Woolly apple aphid (WAA; Eriosoma lanigerum Hausm.) is a major insect pest that has significant economic impact on apple growers worldwide. Modern breeding technologies rely on several molecular tools to help breeders select genetic determinants for traits of interest. Consequently, there is a need for specific markers linked to the genes of interest. Apple scions and rootstocks have an additional barrier to the introduction of pest resistance genes due to the presence of self-incompatibility S-RNase alleles. The genetic characterization and early identification of these alleles can amplify the contribution of a breeding program to the selection of resistant genitors that are as compatible as possible. In this study, we identified the Er1 gene involved in the resistance to WAA in Malus prunifolia var. ringo, also known as ‘Maruba Kaido’ rootstock, and we analyzed the inheritance pattern of the WAA resistance Er1 gene in a segregant population derived from Malus pumila ‘M.9’ and ‘Maruba Kaido’ rootstocks. The self-incompatibility of S-RNase alleles S6S26 of ‘Maruba Kaido’ were also identified along with their inheritance pattern. We also confirmed the identification of the S1S3 alleles in the ‘M.9’ rootstock. To the best of our knowledge, this is the first study to characterize WAA resistance and RNase S-alleles in ‘Maruba Kaido’. Furthermore, we discuss the potential use of the genetic markers for these genes and their potential impact on apple breeding programs.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o número de anteras por flor, grãos de pólen por antera e capacidade germinativa do pólen de diferentes cultivares de macieiras. O trabalho foi executado no Laboratório de Fisiologia do Desenvolvimento e Genética Vegetal da Universidade Federal de Santa Catarina, e as coletas a campo foram realizadas na Epagri/Estação Experimental de Caçador-SC, em outubro de 2005. Foram utilizadas as seguintes cultivares comerciais de macieira desenvolvidas no Brasil: Primícia, Princesa, Fred Hough, Catarina, Baronesa, Lisgala, Suprema, Condessa, Daiane, Duquesa, Imperatriz e Joaquina. As cultivares de macieira Condessa, Princesa, Eva, Duquesa, Imperatriz, Gala, Fred Hough, Daiane, Baronesa e Suprema produzem pólen em quantidade suficiente e com boa capacidade germinativa. A cv. Condessa, embora apresente alta capacidade germinativa de pólen, produz menos anteras e grãos de pólen por antera que as demais. A cv. Princesa é a que apresenta o melhor perfil como polinizadora, por conjugar número de anteras/flor, número de grãos de pólen/antera e capacidade germinativa do pólen mais satisfatórios.

The objective of this study was to evaluate the number of anthers per flower, the number of pollen grains per anther and the pollen germination capacity of different cultivars of apple trees. The study was performed at the Physiology and Plant Genetics Laboratory of Federal University of Santa Catarina. The field collecting were performed at Epagri / Caçador Experimental Station, in Santa Catarina State during October, 2005. It was used the following apple cultivars developed in Brazil: Primícia, Princesa, Fred Hough, Catarina, Baronesa, Lisgala, Suprema, Condessa, Daiane, Duquesa, Imperatriz and Joaquina. It was concluded that the apple cultivars Condessa, Princesa, Eva, Duquesa, Imperatriz, Gala, Fred Hough, Daiane, Baronesa and Suprema produce pollen grains of satisfactory quantity and of good germination capacity. The cv. Condessa, although having high pollen germination capacity, produces less anthers and less pollen grains per anther than the others. Princesa is the cultivar of best pattern as pollinizer, once it combines number of anthers/flower, number of pollen grains/anther and pollen germination capacity in a better satisfactory level.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento do tubo polínico em cruzamentos entre cultivares brasileiras de macieira. Realizou-se a polinização dirigida entre cultivares com mesma época de floração (34 cruzamentos). As polinizações foram realizadas em três estigmas de cada uma das dez flores emasculadas por cruzamento. O crescimento dos tubos polínicos foi avaliado por meio da técnica da fluorescência, em flores coletadas 120 horas após a polinização. Na grande maioria das polinizações cruzadas, houve alta percentagem de tubos polínicos que cresceram até o ovário. O acompanhamento do crescimento do tubo polínico pela técnica de fluorescência permite separar cruzamentos compatíveis ou parcialmente compatíveis dos incompatíveis.

