RESUMO Introdução: A fixação dos esfregaços citológicos consiste na imersão imediata em fixador adequado para preservar as características morfológicas celulares, sendo essencial para a análise microscópica e a interpretação diagnóstica. Objetivo: Avaliar a influência dos tempos de fixação nas características morfológicas e tintoriais de amostras fixadas em álcool etílico e coradas pelo método de Papanicolaou. Método: Realizou-se pesquisa experimental, quantitativa e qualitativa de 99 amostras de raspado da mucosa jugal de 33participantes, fixadas em álcool etílico 96% em três tempos diferentes. Grupo A: 15 minutos; grupo B: 30 minutos; grupo C: sete dias. A qualidade da coloração foi categorizada em ótima, boa, regular e ruim, com posterior recategorização em ótimo e não ótimo. Para verificar a associação entre os grupos e as categorias, realizou-se teste exato de Fisher, com nível de significância de 0,05. Resultado: Das 99 lâminas coradas, 19 foram desprezadas por acelularidade, restando 80 lâminas para serem analisadas. Destas, foram avaliadas 28 no grupo A, 26 no grupo B e 26 no grupo C. No grupo A, foi encontrada qualidade ótima - 60,7% (n = 17); boa - 28,6% (n = 8); regular - 10,7% (n = 3) e ruim - 0% (n = 0). No grupo B, ótima - 61,5% (n = 16); boa - 30,8% (n = 8); regular - 7,7% (n = 2); e ruim - 0% (n = 0). E no Grupo C, ótima - 92,3% (n = 24); boa - 7,7% (n = 2); regular - 0% (n = 0); e ruim - 0% (n = 0). Nos três grupos não houve representação na categoria ruim. Conclusão: Os resultados sugerem que há diferença significativa na qualidade da coloração (p = 0,01) de acordo com o tempo de fixação.

ABSTRACT Introduction: Fixation of cytological smears consists of immediate immersion in appropriate fixative, in order to preserve cellular morphological characteristics, it is essential for the microscopic examination and diagnostic interpretation. Objective: To evaluate the influence of fixation times on the morphological and staining characteristics of samples fixed in ethanol and stained by the Papanicolaou method. Method: Experimental, quantitative and qualitative research was carried out on 99 samples of the jugal mucosa scrapings from 33 participants, fixed in 96% ethyl alcohol in three different times. Group A: 15 minutes; group B: 30 minutes; group C: seven days. The quality of staining was categorized in Optimal, Good, Regular and Poor, with subsequent recategorization at optimal and non-optimal. To verify the association among the groups and the categories, Fisher’s exact test was performed, with significance level of 0.05. Results: From the 99 stained slides, 19 were discarded due to acellularity, remaining 80 slides. From these, 28 in group A, 26 in group B and 26 in group C were evaluated. In Group A, optimal quality was found in 60.7% (n = 17), good in 28.6% (n = 8), regular in 10.7% (n = 3) and poor in 0% (n = 0). In group B optimal was found in 61.5% (n = 16), good in 30.8% (n = 8), regular in 7.7% (n = 2) and poor in 0% (n = 0). In group C, optimal was found in 92.3% (n = 24), good in 7.7% (n = 2), regular in 0% (n = 0) and poor in 0% (n = 0). In the three groups, there was no representation of the Poor category. Conclusion: The results suggest that there is a significant difference in the staining quality (p-value = 0.01) according to the fixation time.

RESUMEN Introducción: La fijación de extensiones citológicas consiste en la inmersión inmediata en fijador adecuado para preservar la morfología celular, siendo esencial para el análisis microscópico y la interpretación diagnóstica. Objetivo: Evaluar la influencia de los tiempos de fijación en las características morfológicasy de tinción de muestras fijadas con metanoly tenidas con el método de Papanicolaou. Método: Se realizó una investigación experimental, cuantitativa y cualitativa de 99 muestras de raspado de la mucosa yugal de 33 participantes, fijadas con etanol al 96% en tres tiempos distintos. Grupo A: 15 minutos; grupo B: 30 minutos; grupo C: 7 días. La calidad de la tinción fue categorizada en óptima, buena, regular y mala, con posterior reclasificación en óptima y no óptima. Para determinar la asociación entre los grupos y las categorias, se realizó la prueba exacta de Fisher, con un nivel de significación del 0,05. Resultado: De las 99 muestras tenidas, 19 fueron desechadas por acelularidad, quedando 80 para ser analizadas. De estas muestras, 28 fueron evaluadas en el grupo A, 26 en el grupo B y 26 en el grupo C. En el grupo A, hemos encontrado calidad óptima - 60,7% (n =17); buena - 28,6% (n = 8); regular -10,7% (n = 3) y mala - 0% (n = 0). En el grupo B, óptima - 61,5% (n = 16); buena - 30,8% (n = 8); regular - 7,7% (n = 2); y mala - 0% (n = 0). En el grupo C, óptima - 92,3% (n = 24); buena - 7,7% (n = 2); regular - 0% (n = 0) y mala - 0% (n = 0). En los tres grupos no hubo representación en la categoria mala. Conclusión: Los resultados sugieren que hay diferencia significativa en la calidad de la tinción (p = 0,01) de acuerdo con el tiempo de fijación.

