Resumo O presente estudo teve como objetivo caracterizar a importância de Anaplasma marginale, Babesia bigemina e Babesia bovis na gênese da tristeza parasitária bovina em bezerros leiteiros do noroeste de Minas Gerais. Foram coletadas 300 amostras sanguíneas de bezerros, seguidas por extração de DNA e Nested- PCR utilizando oligonucleotídeos iniciadores que amplificam fragmentos dos genes sbp-4 (B. bovis) e rap-1a (B. bigemina) e a Semi-Nested para o gene msp5 (A. marginale). A prevalência de A. marginale foi 55,66% (167/300), B. bigemina, 15,33% (46/300) e B. bovis 4,0% (12/300) dos bezerros examinados. Formas parasitárias de A. marginale and B. bigemina foram encontradas em 36,33% e 2,66% dos esfregaços sanguíneos, enquanto B. bovis não foi detectado. Houve diferença estatística entre as prevalências de animais infectados nas faixas etárias 1 (10-70 dias) e 2 (>70-300 dias). Um total de 15 animais com sintomas clássicos da doença foram examinados, e as amostras foram confirmadas como uma infecção simples por A. marginale através da Nested-PCR. Esses resultados confirmam a anaplasmose bovina como a principal agente da tristeza parasitária bovina nos bezerros do rebanho estudado.

Abstract The present study aimed to characterize the importance of the Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in the genesis of cattle tick fever (CTF) among dairy calves in the northwest of Minas Gerais, Brazil. Blood samples from 300 calves were collected, followed by DNA extraction and nested PCR using oligonucleotide primers to amplify fragments of the semi-nested for the msp5 gene (A. marginale), sbp-4 (B. bovis) and rap-1a (B. bigemina) Among the examined calves, the prevalence of A. marginale was 55.6% (n=167/300), B. bovis was 4.0% (n=12/300) and B. bigemina was 15.3% (n=46/300), by PCR techniques. Parasitic forms of A. marginale and B. bigemina were found in 36,3% and 2,6% of the blood smears while B. bovis was not detected. There was a statistical difference between the positivity of infected animals in the age groups 1 (10-70 days) and (>70-300 days) for A. marginale and B. bigemina. A total of 15 calves with the classic symptoms of disease were examined, and the samples obtained were confirmed as a simple infection by A. marginale through semi-nested PCR. These results confirm bovine anaplasmosis as the primary cause of CTF among the calves of dairy cattle within the studied area.

Resumo O estudo teve como objetivo realizar a caracterização morfológica, molecular e filogenética de Borrelia theileri obtida de Rhipicephalus microplus naturalmente infectado em bovino no estado do Rio de Janeiro, Brasil. Um total de 50 fêmeas de R. microplus ingurgitadas foram analisadas para espiroquetas por meio de esfregaço de hemolinfa. Ovos macerados e carrapatos, assim como sangue de bovinos infectados por esses carrapatos, foram analisados os genes glpQ, flaB e hpt por PCR. Os produtos de PCR foram purificados e sequenciados para análise e construção de uma árvore filogenética. Apenas 2% (1/50) dos carrapatos geraram um resultado positivo tanto pelo esfregaço como pela PCR. As formas espirais (n = 50) apresentaram (média ± DP) comprimento médio de 19,17 ± 4,12, diâmetro de 0,2935 ± 0,0469 e número de voltas de 8,44 ± 2,59. Os alinhamentos das sequências dos três genes avaliados exibiram 98% de similaridade aos isolados de B. theileri, ocorrendo em um clado altamente relacionado à linhagem de B. theileri KAT. As amostras de maceração de ovos foram positivas para os três genes avaliados, enquanto o sangue bovino foi negativo pela PCR. Esta é a mais completa caracterização de B. theileri nas Américas, apresentando dados morfológicos, moleculares e filogenéticos, incluindo a transmissão transovarial da espiroqueta no carrapato hospedeiro.