The objective of this study was to evaluate pollen tube growth in crosses between Brazilian apple cultivars. Artificial pollination was carried out among cultivars that bloom at the same time (34 crosses). Pollination was done on three stigmas in each of the ten emasculated flowers per crossing. Fluorescence was used to visualize pollen tube growth in flowers collected 120 hours after pollination. In most of the cross-pollinations, high percentage of pollen tubes reached the ovary. The visualization of pollen tube growth by the fluorescence technique permitted the separation of compatible or partial compatible crosses from the incompatible ones.

Uma das prioridades do Programa de Melhoramento Genético de Macieira da Epagri é a obtenção de cultivares resistentes à mancha foliar de glomerella - MFG, doença essa causada principalmente pela espécie Colletotrichum gloeosporioides, que tem causado elevadas perdas na produção. Os resultados obtidos neste estudo têm, dentre outras, a finalidade de subsidiar os programas de melhoramento genético da macieira na seleção de parentais, objetivando a incorporação de resistência genética à MFG nas futuras novas cultivares. Para tanto, o primeiro passo é a identificação de germoplasma portador dos genes de resistência. No presente trabalho, foram utilizados 3 isolados de C. gloeosporioides provenientes de diferentes regiões produtoras de maçã. Estes isolados foram inoculados em 245 acessos pertencentes ao Banco de Germoplasma de Macieira - BGM, da Epagri / Estação Experimental de Caçador - EECd, SC. Para a inoculação em tecido foliar, a concentração de conídios foi ajustada para 10³ esporos/mL. Após 72h de incubação, sob temperatura de 25ºC, foi realizada a avaliação da incidência para presença ou ausência de sintomas e para a severidade da doença. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com três repetições. As diferenças de severidade entre os acessos foram testadas através da Anova não paramétrica Kruskal Wallis. Entre os acessos testados, 187 (76,3%) manifestaram resistência e 58 (23,7%) suscetibilidade à MFG. Entre as cultivares suscetíveis, não houve diferença no grau de severidade de ataque da MFG.

One of the priorities at this moment of the apple tree genetic breeding program in the south of Brazil is the obtainment of resistant cultures to the Gala Leaf Spot (MFG) disease. This illness is caused mainly by the fungus Colletotrichum gloeosporioides, what has been causing great loss in the apple production. To solve this problem, the first step is to select the resistant germoplasm, that will supply the resistant genes. In this research we used 3 isolates of C. gloeosporioides from different apple producer locations, and 245 samples belonging to the Active Germoplasm Bank Apple Tree from the Experimental station of EPAGRI in Caçador, Santa Catarina. For the inoculation of the leaf tissue, the concentration of the conidia was adjusted to 10³ spore/ml. After 72 hours of incubation at 25ºC, were evaluated for the presence and absence of the symptom and its severity, through the diagrammatic scale. The experimental delineation was completely by randomized with 3 repetitions. The severity differences among the samples were tested through the Anova non-parametric Kruskal Wallis test. Among the tested samples, 185 were resistant and 32 susceptible. From those susceptible, there was not a difference in the severity degree of the MFG attack. The data obtained in this study can help in the choice of resistant samples, that could be used as a parentage in the genetic breeding programs of the apple tree, to obtain the resistance to this disease.

A produção de maçã vem sendo comprometida pela ocorrência de muitas doenças, entre as quais se destaca a Mancha Foliar de Glomerella (MFG), causada por Colletotrichum spp. O primeiro relato dessa doença em maçã foi registrado em plantas próximas a pomares de citrus no Estado de São Paulo, Brasil. A origem da MFG ainda não está bem clara, e estudos baseados na filogenia permitirão relacionar o organismo evolutivamente, possibilitando caracterizar possíveis mecanismos divergentes de evolução. A amplificação da região 5.8S-ITS (espaçador interno transcrito) do rDNA de 51 isolados de Colletotrichum patogênicos em de maçã, goiabeira serrana e citrus produziu um fragmento de aproximadamente 600 pares de bases (pb) para todos os isolados analisados. Os fragmentos amplificados foram digeridos por enzimas de restrição, sendo obtidos fragmentos de 90 a 500pb. O sequenciamento dessa região permitiu a construção de uma árvore filogenética com a distribuição dos isolados em cinco grupos, independentemente de seus hospedeiros. A partir da comparação in silico, foi possível verificar uma variação de 93 a 100% de similaridade entre as sequências estudadas e o banco de dados do GenBank. O agente causal da MFG está relacionado (agrupado) a isolados de goiabeira serrana e aos isolados padrões de citrus.

