RESUMO Folhas e cascas do caule de Stryphnodendron adstringens, uma espécie do Cerrado brasileiro, foram utilizadas para examinar os padrões sazonais da atividade da fenilalanina amônia-liase e os teores de fenóis e taninos totais em 16 indivíduos adultos, em condições de campo. Avaliações das trocas gasosas, incluindo fotossíntese líquida, transpiração, condutância estomática, densidade de fluxo de fótons fotossinteticamente ativos, temperatura da folha, deficit de pressão de vapor e potencial hídrico foliar foram realizadas. Os resultados foram submetidos à análise de componentes principais. A condutância estomática, fotossíntese líquida, transpiração, eficiência do uso da água, potencial hídrico mínimo e densidade de fluxo de fótons fotossinteticamente ativos foram maiores na estação chuvosa, enquanto que o potencial hídrico máximo e o deficit de pressão de vapor na atmosfera foram semelhantes entre as estações. As variações sazonais nas características de trocas gasosas foram influenciadas por mudanças nas condições climáticas e se correlacionaram positivamente com as maiores temperaturas, precipitação e umidade relativa do ar e negativamente com o aumento da insolação. Não houve correlação entre o potencial hídrico foliar máximo e as demais variáveis climáticas. A atividade da fenilalanina amônia-liase foi semelhante nas estações seca e chuvosa e os maiores teores de fenóis e taninos totais foram observados nas estações seca e chuvosa, respectivamente. A atividade da fenilalanina amônia-liase e os teores de fenóis totais foram influenciados negativamente pela temperatura e precipitação na estação seca, e os teores de taninos totais foram correlacionados principalmente com temperaturas mais elevadas, com menor influência da precipitação na estação chuvosa.

ABSTRACT There were performed analyses of the leaves and stem bark of Stryphnodendron adstringens, a Brazilian Cerrado plant, to examine the seasonal patterns of phenylalanine ammonia-lyase activity and total phenol and tannin contents in 16 adult individuals under field conditions. The measurements of gas exchange parameters, including net photosynthesis, transpiration and stomatal conductance, as well as the photosynthetic photon flux density, leaf temperature, vapor pressure deficit and leaf water potential were also performed. The results were subjected to a principal component analysis. The values obtained for stomatal conductance, net photosynthesis, transpiration, water use efficiency, minimum water potential and photosynthetic photon flux density were higher in the rainy season, while the maximum water potential and vapor pressure deficit in the atmosphere were similar between seasons. The seasonal variations in gas exchange characteristics were influenced by changing weather conditions and were positively correlated with higher air temperatures, rainfall amounts and relative air humidity and negatively correlated with increased insolation. There was no correlation between the maximum leaf water potential and any of the weather variables. Phenylalanine ammonia-lyase activity was similar in the dry and rainy seasons, and higher levels of total phenols and tannins were observed in the dry and rainy seasons, respectively. Phenylalanine ammonia-lyase activity and total phenol contents were negatively influenced by temperature and rainfall in the dry season, and the total tannin contents were mainly correlated with higher temperatures and a lower influence of rainfall in the rainy season.

RESUMO Objetivou-se por este trabalho desenvolver uma metodologia para indução de calos em segmentos foliares de B. verbascifolia e avaliar a produção de compostos fenólicos bioativos. Explantes foliares foram inoculados em meio MS com 30 g L-1 de sacarose, solidificados com 7 g L-1 de agar e suplementados com 2,4-D (0; 4,52; 9,05; 18,10 µM) e BAP (0; 4,44; 8,88; 17,75 µM), na presença e ausência de luz. Após 45 dias da inoculação foram avaliados a porcentagem de indução de calos, coloração, consistência, matéria fresca e seca, teores de fenóis, flavonóides e taninos totais e o perfil cromatográfico por HPLCDAD. A indução de calos ocorreu apenas nos meios com reguladores de crescimento. A indução máxima (100%) foi observada em meios com 2,4-D e BAP combinados, na presença e ausência de luz. Foram obtidos calos friáveis e compactos com coloração amarela, verde e vermelha. Meios de cultivo contendo 4,52 µM 2,4-D + 4,44 µM BAP, na ausência de luz induziram 100% de calos friáveis, com maiores pesos fresco e seco. Os calos produziram quantidades significativas de fenóis e flavonóides totais, superiores aos teores detectados no explante inicial. Taninos totais foram detectados apenas em calos induzidos em meios contendo 17,75 µM de BAP e 4,52 µM de 2,4-D + 17,75 µM de BAP e não foram observados no explante inicial. Os compostos fenólicos bioativos detectados são derivados de ácido benzóico, p-cumárico, cinâmico, gálico e catequinas.

