O objetivo do presente trabalho foi isolar e tipificar micro-organismos presentes em linfonodos hipertrofiados ou lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose colhidos de 12 caprinos e 28 ovinos abatidos no matadouro público do município de Patos, Paraíba. A identificação de micobactérias foi feita com o método PRA (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Também foi realizado o exame histopatológico das lesões. Os órgãos afetados foram fígado, pulmão, glândula mamária, bexiga e linfonodos mediastínicos, mesentéricos, submandibulares, parotídeos, poplíteos, pré-crural, pré-escapular e inguinal superficial. O exame histopatológico apontou a presença de granulomas em 8 (20,00%) animais. Dos 12 caprinos, 1 (8,33%) foi positivo no cultivo de micobactérias, e pelo método PRA o isolado foi classificado como pertencente ao complexo M. tuberculosis. Dois (7,14%) ovinos foram positivos para a presença de micobactérias ambientais. Houve isolamento de Corynebacterium pseudotuberculosis em 8 (66,66%) caprinos e em 17 (60,71%) ovinos, e isolamento simultâneo de micobactérias e C. pseudotuberculosis em 1 (8,33%) caprino e 1 (3,57%) ovino. O isolamento de micobactéria do complexo M. tuberculosis em caprinos no presente trabalho levanta preocupações do ponto de vista de saúde pública, uma vez que profissionais envolvidos na manipulação destes animais, bem como a população consumidora de carne e leite, estão expostos ao risco de infecção.

The aim of this work was to isolate and characterize microorganisms in hypertrophied lymph nodes or gross lesions suggestive of tuberculosis collected from 12 goats and 28 sheep slaughtered at the public slaughterhouse of Patos municipality, Paraíba State, in the Northeast region of Brazil. The identification of mycobacteria was performed by the PRA method (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Histopathological examination of lesions was also performed. Organs affected were liver, lung, mammary gland, bladder and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid, popliteal, precrural, prescapular and superficial inguinal lymph nodes. Histopathological examination showed the presence of granulomas in 8 (20.00%) animals. Of the 12 goats, 1 (8.33%) was positive in the culture of mycobacteria, and by PRA method the isolate was classified as belonging to the M. tuberculosis complex. Two (7.14%) sheep were positive for the presence of environmental mycobacteria. There was isolation of Corynebacterium pseudotuberculosis in 8 (66.66%) goats and 17 (60.71%) sheep, and simultaneous isolation of mycobacteria and C. pseudotuberculosis in 1 (8.33%) goat and 1 (3.57%) sheep. The isolation of mycobacteria of the M. tuberculosis complex in goats in this study raises concerns of public health, as professionals involved in handling these animals and the meat and milk consumers are exposed to the risk of infection.

Os psitacídeos são um dos grupos de aves mais ameaçadas no mundo e diversas espécies brasileiras são classificadas desde vulneráveis à criticamente ameaçadas de extinção. Torna-se, portanto, necessário identificar os agentes que causam infecções em animais selvagens em cativeiro e determinar os riscos relacionados de modo a intervir sobre os fatores envolvidos para diminuir a possibilidade de surtos de doenças e promover a conservação de espécies ameaçadas. O objetivo deste estudo foi identificar Escherichia coli Enteropatogência (EPEC) de isolados cloacais de psitacídeos assintomáticos em cativeiro e avaliar a distribuição do patotipo EPEC. Suabes cloacais foram coletados de 46 psitacídeos assintomáticos e os isolados foram testados pela reação em cadeia pela polimerase (PCR) para a presença do gene attaching and effacing (eae) e bundle forming pilus (bfpA) de EPEC. Amostras oriundas de diversas espécies foram testadas e três amostras resultaram positivas para os genes eae e bfp e caracterizadas como EPEC típicas. Esse é o primeiro relato em psitacídeos assintomáticos para esse patotipo. Apesar de que algumas cepas de E.coli serem mais patogênicas do que outras, diversos fatores devem ser considerados para determinar o potencial de isolados de E.coli de causar doença em psitacídeos em cativeiro. Aves positivas para cepas de EPEC (típicas) poderiam ser fontes de infecção zoonóticas e adquirir essas cepas através do contato com humanos e animais domésticos. Esses achados também podem ser valiosos para o manejo a longo prazo de espécies ameaçadas ex situ já que uma amostra de EPEC foi isolada de um Papagaio-de-cara-roxa (Amazona brasiliensis).