Abstract This study aimed to perform a morphological, molecular and phylogenetic characterization of Borrelia theileri obtained from infected Rhipicephalus microplus in Brazil. Fifty engorged R. microplus females from cattle in the municipality of Seropédica, Rio de Janeiro, were analyzed for spirochetes by hemolymph smear. Macerated eggs and positive ticks, as well as blood from the bovine infested by these ticks, were analyzed the glpQ, flaB and hpt genes by PCR. The PCR products were purified and sequenced for analysis and construction of a phylogenetic tree. Only 2% (1/50) of the ticks generated a positive result by both smear and PCR. The spiral forms (n = 50) had (media ± SD) a mean length of 19.17 ± 4.12 µm, diameter of 0.2935 ± 0.0469 and number of turns 8.44 ± 2.59. Sequence alignments of the three evaluated genes exhibited 98% similarity to B. theileri isolates, occurring in a clade highly related to B. theileri strain KAT. Egg maceration samples were positive for the three evaluated genes, whereas bovine blood was negative by PCR. This is the most detailed characterization of B. theileri in the Americas to-date, presenting morphological, molecular and phylogenetic data, including the transovarial transmission of the spirochete in the host tick.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi detectar ovos de helmintos e oocistos de protozoários em amostras de fezes de aves da ordem Passeriformes no estado do Pará, Brasil. Amostras de fezes foram coletadas individualmente de 403 aves Passeriformes oriundas de apreensão e mantidas em cativeiro no estado do Pará. As amostras foram processadas usando a técnica de dupla centrifugação em solução saturada de sacarose e as amostras positivas para oocistos de coccídios foram submetidas à esporulação em dicromato de potássio 2,0%. Ovos de helmintos e/ou oocistos de protozoários foram observados em 43,18% (174/403) das amostras fecais examinadas. Oocistos de coccídios foram detectados em 93,68% (163/174) das amostras positivas, enquanto que ovos de helmintos foram observados em 10,34% (18/174). A esporulação de oocistos ocorreu em 43,56% (71/163) das amostras, e somente oocistos de Isospora spp. foram detectados. Ovos de nematódeos das Superfamílias Trichostrongyloidea (4,60%; 8/174), Ascaridoidea (0,57%; 1/174) e Trichuroidea (0,57%; 1/174) foram diagnosticados nas amostras positivas. Ovos de Cestoda foram diagnosticados em 2,87% (5/174), enquanto que ovos de Trematoda foram detectados em 2,30% (4/174) das amostras positivas. Aves Passeriformes oriundas de apreensão e mantidas em cativeiro nas áreas visitadas estavam parasitadas por helmintos e protozoários, predominando a infecção por coccídios do gênero Isospora.

ABSTRACT: The objective of this study was to detect helminth eggs and protozoan oocysts in samples of feces from birds of the order Passeriformes in Para State, Brazil. Fecal samples were collected individually from 403 passerine birds seized and kept in captivity in Para State. Samples were processed by the double centrifugation technique in saturated sucrose solution and the coccidial oocyst-positive samples were submitted to sporulation in potassium dichromate 2.0%. Helminth eggs and/or protozoan oocysts were observed in 43.18% (174/403) of the fecal samples examined. Coccidial oocysts were detected in 93.68% (163/174) of the positive samples, whereas helminth eggs were observed in 10.34% (18/174) of the positive samples. Oocyst sporulation occurred in 43.56% (71/163) of the samples, and only Isospora spp. oocysts were detected. Nematode eggs of the superfamilies Trichostrongyloidea (4.60%; 8/174), Ascaridoidea (0.57%; 1/174), and Trichuroidea (0.57%; 1/174) were diagnosed in the positive samples. Cestoda eggs were diagnosed in 2.87% (5/174), whereas Trematoda eggs were detected in 2.30% (4/174) of positive samples. Passerine birds seized and kept in captivity in the visited local presented parasitism by intestinal helminths and protozoan, with a predominance of infection with coccidia of the gender Isospora.