ABSTRACT This study developed a methodology for callus induction in leaf segments of B. verbascifolia and evaluated the bioactive phenolic compounds production. Leaf explants were cultured in MS medium with 30 g L-1 sucrose, solidified with 7 g L- 1 agar supplemented with 2,4-D (0; 4.52; 9.05; 18.10 µM) and BAP (0; 4.44; 8.88; 17.75 µM ) in the presence and absence of light. Forty-five days after inoculation we assessed the percentage of callus induction, color, consistency, fresh and dry matter, total phenols, flavonoids, tannins contents, and chromatographic profile by HPLC-DAD method. Callus induction occurred only in medium with growth regulators. Maximal induction (100%) was found in medium containing 2,4-D combined with BAP in the presence and absence of light. We obtained friable and compact callus in yellow, green, and red. Culture media containing 4.52 µM 2,4-D + 4.44 µM BAP induced 100% of friable callus with higher fresh and dry weight in the absence of light. The callus produced higher amounts of total phenols and flavonoids than the initial explant. Total tannins were detected only in callus induced in media containing 17.75 µM BAP and 4.52 µM 2,4-D + 17.75 µM BAP, and were not found in the initial explant. The bioactive phenolic compounds detected are derived from benzoic, p-coumaric, cinnamic, gallic acids, and catechins.

Este trabalho teve como objetivo quantificar fenóis totais e taninos nas cascas de angico-vermelho (Anadenanthera peregrina) em diferentes classes de diâmetro, além de comparar duas metodologias de quantificação de fenóis. Foram coletadas cascas de 35 árvores, distribuídas em sete classes diamétricas. As cascas foram secas ao ar livre, trituradas e peneiradas, sendo utilizado o material retido na peneira de 60 mesh. Para a extração dos fenóis, utilizou-se metanol:água (50%). O doseamento de fenóis totais foi realizado pelos métodos de Folin-Denis e Folin-Ciocalteau modificados, e para taninos, pelo método difusão radial. Não foi encontrada diferença estatística entre as metodologias de quantificação de fenóis. Verificou-se aumento nos teores de fenóis e taninos com o aumento do diâmetro das árvores.

This study aimed to quantify total phenols and tannins in barks of Anadenanthera peregrina in different diameter classes and compare two methods of quantification of phenols. Barks of thirty-five trees, distributed in seven diameter classes, were collected. They were air-dried, ground and sieved; the material retained on 60 mesh sieve was used. Methanol:water (50%) solution was used for the extraction of phenols. Quantification of total phenols was performed by the modified Folin-Denis and Folin-Ciocalteau methods, while tannins were quantified by the radial diffusion method. No statistically significant differences were found between the phenol quantification methodologies. Increased contents of phenols and tannins were verified as the diameter of trees increased.

O objetivo deste trabalho foi caracterizar e comparar dois tipos de calos de explantes foliares de Coffea arabica (cultivar Catiguá). Células de diferentes tipos de calos foram caracterizadas quanto a viabilidade e características morfológicas externas e internas. Foram obtidos dois tipos de calos morfologicamente distintos: (a) amarelo friável e (b) transparente aquoso. Os calos amarelos friáveis apresentaram maior viabilidade celular e características embriogênicas. Microscopia eletrônica de varredura e transmissão mostraram características embriogênicas em calos amarelos friáveis evidenciadas pela presença de células pequenas e isodiamétricas. Os calos transparentes aquosos apresentaram células alongadas e vacuolizadas.