Psittaciformes are one of the most endangered groups of birds, and several Brazilian species are classified between vulnerable and critically endangered. It is thus necessary to identify agents that cause infections in captive wild animals and to assess the risks posed thereof and to design interventions to minimize the possibility of disease outbreaks, leading to the conservation of endangered species. The purpose of this study was to identify enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) cloacal isolates from asymptomatic psittacines in captivity and evaluate the distribution of the EPEC pathotype. Cloacal swabs were obtained from 46 asymptomatic birds, and resulting isolates were tested by polymerase chain reaction (PCR) for the presence of the attaching and effacing gene (eae) and bundle-forming pilus structural gene (bfpA) of EPEC. Samples from several species were tested, and three samples were found to be positive for the eae and bfpA genes and characterized as typical EPEC. This is the first report of this pathotype in asymptomatic psittacines. Although certain E. coli strains are more pathogenic than others, various factors should be considered when determining the potential of E. coli isolates to cause disease in captive psittacines. Birds that are positive for the EPEC (typical) strain could be zoonotic sources of infection, and may have acquired these strains through contact with humans or domestic animals. These findings may also be valuable for the long-term management of endangered species ex situ as one EPEC sample was isolated from a Red-tailed Amazon (Amazona brasiliensis).

A total of 8,058 male and female mixed-breed goats and 1-4 years of age were slaughtered over a period of 7 months at the public slaughterhouse of Patos city, Paraíba state, in the Northeast region of Brazil; 822 animals were inspected for gross lesions of tuberculosis, and 12 (1.46%) had lesions suggestive of tuberculosis in the mammary gland, lungs, liver and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid and prescapular lymph nodes. Presence of granulomatous lesions was confirmed in the submandibular lymph node of one (8.3%) goat at the histopathological examination and at the mycobacterium culture the same sample was confirmed positive. Isolate was confirmed as belonging to the M. tuberculosis complex by PCR restriction enzyme analysis (PRA). Spoligotyping identified the isolate into spoligotype SB0295 on the M. bovis Spoligotype Database website (www.mbovis.org), and it was classified as M. bovis. The occurrence of M. bovis in goats in this study suggests that this species may be a potential source of infection for humans and should be regarded as a possible problem in the advancement of control and eradication program for bovine tuberculosis in Brazil.

Sêmen bovino experimentalmente contaminado com a estirpe Leptospira santarosai Sorovar Guaricura foi utilizado para verificar a porcentagem de recuperação de leptospiras, utilizando o meio de EMJH com 5-fluorouracil (300 mg/L) e ácido nalidíxico (20 mg/L), denominado "meio seletivo", associado à técnica das diluições seriadas. O meio seletivo EMJH foi encontrado com porcentagem de recuperação mais elevada e com menos perda de amostras devido à contaminação com microorganismos oportunistas quando comparado com o meio EMJH não seletivo, que foram encontrados, respectivamente, com 151/376 (40.0%) de crescimento positivo e 38/376 (10.0%) de contaminação, 58/376 (15%) e 129/376 (34.0%). Estes resultados foram estatíticamente significantes (p<0, 0001; Fisher). Diferenças foram encontradas quando as freqüências de leptospiras recuperadas foram comparadas com a técnica de diluição seriada (10-1 a 10-4) e entre os meios seletivo e não-seletivo, em diferentes níveis de diluição. À diluição de 1/10, as porcentagens encontradas foram (0%, 0/80) e (38%, 30/80); à diluição 1/100, (3%, 2/80) e (49%, 39/80); e à diluição 1/1000, (25%, 20/80) e (50%, 40/80), respectivamente. A porcentagem de recuperação de leptospiras foi diretamente proporcional às diluições empregadas. A metodologia das diluições seriadas (estabelecendo pelo menos três diluições) e o uso de meio EMJH seletivo mostraram ser eficientes no isolamento de leptospiras presentes nas amostras de sêmen bovino.

Bovine semen experimentally contaminated with Leptospira santarosai serovar Guaricura was submitted to the modified EMJH medium with 5-fluorouracil (300mg/L) and nalidixic acid (20mg/L), named as "selective medium" and using the serial dilution technique, in order to evaluate the percentage of recovery of the added microorganism. The selective EMJH medium was found with higher percentage of recovery of leptospiras and minor losses of samples due to contamination with opportunistic microorganisms than the non-selective EMJH medium: 151/376 (40.0%) of positive growth; and 38/376 (10.0%) contamination and 58/376 (15%) and 129/376 (34.0%), respectively. These results were statistically significant (p<0. 0001; Fisher). Differences were found when the frequencies of positive leptospires recovery have been compared in the serial dilution technique (10-1 to 10-4) between the selective and non-selective media at different dilution factors. At 1/10th dilution the percentages found were (0%, 0/80) and (38%, 30/80), at 1/100th dilution, (3%, 2/80) and (49%, 39/80) and at 1/1,000th dilution, (25%, 20/80) and (50%, 40/80), respectively. The percentage of recovery of leptospires was found to be directly proportional to the dilution used. The methodology of the serial dilution technique (setting at least three dilutions) and the use of selective EMJH medium have been found to be efficient for the isolation of leptospires from the bovine semen samples.

