A presente pesquisa visou elucidar quais aspectos da resposta imune em Diatraea flavipennella são suprimidos pelo parasitoide Cotesia flavipes, para garantir o sucesso do parasitismo. Investigou-se a presença de células em apoptose no corpo gorduroso pela técnica de TUNEL. De acordo com os resultados verificou-se redução nos níveis de oxido nítrico e na atividade da fenoloxidase nas lagartas parasitadas, aos três dias, e redução do número total de hemócitos aos três e sete dias. Na contagem diferencial, observou-se aumento no número de plasmatócitos e redução de esferulócitos, no terceiro dia de parasitismo. O número de micro-esferas melanizadas, nas lagartas parasitadas, foi inferior mostrando uma melanização menos intensa. A análise ultra-estrutural comfirmou o efeito imunossupressor de C. flavipes para suprimir a resposta de encapsulação em D. flavipennella, pois, somente foi evidenciado à formação de cápsula de hemócitos, aderidas à superfície das micro-esferas, nas lagartas não parasitadas. Como efeito do parasitismo, foi registrado ainda no terceiro dia presença de hemócitos e células do corpo gorduroso em apoptose, além deste último apresentar aspecto de degeneração. Conclui-se que C. flavipes suprimi a resposta imunológica celular e humoral de D. flavipennella e afeta drasticamente o tecido gorduroso.

The present research aimed to elucidate which aspects of immune responses in Diatraea flavipennella are suppressed by the parasitoid Cotesia flavipes, thus, ensuring parasitism success. We investigated the presence of apoptosis in fat body cells through the TUNEL technique. According to the results, reduced levels of nitric oxide and phenoloxidase activity were observed in larvae parasitized for three days, and reduced total number of hemocytes, after three and seven days. An increase in plasmatocytes and decrease in spherulocytes numbers were observed in the differential count on the third day of parasitism. The number of melanized microspheres in parasitized larvae was low and indicated less intense melanization. The ultrastructural analysis confirmed the immunosuppressive effect of C. flavipes on the encapsulation response of D. flavipennella because only the formation of hemocytes capsules, adhered to the microspheres' surface, was evidenced in non-parasitized caterpillars. The effect of parasitism was also recorded on the third day with the presence of hemocytes and apoptosis in fat body cells, including aspects of degeneration in the latter. We concluded that C. flavipes suppresses cellular and humoral immunological responses in D. flavipennella and drastically affects the host's fat tissue.

Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos de Metarhizium anisopliae, sobre Diatraea flavipennella e investigar sua resposta imune. Foi observado o efeito de M. anisopliae sobre lagartas de D. flavipennella, pulve-rizado nas concentrações de 103, 104, 105 conídios/mL, no qual apresentou diferenças com relação ao período larval, prolongando até 72,0 dias nos tratamentos e 25,0 dias na testemunha. Os resultados referentes aos hemócitos revelaram que as células mais frequentes quando pulverizado nas concentrações de 103, 105, 107 conídios/mL foram prohemócitos, esferulócitos, plas-mócitos e granulócitos, em relação aos adipohemócitos e oenocitóides. O nível de oxido nítrico apresentou diferença entre a testemunha e a concentração 107 conídios/mL (24h), enquanto a atividade de fenoloxidase foi semelhante entre os tratamentos em 24h e superior na concentração 107 conídios/mL (60h). No perfil bioquímico dos hemócitos, houve uma alteração em carboidratos, lipídios e proteínas em reação ao fungo. Os resultados indicam que o fungo M. anisopliae pode ser utilizado no Manejo Integrado de D. flavipennella, por apresentar patogenicidade e interferir no seu desenvolvimento mesmo quando expostas a pequenas concentrações.

This work aimed to evaluate the effects of Metarhizium anisopliae on Diatraea flavipennella and investigate their immune response. Was observed the effect of M. anisopliae against larvae of D. flavipennella sprayed at concentrations of 103, 104, 105 conidia / mL, in which showed differences relative the larval period, extending up to 72.0 days in treatment and 25.0 days in the control. The results for hemocytes revealed that the most frequent cells when sprayed at the concentrations of 103, 105, 107 conidia / mL were the prohemocytes, spherulocytes, plasmatocytes and granulocytes in relation to adipohemocytes and oenocytoids. The level of nitric oxide was different between the control and the concentration 107 spores / mL (24), while the activity of phenoloxidase was similar among treatments in 24 and higher concentration 107 spores / mL (60h). In biochemical profile of hemocytes was a change in carbohydrates, lipids and proteins in response to the fungus. The results indicate that the fungus M. anisopliae can be used in the Integrated Management of D. flavipennella by presenting pathogenicity and interfere with their development even when exposed to small concentrations.

