Objetivo: Acessar a citotoxicidade e genotoxicidade do tratamento intravítreo de adalimumabe em um modelo experimental animal utilizando técnicas citológicas e moleculares. Métodos: Dezoito coelhos foram aleatoriamente selecionados em três grupos: controle, tratamento intravítreo com adalimumabe e placebo. Os efeitos tóxicos nas células da retina foram avaliados através de ensaios de citometria de fluxo, para a determinação de atividade apoptótica e necrótica. A genotoxidade foi avaliada através de ensaios cometa para determinar danos ao DNA e através de PCR em tempo real para avaliar a expressão genética de caspases (8 e 3) promotoras de apoptose celular. Resultados: Não foram detectadas citotoxicidade e genotoxidade nos dois grupos de tratamento, adalimumabe e placebo, em comparação com o controle. A citometria de fluxo determinou que mais de 90% das células eram viáveis após o tratamento, e uma pequena quantidade de células da retina apresentaram apoptose (~10%) ou necrose (<1%) em todos os grupos. O dano molecular também foi baixo com uma degradação no DNA de no máximo 6,4% detectados nos ensaios cometa. Adicionalmente, não foram observados aumentos na expressão genética das caspases que induzem a apoptose através dos ensaios de PCR em tempo real. Conclusão: O tratamento intravítreo com adalimumabe não promoveu nenhuma citotoxicidade e genotoxicidade detectável em células da retina por até sessenta dias. Estes resultados, portanto, indicam que o adalimumabe pode ser uma opção segura para o tratamento de doenças oculares inflamatórias em que o TNFα está envolvido.

Purpose: To assess the cytotoxicity and genotoxicity of intravitreal adalimumab treatment in an animal experimental model using cytological and molecular techniques. Methods: Eighteen rabbits were randomly assigned to three groups: control, adalimumab treatment, and placebo. Cytotoxicity on retinal cells was evaluated using flow cytometry assays to determine the level of apoptosis and necrosis. Genotoxicity was evaluated by comet assays to assess DNA damage, and quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) was used to evaluate expression of apoptosis-inducing caspases (8 and 3). Results: No cytotoxicity or genotoxicity was observed in any of the two treatment groups (adalimumab and placebo) following intravitreal administration compared with the control group. Flow cytometry analysis revealed that more than 90% of the cells were viable, and only a low proportion of retinal cells presented apoptotic (~10%) or necrotic (<1%) activity across all groups. Molecular damage was also low with a maximum of 6.4% DNA degradation observed in the comet assays. In addition, no increase in gene expression of apoptosis-inducing caspases was observed on retinal cells by qPCR in both the adalimumab and placebo groups compared with the control group. Conclusion: The use of adalimumab resulted in no detectable cytotoxicity or genotoxicity on retinal cells for up to 60 days upon administration. These results therefore indicate that adalimumab may be a safe option for intravitreal application to treat ocular inflammatory diseases in which TNF-α is involved.

RACIONAL: O número de neoplasias vem aumentando de maneira preocupante. O tratamento cirúrgico constitui-se em uma das modalidades terapêuticas mais eficientes para os tumores sólidos. O implante neoplásico em ferida operatória é complicação cujo percentual de ocorrência relatado na literatura é variável, porém configura alta morbidade e grande dificuldade terapêutica. A proteção da ferida operatória é um dos princípios de cirurgia oncológica recomendados, entretanto pouco estudado. OBJETIVO: Avaliar a influência da proteção de ferida operatória no desenvolvimento de implante tumoral na ferida operatória. MÉTODOS: Foram utilizadas linhagens de células tumorais do Sarcoma 180, com inoculação intraperitoneal em camundongos Swiss. Após o estabelecimento da ascite neoplásica, os animais foram randomizados em dois grupos de 10, cada grupo composto por cinco machos e cinco fêmeas. Nos dois grupos foi realizada laparotomia e manipulação de órgãos intra-abdominais. Em um grupo a laparotomia foi realizada utilizando a proteção da ferida abdominal e no outro grupo sem proteção. No 9º dia pós-operatório foi realizada avaliação macroscópica da cicatriz operatória, sendo esta removida posteriormente para avaliação microscópica. RESULTADOS: Houve infiltração microscópica de células tumorais na ferida operatória em todos animais. Porém, no grupo em que se realizou a proteção da ferida a infiltração foi menos intensa quando comparado ao grupo sem proteção. A infiltração também foi mais intensa nas fêmeas do que nos machos do mesmo grupo. CONCLUSÃO: A infiltração tumoral na ferida operatória foi mais intensa no grupo em que não foi realizada a proteção da ferida operatória e nas fêmeas quando comparadas aos machos do mesmo grupo.

BACKGROUND: The number of malignancies increased alarmingly. Surgery constitutes one of the most efficient therapeutic modalities for the treatment of solid tumors. The neoplastic implant in surgical wound is a complication whose percentage of occurrence reported in the literature is variable, but sets with high morbidity and therapeutic difficulties. Protecting the wound is one of the recommended principles of oncologic surgery. AIM: To evaluate the influence of wound protection in the development of tumor implantation. METHODS: Sarcoma 180 tumor cells were used, with intraperitoneal inoculation in Swiss mice. After the establishment of neoplastic ascites, animals were randomized into two groups of 10, each group consisting of five males and five females. In both groups, laparotomy and manipulation of intra-abdominal organs was performed. In a group laparotomy was performed using the protection of the abdominal wound and the other group without it. On the 9th postoperative day macroscopic evaluation of the operative scar was performed, which was later removed for microscopic evaluation. RESULTS: There was microscopic infiltration of tumor cells in the wound of all animals. However, the group that held the protection, infiltration was less intense when compared to the group without it. The infiltration was also more severe in females than in males of the same group. CONCLUSION: Tumor infiltration into the wound was more intense in the group in which the protection of the surgical site was not performed, and in females when compared to males of the same group.