A piometra é uma enfermidade da cadela adulta, sendo a doença reconhecida como uma das causas mais comuns de morte desta espécie animal. Os objetivos deste trabalho foram a avaliação de aspectos microbiológicos e histopatológicos da piometra canina e pesquisa de fatores de virulência de E. coli, identificando possíveis riscos para a saúde humana. Foi realizado o exame microbiológico de conteúdo intra-uterino de 100 cadelas com piometra bem como a contagem de unidades formadoras de colônias de microrganismos nestas amostras, testes de susceptibilidade "in vitro" aos antimicrobianos de E. coli e pesquisa de fatores de virulência nestas estirpes, e exame histopatológico de amostras de útero. Escherichia coli foi o microrganismo mais freqüentemente isolado (76,6%), sendo que 120 estirpes (79,5%) foram positivas para os genes sfa, 86 (56,9%) foram positivas para cnf, 87 (57,6%) foram positivas para pap, 52 (34,4%) foram positivas para hly, 51 (33,8%) foram positivas para iuc e 5 (3,3%) foram positivas para afa. Observou-se maior sensibilidade de E.coli à norfloxacina, polimixina B, sulfazotrim, cloranfenicol e enrofloxacina. Em 42% das amostras de parede uterina nas quais foram isolados microrganismos, os tamanhos das áreas de processo inflamatório corresponderam a 39-56%. Foram identificados fatores de virulência em 98,0% das estirpes de Escherichia coli avaliadas, demonstrando uma alta freqüência de E. coli potencialmente patogênica. Deve-se considerar que os cães são animais que vivem em proximidade aos homens há milhares de anos e possuem um papel importante na transmissão de E. coli aos outros animais e também ao homem.

As pyometra is recognized as one of the main causes of disease and death in the bitch the purposes of this study were to evaluate microbiological and histopathological aspects of canine pyometra and to research the virulence factors of the E. coli isolates identifying possible risks to human health. The microbiological isolation from the intrauterine contents of 100 dogs with pyometra was carried out and the virulence factors in the E. coli strains were identified using PCR method. This study also consisted of the counting of microorganisms colonies forming units in samples of intrauterine content, tests of antimicrobial susceptibility of the E. coli isolates and the histological examination of the uterus. E. coli was the most prevalent microorganism isolated (76.6%) and 120 strains (79.5%) were positive for sfa, 86 (56.9%) were positive for cnf, 87 (57.6%) were positive for pap, 52 (34.4%) were positive for hly, 51 (33.8%) were positive for iuc and 5 (3.3%) were positive for afa genes. One observed more sensitivity of E. coli to norfloxacin, polimixin B, sulphazotrin, chloranfenicol and enrofloxacin. In 42% of the samples of uterine walls where microorganisms were isolated, the sizes of the areas of the inflammatory responses corresponded to 39-56%. Virulence factors were identified in 98.0% of the strains evaluated, demonstrating a high frequency of potentially pathogenic E. coli. It must be considered that dogs are animals that are living in close proximity to man for thousands of years and have an important role in the transmission of E. coli to other animals and to man.

O conhecimento da microbiota que compõe as diferentes áreas do organismo tem importância reconhecida para a compreensão de doenças infecciosas que podem acometer os avestruzes, embora se disponha de dados limitados acerca deste assunto na literatura. Foi objetivo deste estudo determinar as espécies de microrganismos (bactérias aeróbias e fungos) que compõem a microbiota normal de avestruzes. Para tanto, foram coletadas amostras de cloaca (N=50) e orofaringe (N=50) de avestruzes hígidos de um criadouro. Das amostras de cloaca, foram isolados Escherichia coli (76% das amostras positivas), Bacillus spp. (60%), Streptococcus spp. (18%), Staphylococcus coagulase-negativo (16%), Pseudomonas aeruginosa (8%), Rhodotorula spp. (8%), dentre outros microrganismos isolados em cultura pura ou em associação com outras bactérias e/ou fungos. Das amostras de orofaringe, foram isolados E. coli (74% das amostras positivas), Candida albicans (44%), Bacillus spp. (38%), Staphylococcus coagulase-negativo (32%), Klebsiella pneumoniae (32%), Rhodotorula spp. (8%), Criptococcus spp. (4%), dentre outros microrganismos isolados em cultura pura ou em associação com outras bactérias e/ou fungos. Verificou-se predominância de bactérias Gram negativas em relação às Gram positivas, nas microbiotas da cloaca e orofaringe. Verificou-se freqüência de ocorrência semelhante entre bactérias Gram negativas nas microbiotas da cloaca e orofaringe, bem como de bactérias Gram positivas nestes mesmos sítios. Observou-se maior ocorrência de leveduras em amostras de orofaringe quando comparadas com as de cloaca.

