Culturas como maçã, morango e tomate estão entre os alimentos de maior contaminação por uso de pesticidas no Brasil. Pensando nisso, a otimização multivariada do método QuEChERS, acoplado ao CG-ECD, foi proposta a fim de investigar os níveis de resíduos dos pesticidas clorpirifós, dimetoato, malationa, mevinfós, pedimentalina, simazina e trifluralina em maçãs, morangos e tomates produzidos no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil. O processo envolveu os planejamentos fatorial completo 2(4) e Doehlert seguido de validação do método modificado e aplicação em 91 amostras reais coletadas durante os anos de 2010 e 2011. As modificações realizadas no método proporcionaram aumento de detectabilidade e valores satisfatórios de linearidade, precisão e exatidão. Nas amostras reais, resíduos de pelo menos um pesticida (> LOQ) foram encontrados em 8 (27,6%) amostras de maçãs, 12 (40,0%) morangos e 17 (53,1%) tomates. Os resultados indicaram a necessidade de monitoramento contínuo para o uso destes pesticidas em frutas e vegetais.

Apple, strawberry and tomato are among the foods with higher contamination for pesticide use in Brazil. Thereby, a multivariate optimization of the QuEChERS method coupled to GC-ECD was proposed to investigate the level of pesticides residues clorpyrifos, dimethoate, malathion, mevinphos, pedimentalina, simazine and trifluralin in apple, strawberries and tomatoes produced in Santa Catarina state, South of Brazil. The process involved a two-level full factorial and Doehlert designs followed by validation of the modified method and its application in 91 real samples collected during the years 2010 and 2011. Modifications in the method provided increased detectability and satisfactory values of linearity, accuracy and precision. In real samples, residues of at least one pesticide (> LOQ) were found in 8 (27.6%) apple, 12 (40.0%) strawberry and 17 (53.1%) tomato samples. The results indicated the necessity of continuous monitoring for pesticide use in fruits and vegetables.

Cepas de Micrococcaceae são aplicadas em embutidos cárneos fermentados como culturas iniciadoras, onde vários membros desta família são naturalmente encontrados. O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar Staphylococcus xylosus de embutidos cárneos artesanais produzidos na região Sul do Brasil. Dos 89 isolados que apresentaram atividades positiva para catalase e negativa para coagulase, 25 cepas foram selecionadas para caracterização fenotípica. Nove cepas identificadas como Staphylococcus xylosus por API-STAPH foram avaliadas para capacidade de redução de nitratos e o crescimento satidfatório das cepas foi verificado na presença de nitrito e NaCl, demonstrando seu potencial para utilização como culturas iniciadoras em embutidos cárneos fermentados. As cepas foram ainda avaliadas quanto ao gênero e espécie através da reação em cadeia da polimerase e apenas duas cepas foram identificadas como S. xylosus, diferindo dos resultados encontrados na caracterização fenotípica.

Micrococcaceae strains are applied to fermented sausage as starter cultures, where several members of this family are naturally found. The aim of the present work was to isolate and characterize Staphylococcus xylosus from artisanal sausages produced in South Region of Brazil. From 89 isolates presenting catalase positive and coagulase negative activities, 25 strains were selected for phenotypic characterization. Nine strains identified as Staphylococcus xylosus by API-STAPH were evaluated for their nitrate reduction capacity, which showed satisfactory growth of the strains in the presence of nitrite and sodium chloride, demonstrating their potential for use as starter cultures in fermented sausage. The strains were also evaluated through genus and species-specific PCR, which showed only two as S. xylosus, differing from results found in phenotypic characterization.

Investigamos a viabilidade de cepas de Staphylococcus xylosus (AD1 e U5) isoladas de embutidos com fermentação natural, para aplicação como cultivos iniciadores em embutidos fermentados produzidos na Região Sul do Brasil. O estudo demonstrou que cepas de Staphylococcus xylosus (AD1 e U5) apresentaram crescimento significativo durante a fermentação, estabilidade no processo de liofilização e conservação, ausência de produção de enterotoxinas e viabilidade para aplicação como cultivo iniciador simples ou associado com bactérias lácticas na elaboração de embutidos fermentados.

Viability of Staphylococcus xylosus isolated from artisanal sausages for application as starter cultures in meat products Viability of Staphylococcus xylosus strains AD1 and U5isolated from natural fermented sausages was investigated as starter cultures in fermented sausages produced in the South Region of Brazil. The study demonstrated that the Staphylococcus xylosus strains AD1 and U5showed significant growth during fermentation, stability over freeze-dried process, negative reaction for staphylococcal enterotoxins and viability for using as a single-strain culture or associated with lactic acid bacteria for production of fermented sausages.