Fungos entomopatogênicos e o percevejo predador Podisus nigrispinus (Dallas) podem ocorrer simultaneamente nos agroecossistemas infectando o mesmo inseto alvo ou alvos diferentes. O contato durante a disseminação do fungo ou pulverização, caminhamento em superfícies vegetais tratadas e predação de indivíduos contaminados estão entre as possíveis vias de interação entre fungos entomopatogênicos e percevejos predadores. Este trabalho avaliou o impacto de três isolados de cada um dos fungos Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. (866, 1022 e 1189) e Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (604, 634 e 561) sobre ninfas e adultos de P. nigrispinus pelas vias de contato, residual seco e ingestão de presas contaminadas, em laboratório. M. anisopliae ocasionou maior mortalidade do predador que B. bassiana, tanto por contato como por resíduo seco do fungo. Entre as vias de infecção dos fungos o contato causou maior mortalidade do predador. Não houve confirmação de mortalidade de adultos em nenhuma das vias de infecção pelos isolados testados. A predação de larvas de Alabama argillacea (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) contaminadas com os fungos afetou a produção de ovos das fêmeas adultas, porém o mesmo não foi constatado quando adultos alimentaram-se de presas contaminadas. Os resultados sugerem que isolados de M. anisopliae podem causar mortalidade de ninfas de P. nigrispinus por contato, enquanto os isolados de B. bassiana foram de menor impacto em todas as vias de infecção estudadas, comparados aos isolados de M. anisopliae.

Entomopathogenic fungi and the predatory stinkbug Podisus nigrispinus (Dallas) can target simultaneously the same or different pests in agroecosystems. Topical contact during fungal dispersion or spraying, walking on plant surfaces and ingestion of contaminated prey are some of possible ways of interactions between fungi and the predatory stinkbug. The impact of three isolates of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. (866, 1022 and 1189) and Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (604, 634 and 561) against nymphs and adults of P. nigrispinus was investigated under laboratory conditions. M. anisopliae caused higher mortality compared to B. bassiana either by topical application or by dry residue on cotton leaves. Topic contact with both fungi caused higher mortality to the predator. No mortality confirmation was reported for the adults. Nymphs fed with cotton leafworm larvae Alabama argillacea (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) contaminated by the fungi had their reproduction affected, but this was not observed when adult predators fed on contaminated larvae. These findings suggest that isolates of M. anisopliae can cause mortality of P. nigrispinus nymphs by topical contact, while isolates of B. bassiana were less harmful by all ways of infection as compared to M. anisopliae.

Inseticidas químicos são amplamente usados para o controle da traça-das-crucíferas, Plutella xylostella (L.). Esta é considerada a principal praga das crucíferas em todo o mundo e o surgimento de resistência de P. xylostella tem sido freqüentemente relatado. Este trabalho investigou as diferentes interações dos fungos Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. e Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. com o parasitóide de larva-pupa Oomyzus sokolowskii (Kurdjumov) sobre larvas de P. xylostella. O experimento foi conduzido à temperatura de 26 ± 1°C, UR de 75 ± 5% e fotofase de 12h, empregando-se delineamento inteiramente casualizado, constando de oito tratamentos com seis repetições cada. Foram utilizados os isolados E9 de M. anisopliae e ESALQ 447 de B. bassiana, na concentração de 10(7) conídios ml-1. Os resultados mostram que M. anisopliae e B. bassiana reduziram o parasitismo de P. xylostella por O. sokolowskii . Por outro lado, efeitos aditivos no controle de P. xylostella foram evidenciados nas diferentes combinações dos fungos com o parasitóide, exceto para B. bassiana quando pulverizado 24h antes da exposição a O. sokolowskii. Os fungos M. anisopliae e B. bassiana foram mais eficientes quando aplicados após a exposição das larvas ao parasitóide, e a eficiência de O. sokolowskii foi influenciada negativamente pela presença dos fungos independente da combinação. A associação dos fungos com o parasitóide apresentam potencial para serem testados em campo, objetivando o controle de P. xylostella bem como favorecer economicamente o sistema produtivo das brássicas.