The aim of this research was to characterize and compare two types of calli from leaf explants of Coffea arabica (cultivar Catiguá). Cells of different types of callus were successfully characterized regarding viability and internal and external morphological characteristics. It was obtained two morphologically distinct types of callus: (i) yellow friable and (ii) transparent watery. The yellow friable calli showed higher cell viability and embryogenic characteristics. Scanning and transmission electron microscopy showed embryogenic characteristics in cells of the yellow friable calli evidenced by the presence of small and isodiametric cells, while transparent watery calli showed elongated cells and large cytoplasm vacuolization.

Atualmente, culturas de células ou de suspensões celulares têm sido frequentemente empregadas para produzir fitoterápicos com maiores concentrações de princípios ativos. O barbatimão é uma importante espécie medicinal do Cerrado, com taninos nas cascas do caule. Objetivando-se induzir calos em barbatimão e avaliar os teores de fenóis e taninos totais, explantes foliares foram inoculados em meio MS suplementado com 30 g L-1 sacarose e acrescidos de 2,4-D (0; 4,52; 9,05; 18,10 μM ) e BAP (0; 4,44; 8,88; 17,75 μM ), na presença e ausência de luz. A calogênese ocorreu em meios contendo 2,4-D, na presença de luz. O número de calos não variou com as concentrações de 2,4-D e maiores valores de matérias fresca e seca de calos e teores de fenóis totais foram observados em meios com 9,05 μM e 18,10 μM de 2,4-D, na presença e ausência de luz. Com BAP, a calogênese ocorreu na ausência de luz, com maior produção de calos na presença de 4,44 e 8,88 μM de BAP e maiores valores de matéria fresca e seca em meios com 4,44 μM de BAP. Calos crescidos em meios suplementados 4,44 e 17,75 μM de BAP apresentaram maiores teores de fenóis totais. Não se detectaram taninos, independente do regulador empregado.

Recently, cell cultures and cell suspensions have been frequently employed to produce phytotherapics with high amounts of active principles. Barbatimão is a native species from the Cerrado, with tannins in the stem bark. In order to induce callus in barbatimão and evaluate the content of total phenols and tannins, leaf explants were inoculated on MS medium, supplemented with sucrose 30 g L¹ and 2,4-D (0, 4.52, 9.05, 18.10 μM ) and BA (0, 4.44, 8.88, 17.75 μM ), in the presence and absence of light. The callogenesis occurred on medium containing 2,4-D, in the presence of light. The callus number did not alter with the different concentrations of 2,4-D but higher values of dry and fresh matter of the callus and total phenol contents were observed in medium with 9.05 μM and 18.10 μM of 2,4-D, independently of the light treatment. In treatments with BA, the callogenesis occurred in the absence of light and higher callus induction was observed in medium supplemented with 4.44 and 8.88 μM BA in the absence of light and higher values of dry and fresh matter of the callus were observed in medium increased with 4.44 μM BA. Callus grown on medium supplemented with 4.44 and 17.75 μM BA showed higher total phenol content. Tannins were not detected independently of the regulator used.

O murici-pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss.) é um arbusto do cerrado cujo chá da casca do caule apresenta atividade adstringente nas diarréias e disenterias. O gênero Byrsonima apresenta taxa de germinação baixa e emergência lenta da plântula, dificultando a propagação sexuada. Objetivou-se com este trabalho obter calos friáveis em explantes foliares de murici-pequeno para estudos futuros em suspensão celular e metabolismo secundário, assim como embriogênese somática. Avaliou-se o efeito de diferentes concentrações da auxina 2,4-D e a sua interação com as citocininas TDZ e BAP na calogênese. Os resultados demonstraram que na ausência de 2,4-D não ocorre formação de calo em explantes foliares. A adição de BAP ou TDZ não influencia o processo de calogênese. Para a indução e proliferação de calo em explantes foliares de murici-pequeno, os resultados recomendam o uso de meio MS, acrescido de 1,0 mg L-1 de 2,4-D, mantendo os explantes em condição de escuro por 30 dias.