Arthrospira (Spirulina) platensis foi cultivada em laboratório sob condições controladas (30ºC, intensidade luminosa de 140 µmol fótons.m-2.s-1, 12 horas claro/escuro e insuflação constante de ar atmosférico), em três meios de cultivo: (1) meio de Paoletti (controle), (2) meio de Paoletti suplementado com 1,0 g.L-1 de NaCl (água salinizada) e (3) meio de Paoletti preparado com rejeito de dessalinizador. Foi verificado o efeito destes tratamentos no crescimento, teor de proteínas e aminoácidos. As concentrações celulares máximas obtidas foram de 2,587; 3,545 e 4,954 g.L-1 no meio controle, meio de Paoletti suplementado com água salinizada ou com rejeito de dessalinizador, respectivamente. Com relação às concentrações protéicas, estas foram maiores na biomassa cultivada no meio 3, com 56,17%, enquanto que a biomassa cultivada no meio 2 apresentou 48,59%. A maioria dos aminoácidos essenciais encontrou-se acima dos limites requeridos pela FAO, com exceção apenas de lisina e triptofano.

Arthrospira (Spirulina) platensis was cultivated in laboratory under controlled conditions (30ºC, photoperiod of 12 hours light/dark provided by fluorescent lamps at a light intensity of 140 µmol photons.m-2.s-1 and constant bubbling air) in three different culture media: (1) Paoletti medium (control), (2) Paoletti supplemented with 1 g.L-1 NaCl (salinated water) and (3) Paoletti medium prepared with desalinator wastewater. The effects of these treatments on growth, protein content and amino acid profile were measured. Maximum cell concentrations observed in Paoletti medium, Paoletti supplemented with salinated water or with desalinator wastewater were 2.587, 3.545 and 4.954 g.L-1, respectively. Biomass in medium 3 presented the highest protein content (56.17%), while biomass in medium 2 presented 48.59% protein. All essential amino acids, except lysine and tryptophan, were found in concentrations higher than those requiried by FAO.

Foram realizadas 30 coletas quinzenais, entre abril e outubro de 2002, de ostras (Crassostrea rhizophorea) de um criadouro natural, no estuário do rio Cocó (Fortaleza/Ceará/Brasil), objetivando-se isolar cepas de Aeromonas spp. As amostras de ostras foram submetidas aos métodos de plaqueamento direto (PD) e presença/ausência (P/A). Foram identificadas Aeromonas em 15 (50%) amostras analisadas pelo método PD e em 13 (43%) pelo método P/A. Foram isoladas: A. caviae, A. eucrenophila, A. media, A. sobria, A. trota, A. veronii bv. sobria, A. veronii bv. veronii e Aeromonas sp. A espécie predominate foi A. veronii (ambos biovars), identificada em 13 (43%) amostras, seguida de A. media em 11 (37%) e A. caviae em 7 (23%). Das 59 cepas identificadas, 28 (48%) apresentaram resistência a pelo menos um, dos oitos antibióticos testados.

Between April and October 2002, thirty fortnightly collections of oysters (Crassostrea rhizophorea) from a natural oyster bed at the Cocó River estuary in the Sabiaguaba region (Fortaleza, Ceará, Brazil) were carried out, aiming to isolate Aeromonas spp. strains. Oyster samples were submitted to the direct plating (DP) and the presence/absence (P/A) methods. Aeromonas were identified in 15 (50%) samples analyzed by the DP method and in 13 (43%) analyzed by the P/A method. A. caviae, A. eucrenophila, A. media, A. sobria, A. trota, A. veronii bv. sobria, A. veronii bv. veronii and Aeromonas sp. were isolated. The predominant species was A. veronii (both biovars), which was identified in 13 (43%) samples, followed by A. media in 11 (37%) and A. caviae in seven (23%). From the 59 strains identified, 28 (48%) presented resistance to at least one of the eight antibiotics tested.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica da ostra de mangue (Crassostrea rhizophorae) originária de um criadouro natural no estuário do Rio Cocó, Fortaleza, Ceará, Brasil. Para isso, foram realizadas as estimativas do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e de Fecais (CF) e de Enterococcus spp. Os valores encontrados para CT e CF no músculo (com líquido intervalvar) variaram de <1,8 a >1.600 e <1,8 a 920 por grama, respectivamente. O valor do NMP de Enterococcus spp. variou de <3,0 a >1.100/g. Não houve correlação entre os parâmetros físico-químicos (temperatura, salinidade e pH) da água na área do criadouro e os níveis de contaminação encontrados nas ostras. Somente houve correlação entre os valores de CT e CF. Cepas de Enterococcus spp. foram isoladas e submetidas a testes bioquímicos para identificação das espécies e, posteriormente, foram testadas para verificar a produção de substância inibitória semelhante à bacteriocina utilizando a cepa-teste Escherichia coli ATCC 25922. De um total de 121 cepas de Enterococcus spp. testadas apenas uma, E. faecalis, apresentou atividade inibitória.