RESUMO Objetivo: Validar a quantificação de T-cell receptor excision circles (TRECs) e kappa-deleting recombination circles (KRECs) por reação em cadeia de polimerase (polymerase chain reaction, PCR) em tempo real (qRT-PCR), para triagem neonatal de imunodeficiências primárias que cursam com defeitos nas células T e/ou B no Brasil. Métodos: Amostras de sangue de recém-nascidos (RN) e controles foram coletadas em papel-filtro. O DNA foi extraído e os TRECs e KRECs foram quantificados por reação duplex de qRT-PCR. O valor de corte foi determinado pela análise de Receiver Operating Characteristics Curve, utilizando-se o programa Statistical Package for the Social Sciences (SSPS) (IBM®, Armonk, NY, EUA). Resultados: 6.881 amostras de RN foram analisadas quanto à concentração de TRECs e KRECs. Os valores de TRECs variaram entre 1 e 1.006 TRECs/µL, com média e mediana de 160 e 139 TRECs/µL, respectivamente. Três amostras de pacientes diagnosticados com imunodeficiência grave combinada (severe combined immunodeficiency, SCID) apresentaram valores de TRECs abaixo de 4/µL e um paciente com Síndrome de DiGeorge apresentou TRECs indetectáveis. Os valores de KRECs encontraram-se entre 10 e 1.097 KRECs/µL, com média e mediana de 130 e 108 KRECs/µL, e quatro pacientes com diagnóstico de agamaglobulinemia tiveram resultados abaixo de 4 KRECs/µL. Os valores de corte encontrados foram 15 TRECs/µL e 14 KRECs/µL, e foram estabelecidos de acordo com a análise da Receiver Operating Characteristics Curve, com sensibilidade de 100% para detecção de SCID e agamaglobulinemia, respectivamente. Conclusões: A quantificação de TRECs e KRECs foi capaz de diagnosticar crianças com linfopenias T e/ou B em nosso estudo, validando a técnica e dando o primeiro passo para a implementação da triagem neonatal em grande escala no Brasil.

ABSTRACT Objective: To validate the quantification of T-cell receptor excision circles (TRECs) and kappa-deleting recombination excision circles (KRECs) by real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) for newborn screening of primary immunodeficiencies with defects in T and/or B cells in Brazil. Methods: Blood samples from newborns and controls were collected on filter paper. DNA was extracted and TRECs, and KRECs were quantified by a duplex real-time PCR. The cutoff values were determined by receiver operating characteristic curve analysis using SPSS software (IBM®, Armonk, NY, USA). Results: Around 6,881 samples from newborns were collected and TRECs and KRECs were quantified. The TRECs values ranged between 1 and 1,006 TRECs/µL, with mean and median of 160 and 139 TRECs/µL, respectively. Three samples from patients with severe combined immunodeficiency (SCID) showed TRECs below 4/µL and a patient with DiGeorge syndrome showed undetectable TRECs. KRECs values ranged from 10 to 1,097 KRECs/µL, with mean and median of 130 and 108 KRECs/µL. Four patients with agammaglobulinemia had results below 4 KRECs/µL. The cutoff values were 15 TRECs/µL and 14 KRECs/µL and were established according to the receiver operating characteristic curve analysis, with 100% sensitivity for SCID and agammaglobulinemia detection, respectively. Conclusions: Quantification of TRECs and KRECs was able to diagnose children with T- and/or B-cell lymphopenia in our study, which validated the technique in Brazil and enabled us to implement the newborn screening program for SCID and agammaglobulinemia.

