VIII e em pupas. Sobre o cascudinho adulto, o fungo não teve efeito nocivo em nenhum grupo analisado. Com base nesses resultados, observou-se que o fungo nas concentrações testadas apresentou efeito nocivo às fases do ciclo biológico do cascudinho, com exceção do inseto adulto.

The present research was carried out to verify the Beauveria bassiana fungus efficacy in all development phases of Alphitobius diaperinus and to know in which phase it is more susceptible for biologic control. The B. bassiana, 986-isolated fungus, was tested in two different concentrations (3.4 x 10(6) and 3.4 x 10(8) conidium ml-1) and a control group. Two readings were realized, one after 7 days of fungus application and the other after 14 days. At concentration of 3.4 x 10(6) conidium ml-1, 54% of treated eggs were infertile, with larva death of 54% at I, II and III phase, 22.5% at IV, V, and IV phase and 9.5% at VII and VIII phase. For pupa stage 24.5% of death was found. At concentration of 3.4 x 10(8) conidium ml-1, 66.8% of treated eggs were impracticable occurring treated larva death of 56% at I, II and III phase; 34% at IV, V and VI phase, 24.5% at VII and VIII phase and 49.5% at pupa phase. For control group, 13.3% of eggs were not viable with larva death of 10% at I, II and III phase, 4% at IV, V and VI phase and 0% at pupa, VII and VIII phase. About the adult lesser mealworms, the fungus did not present noxious effect at all analyzed group. In conclusion, these results showed that the fungus at tested concentrations presented noxious effect at all biologic cycle phases of lesser mealworms, except for the adult insect.

A patogenicidade do fungo Beauveria bassiana (isolado 986) foi avaliada no desenvolvimento da fase parasitária do Anocentor nitens, acompanhando o desenvolvimento de larvas não alimentadas até o estágio adulto. Foram utilizados dois tratamentos e um grupo controle com cinco repetições cada. No tratamento 1 (T1), as orelhas dos bovinos foram banhadas com a suspensão fúngica de 10(8) conídios ml-1; no tratamento 2 (T2), as orelhas foram banhadas com água destilada e espalhante adesivo. No grupo controle (C), as orelhas foram banhadas com água destilada. Após 24 horas dos tratamentos, as orelhas de cada animal foram infestadas com 100mg de larvas. Os parâmetros analisados, em cada tratamento, foram: número e peso de fêmeas recuperadas; períodos de pré-postura, postura, incubação, eclosão e longevidade; percentual de eclosão; peso da massa de ovos e da quenógina; índices de eficiência reprodutiva e nutricional. Verificou-se que, no T1 e T2, o número de fêmeas recuperadas, após 35 dias, foi significantemente menor (P<0,05) que no C. O número de fêmeas recuperadas foi 35, 70 e 117 fêmeas, no T1, T2 e C, respectivamente. As fêmeas oriundas das larvas sobreviventes dos grupos tratados não sofreram ação deletéria do entomopatógeno avaliado.

This study evaluated the pathogenicity of the fungus Beauveria bassiana (Isolate 986) on the development of the parasitic phase of Anocentor nitens by accompanying the development of unfed larvae until the adult stage. Two treated and one control group were used with five repetitions each. In the first treated group (T1), cattle ears were bathed with a fungal suspension of 10(8) conidia ml-1, second treated group (T2), the ears were bathed with distilled water and Tween 80 1% and the control group (C), the ears were bathed with distilled water. One day after treatment, the ears of each animal were infested with 100 mg of larvae. The parameters analyzed in each treatment were: number and weight of females recovered; periods of pre-oviposition, oviposition, incubation, eclosion and longevity; percentage of eggs hatched; weight of the egg mass and of females after oviposition. We found that in the two treated groups the number of females recovered was significantly lower (P<0.05) than in the control group. 35, 70 and 117 females were recovered from the T1, T2 and C, respectively. The females obtained from the surviving larvae of the treated groups did not suffer any deleterious effects from the entomopathogen studied.

The objective of this study was to isolate and identify fungal species found in natural association with adults of Musca domestica. The adult insects were collected from two natural breeding grounds: hog pens and an urban sanitary landfill. The isolated fungi were identified as: Aspergillus flavus (23.8%), A. niger var. niger (14.4%), Penicillium corylophilum (21.4%), P. fellutanum (11.9%), Cladosporium cladosporoides (4.7%), Fusarium sp. (4.7%), Alternaria alternata (11.9%), Curvularia brachyspora (2.4%), Mycelia sterilia (2.4%) and the Mucorales order (2.4%).

