RESUMO: O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.

ABSTRACT: Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.

Neste trabalho foi estudado o efeito Payne como uma medida das interações carga-carga e polímero-carga em nanocompósitos de montmorilonitaorganofílica (MMTorg) e borracha nitrílica (NBR), usando o Analisador de Processamento de Borracha - RPA 2000. Os nanocompósitos de NBR e MMTorg foram preparados em um misturador de rolos e o efeito Payne foi avaliado em compostos não vulcanizados tipo goma pura e contendo 5, 10, 15 e 20 phr de MMTorg. Os resultados mostraram que a composição com 5phr de MMTorg apresentou melhor interação polímero-carga como consequência da menor quantidade de aglomerados de carga na matriz elastomérica.

In this work the Payne effect was evaluated as a measure of the filler-filler and filler-polymer interactions in nanocomposites of organomontmorillonite (MMTorg) on acrylonitrile-butadiene-rubber (NBR) by using the Rubber Process Analyzer - RPA 2000. The nanocomposites of NBR and MMTorg were prepared on a Berstorff two-roll mill and the evaluation of the Payne effect was carried out in unvulcanized pure gum and varying the MMTorg content from 5, 10, 15 and 20 phr. The composition with 5 phr of MMTorg showed the best filler-polymer interaction as a consequence of the smaller amount of agglomerates of the filler in the elastomeric matrix.

Neoplasias encefálicas constituem a segunda causa neurológica de morte. Foi desenvolvido um modelo animal simplificado de tumor cerebral em ratos utilizando a linhagem celular W256 (carcinoma 256 de Walker) para permitir teste de novos tratamentos. Ratos Wistar foram inoculados nos gânglios da base (caudato subfrontal direito) com uma solução celular tumoral, por via estereotáxica. Este modelo demonstrou crescimento tumoral em 95% dos animais inoculados com sucesso, além de mostrar ausência de metástases extracranianas e infecção sistêmica. A mediana de sobrevida dos animais foi de 10 dias. O volume tumoral estimado foi de 17,08±6,7 mm³ no sétimo dia e de 67,25±19,8 mm³ no nono dia após a inoculação. O tempo de duplicação foi estimado em 24,25 h. O crescimento tumoral induziu a caquexia, mas não houve alterações bioquímicas ou hematológicas. Esse modelo permite fácil reprodução e comporta-se como um tumor indiferenciado, mostrando potencial para estudar migração celular tumoral no sistema nervoso central. Dexametasona 3,0 mg/kg/dia reduziu significantemente a sobrevida dos animais inoculados com tumor nesse modelo. Ciclosporina 10 mg/kg/dia não teve efeito na sobrevida, sendo sua administração bem tolerada.

Brain cancer is the second neurological cause of death. A simplified animal brain tumor model using W256 (carcinoma 256, Walker) cell line was developed to permit the testing of novel treatment modalities. Wistar rats had a cell tumor solution inoculated stereotactically in the basal ganglia (right subfrontal caudate). This model yielded tumor growth in 95% of the animals, and showed absence of extracranial metastasis and systemic infection. Survival median was 10 days. Estimated tumor volume was 17.08±6.7 mm³ on the 7th day and 67.25±19.8 mm³ on 9th day post-inoculation. Doubling time was 24.25 h. Tumor growth induced cachexia, but no hematological or biochemical alterations. This model behaved as an undifferentiated tumor and can be promising for studying tumor cell migration in the central nervous system. Dexamethasone 3.0 mg/kg/day diminished significantly survival in this model. Cyclosporine 10 mg/kg/day administration was safely tolerated.

Foram selecionados seis açudes que margeiam a Estrada do Feijão (BA 052), nos municípios de Feira de Santana e Angüera, entre as coordenadas 39º30'-39º00'W e 12º00'-12º30'S. Com a finalidade de se conhecer a flora vascular dos mesmos, esses tipos de plantas foram coletadas de agosto/1996 a dezembro/1997. Registraram-se 121 espécies distribuídas em 46 famílias. As famílias mais representativas foram: Cyperaceae, com 18 espécies (14,9%), Poaceae, com 13 (10,7%), Asteraceae, com 10 (8,3%), Scrophulariaceae e Fabaceae, com 6 (5,0%). As espécies que ocorreram em todos os açudes foram Pistia stratiotes L. (Araceae), Echinochloa colona (L.) Link (Poaceae), Nymphaea ampla (Salisb.) DC. (Nymphaeaceae) e Oxycarium cubense (Poepp. & Kunth.) Lye (Cyperaceae).

Six ponds were studied between August/1996 and December/1997 at the edge of State Highway BA 052, in the municipalities of Feira de Santana and Angüera, 39º30'-39º00'W and 12º00'-12º30'S.With the aim to know their vascular flora, one hundred and twenty-one species of vascular plants were collected, representing 46 families. The most frequent families were: Cyperaceae with 18 species (14.9%), Poaceae with 13 (10.7%), Asteraceae with 10 (8.3%), Scrophulariaceae and Fabaceae with 6 (5.0%). The species which were recorded in all lakes were: Pistia stratiotes L. (Araceae), Echinochloa colona (L.) Link (Poaceae), Nymphaea ampla (Salisb.) DC. (Nymphaeaceae) and Oxycarium cubense (Poepp. & Kunth.) Lye (Cyperaceae).

A possible relationship between C.pneumoniae (CP) infection, atherosclerosis and acute myocardial infarction is a debated matter. Now we performed the search of CP in histological segments of fatal ruptured plaques and of stable plaques by histochemistry (Macchiavello stain), immunohistochemistry and in situ hybridization techniques. Electron microscopy and confocal laser microscopy techniques were used in two additional cases. The semi-quantitification of CP + cells (0-4+) and quantification of lymphocytes demonstrated greater amount of CP + cells and more inflammation in the adventitia of vulnerable plaque vessel segments than of stable ones, larger amount of CP + cells in adventitia than in the plaque and high frequency of CP + cells in all groups studied. This preliminary study strongly suggests a direct pathogenetic involvement of adventitial CP in the rupture of the atheromatous plaque, development of acute myocardial infarction and also in the development of atherosclerosis.