Chemical insecticides are broadly applied to control diamondback moth, Plutella xylostella (L.). Diamondback moth is a major pest of cruciferous worldwide, and resistance of this pest to insecticide has been often reported. Thus, this research investigated the interactions among the fungi Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok., Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., and the larval-pupal parasitoid Oomyzus sokolowskii (Kurdjumov) before and after application of the fungi on DBM larvae offered to the parasitoid. The experiment was carried out at 26 ± 1ºC, 75 ± 5% RH and 12h photophase using a completely randomized design, with eight treatments with six replications each. The isolates E9 of M. anisopliae and ESALQ 447 of B. bassiana, were used at the concentration of 10(7) conidia ml-1. The results showed that M. anisopliae and B. bassiana reduced the parasitism of P. xylostella by O. sokolowskii. Additive effects were found on the mortality of P. xylostella with the different combinations among the fungi and parasitoid, except for the treatment B. bassiana inoculated 24h before exposition of the larvae to O. sokolowskii. The isolates were more efficacious when applied after exposition of the larvae to the parasitoid. The efficiency of O. sokolowskii was negatively influenced by the presence of the fungi, mainly when the fungi were applied 24h before diamondback's larvae were exposed to the parasitoid. The association of the fungi with the parasitoid presents potential to be tested in field. The use of these natural enemies in the integrated management of P. xylostella may economically improve the cabbage productive system, especially for organic farming.

Este trabalho investigou o efeito de seis plantas daninhas [Ageratum conyzoides L., Amaranthus hybridus L., Bidens pilosa L., Desmodium tortuosum (Sw.), Euphorbia heterophylla L., Ricinus communis L.] e do algodoeiro Gossypium hirsutum L cv. CNPA Precoce 1, na biologia de Podisus nigrispinus (Dallas). Ovosdo predador foram fixados às plantas e, posteriormente, os insetos foram alimentados com pupas de Tenebrio molitor (L.) (Coleoptera: Tenebrionidae) até a morte. Para avaliar a preferência para oviposição, fêmeas acasaladas foram confinadas em gaiolas contendo plantas daninhas e algodoeiro, observando-se a seleção da planta para oviposição através do número de posturas e ovos. D. tortuosum propiciou o mais rápido desenvolvimento ninfal de P. nigrispinus. A viabilidade da fase ninfal não foi afetada em relação à espécie de planta e fêmeas produzidas em R. communis foram mais leves em relação às produzidas em G. hirsutum. Fêmeas mantidas em A. conyzoides tiveram maior fecundidade, enquanto aquelas mantidas em D. tortuosum, E. heterophylla e R. communis apresentaram a menor fecundidade. A taxa líquida de reprodução (Ro) e o tempo médio da geração (T) de P. nigrispinus foram maiores em A. conyzoides e menores em R. communis. A taxa intrínseca de crescimento populacional (r m) e a razão finita de crescimento (lambda) foram maiores em B. pilosa e menores em G. hirsutum. Dentre as plantas estudadas P. nigrispinus preferiu ovipositar em A. hybridus e B. pilosa. Os resultados sugerem que plantas daninhas como A. conyzoides, B. pilosa e A. hybridus podem beneficiar a colonização e manutenção de P. nigrispinus no agroecossistema algodoeiro por fitofagia.

This study investigated the effects of six weeds [Amaranthus hybridus L., Desmodium tortuosum (Sw.), Euphorbia heterophylla L., Ageratum conyzoides L., Bidens pilosa L., Ricinus communis L.] and the cotton plant Gossypium hirsutum L. CNPA Precocious 1 on Podisus nigrispinus (Dallas) life history characteristics and oviposition behavior. The study begun with P. nigrispinus eggs placed on plants and caged throughout up to female death. Egg production and selected plant for oviposition by P. nigrispinus were investigated caging mated females on weeds and cotton plants simultaneously. Nymphal development of P. nigrispinus was shorter on D. tortuosum and longer on A. hybridus. Nymphal viability was not affected by any species of plant studied. Nymphs reared on R. communis produced females weighting less compared to the other plant species. The weed A. conyzoides promoted higher female fecundity compared to those females reared on D. tortuosum, E. heterophylla and R. communis. The demographic parameters net reproductive rate (Ro) and mean generation time (T) of P. nigrispinus were higher for females reared on A. conyzoides, while the intrinsic rate of population increase (r m) and finite rate of increase (lambda) suggest that better performance of the predator will be yielded on B. pilosa. The weed plants A. hybridus and B. pilosa were significantly preferred by P. nigrispinus females to lay eggs. These results suggest that the weeds A. conyzoides, B. pilosa and A. hybridus can benefit the colonization and maintenance of P. nigrispinus in the cotton ecosystem by phytophagy.

