Abstract The essential oils obtained by hydrodistillation from fresh leaves of Vitex agnus-castus and Ocimum campechianum, and from fresh inflorescences of Ocimum carnosum were analysed by GC-FID and GC-MS. The major components of V. agnus-castus essential oil were identified as 1,8-cineole (47.9%), terpinyl α-acetate (11.6%), sabinene (11.2%) and caryophyllene oxide (9.7%), while in the O. campechianum essential oil were eugenol (72.1%), β-elemene (6.8%), (E)-caryophyllene (6.4%) and bicyclogermacrene (5.2%). Linalool (79.0%), α-epi-cadinol (5.4%), terpinen-4-ol (3.2%) and 1,8-cineole (2.8%) were the major constituents in the O. carnosum essential oil. The essential oils were subsequently evaluated for their larvicidal and cytotoxic activities. Larval bioassay against Aedes aegypti of V. agnus-castus, O. campechianum and O. carnosum essential oils showed LC50 values of 97.55 ± 0.35, 81.45 ± 0.35 and 109.49 ± 0.35 μg/mL, respectively. The in vitro cytotoxic activities of the essential oils has been evaluated on breast adenocarcinoma (MCF-7), lung carcinoma (NCI-H292), pro-myelocytic leukemia (HL-60), and cervical adenocarcinoma (HEP-2) human cell lines, and pro-myelocytic leukemia cells lines (HL-60) were found to be the most sensitive to all the essential oils tested than the others. This is the first report on larvicidal and cytotoxic activities of these essential oils.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar a adesão e invasão de células HeLa por amotras de Campylobacter spp. (total n=63) isoladas de frangos (n=4), cães (n=4), primatas não-humanos (n=16), porcos (n=9), fezes de bezerros (n=18), e trato genital de bovinos (n=12). Trinta e duas amostras foram capazes de aderir e 13 invadiram células HeLa. As amostras invasivas incluíram 1 de 4 isolados de cão, 4 de 16 isolados de primatas não-humano (2 C. jejuni e 2 C. coli), 1 de 9 C. coli isoladas de porcos e 7 de 18 C. fetus subsp. fetus isoladas de fezes de bezerros. Apenas 25% dos isolados de frango e de cão e 23% dos isolados de suínos foram capazes de aderir a células HeLa, propriedade exibida por 65% das cepas obtidas a partir de fezes de bezerros e por 83% das amostras isoladas de trato genital bovino. O fenótipo aderente foi observado em 5 de 19, 6 de 15 e 21 de 29 amostras de C. jejuni, C. coli e C. fetus subsp. fetus, respectivamente, enquanto que 3 de 19, 3 de 15 e 7 de 29 amostras foram adicionalmente capazes de invadir as células HeLa, respectivamente. Amostras de C. jejuni, C. coli e C. fetus subsp. fetus isoladas de fezes de animais foram capazes de aderir e invadir as células HeLa, enquanto amostras de C. fetus subsp. fetus isoladas a partir de amostras de trato genital bovino não foram invasivas, em células HeLa. O presente estudo mostrou que amostras de C. jejuni isoladas de primatas não-humanos e cães, C. coli isoladas de primatas não-humanos e porcos, e C. fetus subsp. fetus isolados a partir de fezes de bezerros foram capazes de aderir e invadir células HeLa. Além disso, a falta de capacidade invasiva de amostras de C. fetus subsp. fetus isoladas de trato genital bovino pode ser importante na patogênese das doenças das vias genitais causadas por esta bactéria.