RESUMO: De maio a setembro de 2011, um total de 138 roedores silvestres da família Cricetidae foram coletados nos municípios de Anhembi, Bofete e Torre de Pedra, no estado de São Paulo. Todos os animais foram examinados quanto à presença de carrapatos, os quais foram coletados e identificados ao nível de espécie em laboratório, através de análises morfológicas (para adultos, ninfas e larvas) e por biologia molecular para confirmar estas análises, através do sequenciamento de um fragmento do gene 16S rDNA mitocondrial (para uma parte das larvas). Um total de 47 carrapatos (21 larvas e 26 ninfas) foi coletado dos roedores, sendo identificados como 21 larvas e 23 ninfas de Amblyomma ovale (coletados sobre Oligoryzomys nigripes, Oligoryzomys flavescens, Sooretamys agouya e Nectomys squamipes ), duas ninfas de Ixodes schulzei (em O. nigripes e O. flavescens ) e uma ninfa de Amblyomma sculptum em S. agouya. A prevalência geral de parasitismo por A. ovale foi de 4,3% e de 10,1% para larvas e ninfas, respectivamente. As intensidades médias de parasitismo foram de 3,5 larvas/animal parasitado e de 1,6 ninfas/animal parasitado. Um O. nigripes foi encontrado parasitado simultaneamente por larva e ninfa de A. ovale , e outro O. nigripes estava parasitado simultaneamente por uma ninfa de I. schulzei e cinco ninfas de A. ovale . O presente trabalho reporta os seguintes registros inéditos: A. ovale em O. flavescens, O. nigripes e S. agouya; A. sculptum em S. agouya; e I. schulzei em O. flavescens e O. nigripes.

ABSTRACT: From May to September 2011, a total of 138 wild rodents of the Cricetidae family were collected in the cities of Anhembi, Bofete and Torre de Pedra, in São Paulo State. All animals were examined for the presence of ticks, which were collected and identified at species level in the laboratory by morphological examination (for adults, nymphs and larvae) and molecular biology, by sequencing of a fragment of the 16S mitochondrial rDNA (for larvae). A total of 47 ticks (21 larvae and 26 nymphs) were collected from rodents, identified as 21 larvae and 23 nymphs of Amblyomma ovale (collected on Oligoryzomys nigripes , Oligoryzomys flavescens , Sooretamys agouya and Nectomys squamipes ), two nymphs of Ixodes schulzei (O. nigripes and O. flavescens ) and an Amblyomma sculptum nymph in S. agouya . The overall prevalence of parasitism by A. ovale was 4.3% for larvae, and 10.1% for nymphs. The mean intensity of parasitism was 3.5 larvae/parasitized animal, and 1.6 nymphs/parasitized animal. One O. nigripes was found parasitized by both larva and nymph of A. ovale , and another O. nigripes was parasitized simultaneously by an I. schulzei nymph and five A. ovale nymphs. This research reports the following unpublished records: A. ovale on O. flavescens , O. nigripes and S. agouya ; A. sculptum on S. agouya ; and I. schulzei on O. flavescens and O. nigripes .

A leishmaniose visceral é uma enfermidade cujo agente etiológico no Brasil é o protozoário Leishmania infantum chagasi. Os cães são considerados reservatórios urbanos da doença, sendo indicadores da ocorrência de casos humanos. O presente trabalho teve como objetivo diagnosticar a infecção por L. infantum chagasi em cães domiciliados e errantes do município de Belém, estado do Pará, através da reação em cadeia da polimerase (PCR) e da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), empregando dois antígenos distintos. Amostras de sangue venoso de cães adultos, sem distinção de sexo ou raça, de diferentes bairros e épocas do ano da cidade de Belém-PA, foram colhidas em tubos sem e com anticoagulante para obtenção do soro e do DNA, respectivamente. Esses animais foram divididos em dois grupos: cães errantes capturados pelo Centro de Controle de Zoonoses (Grupo A) e cães domiciliados (Grupo B). Os soros foram analisados através do teste de RIFI para pesquisa de IgG utilizando-se dois antígenos distintos: 1) antígeno do kit Bio-Manguinhos/FIOCRUZ (Ag-PRO) contendo formas promastigotas de Leishmania sp. (complexo major-like); 2) Antígeno do Instituto Evandro Chagas (Ag-AMA) constituído por formas amastigotas de L. infantum chagasi. A avaliação dos dois antígenos foi realizada com as amostras reagentes a partir da titulação 1:80. Já a PCR foi realizada a partir do DNA extraído do sangue total dos animais e amplificado utilizando-se os iniciadores RV1e RV2. Das 335 amostras analisadas, 10,4% (35/335) foram reagentes na RIFI (Ag-PRO) e 0,9% (3/335) reagiram com o Ag-AMA. A distribuição das amostras positivas se deu da seguinte forma: Grupo A 14,8% (25/169) com Ag-PRO e 1,2% (2/169) com Ag-AMA; Grupo B 6% (10/166) com Ag-PRO e 0,6% (1/166) com Ag-AMA; sendo que todas as amostras positivas pelo teste de RIFI com o Ag-AMA também reagiram com o Ag-PRO e em nenhuma das amostras foi detectado o DNA de L. infantum chagasi. Os achados do presente estudo indicam que Belém ainda pode ser considerada área não endêmica para leishmaniose visceral canina e que a natureza do antígeno influencia no resultado da RIFI para a pesquisa de anticorpos anti-L. infantum chagasi em cães, sendo que a RIFI que utiliza formas promastigotas de Leishmania major-like como antígeno deve ser utilizada com cautela como método diagnóstico confirmatório em estudos epidemiológicos em áreas não endêmicas para LVC.