Inicialmente realizou-se a seleção dos isolados ESALQ 447, ESALQ 760, ESALQ 900, ESALQ 634, IPA-205 e ESALQ 760 de B. bassiana e de ESALQ E9, IPA-207, ESALQ 860, IPA-204 e UFPE 3027 de M. anisopliae na concentração de 10(8) conídios/ml para lagartas do segundo estádio de Plutella xylostella (L.). Todos os isolados testados causaram mortalidade de lagartas variando de 70% a 96%, exceto para o isolado UFPE 3027 de M. anisopliae, cuja mortalidade foi apenas de 26%. Baseado nesta seleção, os isolados de B. bassiana ESALQ 634 e ESALQ 447 e de M. anisopliae IPA-207 e ESALQ E9 foram escolhidos e avaliados nas concentrações de 10(5), 10(6), 10(7) e 10(8) conídios/ml sobre lagartas do segundo estádio de P. xylostella. Estes isolados nas concentrações superiores a 10(6) ocasionaram mortalidade de lagartas variando de 58% a 96%. O tempo letal (TL50) para larvas do segundo ínstar da traça-das-crucíferas foi de 1,1 a 4,3 dias e de 0,7 a 5,8 dias para os isolados ESALQ 634 e ESALQ 447 de B. bassiana e IPA-207 e ESALQ E9 de M. anisopliae, respectivamente. Os valores da concentração letal (CL50) evidenciam que os isolados IPA-207 e ESALQ E9 de M. anisopliae foram cerca de sete vezes mais virulentos para a traça-das-crucíferas que os isolados ESALQ 634 e ESALQ 447 de B. bassiana. Estes resultados indicam que lagartas de P. xylostella foram mais suscetíveis ao fungo M. anisopliae que B. bassiana, evidenciando que os isolados IPA-207 e ESALQ E9 de M. anisopliae têm potencial para serem utilizados no manejo integrado da traça-das-crucíferas.

An initial screening was undertaken using the isolates ESALQ 447, ESALQ 760, ESALQ 900, ESALQ 634, IPA-205 and ESALQ 760 of B. bassiana, and ESALQ E9, IPA-207, ESALQ 860, IPA-204 and UFPE 3027 of M. anisopliae at the concentration of 10(8) conidia/ml for the diamondback moth (DBM) second instar. All isolates tested caused DBM larval mortality ranging from 70% to 96%, except the M. anisopliae isolate UFPE 3027, which resulted in a mortality of 26%. Based on this survey the isolates ESALQ 634 and ESALQ 447 of B. bassiana and IPA-207 and ESALQ E9 of M. anisopliae were chosen and assessed at the concentrations 10(5), 10(6), 10(7) and 10(8) conidia/ml for DBM second instar. These selected isolates at concentrations higher than 10(6) conidia/ml caused DBM larval mortality ranging from 58% to 96%. The mean lethal time (LT50) for DBM second instar were 1.1 and 4.3 days, and 0.7 and 5.8 days for B. bassiana isolates ESALQ 634 and ESALQ 447 and M. anisopliae isolates IPA-207 and ESALQ E9, respectively. Based on the lethal concentrations (LC50) the isolates IPA-207 and ESALQ E9 were seven times more virulent to DBM second instar than B. bassiana isolates ESALQ 634 and ESALQ 447. These results showed that DBM larvae were more susceptible to M. anisopliae than to B. bassiana and that M. anisopliae isolates IPA-207 and ESALQ E9 may be a valuable component for the integrated management of DBM larvae.

Isolados dos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. foram testados sobre lagartas de Castnia licus (Drury), coletadas nos canaviais da Destilaria Tabu, em Caaporã-PB. Foram utilizados os isolados de código 645, 604, 512, 447, IPA 205, IPA 202, 610, IPA 198, IPA 214 e CG 001 de B. bassiana, bem como os isolados de código 1172, 866, PL 47, IPA 204, CG 423, UOD, 860, IPA 216, E9 e CG 100 de M. anisopliae, provenientes de diferentes hospedeiros e localidades. Na concentração de 10(8) conídios/ml, a percentagem de mortalidade provocada pelos isolados de B. bassiana variou de 53,3 a 83,3%, com Tempo Letal (TL50) compreendido entre 8,5 e 14,8 dias, sendo que o isolado 645 apresentou maior potencial para o controle de C. licus. Para os isolados de M. anisopliae, o percentual de lagartas mortas variou de 43,3 a 80%, com os valores de TL50 compreendidos entre 7,3 e 17,9 dias, sendo o isolado 1172 o mais virulento. As concentrações letais (CL50) para o isolado 645 de B. bassiana e 1172 de M. anisopliae foram de 1,17 x 10(7) conídios/ml e 2,34 x 10(7) conídios/ml, respectivamente, demonstrando que ambos isolados foram patogênicos para a fase larval de C. licus.