Several diseases have affected apple production, among them there is Glomerella leaf spot (GLS) caused by Colletotrichum spp. The first report of this disease in apple was in plants nearby citrus orchards in São Paulo State, Brazil. The origin of this disease is still not clear, and studies based on the molecular phylogeny could relate the organisms evolutionarily and characterize possible mechanisms of divergent evolution. The amplification of 5.8S-ITS (Internal Transcribed Spacer) of rDNA of 51 pathogenic Colletotrichum spp. isolates from apples, pineapple guava and citrus produced one fragment of approximately 600 bases pairs (bp) for all the isolates analyzed. The amplified fragments were cleaved with restriction enzymes, and fragments from 90 to 500bp were obtained. The sequencing of this region allowed the generation of a phylogenetic tree, regardless of their hosts, and 5 isolated groups were obtained. From the "in silico" comparison, it was possible to verify a variation from 93 to 100% of similarity between the sequences studied and the Genbank data base. The causal agent of GLS is nearly related (clustered) to isolates of pineapple guava and to the citrus isolates used as control.

Dentre todas as fruteiras de clima temperado, a macieira é a que mais atenção tem recebido no sentido de se obterem porta-enxertos com características de boa adaptação, resistência ou sanidade. O desenvolvimento de um método eficiente para caracterizar genótipos com tolerância ao alumínio é o primeiro passo para a realização de estudos de mecanismos genéticos envolvidos na herança desse caráter. Assim, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a tolerância ao alumínio dos porta-enxertos de macieira M.9 e Marubakaido em cinco concentrações (0; 50;150; 250 e 350 µM L-1) em solução nutritiva. As estacas de Marubakaido, na concentração intermediária de alumínio apresentaram menor crescimento radicular e aéreo. O M.9 mostrou menor crescimento radicular nas concentrações de 250 e 350 mM de alumínio. As características de crescimento avaliadas permitiram discriminar o porta-enxerto Marubakaido como mais tolerante que o M.9, e a concentração de 350 µM L-1 é a mais eficiente para a discriminação da tolerância ao alumínio aos 15 dias de cultivo em solução nutritiva.

Among all of the temperate fruit trees, the apple tree is the one that has attracted more attention when it comes to obtaining rootstocks with characteristics of good adaptation, resistance or sanity. The development of an efficient method to characterize genotypes with tolerance to the aluminum is the first step for the accomplishment of genetic mechanisms studies involved in the inheritance of this character. Thus, the present work aimed to evaluate the tolerance to aluminum of the apple tree rootstocks M.9 and Marubakaido in five concentrations (0, 50, 150, 250 and 350 µM L-1) in nutritious solution. The cuttings of Marubakaido, in the intermediate concentration of aluminum presented smaller root and aerial growth. M.9 showed smaller root growth in the concentrations of 250 and 350 µM of aluminum. The evaluated growth characteristics permitted to identify the apple rootstock Marubakaido as more tolerant than the M.9, and the concentration of 350 µM L-1 is the most efficient to identify the tolerance to aluminum in the 15 days of cultivation in nutritious solution. It is expected that later, this data can be used in works of individuals' selection in segregated populations accomplished in crossings with these two apple rootstocks.