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the adherence to and invasion of HeLa cells by Campylobacter spp. strains (total n=63) isolated from chickens (n=4), dogs (n=4), non-human primates (n=16), pigs (n=9), calf feces (n=18), and bovine genital tracts (n=12). Thirty-two strains adhered to and 13 invaded HeLa cells. Invasive strains included 1 of 4 dog isolates, 4 of 16 non-human primate isolates (2 C. jejuni and 2 C. coli), 1 of 9 C. coli strains isolated from pigs, and 7 of 18 C. fetus subsp. fetus isolated from calf feces. Only 25% of chicken and dog isolates and 23% of pig isolates were able to adhere to HeLa cells, a property of 65% of strains obtained from calf feces and 83% of bovine genital tract-isolated strains. The adherent phenotype was observed in 5 of 19, 6 of 15, and 21 of 29 strains of C. jejuni, C. coli, and C. fetus subsp. fetus, respectively, whereas 3 of 19, 3 of 15, and 7 of 29 strains were additionally able to invade HeLa cells, respectively. C. jejuni, C. coli, and C. fetus subsp. fetus strains isolated from animal feces are able to adhere and invade HeLa cells, whereas C. fetus subsp. fetus strains isolated from the bovine genital tract were not invasive in HeLa cells. The present study showed that C. jejuni isolated from primates and dogs, C. coli isolated from non-human primates and pigs, and C. fetus subsp. fetus isolated from calf feces have the ability to adhere to and to invade HeLa cells. Moreover, the lack of invasive ability by C. fetus subsp. fetus strains isolated from the bovine genital tract could be important in the pathogenesis of the genital tract diseases caused by this bacterium.

Various vegetables as biological catalysts were evaluated in enantioselective reduction of carbonyl compounds. The stereoselectivity of the process was in agreement with Prelog's rule for twelve of the vegetables, whereas okra and green peppers formed anti-Prelog products. Zingiber officinale exhibited the best results with 30% conversion and 89% ee. The parameters of the reaction such as time, solvent and other substrates investigated, as well as the specie, showed good chemo- and enantioselectivity.

Para a produção de anticorpos monoclonais contra Campylobacter fetus subsp. venerealis foram utilizadas as linhagens de células de mieloma Sp2/0-Ag14 e células de baço de camundongos BALB/c imunizados com sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354. A detecção dos anticorpos monoclonais foi realizada por ELISA indireto utilizando antígeno sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354. A clonagem foi realizada por diluição limitante e os clones foram caracterizados por ELISA indireto utilizando um painel de bactérias escolhidas em função da prevalência e habitats: C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354, C. fetus subsp. fetus ADRI 1812, C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, C. lari NCTC 11352 e Arcobacter skirrowii LMG 6621; e no "western blotting" utilizando antígenos sonicados de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 e C. sputorum biovar sputorum LMG 6647. Foram obtidos 15 clones produtores de anticorpos anti- C. fetus subsp. venerealis das classes IgM (1) e IgG (14). Quatro clones dentre os 15 clones obtidos foram produtores de anticorpos monoclonais espécie-específicos: dois clones reagiram com maior especificidade contra C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 e dois clones reagiram com maior especificidade contra C. fetus subsp. fetus ADRI 1812. Nenhum dos clones reagiu contra C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, comprovando a especificidade dos anticorpos monoclonais testados. Todos os clones reconheceram uma proteína de massa molecular de aproximadamente 148 kDa no sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354.

Myeloma cells Sp2/0-Ag14 and spleen cells from BALB/c mouse immunized with sonicated Campylobacter fetus subsp. venerealis NCTC 10354 were fused with polyethylene glycol (PEG) for the selection of clones producing antibodies. Clones were obtained by limiting dilution and screened for the production of specific antibodies to C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 by indirect ELISA and western blot against a panel of bacteria: C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354, C. fetus subsp fetus ADRI 1812, C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, C. lari NCTC 11352, and Arcobacter skirrowii LMG 6621 for the ELISA and C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 and C. sputorum biovar sputorum LMG 6647 for the western blotting. Fifteen clones producing monoclonal antibodies (MAbs) anti-C. fetus subsp. venerealis of the IgM (1) and IgG (14) classes were further screened for species-specificity. Four clones of the 15 obtained were producers of species-specific monoclonal antibodies (MAbs): two were specific for C. fetus subsp. venerealis and two were specific for C. fetus subsp. fetus. None of the clones were reactive against C. sputorum biovar sputorum LMG 6647. All clones recognized a protein with molecular mass of approximately 148 kDa from lysed C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354.