The knowledge of the microbiota present in different parts of the organism is important for the understanding of the infectious diseases of ostriches, although limited literature is available on this matter. The objective of this study was to determine the species of microorganisms (aerobic bacteria and fungi) that form the normal microbiota of ostriches. Samples from cloaca (N=50) and oropharynx (N=50) were collected from healthy ostriches of a breeder. In samples from cloaca, the following microorganisms were isolated: Escherichia coli (76% of the positive samples), Bacillus spp. (60%), Streptococcus spp. (18%), coagulase-negative Staphylococcus (16%), Pseudomonas aeruginosa (8%), Rhodotorula spp. (8%), among others, considering that these microorganisms were isolated in pure culture or associated with other bacteria and/or fungi. In samples collected from oropharynx, the following microorganisms were isolated: E. coli (74% of the positive samples), Candida albicans (44%), Bacillus spp. (38%), coagulase-negative Staphylococcus (32%), Klebsiella pneumoniae (32%), Rhodotorula spp. (8%), Criptococcus spp. (4%), among others, considering that these microorganisms were isolated in pure culture or associated with other bacteria and/or fungi. A predominance of Gram negative bacteria in relation to Gram positive ones was observed in the microbiotas of cloaca and oropharynx. A similar frequence of occurrence between Gram negative bacteria in the microbiotas of cloaca and oropharynx, as well as Gram positive bacteria in these same areas, was verified. A higher occurrence of yeasts was observed in samples of oropharynx when compared to samples from cloaca.

A inativação de leptospiras em misturas de sêmen, obtidas através de vagina artificial, de três touros holandeses, foi estudada. A concentração espermática foi ajustada em diluidor gema-citrato utilizando os seguintes tratamentos: A (controle; sem antibióticos); B (penicilina, 1000 UI/mL - estreptomicina, 1000 µg/mL); C (amoxicilina, 1000 µg/mL); D (ceftiofur sódico, 1000 µg/mL); E (amoxicilina 1000 µg/mL - ceftiofur sódico 1000 µg/mL). Leptospiras (2,0x10(6) leptospiras/mL) foram adicionadas ao sêmen diluído. A recuperação das leptospiras foi obtida em meio EMJH modificado semi-sólido, com e sem antibióticos. As médias da porcentagem de motilidade progressiva e a de motilidade individual progressiva dos espermatozóides não foram afetadas pelos antibióticos nas concentrações usadas. Penicilina-estreptomicina apresentou os melhores resultados na inativação das leptospiras (97.1%). Amoxicilina, ceftiofur sódico e suas combinações, nas concentrações estudadas, apresentaram resultados insatisfatórios: 59.29%; 32.5% e 60.36% de inativação, sendo menos efetivos na inativação das leptospiras do que penicilina-estreptomicina.

Inactivation of leptospires in pools of semen from three Holstein Friesian bulls, collected in an artificial vagina, was investigated. Spermatic concentration was adjusted in egg yolk citrate extender, submitted to the following treatments: A (control; without antibiotics); B (penicillin, 1,000 UI/mL - streptomycin, 1,000 µg/mL); C (amoxicillin, 1,000 µg/mL); D (ceptiofur sodium, 1,000 µg/mL); E (amoxicillin 1,000 µg/mL - ceptiofur sodium 1,000 µg/mL). Leptospires (2.0 x 10(6) leptospires/mL) were added into the diluted semen. Recovery of leptospires was obtained in modified EMJH semi-solid medium with and without antibiotics. The antibiotics in the concentrations used did not affect means of percentage of progressive motility and individual progressive motility of spermatozoids. Penicillin-streptomycin presented the best results in leptospire inactivation (97.1%). Amoxicillin, ceptiofur sodium and their combination at the concentrations studied presented poor results: 59.29%; 32.5% and 60.36% of inactivation, being less effective in leptospire inactivation than penicillin-streptomycin.