Acca sellowiana (Myrtaceae) é uma frutífera nativa da região Sul do Brasil e nordeste do Uruguai, que vem despertando grande interesse devido ao alto potencial organoléptico de seus frutos. Neste trabalho, teve-se como objetivo a caracterização do tipo de sistema de incompatibilidade atuante em A. sellowiana, através da avaliação do desenvolvimento dos tubos polínicos. Utilizaram-se dois acessos: 458, sendo autocompatível, e 101, auto-incompatível. A maior porcentagem de germinação de grãos de pólen foi observada no acesso 101, com 68,8% de grãos de pólen germinados. Não foram observadas diferenças no crescimento dos tubos polínicos em pistilos autopolinizados ou de polinização cruzada, em ambos os acessos. O crescimento completo do tubo polínico até o ovário ocorreu em pistilos coletados 96 horas após a polinização, independentemente do tratamento aplicado. Sugere-se a ocorrência de auto-esterilidade ou auto-incompatibilidade tardia ou pós-zigótica, considerando que o abortamento dos frutos de A. sellowiana é uniforme e ocorre num prazo curto, por volta de 20 a 30 dias após a fertilização das flores.

Acca sellowiana (Myrtaceae) is a native fruit species from the South Brazil and northeast Uruguay which is attracting great interest due to the high organoleptic potential of its fruits. In this study we aimed to characterize the type of incompatibility system which occurs in A. sellowiana, through the evaluation of the polinic tube development. Two accesses were used: being 458 self-compatible and 101 self- incompatible. The highest percentage of pollen grains germination, 68,8%, was observed in the access 101. It was not observed differences in the growth of the polinic tubes between self-pollinated pistils and cross-pollinated ones in both accesses. The complete growth of the polinic tube until reaching the ovary occurred only in pistils collected 96 hours after the polinization, independent of the treatment. The data suggests the occurrence of self-sterility, or a delayed or post-zygotic self-incompatibility in the species, considering that the abortion of A. sellowiana fruits is uniform and occurs in a short period of time, around 20 to 30 days, after the fertilization of the flowers.

The pineapple guava (Acca sellowiana), known in portuguese as the goiabeira-serrana or "Feijoa", is a native fruit tree from southern Brazil and northern Uruguay that has commercial potential due to the quality and unique flavor of its fruits. Knowledge of genetic variability is an important tool in various steps of a breeding program, which can be facilitated by the use of molecular markers. The conservation of repeated sequences among related species permits the transferability of microsatellite markers from Eucalyptus spp. to A. sellowiana for testing. We used primers developed for Eucalyptus to characterize A. sellowiana accessions. Out of 404 primers tested, 180 amplified visible products and 38 were polymorphic. A total of 48 alleles were detected with ten Eucalyptus primer pairs against DNA from 119 A. sellowiana accessions. The mean expected heterozygosity among accessions was 0.64 and the mean observed heterozygosity 0.55. A high level of genetic diversity was also observed in the dendrogram, where the degree of genetic dissimilarity ranged from 0 to 65% among the 119 genotypes tested. This study demonstrates the possibility of transferring microsatellite markers between species of different genera in addition to evaluating the extent of genetic variability among plant accessions.

O objetivo deste trabalho foi resgatar embriões imaturos de porta-enxertos de macieira Malus prunifolia (Marubakaido) e Malus pumila (M9) depois de 40 e 60 dias de polinização e colocá-los em meio de cultura MS suplementado com ágar (6 g L-1) e hidrolisado de caseína (500 mg L-1). Embriões originados do cruzamento interespecífico dirigido e de polinização aberta mostraram diferenças significativas in vitro, tendo sido observadas diferenças quanto ao progenitor feminino, quanto à fase de desenvolvimento do embrião e à composição do meio de cultura. Embriões do porta-enxerto M. pumila, resgatados aos 40 dias depois da polinização e colocados em meio de cultura suplementado com ácido indolacético (AIA), ácido giberélico (GA3), cinetina e maltose, resultaram em desenvolvimento normal das plantas. Porém, foi observada alta porcentagem de embriões oxidados (96,2%), originados de polinização dirigida, cultivados em meio com 14 µM de AIA, 5 µM de cinetina e 1,5 µM de GA3 (MS1), principalmente para o cruzamento M. prunifolia e M. pumila. Embriões de polinização aberta de M. prunifolia x M. pumila formaram calos. Foi possível identificar a influência do progenitor feminino, pelo incremento de brotações de M. pumila derivada de polinização aberta e dirigida. O cruzamento de espécies responsivas e o uso da técnica de cultura de embrião promoveram germinação rápida e uniforme e, por conseguinte, o desenvolvimento de mudas normais.