O presente estudo avalia a interferência do teste de tuberculinização no teste do interferon gama (INFg), estima a sensibilidade e a especificidade do INFg em condições brasileiras e simula a utilização dos testes múltiplos usando a tuberculinização comparada e o teste do INFg. Trezentos e cinquenta animais oriundos de dois rebanhos livres e dois rebanhos positivos foram submetidos à tuberculinização comparada e ao teste de INFg. A tuberculinização comparada foi realizada utilizando PPD aviária e bovina. O teste de INFg foi realizado utilizando o kit Bovigam® (CSL Veterinary, Austrália) de acordo com as especificações do fabricante. A sensibilidade e especificidade do teste de INFg foram calculadas pelo Modelo Bayesiano de Classe Latente. Esses parâmetros foram também estimados para os testes múltiplos. Os resultados do teste de INFg no D0 e D3 após o teste de tuberculinização foram comparados pelos testes estatísticos de McNemar e kappa. Os resultados das médias de densidade ótica do teste de INFg em ambos os dias foram similares. A sensibilidade e a especificidade do teste de INFg apresentaram resultados variando (95% intervalo de confiança) de 72 a 100% e 74 a 100%, respectivamente. A sensibilidade do teste em paralelo foi acima de 97,5% enquanto a especificidade do teste em série foi acima de 99,7%. O teste do INFg provou ser um método de diagnóstico muito útil.

This study aimed to evaluate the interference of tuberculin test on the gamma-interferon (INFg) assay, to estimate the sensitivity and specificity of the INFg assay in Brazilian conditions, and to simulate multiple testing using the comparative tuberculin test and the INFg assay. Three hundred-fifty cattle from two TB-free and two TB-infected herds were submitted to the comparative tuberculin test and the INFg assay. The comparative tuberculin test was performed using avian and bovine PPD. The INFg assay was performed by the BovigamTM kit (CSL Veterinary, Australia), according to the manufacturer's specifications. Sensitivity and specificity of the INFg assay were assessed by a Bayesian latent class model. These diagnostic parameters were also estimate for multiple testing. The results of INFg assay on D0 and D3 after the comparative tuberculin test were compared by the McNemar's test and kappa statistics. Results of mean optical density from INFg assay on both days were similar. Sensitivity and specificity of the INFg assay showed results varying (95% confidence intervals) from 72 to 100% and 74 to 100% respectively. Sensitivity of parallel testing was over 97.5%, while specificity of serial testing was over 99.7%. The INFg assay proved to be a very useful diagnostic method.

Foram identificadas diferenças no perfil protéico das amostras de Sponselee, Norma e Hardjoprajitno, com bandas protéicas entre 175, 47 kDA e 12,10 kDa. A amostra Sponselee foi a que apresentou maior número de bandas (12), seguida da Norma que apresentou 11 bandas e de Hardjoprajitno que apresentou 9 bandas. Todas as bandas observadas na amostra Sponselee possuíam correspondentes nas outras duas amostras. A amostra Norma não apresentou uma banda em torno de 35,77 kDa e a Hardjoprajitno não apresentou bandas em torno de 89,59 kDa, 35,77 kDa e 12,10 kDa. O reconhecimento dessas proteínas por soros hiperimunes contra cada uma das amostras também mostrou diferenças, sendo que o maior número de proteínas reconhecido em todas as amostras por todos os soros se encontrou entre 35,83 kDa e 29,19 kDa. Os soros contra bovino na amostra Norma só reconheceu proteínas de baixa massa molecular nas amostras Norma (6,80 kDa) e Hardjoprajitno (6,80 kDa e 5,30 kDa). Soro bovino contra a amostra Hardjoprajitno reconheceu uma proteína de 44,33 kDa todas às amostras e proteínas de 4,22 kDa nas amostras Sponselee e Norma e de 10,49 kDa e 6,16 kDa na Hardjoprajitno. As diferentes proteínas identificadas poderiam se constituir em alvos específicos para o desenvolvimento de testes diagnósticos e vacinas contra leptospirose bovina.