This study was aimed at evaluating the microbiological quality of mangrove oysters (Crassostrea rhizophorae), collected at a natural oyster bed in the estuary of Cocó river (Fortaleza, Ceará, Brazil). MPN values were used for estimating the total (TC) and fecal (FC) coliforms and Enterococcus spp. TC and FC MPN values in the whole muscle and intervalve liquid ranged from <1.8 to >1,600/g and from <1.8 to 920/g, respectively. The MPN estimates for Enterococcus spp. were between <3.0 and >1,100/g. No correlation was found between the physico-chemical parameters (temperature, salinity and pH) of the surrounding water and the bacteriological contamination levels found in the tested oysters. The only correlation found was between TC and FC values. Enterococcus spp. strains were isolated and subjected to biochemical tests for species identification. The capacity of those strains for production of a bacteriocin-like inhibitory substance was tested using the Escherichia coli strain ATCC 25922 as a testing organism. Only one, E. faecalis, out of 121 Enterococcus strains tested, presented the inhibitory activity.

Lactobacillus sakei é comprovadamente uma cepa produtora de bacteriocinas e, neste trabalho procurou-se observar seus efeitos como cultivo iniciador, na fermentação de filés de sardinha-verdadeira (Sardinella brasiliensis) em diferentes concentrações de NaCl (2, 4 e 6%) e glicose (2 e 4%), observando-se sua capacidade para produzir ácidos orgânicos e conseqüente redução do pH e microrganismos deterioradores. Os tratamentos foram desenvolvidos de forma independente, variando apenas um dos parâmetros operacionais (NaCl ou glicose). Ao término de 21 dias de fermentação, a concentração de microrganismos deterioradores atingiu 9,7 Log10 UFC.g-1, correspondente a 6% de NaCl e 4% de glicose. Poucas diferenças foram observadas na produção de ácido lático quando se adicionou 2 e 4% de glicose; a acidez foi 1,32 e 1,34%, respectivamente, para os experimentos com 6% NaCl, os quais apresentaram os melhores resultados. O pH inicial dos filés de sardinha foi seis e, ao término de 21 dias, 3,8, 3,9 e 4, equivalente aos experimentos com 2, 4 e 6% NaCl. Este comportamento pode ser atribuído ao poder inibidor do NaCl sobre a microbiota deterioradora. Ao término de 21 dias de fermentação a concentração de bactérias ácido láticas foi 14,5 Log10 UFC.g-1.

Lactobacillus sakei 2a is a bacteriocin producer strain and, in this work, it's effects as a starter culture in the fermentation process of sardine (Sardinella brasiliensis) fillets were observed at different concentrations of NaCl (2, 4 and 6%) and glucose (2 and 4%), to determine it's ability to produce organic acids and consequent pH reduction. Experiments were carried out independently, with only one parameter (NaCl or glucose) varying at a time. After 21 days of fermentation the deteriorative bacteria concentration reached 9.7 Log10 CFU. g-1 corresponding to 6% NaCl and 4% glucose. Little differences were observed in lactic acid production when 2 and 4% glucose were added, since total acidity was 1.32 and 1.34% respectively, the experiments with 6% NaCl presented the best results. Initial pH of sardine fillets was 6 and after 21 days pH values were 3.8, 3.9 and 4 for the experiments with 2, 4 and 6% NaCl. This may have been due to the inhibitory properties of NaCl over the deteriorative bacteria. After 21 days of the fermentation process lactic acid bacteria concentrations were 14.5 Log10 CFU.g-1. The ratio protein nitrogen and total soluble nitrogen was typical of a cured fish.