The objetive of this work was to rescue immature embryos of apple rootstocks Malus prunifolia (Marubakaido) and Malus pumila (M9) after 40-60 days of pollination and to put them into MS culture media supplemented with agar (6 g L-1) and casein hydrolysate (500 mg L-1). Embryos originated from interspecific crosses and open pollination showed differences in the in vitro responses, depending on the female parent, the developmental stage of the embryo, and the culture medium composition. Embryos of the M. pumila rootstock, rescued within 40 days after pollination and put in culture medium supplemented with indolacetic acid (IAA), gibberellic acid (GA3), kinetin and maltose, resulted in a normal development of plantlets. However, embryos originating from hand-pollination, cultivated in medium supplemented with 14 µM IAA, 5 µM kinetin and 1.5 µM Ga3 (MS1), mainly those of M. prunifolia x M. pumila, showed a high percentage of rusted embryos (96.2%). Embryos from open pollination of M. prunifolia and M. pumila formed calluses. It was possible to identify the influence of the female parent by the enhanced development of M. pumila shoots derived from open or hand-pollination. The crossing of responsive species and the use of the technique of embryo culture provided a rapid and uniform germination and, consequently, the development of fully normal seedlings.

No presente trabalho, estudaram-se características associadas à germinação in vitro e ao desenvolvimento in vivo do tubo polínico em seis variedades-copa e de porta-enxertos de macieira como subsídios para o estabelecimento de programas de melhoramento genético. Utilizou-se de pólen de seis cultivares de macieira inoculado em meio de cultura com ágar (10 g.L-1) em água destilada, combinados com concentrações de sacarose (0; 10; 20; 30; 40 e 50%) e ácido bórico (0 e 40 mg.L-1). Para o estudo do desenvolvimento do tubo polínico, realizou-se coleta das flores em quatro períodos (6; 12; 24 e 48 horas após as polinizações) em M9 x Marubakaido e a autofecundação em M9, sendo os tubos polínicos analisados em coloração de azul de anilina acidificada/carmim acético e em fluorescência. A sacarose, em concentrações entre 15% a 25%, pode ser empregada com sucesso para a germinação in vitro de grãos de pólen da macieira. O ácido bórico não teve efeito positivo para esta característica. Na ausência do ácido bórico e na presença de 15% de sacarose, observaram-se os maiores percentuais de germinação: Fuji (51,1%), Imperatriz (31,7%), M.9 (20,8%), Catarina (19,2%), Gala (13,7%) e Marubakaido (6,1%). Quanto ao desenvolvimento do tubo polínico, com 12 horas da polinização, iniciou-se a germinação no pólen, no estigma, no cruzamento M.9 x Marubakaido, e após 24 horas da polinização observou-se 83% de germinação. As técnicas de coloração com azul de anilina acidificada com carmim acético e de visualização em fluorescência foram eficientes na visualização e coloração dos grãos de pólen e do desenvolvimento dos tubos polínicos.

In the present work it was studied features associated to the germination of pollen and the development of pollen tubes in six apple varieties as subsidies for the establishment of genetic improvement programs. Pollen grains were inoculated in culture medium with distilled water, agar (10 g. L-1), combined with sucrose at 0, 10, 20, 30, 40 and 50% and boric acid at 0 and 40 mg. L-1. For the study of pollen tubes development flowers were collected at 6, 12, 24 and 48 hours after antesis in M.9 x Marubakaido and in the self-pollinated M.9, being the pollen tubes analyzed in staining with blue aniline with acetic carmim and in fluorescence. Sucrose in concentrations ranging from 15% to 25% can successfully be used for the in vitro germination of pollen grains. Boric acid was not effective in promoting in vitro germination of pollen grains. In the absence of boric acid and in the presence of 15% of sucrose it was observed the largest germination rates: Fuji (51.1%), Imperatriz (31.7%), M.9 (20.8%), Catarina (19.2%), Gala (13.7%), and Marubakaido (6.1%). In the crossing M.9 x Marubakaido after 12 hours of pollination the pollen germination began in the stigma and after 24hrs it was observed 83% of germination. The techniques employed were efficient in the visualization and coloration of the pollen grains and of development of tube pollen.