Differences in the protein profile of Leptospira sp. strains Sponselee, Norma and Hardjoprajitno were observed, with bands ranging from 175.47 kDa to 12.10 kDa. Strain Sponselee presented a 12-band profile, while strain Norma showed 11 and strain Hardjoprajitno showed 9 bands in the profile. All bands observed in Sponselee strain profile could match bands in the other two strains. Strain Norma lacks a band at 35.77 kDa and strain Hardjoprajitno lacks the bands at 89.59 kDa, 35.77 kDa and 12.10 kDa. The recognition profile from hyperimmune sera was also different for the studied serovar Hadjo strains. The majority of recognized proteins was in the range of 35.83 kDa to 29.19 kDa. Cattle sera against strain Norma only recognized low molecular mass proteins in strains Norma (6.80 kDa) and Hardjoprajitno (6.80 kDa and 5.30 kDa). Bovine sera against strain Hardjoprajitno recognized a 44.33 kDa protein in all studied strains and proteins of 4.22 kDa in strains Sponselee and Norma and of 10.49 kDa and 6.16 kDa in strain Hadjoprajitno. The different identified proteins could become specific targets to the development of diagnostic tests and vaccines against bovine leptospirosis.

OBJETIVO: Investigar a associação da desnutrição em crianças residentes em assentamentos subnormais (favelas) de Maceió (AL) com o estado nutricional materno e as condições socioambientais. MÉTODOS: Estudo transversal, envolvendo amostra probabilística de 2.075 mães (18 a 45 anos) e respectivos filhos (4 meses a 6 anos), moradoras nas favelas da cidade de Maceió (AL). Para escolha dos assentamentos, procedeu-se primeiramente a uma análise de clusters para eleger a região administrativa da cidade de Maceió com menor índice de desenvolvimento humano. Após essa análise, a 7ª Região Administrativa foi a designada para o estudo, com seus 23 assentamentos subnormais. Os dados socioeconômicos, demográficos, antropométricos e de saúde materno-infantil foram coletados através de inquérito domiciliar. A estatística analisou a razão de chances de uma criança ser desnutrida, e a regressão univariada foi usada para verificar quais variáveis maternas estariam associadas a essa desnutrição. RESULTADOS: A desnutrição crônica (-2 desvios padrão/altura por idade) esteve presente em 8,6% das crianças e associou-se com idade e escolaridade materna, tipo de residência, número de cômodos, revestimento de piso, origem da água e baixo peso ao nascer (< 2.500 g) em crianças com idade < 24 meses. Encontrou-se também associação entre desnutrição infantil e baixa estatura materna, que não foi observada para índice de massa corporal. CONCLUSÕES: A alta prevalência de desnutrição infantil observada nesses assentamentos esteve relacionada às condições socioambientais e à baixa estatura das mães, que apresentaram déficit ou excesso de peso.

OBJECTIVE: To investigate the association of malnutrition in children living in substandard settlements (slums) of Maceió, AL, Brazil, with maternal nutritional status and environmental conditions. METHODS: Cross-sectional study involving a probability sample of 2,075 mothers (18 to 45 years) and their children (4 months to 6 years), living in the slums of the city of Maceió. First, we conducted a cluster analysis with the purpose of choosing the settlements and the administrative region of the city of Maceió with the lowest human development index. After this analysis, the 7th Administrative Region was designated for the study, including its 23 substandard settlements. Socioeconomic, demographic, anthropometric, and maternal and child health data were collected by means of household survey. The statistical analysis included the odds ratio of a child to be malnourished, and the univariate regression was used to check which maternal variables were associated with this malnutrition. RESULTS: Chronic malnutrition (-2 standard deviations/height for age) was found in 8.6% of children and was associated with mother's age and educational level, type of residence, number of rooms, flooring, water supply, and low birth weight (< 2,500 g) in children aged < 24 months. We also found an association between child malnutrition and maternal height. Such association was not observed regarding body mass index. CONCLUSIONS: The high prevalence of malnutrition observed in these settlements was related to social and environmental conditions and short maternal height, who had weight deficit or weight excess.