Isolates of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. were tested against Castnia licus (Drury) larvae, collected from Tabu Distillery sugar cane fields, in Caaporã-PB. The isolates code 645, 604, 512, 447, IPA 205, IPA 202, 610, IPA 198, IPA 214 and CG 001 of B. bassiana, as well as the isolates code 1172, 866, PL 47, IPA 204, CG 423, UOD, 860, IPA 216, E9 and CG 100 of M. anisopliae, originated from different hosts and localities, were tested. At the concentration of 10(8) conidia/ml, the percentage of mortality caused by isolates of B. bassiana ranged from 53.3% to 83.3%, with Lethal Time (LT50) ranging from 8.5 to 14.9 days. The isolate 645 presented the highest potential to control C. licus. For M. anisopliae isolates, the percentage of larval mortality ranged from 43.3 to 80%, with LT50 ranging from 7.3 to 18.0 days. The isolate 1172 was the most virulent. The lethal concentrations (LC50) for the isolates 645 of B. bassiana and 1172 of M. anisopliae, were 1,17 x 10(7) conidia/ml and 2,34 x 10(7) conidia/ml, respectively, thus showing that both isolates are pathogenic to larval phase of C. licus.

Verificou-se a viabilidade e virulência de conídios puros de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. isolado 447, armazenado por longos períodos em baixa temperatura. O experimento iniciou-se no Laboratório de Patologia de Insetos do Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola da ESALQ-USP (Piracicaba, SP) e teve seqüência no Laboratório de Patologia de Insetos do Departamento de Agronomia da UFRPE (Recife, PE), durante o período de abril de 1992 a janeiro de 1999. O fungo foi produzido em arroz pré-cozido e os conídios puros, com umidade de 15,5% foram armazenados em freezer, à temperatura de -7 ± 1ºC. Após 0, 5, 8, 50, 75 e 80 meses de armazenamento, a viabilidade dos conídios foi avaliada em meio BDA e a virulência foi testada sobre larvas de Diatraea saccharalis (F.). O fungo manteve viabilidade de 100% em todos os tratamentos, com elevada virulência sobre larvas de D. saccharalis. Os resultados de TL50 e porcentagens de mortalidade foram de 3,0 dias e 92,0%; 3,86 e 96,0%; 3,97 e 92,0% ; 4,05 e 94,0% e 4,0 e 96,0 %; 4,1 dias e 94,0% , respectivamente. O armazenamento em freezer é, portanto, uma forma adequada de conservação de conídios puros de B. bassiana por pelo menos 80 meses.

The viability (germination capability) and virulence of the fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill strain 447 was assessed after long term storage at a low temperature.. The experiments were initiated at the Laboratory of Insect Pathology of the Department of Entomology, Phytopathology and Zoology, ESALQ-USP (Piracicaba, SP) and concluded at the Laboratory of Insect Pathology, Department of Agronomy UFRPE (Recife, PE) conducted from May 1992 to January 1999. The fungus was produced on rice, and pure conidia with 15. 5 % RH was stored in a freezer at -7±1ºC. The conidial viability and virulence towards Diatraea saccharalis larvae after 0, 5, 8, 50, 75 and 80 months of storage were evaluated. The stored fungus maintained 100% viability in all tratments and freezing was proven a good procedure for storing pure conidia of B. bassiana for at least 80 months. LT50 and mortality rate were 3.02 days and 92%, 3.86 and 96%, 3.97 and 92%, 4.05 and 94% and 3.97 and 96%, 4.10 days and 94%, respectively.

Este estudo visou a elaboração de formulações experimentais com micélios de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae. Os experimentos foram desenmvolvidos no laboratório de Patologia de Insetos do Departamento de Entomologia da Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, em Piracicaba, São Paulo, Brasil. As formulações foram preparadas com alginato de sódio e amido de milho pregelatinizado e submetidas às temperaturas de 25,30 e 35ºC 1ºC. O amido de milho pregelatinizado foi mais adequado que o alginato de sódio para elaboração de formulações com micélios de B. bassiana e M. anisopliae.

This research deals with preparation of experimental formulations with mycelia of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae. The formulations were prepared with sodium alginate and pre-gelatinized corn-starch. They were kept at 25, 30 and 35±1ºC. Pre-gelatinized corn starch was more suitable that the sodium alginate for the preparations of formulations with mycelia of B. bassiana and M. anisopliae.