A microenxertia pode ser uma alternativa eficiente para a propagação de plantas de elevada qualidade genética e fitossanitária, em um reduzido período de tempo e sob condições controladas. O objetivo deste trabalho foi realizar a microenxertia em plantas micropropagadas sob efeito dos fitorreguladores AIB e BAP, nas combinações de Gala/M9 e Gala/Marubakaido. Para a combinação Gala/Marubakaido, foi constatado o menor número de folhas para o tratamento com 2,2 µM de AIB, e para os demais tratamentos não houve diferença significativa. Após a aclimatização, a sobrevivência dos microenxertos foi de 92,5% para combinação Gala/Marubakaido e 88,5% para Gala/M9. O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Bioquímica e Morfogênese Vegetal (CCA - UFSC).

The micrografting technique can provide an efficient production of high quality genetic plants, in a short time period and under controlled and aseptic conditions. The aim of this work was the study of micrografting technique by using in vitro plants and verifying the influence of application of growth regulators IBA and BAP, in Gala/M9 and Gala/Marubakaido scion-rootstock combinations. The combination Gala/Marubakaido had the lowest number of leaves when treated with 2,2 µM of IBA. However none of the other treatments had significant statistical differences. After acclimatization, the survivor rates from the micrografts were 92,5% to Gala/Marubakaido combination and 88,5% to Gala/M9. This study was developed in the Biochemistry and Vegetal Morphogeneses Laboratory (CCA - UFSC).

A dormência em sementes de macieira é um dos fatores limitantes para o avanço nos programas de melhoramento genético nesta espécie. Assim, o presente estudo objetivou estudar a germinação in vitro de embriões dormentes do porta-enxerto de macieira M9, oriundos da EE São Joaquim da EPAGRI/SC. Os embriões foram excisados de sementes maduras e inoculados em meio basal MS, adicionado de sacarose (30 g.L-1), ágar (6 g.L-1), água de coco (15%), caseína hidrolisada (CH) (500 mg.L-1), AIA (0 e 14 µM); AG3 (0 e 1,5 µM), Kin (5 µM), 2-iP (12 µM); BAP (4 µM). As culturas foram mantidas no escuro por 10 dias e transferidas para sala de crescimento sob regime de luz de 16 horas, temperatura de 25 ± 2°C e 40 µmol de radiação luminosa. A maior percentagem de germinação (75%) foi obtida em meio MS suplementado com CH (500 mg.L-1), AIA (14 µM), AG3 (1,5 µM) e Kin (5 µM). Quando a Kin foi substituída por BAP (4µM), observou-se a formação de calo, sobre o qual se originaram gemas e brotações, cujos valores médios foram de 2,3 brotos por embrião e 12,3 gemas por brotação. Em relação ao comprimento das brotações, não houve diferença significativa entre os tratamentos. A maior percentagem de indução de calos ocorreu em meio de cultura suplementado com AIA, Kin e 2-iP. O meio de cultura MS/2 suplementado com CH e água de coco e isento de fitorreguladores, resultou em 25% de germinação. Já, o número de raízes foi maior no meio de cultura MS suplementado com AIA (14 µM), AG3 (1,5 µM) e CH. O comprimento médio das raízes (4,0 cm) não foi afetado por nenhum tratamento em particular. Desta forma, esta técnica é uma alternativa eficiente ao uso de tratamentos de frio para a superação da dormência.

The embryo dormancy in apple is a limiting factor in breeding programs with this species. Thus the present work was carried out in order to study the in vitro germination of M9 apple dormant embryos, originated from the Experimental Station of São Joaquim (EPAGRI/SC). The embryos, excised from mature seeds were inoculated in the basal culture medium MS supplemented with of sucrose (30 g.L-1), coconut water (15%), casein hydrolysate (CH) (500 mg.L-1), AIA (0 and 14 µM); GA3 (0 and 1.5 µM); and three citokinins sources: (Kin (5 µM); 2iP (12 µM) and BAP (4 µM). The culture medium was gellified with agar (6 g.L-1). The cultures were maintained in the dark during 10 days, then transferred to growth room under 16 hours of light period, 25 ± 2°C, temperature, and 19 µE.m-2.s-1 of luminous radiation. The results showed that the highest value for embryo germination (75%) was obtained in MS culture medium supplemented with CH, AIA (14 µM), GA3 (1.5 µM), and Kin (5 µM). When, in this treatment the Kin was replaced by BAP (4 µM), it was observed the callus induction and the subsequent proliferation of buds and shoots, reaching values of 2.3 shoots/embryos and 12.3 buds/shoot. The length of shoots was 4 cm, without statistical differences between the different treatments. The highest percentage of callus induction occurred in culture medium supplemented with AIA, Kin, and 2-iP. The culture medium MS half strength supplemented with CH, coconut water and free of growth regulators resulted in values of 25% of germination. The root number was highest in the culture medium supplemented with AIA (14 µM), GA3 (1.5 µM), and CH. The average root length (4.0) was not affected by any particular treatment. Thus, this technique is an efficient alternative to the cool treatments for dormancy suppression.