Melaço de cana de açúcar é um sub-produto barato da indústria açucareira. Esse produto foi empregado para o crescimento e produção de bacteriocina de Lactobacillus plantarum BN e avaliado quando a sua aplicação potencial no aumento da vida útil de carne crua. Cubos de carne bovina foram imersos por 5 minutos no sobrenadante filtrado e neutralizado dessa cultura (Tratamento A) e mantidos a 5ºC. Contagens de microrganismos psicrotróficos e mesófilos, determinação de pH e de acidez total foram realizadas nas amostras após 0, 3, 6, 9, 12 e 15 dias. Essas determinações foram também feitas em amostras mergulhadas por 5 minutos em solução de ácido lático a 6% (tratamento B) e em água destilada (tratamento C). Após 3 dias em refrigeração, as contagens de microrganismos psicrotróficos nas amostras submetidas ao tratamento A aumentaram 0,38 ciclos log, enquanto aquelas submetidas aos tratamentos B e C aumentaram muito mais (1,42 and 2,04 ciclos log, respectivamente). O mesmo aconteceu com os microrganismos mesófilos (0,31, 0,33 and 1,04 ciclos log, respectivamente). No sexto dia, as contagens de psicrotróficos nas amostras submetidas aos tratamentos A e B foram 2,07 e 0,64 ciclos log, respectivamente, mais baixas que nas amostras controle (tratamento C). As contagens de mesófilos nessas amostras foram 1,58 e 1,12 ciclos log, respectivamente, mais baixas que nos controles. No sexto dia, somente as amostras submetidas ao tratamento A apresentaram contagens inferiores a aquelas consideradas pelo ICMSF como padrão de qualidade (<10(7) UFC/g). Após 9 dias, somente as amostras tratadas com a bacteriocina apresentaram qualidade aceitável. A partir do 12º dia, todas as amostras de carne estavam fora dos padrões de qualidade. Esses resultados indicam que a imersão da carne bovina em caldo de melaço de cana de açúcar pode ser um interessante recurso tecnológico para aumentar a vida útil desse produto em refrigeração.

Sugar cane molasses is a cheap by-product of the sugar cane industry. This product was used for growth and production of bacteriocins by Lactobacillus plantarum BN and evaluated for its potential application in the extension of the shelf-life of raw meat. Bovine meat cubes were dipped in the filtered and neutralized supernatant of the fermented broth (Treatment A) and stored at 5ºC. Counts of psychrotrophic and mesophilic aerobic microorganisms, pH determination and total acidity were performed on meat cubes after 0, 3, 6, 9, 12 and 15 days. These determinations were also done in cubes dipped in a 6% lactic acid solution (treatment B) and distilled water (treatment C). After 3 days, the counts of psychrotrophic microorganisms in cubes submitted to treatment A, B and C increased 0.38, 1.42 and 2.04 log cycles, respectively. The same happened with mesophilic microorganisms (0.31, 0.33 and 1.04 log cycles increases, respectively). On the sixth day, the psychrotrophic population in samples submitted to treatments A and B were 2.07 and 0.64 log cycles, respectively, lower than in the control samples (treatment C). Mesophilic microorganisms in these samples were 1.58 and 1.12 log cycles, respectively, lower than the controls. On the sixth day, only samples submitted to treatment A presented lower counts than those recommended by ICMSF as quality standards for raw meat (<10(7) CFU/g). After nine days of storage under refrigeration, samples submitted to treatment A still maintained acceptable quality. From the twelfth day on, all samples exceeded the microbial quality limits. These results indicate that dipping of raw meat in filtered sugar cane molasses containing bacteriocins produced by L. plantarum BN may be an interesting technological option to extend the shelf life of refrigerated bovine meat.

Estudou-se o efeito do cloreto de sódio sobre a produção de biomassa e proteínas extracelulares totais, durante o cultivo de Saccharomyces cerevisiae. A levedura foi desenvonvida em fermentador de leito fluidizado, com vazão de ar de 70L/min, temperatura de 33° C, e umidade relativa de 99-100%. Foi utilizado substrato semi-sólido de batatas, previamente hidrolizado, acrescido de cloreto de sódio 0,6M. O crescimento celular foi monitorado por densidade óptica à 595 nm. Observou-se, como resultado, que a adição de cloreto de sódio 0,6M induziu um aumento de 36,86% na produção de proteínas extracelulares totais, mas inibiu o crescimento celular em 27,62% quando os meios com e sem cloreto de sódio foram testados. A produção máxima de biomassa, tanto para os experimentos com adição de cloreto de sódio quanto para o sem adição, ocorreu no período de 7 a 9 horas de fermentacão, enquanto que a produção de proteínas extracelulares totais, independentemente da adição do sal, ocorreu durante o período de 9 a 12 horas de fermentação. As velocidades específicas máximas de crescimento foram de 0,350/h para os experimentos com sal, e de 0,339/h para aqueles sem a adição do sal. A combinação de alta vazão de ar e a presença de cloreto de sódio 0,6M na fermentação parece não ter tido efeito sobre a duração da fase lag na curva de crescimento celular de Saccharomyces cerevisiae.