Visceral leishmaniasis is a disease whose etiological agent in Brazil is Leishmania infantum chagasi. Dogs are considered urban reservoirs of the disease, being an indicator of the human cases occurrence. The present study aimed to diagnose L. infantum chagasi infection in stray and owned dogs in Belém, Pará State, by polymerase chain reaction (PCR) and indirect immunofluorescence assay (IFA) using two different antigens. Venous blood samples from adult dogs, regardless of gender or breed, of different neighborhoods in Belém-PA, were collected in tubes with and without anticoagulant to obtain DNA and serum, respectively. These animals were divided into two groups: stray dogs captured by the Center for Zoonosis Control (Group A) and owned dogs (Group B). Sera were analyzed by IFA testing for IgG using two different antigens: 1) Bio-Manguinhos/Fiocruz antigen kit (Ag-PRO) containing promastigotes of Leishmania sp. (Complex Major-Like), 2) Instituto Evandro Chagas Antigen (Ag-AMA) consisting of amastigotes of L. infantum chagasi. The evaluation of the two antigens was performed considering positive the reactions above the 1:80 dilution. Already PCR was performed with DNA isolated from whole blood of animals and amplified with the primers RV1 and RV2. Of the 335 samples analyzed, 10.4% (35/335) were positive by IFA (Ag-PRO) and 0.9% (3/335) with the Ag-AMA. The distribution of positive samples is given as follows: Group A 14.8% (25/169) with Ag-PRO and 1.2% (2/169) with Ag-AMA; Group B 6% (10/166) with Ag-PRO and 0.6% (1/166) with Ag-AMA, being that all samples positive by IFA with Ag-AMA also reacted with Ag-PRO, and none of the samples detected DNA of L. infantum chagasi. The findings of this study indicate that Belém can still be considered non-endemic area for canine visceral leishmaniasis and the nature of the antigen influences the result of the IFA for the detection of anti-L. infantum chagasi antibodies in dogs, and the IFA using promastigotes of Leishmania major-like antigen should be used with caution as a confirmatory diagnostic on epidemiological studies in non-endemic areas.

Polimorfismo do códon 129 do gene da proteína priônica não é fator de risco para doença de AlzheimerA interação entre proteína priônica e oligômeros b-amiloide foi demonstrada recentemente. Homozigose no códon 129 do gene da proteína priônica (PRNP) é fator de risco para doença de Creutzfeldt-Jakob. Este polimorfismo foi estudado como possível fator de risco para doença de Alzheimer (DA).ObjetivoEstudar uma possível associação entre o polimorfismo do códon 129 e DA.MétodosForam investigados 99 pacientes com DA e 111 controles em relação ao polimorfismo do códon 129 e sua associação com desempenho cognitivo. Foram pesquisados outros polimorfismos do PRNP e efeito aditivo do gene da apolipoproteína E (ApoE).ResultadosDistribuição no códon 129: 45,5% metionina (MM), 42,2% metionina valina (MV), 12,1% valina (VV) nos pacientes com DA; e 39,6% MM, 50,5% MV, 9,9% VV, nos controles (p >0.05). Não houve diferença no desempenho cognitivo em relação ao códon 129. Estratificação pelo genótipo do ApoE não mostrou diferença entre grupos.ConclusãoPolimorfismo do códon 129 não é fator de risco para DA em pacientes brasileiros.