Com o objetivo específico de obter uma população segregante, visando à avaliação na frutificação efetiva, quantidade de sementes normais e peso e diâmetro de frutos oriundos de polinização aberta e dirigida, foram realizados cruzamentos entre dois porta-enxertos de macieira, Marubakaido (Malus prunifolia Borkh.) e M.9 (Malus pumila Mill.) na Estação Experimental de São Joaquim -- EPAGRI/SC. 'Marubakaido' apresentou florescimento mais precoce e mais prolongado que a cultivar M.9. A percentagem de frutificação efetiva, para o porta-enxerto 'M.9' usado como progenitor feminino, foi de 26% e 32%, e usado como doador de pólen, foi de 5% e 25%, no anos de 1999 e 2000, respectivamente. Foram encontrados frutos deformados nos cruzamentos de 'M.9' X 'Marubakaido' e com um maior número de sementes atípicas quando comparadas ao sistema de polinização aberta. O mesmo não ocorreu no cruzamento recíproco. O peso e o diâmetro dos frutos foram maiores quando houve a polinização dirigida em 'M.9', o mesmo não acontecendo com 'Marubakaido', comparativamente à polinização aberta. A análise via contrastes ortogonais revelou valores de F significativos também para número de sementes normais e anormais frente aos dois sistemas de polinização em 'M.9'.

This work had as objective to evaluate the fruit set, fruit weight and diameter and amount of normal and atypical seeds of two apple rootstocks in both open and artificial pollination conditions. Crosses among 'Marubakaido' (Malus prunifolia Borkh.) and 'M.9' (Malus pumila Mill) and reciprocal were performed at Estação Experimental de São Joaquim -- EPAGRI/SC. 'Marubakaido' required least cool temperatures to blooming and kept longer than M.9 cultivar. The percentage of effective fruit set when 'M.9' were used as female was 26% and 32% and when it was used as pollen donor, 5% e 25%, in 1999 and 2000, respectively. The cross 'M.9' X 'Marubakaido' produced deformed fruits, with a higher number of atypical seeds, in comparison with the open pollination system. The same results did not occurred in the reciprocal cross. The 'M.9' fruit weight and diameter were larger in the artificial crosses than in those produced by open pollination. No differences among pollination systems for the same variables were found in 'Marubakaido'. In addition, orthogonal contrast analyses revealed significant F values for number of normal seeds, number of atypical seeds when pollination systems in 'M.9' were compared.

A cultura in vitro de embriões permite desenvolver estudos nas áreas de fisiologia e melhoramento, possibilitando o resgate de embriões imaturos, oriundos de cruzamentos que podem ser incompatíveis. Em macieira, geralmente, os embriões imaturos apresentam dormência e baixa germinação. O objetivo deste trabalho foi testar concentrações de BAP (6-benzilaminopurina) em diferentes períodos de imersão para superação da dormência e germinação de embriões imaturos de macieira. Os embriões foram extraídos de sementes retiradas de frutos oriundos do cruzamento entre os porta-enxertos de macieira Marubakaido (Malus prunifolia) x M9 (Malus pumilla), realizado em plantas matrizes cultivadas na Epagri -- São Joaquim (SC). Os 50 frutos colhidos ao acaso foram submetidos a uma esterilização com etanol 96º por 10 min e após com solução de hipoclorito de sódio a 2% por 20 min. As sementes foram submetidas a uma desinfestação, utilizando-se etanol 70% por 30 s e solução de hipoclorito de sódio 1,25% por 15 min, seguindo-se três lavagens com água esterilizada e autoclavada. Os embriões foram inoculados em 10 ml de meio MS/2, suplementado com 100 mg.L-1 de mio-inositol, 30 g.L-1 de sacarose e com BAP (0, 6 e 12 mg.L-1) e 6 g.L-1 de agar, com pH ajustado para 5,8. Os embriões foram mantidos por 24 ou 48 horas neste meio e depois transferidos para um meio MS/2 sem regulador vegetal. Não ocorreu contaminação nem oxidação em nenhum embrião. A concentração de BAP que promoveu maior crescimento dos embriões foi de 6 mg.L-1, mas o melhor aspecto quanto à intensidade de coloração e formação de brotos foi obtido utilizando-se 12 mg.L-1.