The effect of sodium chloride on the cell's growth and total extracellular protein production during fermentation of Saccharomyces cerevisiae in an air-fluidized bed fermentation, with a 70 L/min air flow at 33° C and 99-100% relative unidity was studied. A semi-solid potato substrate (previously hydrolized) with 0.6M sodium chloride was used. Cell's growth was monitored by optical density at 595 nm. Results showed that the addition of 0.6M sodium chloride enhanced total extracellular protein level (36.86%). On the other hand, the addition of sodium chloride inhibited cell growth (27.62%), when mediums with and without sodium chloride were tested. The maximum yield of biomass was achieved at the 7 - 9th hour fermentation for experiments either with or without addition of sodium chloride, while maximum yield of total extracellular proteins was achieved at the 9 - 12th hour fermentation, in all runs. The maximum specific cell's growth rate averaged 0.350/h for the experiments where salt was added and 0.339/h for those without salt. Finally, it seemed that the length of the lag phase had not been affected by the combination of high air flow rate and the presence of 0.6M sodium chloride in the yeast growth curve in this air-fluidized bed fermentation of Saccharomyces cerevisae.

Comparative studies of Lactobacillus plantarum were carried out in MRS broth (control) and in 3% (w/v) sugar cane blackstrap molasses enriched as follows: 0.5% yeast extract, 0.5% ammonium citrate and 0.5% sodium acetate (Medium 1) and 0.5% yeast extract, 0.5% ammonium citrate, 0.5% sodium acetate, 0.5% ammonium phosphate, 0.2% ammonium citrate, 0.1% Tween 80 and 0.005% manganese sulphate (Medium 2). The experiment, was carried out at a 5 L fermentor, with 3.5 L as working volume. At the end of the fermentation period MRS presented the highest viable cells production (28.68 log CFU/mL) while in Medium 2 it was 25.80 and in Medium 1 19.36 log CFU/mL. Biomass productivity was 0.0865 g.L-1.h for MRS (control), 0.0768 and 0.0507 g.L-1.h for Medium 2 and Medium 1, respectively. In Medium 1 total available sugar consume was only 60.11% while in MRS and Medium 2 it was 87.21% and 83.80%, respectively.

Foram realizados estudos comparativos do crescimento de Micrococcus varians em meio de cultura BHI (controle) e em meio constituído de melaço de cana-de-açúcar diluído a 2% enriquecido com 0,1% de extrato de levedura. O experimento foi conduzido com três repetições do meio experimental e controle, em fermentador de 5 litros, com volume de trabalho de 3,5 litros, sob agitação contínua (150 rpm), temperatura de 35o ± 0,1°C, aeração 0,7 L ar. l-1 meio. min-1, pH inicial 7,0 ± 0,2, tempo de fermentação de 24 horas e inóculo inicial em torno de log10 UFC/ml. As amostras foram coletadas em intervalos de duas horas. Micrococcus varians cresceu nos dois meios de cultura estudados, confirmando a viabilidade do meio experimental pra o cultivo desta espécie. A concentração média final da biomassa foi maior no meio controle do que no experimental, com 0,99 g.l-1 e 0,78 g.l-1 respectivamente. O número de células viáveis ao final das fermentações foi de 20,65 log10 UFC/ml para o BHI (controle) e 19,43 log10 UFC/ml para o meio experimental. O consumo de açúcares totais no meio controle foi de 79,78%, enquanto no meio experimental foi de apenas 50,53%.

Comparative studies on the growth of Micrococcus varians were carried out in BHI culture medium (control) as well as in a culture medium with 2% diluted sugar cane blackstrap molasses, enriched with 0.1% yeast extract. The experiment was conducted with three samples of the experimental and control media in a 5 liter fermentor with working volume of 3.5 liters, continuous agitation (150 rpm), 35 ± 0.1°C temperature, 0.7 L air. l-1 medium. min -1, initial pH 7.0 ± 0.2, 24 hour fermentation period, and approximate inoculum of 6.0 log10 CFU/ml. Samples were collected at 2-hour intervals. Micrococcus varians grew in the two culture media studied, which confirms the experimental medium viability for the growth of this species. The final average concentration of biomass was higher in the control medium than in the experimental medium: 0.99 g.l-1 and 0.78 g.l-1, respectively. The final number of viable cells at the end of fermentation was 20.65 log10 CFU/ml for the control medium (BHI), while in the experimental medium the number of viable cells was 19.43 log10 CFU/ml. The consumption of total sugars was higher for the biomass in the control medium (79.78%), while only 50.53% was consumed for the experimental medium.