Byrsonima intermedia A. Juss is a shrub of cerrado whose husk presents medicinal activities in diarrheas and dysenteries. The Byrsonima genus present low germination rate and slow plantlet emergency which makes difficult sexual propagation. The objective of this work was to obtain friable callus in leaf explants for future studies with suspension cells and secondary metabolites as well as somatic embryogenesis. The effect of different concentrations of 2,4-D and its interaction with TDZ and BAP in callus formation was evaluated. The results demonstrated that there is no formation of callus in leaf explants maintained in absence of 2,4-D. The addition of TDZ or BAP had no influence in the calogenesis process. For callus induction and proliferation, the results suggest the use of MS medium supplemented with 1.0 mg L-1 2,4-D maintaining the explants in the dark.

O murici-pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss.), espécie medicinal do Cerrado, apresenta dificuldade de propagação sexuada decorrente da baixa taxa de germinação e emergência lenta das plântulas em campo. Objetivou-se com o presente trabalho estudar aspectos da germinação in vitro de murici-pequeno mediante avaliação do efeito dos meios de cultura MS e WPM e diferentes concentrações de BAP. Frutos maduros foram coletados de populações naturais, dos quais sementes e embriões foram excisados e utilizados como explante. Pelos resultados, infere-se que os meios de cultura mais eficientes para a germinação in vitro de sementes e embriões são o MS e WPM 50%, sem sacarose, apresentando 60% e 100% de germinação, respectivamente. Observou-se também que não se faz necessária a adição de BAP na germinação in vitro de embriões.

The murici-pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss.) is a medicinal plant of cerrado that presents difficulties of sexual propagation due to a low rate of seed germination and plant emergency in the field. The objective of this work was study aspects of the in vitro germination of murici-pequeno evaluating the effects of MS and WPM culture media and different concentrations of BAP. Mature fruits were collected from native plants and their seeds and embryos excised and used as explants. The results indicated that the most effective culture media used for the in vitro seed and embryo germination were MS and WPM 50%, both with no sucrose, presenting 60 and 100% germination, respectively. The use of BAP is not required for in vitro embryo germination.

Com o objetivo de avaliar a influência do fotoperíodo na produção e acúmulo de alantoína em plantas de confrei (Symphytum officinale L.), uma conhecida espécie medicinal, um experimento foi conduzido nos meses de julho e agosto de 1998. Mudas obtidas de plantas com 90 dias de idade foram submetidas a quatro fotoperíodos diferentes (8, 12, 16 e 20 horas) durante 60 dias, e os teores de alantoína em raízes e rizomas foram avaliados. pelos resultados, constatou-se que fotoperíodos crescentes promoveram um aumento no teor médio de alantoína em raízes (0,06%, 0,303%, 1,213% e 4,78%) e uma redução no acúmulo de alantoína em rizomas (9,65%, 7,14% e 0,55%), quando o fotoperíodo foi aumentado de 8 para 12 e 16 horas, respectivamente, tendendo a estabilizar-se em fotoperíodo de 20 horas (0,53%). Plantas cultivadas em condições de campo apresentaram um teor de 2,55% e 2,63% de alantoína em rizomas e raízes, respectivamente. Tendo em vista que as raízes de confrei são consideradas sítios produtores de alantoína, pelos resultados, ficou demostrado que as condições de fotoperíodo influenciaram tanto a síntese dessa substância nesses órgãos, como o seu acúmulo nos rizomas.

In order to evaluate the influence of photoperiod on the accumulation of allantoin in comfrey (Symphytum officinale L.), a well known medicinal plant, an experiment was conducted during July and August, 1998. Cuttings obtained from 90 day old plants were submitted to four photoperiods (8, 12, 16 and 20 hours). After 60 days, allantoin content in roots and rhizomes was evaluated. The results showed that increases in photoperiod promoted an increment in the average content of allantoin in roots (0.06%, 0.303%, 1.213% and 4.78%). On the other hand, in rhizomes, allantoin accumulation decreased (9.65%, 7.14%, 0.55%) when the photoperiod was increased from 8 to 12 and 16 hours, respectively, stabilizing on a 20-hour photoperiod (0.53%). Plants cultivated under field conditions presented 2.55% and 2.63% allantoin content in rhizomes and roots, respectively. Based on the fact that in comfrey the roots are considered to be sites of allantoin synthesis, the results demonstrated that photoperiod could influence both the synthesis of allantoin in these organs as well as its accumulation in the rhizomes.