RACIONAL: A hepatocarcinogênese é um processo no qual as alterações genéticas e epigenéticas são bem conhecidas em modelos animais, mas carece de estudos no homem. OBJETIVOS: Analisar a freqüência das oncoproteínas p21ras, c-myc e p53 no carcinoma hepatocelular e no fígado não-neoplásico. Verificar ainda a associação destas oncoproteínas com os padrões e graus histológicos, assim como com as infecções pelos vírus das hepatites B e C. MÉTODOS: Foi analisada por método imunoistoquímico a detecção das oncoproteínas p21ras, c-myc e p53 em 47 casos de carcinoma hepatocelular e no tecido não-neoplásico circunjacente ao tumor (40 casos). RESULTADOS: As oncoproteínas p21ras, c-myc e p53 foram detectadas, respectivamente, em 44,7%, 53,2% e 36,2% dos casos de carcinoma hepatocelular. A imunorreatividade do p21ras e c-myc mostrou uma associação significativa. Contudo, não houve associação significativa entre a detecção do p21ras, c-myc e p53 com os diferentes graus e padrões histológicos, nem tampouco com as infecções pelos vírus das hepatites B e C. A mesma associação significativa entre o p21ras e c-myc foi encontrada no tecido não-neoplásico dos casos de cirrose em relação aos que não apresentaram cirrose, enquanto que o p53 foi negativo em todos os casos. CONCLUSÕES: A imunorreatividade das oncoproteínas p21ras, c-myc e p53 corrobora evidências prévias de sua detecção no carcinoma hepatocelular, o que sugere poder haver participação destas proteínas na hepatocarcinogênese humana. A significativa associação entre as proteínas p21ras, c-myc e p53 no carcinoma hepatocelular e na cirrose pode apontar uma interação entre as mesmas, sobretudo na hepatocarcinogênese pela via da cirrose.

BACKGROUND: Genetic and epigenetic alterations have been described in animal hepatocarcinogenesis models but need to be studied in human being. AIMS: To assess the immunoreactivity of p21ras, c-myc and p53 oncoproteins in hepatocellular carcinoma and non neoplastic tissue. Association of the immunoreactivity of these markers with histological grades and patterns, hepatitis B and C were additionally studied. METHODS: Detection of oncoproteins p21ras, c-myc and p53 was performed immunohistochemically in hepatocellular carcinoma (47 cases) and surrounding non neoplastic liver tissue (40 cases). RESULTS: Oncoproteins p21ras, c-myc and p53 were detected in 44,7%, 53,2% and 36,2% of the hepatocellular carcinoma cases, respectively. The p21ras and c-myc immunoreactivity has shown a significant association. However there was no association of p21ras, c-myc and p53 detection with hepatitis B and C virus infections, histological grades and patterns. The same significant association between p21ras and c-myc was observed in non-neoplastic tissue with cirrhosis when compared with tissue without it. The p53 immunoreactivity was negative in all non-neoplastic liver tissue samples. CONCLUSIONS: The immunoreactivity detection of p21ras, c-myc and p53 corroborates previous evidence of their detection in hepatocellular carcinoma that suggest the participation of these proteins in human hepatocarcinogenesis. The significant association between p21ras and c-myc oncoproteins in hepatocellular carcinoma and in cirrhosis can point to an interaction between them mainly, in hepatocarcinogenesis that occurs through cirrhosis.

Os autores apresentam uma técnica de imunoperoxidase para a identificação de leptospiras em cortes de rim fixados em formol e emblocados em parafina. A variante metodológica inclui a utilização do complexo peroxidase-antiperoxidase, conferindo alta sensibilidade à reação. São, ainda, discutidas algumas possíveis aplicações do método ao estudo do acometimento renal na leptospirose.

An Immunoperoxidase technique for identification of leptospires in formalin fixed, paraffin embedded kidney sections is presented, using peroxidase-antiperoxidase complex. The anti-leptospiral antibody was raised in rabbit. Possible applications of this technique are discussed.