The embryos culture in vitro allows studies in the physiology breeding areas, facilitating the rescue of immature embryos, originated from incompatible crossings. In apple, the immature embryos generally present dormancy and lower germination. The objective of this work was to test concentrations of BAP in different immersion periods for break of the dormancy and germination of apple immature embryos. The embryos were extracted from fruits seeds originated from the crossing between apple rootstock Marubakaido and M.9, accomplished in adult plants in Epagri - São Joaquim (SC). The 50 collected fruits were submitted to a sterilization with alcohol 96º for 10 minutes and after with NaClO solution (2%) for 20 minutes. The removed seeds were submitted to a disinfestations treatment with alcohol 70% for 30 seconds and with NaClO solution (1,25%) for 15 minutes, followed by three washes with sterilized water and autoclaved. The embryos were inoculated in 10 ml of MS/2 culture medium, to which was added 100 mg.L-1 of myo-inositol, 30 g.L-1 of sucrose and with BAP (0, 6 and 12 mg.L-1) and 6 g.L-1 of agar and with pH adjusted to 5.8. The embryos were maintained by 24 or 48 hours in this medium and later transferred for a medium MS/2 without growth regulators. There was no contamination or oxidation. The concentration that promoted larger growth of the embryos was of 6 mg.L-1. However, the best general aspect in the coloration intensity and formation of sprouts was obtained when medium containing 12 mg.L-1 was utilized.

A macieira (Malus sp.) cultivada em solos ácidos com pH inferior a 5,0 pode apresentar distúrbios nutricionais e inibição de crescimento causados por níveis tóxicos de Al que podem afetar a absorção do Ca, o qual apresenta estreita correlação com a produção de frutos de melhor qualidade. O objetivo deste trabalho foi verificar a tolerância ao Al em 18 somaclones e três cultivares porta-enxertos provenientes da seleção in vitro. As plântulas foram cultivadas durante 45 dias em copos de plástico de 300 mL contendo solução nutritiva e utilizando-se sílica lavada como substrato. Os valores obtidos foram submetidos à análise multivariada pelos componentes principais e agrupamento hierárquico baseado no método de Ward, o qual revelou ser mais adequado na classificação dos clones quanto à tolerância ao Al do que os testes de médias. O porcentual de redução na matéria seca da parte aérea e no número de folhas foram características que melhor possibilitaram a discriminação dos clones. Os clones foram classificados em três grupos: bem sensível ou não tolerante, moderadamente tolerante e tolerante.

The apple trees (Malus sp.) cultivated in soils with pH below 5.0 may present nutritional disorders and growth restriction due to the presence of high toxic levels of Al that may affect the Ca absorption, which shows a narrow correlation with fruits of better quality. The aim of this work was to verify the tolerance to Al in 18 apple rootstocks somaclones and three cultivars originated from in vitro selection. The plantlets were cultivated in 300 mL plastic glasses with washed silica in nutrient solution for 45 days. The obtained values were submitted to a multivariate analysis by the main components and hierarchical grouping based on Ward method, which showed to be more appropriate to classify the clones with relationship to the tolerance to Al than the tests of averages. The reduction percentage in the dry matter of the shoots and in the number of leaves were characteristic that best permitted clones discrimination. Three groups of clones could be classified such as: no tolerant, slightly tolerant and tolerant.