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o mecanismo de penetração do fungo Metarhizium anisopliae em Boophilus microplus em condições experimentais. As infecções foram realizadas utilizando amostra de M. anisopliae isolada de carrapatos. A suspensão de conídios do fungo foi preparada utilizando água destilada e espalhante adesivo Tween 80 e foi quantificada na concentração de 10(8) conídios/ml. As fêmeas ingurgitadas foram banhadas nesta suspensão durante cinco minutos e, após este período, foram levadas à câmara climatizada. Três dias após a infecção, as fêmeas foram fixadas utilizando tetróxido de ósmio e glutaraldeído, posteriormente desidratadas em bateria de álcool etílico com acetona. Após a desidratação, esse material foi levado à metalização e ao microscópio eletrônico de varredura, onde se observou a fixação dos conídios na cutícula das fêmeas, havendo germinação e a dilatação da extremidade do tubo germinativo em todas as amostras. Esta dilatação observada foi devido à formação do apressório, apesar de não ser possível observar esta estrutura sobre a cutícula das fêmeas ingurgitadas. O tetróxido de ósmio mostrou ser um excelente fixador para fungos, enquanto o glutaraldeído mostrou ser eficiente na fixação do artrópode. Conclui-se que a forma principal de penetração deste entomopatógeno em B. microplus é através da cutícula. Cabe aqui frisar que esta é a primeira vez que é descrito o mecanismo de penetração de M. anisopliae em carrapatos.

The objective of the present communication has been to draw attention to the mode of penetration of the fungus Metarhizium anisopliae through the cuticle of Boophilus microplus under experimental conditions. Samples of M. anisopliae isolated from naturally infected ticks were used to prepare a suspension of 108 conidia/ml in a destilled water with 2% of Tween 80. The engorged females were submergged in this suspension for five minutes, then transferred to 27 ± 1 °C and > 80% RH in climatized chamber. Three days after the infection, females were fixed in either osmium tetroxide or glutaraldehyde, and dehydrated in alcohol / acetone for SEM. Fixation of conidia in the cuticle, formation of germinative tube and appressoria were seem. It was suggested that the penetration of this entomopathogenic fungus is primarily through the cuticle. The fixation of the fungus for SEM was best accomplished by the osmium tetroxide whereas the glutaraldehyde was more efficient fixative for the tick. It is the first time that the penetration’s mechanism of M. anisopliae is described in ticks.

Este experimento foi conduzido para conhecer os efeitos de duas espécies de fungos, Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae em ovos do carrapato Rhipicephalus sanguineus sob temperatura e umidade constantes (27 ± 1° C e > 80% de umidade relativa (UR)) e variáveis (25 ±5° C e > 60% UR). Ovos de R. sanguineus foram imersos em quatro concentrações (10(8), 10(7), 10(6) e 10(5) conídios/ml) de dois isolados de B. bassiana (Bb 986 e Bb 747) e três isolados de M. anisopliae ( Ma 959, Ma E9 e Ma 319). Os períodos de incubação e eclosão das larvas de todos os ovos tratados foram estatisticamente não significantes (P>0,05). Entretanto, a porcentagem de eclosão das larvas, oriundas dos ovos tratados, foi inversamente proporcional à concentração de conídios/ml. A porcentagem de eclosão variou entre 0 à 26,66% para a concentração 10(8) conídios/ml, e 6,66 à 100% para a concentração 10(5) conídios/ml. A porcentagem de eclosão das larvas de ovos mantidos em temperatura e umidade variáveis foi menor quando comparada com a das larvas de ovos mantidos em temperatura de 27°C e umidade > 80% UR (P<0,05). A CL 50 e 90 para inibição da eclosão das larvas também foi menor em temperatura e umidade variáveis (P< 0,05).

This experiment was conducted to evaluate the effects of two species of fungi Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae on the eggs of the tick Rhipicephalus sanguineus at constant (27 ± 1° C and > 80% RH) and variable (25 ± 5° C and > 60% RH), temperatures and humidities. Eggs of R. sanguineus were immersed in four concentrations (10(8), 10(7), 10(6), 10(5) conidia/ml) of two isolated of B. bassiana (Bb 986 and Bb 747) and three isolated of M. anisopliae ( Ma 959, Ma E9 and Ma 319). The incubation and hatch periods of all treated eggs and controls were statistically not significant (P> 0.05). Otherwi- se, the percentage of hatch of larvae in all treated eggs was inversely proportional to the concentration of conidia/ml. The percentage of hatch ranged from 0 to 26.66% for the 10(8) concentration and from 6.66 to 100% for the 10(5) concentration. The percentage of eclosion of eggs maintened at variable temperatures and humiditis were lower as compared with eggs maintened at 27 ± l° C and > 80% RH (P< 0.05). The DL 50 and 90 for inhibicion of eclosion of larvae were also lower at variable temperatures and humidities (P<0.05).