Interaction of prion protein and amyloid-b oligomers has been demonstrated recently. Homozygosity at prion protein gene (PRNP) codon 129 is associated with higher risk for Creutzfeldt-Jakob disease. This polymorphism has been addressed as a possible risk factor in Alzheimer disease (AD).ObjectiveTo describe the association between codon 129 polymorphisms and AD.MethodsWe investigated the association of codon 129 polymorphism of PRNP in 99 AD patients and 111 controls, and the association between this polymorphism and cognitive performance. Other polymorphisms of PRNP and additive effect of apolipoprotein E gene (ApoE) were evaluated.ResultsCodon 129 genotype distribution in AD 45.5% methionine (MM), 42.2% methionine valine (MV), 12.1% valine (VV); and 39.6% MM, 50.5% MV, 9.9% VV among controls (p>0.05). There were no differences of cognitive performance concerning codon 129. Stratification according to ApoE genotype did not reveal difference between groups.ConclusionCodon 129 polymorphism is not a risk factor for AD in Brazilian patients.

OBJETIVO: Comparar os alunos de 12 anos das escolas públicas e privadas de Goiânia, Goiás, quanto à prevalência de cárie, condição periodontal, anomalia dentofacial e fluorose. MÉTODOS: Em 2003, o Projeto Condições de Saúde Bucal da População Brasileira 2002-2003 (SB Brasil) foi ampliado para Goiânia na forma de um estudo transversal, descrito neste trabalho. A amostra foi constituída por 1 947 escolares de 12 anos frequentando escolas da zona urbana do Município: 1 790 (91,9%) eram de escolas públicas e 157 (8,1%) de escolas privadas. Através de exame clínico, foram coletados dados sobre as seguintes condições bucais: cárie dentária (índice de dentes cariados, perdidos e obturado, CPOD), condição periodontal (índice periodontal comunitário, CPI), anormalidade dento-facial (índice de estética dental, DAI) e fluorose dentária (índice de Dean). Para comparação entre os grupos foram utilizados os testes do qui-quadrado e U de Mann Whitney. RESULTADOS: Houve diferença entre os tipos de escola para todas as variáveis investigadas. Os escolares de instituições públicas apresentaram índices mais elevados de cárie, condição periodontal e anomalia dentofacial do que aqueles de escolas privadas (P < 0,05). Os escolares de instituições privadas apresentaram maior prevalência de fluorose (P < 0,05). CONCLUSÕES: O tipo de escola foi associado à condição de saúde bucal dos escolares pesquisados. São recomendados investimentos em ações e serviços que busquem minimizar tais desigualdades e seus efeitos como parte das políticas de saúde bucal.

OBJECTIVE: To compare 12-year-old students from public and private schools in the city of Goiânia, Brazil, in terms of the prevalence of caries, periodontal conditions, dentofacial anomalies, and fluorosis. METHODS: In 2003, the 2002-2003 Oral Health Conditions in the Brazilian Population project (SB Brasil) was expanded to Goiânia as a cross-sectional study, as described in the present article. The sample included 1 947 students from urban schools: 1 790 (91.9%) attended public schools and 157 (8.1%) attended private schools. Data on the following oral conditions were collected through clinical examination: dental caries (decayed, missing, or filled teeth index, DMFT), periodontal condition (Community Periodontal Index, CPI), dentofacial anomaly (Dental Aesthetics Index, DAI), and dental fluorosis (Dean index). The groups were compared using the chi-square and Mann-Whitney U tests. RESULTS: There were differences between the public and private schools for all the variables. DMFT, CPI, and DAI indexes were higher in children from public schools (P < 0.05). Fluorosis was more prevalent in students from private schools (P < 0.05). CONCLUSIONS: The type of school was associated with the oral health condition of the children in this sample. Investments in actions and services to mitigate this inequality and its effects should be made as part of the policies to promote oral health.