RESUMO Solanum guaraniticum é uma planta medicinal tradicionalmente usada para tratar doenças gástricas e hepáticas. Porém, não há evidências documentadas sobre sua segurança. O presente estudo avaliou a toxicidade do extrato das folhas de S. guaraniticum após administração aguda em ratos. Doses únicas do extrato (1.250, 2.500 and 5.000 mg/kg) foram administradas por gavagem e os animais foram monitorados por 48 h ou 14 dias. Mortalidade, sinais de toxicidade aguda e atividade geral, através do teste de campo aberto, foram analisados, assim como parâmetros hematológicos e bioquímicos, atividades enzimáticas (δ-aminolevulinato desidratase e acetilcolinesterase) e parâmetros de estresse oxidativo (nível de peroxidação lipídica, conteúdo de tióis não protéicos, atividade da catalase em tecidos e poder redutor em soro). A análise fitoquímica também foi realizada por HPLC. Os resultados mostraram que a administração do extrato não provoca mortes (LD50>5.000 mg/kg) ou efeitos adversos significativos com relação ao consumo de comida, ganho de peso corporal, análise patológica, entre outros. Entretanto, o teste de campo aberto mostrou uma diminuição na atividade espontânea geral (cruzamentos e levantadas), principalmente em 48 h após o tratamento. Portanto, nossos resultados sugerem que o extrato de S. guaraniticum não é agudamente tóxico, mas causa alterações na atividade do sistema nervoso central.

ABSTRACT Solanum guaraniticum is a medicinal plant traditionally used to treat gastric and liver diseases. However, there is no documented evidence corroborating its safety. The present study evaluated the potential toxicity of S. guaraniticum leaf extract after acute administration in rats. Single doses of the extract (1.250, 2.500, and 5.000 mg/kg) were administered by gavage, and the rats were then monitored for 48 h and/or 14 days. Mortality, acute signs of toxicity, and general activity in the open field test were assessed as well as hematological and biochemical parameters, enzymatic activity (δ-aminolevulinate dehydratase and acetylcholinesterase), and oxidative stress parameters (lipid peroxidation level, non-protein thiol content, tissue catalase activity, and serum ferrous reducing power). Phytochemical analysis was also performed by HPLC. The results showed that extract administration produced no deaths (LD50 > 5,000 mg/kg), and no significant adverse effects regarding food consumption, body weight gain, gross pathology, or other parameters. However, the open field tests showed a decrease in spontaneous activity (crossing and rearing) mainly at 48 h after treatment. The results suggest that S. guaraniticum extract is not acutely toxic, but causes alterations in central nervous system activity.

The aim of the study was to analyze epidemiological and microbiological aspects of oral colonization by methicillin-resistant Staphylococcus of health care workers in a cancer hospital. Interview and saliva sampling were performed with 149 health care workers. Antimicrobial resistance was determined by disk diffusion and minimum inhibitory concentration. Polymerase Chain Reaction, Internal Transcribed Spacer-Polymerase Chain Reaction and Pulsed Field Gel Electrophoresis were performed for genotypic characterization of methicillin-resistant Staphylococcus. Risk factors were determined by logistic regression. Methicillin-resistant Staphylococcus colonization prevalence was 19.5%, denture wearing (p = 0.03), habit of nail biting (p = 0.04) and preparation and administration of antimicrobial (p = 0.04) were risk factors identified. All methicillin-resistant Staphylococcus were S. epidermidis, 94.4% of them had mecA gene. Closely related and indistinguishable methicillin-resistant S. epidermidis were detected. These results highlight that HCWs which have contact with patient at high risk for developing infections were identified as colonized by MRSE in the oral cavity, reinforcing this cavity as a reservoir of these bacteria and the risk to themselves and patients safety, because these microorganisms may be spread by coughing and talking.

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do ácido peracético (PAA) na desinfecção de resinas acrílicas dentais experimentalmente contaminadas com Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. METODOLOGIA: Quinze corpos de prova (CP) foram utilizados para cada tipo de resina (termopolimerizáveis, autopolimerizáveis e ativados por energia de micro-ondas). Cada CP foi colocado em um tubo teste com meio de cultura contendo uma suspensão de cada microrganismo e incubado. Posteriormente, os CP foram lavados e transferidos para outros tubos contendo 50 mL de água por 5 minutos, em 0,2% de ácido peracético por 5 min ou em glutaraldeído por 30 minutos, plaqueados em ágar de cultura e incubados. O crescimento microbiano foi determinado por contagem de colônias após o plaqueamento. RESULTADO: O crescimento de Candida albicans foi inibido nos tratamentos com ácido peracético e glutaraldeído. O número de colônias nas resinas tratadas com solução salina foi superior a 10(5) UFC/mL. Nas resinas infectadas com E. coli, S. aureus e P. aeruginosa, o crescimento das colônias não foi inibido nas resinas tratadas com salina e ácido peracético, mas foi totalmente inibida pelo glutaraldeído. CONCLUSÃO: A desinfecção com ácido peracético inibiu efetivamente o crescimento de C. albicans em todas as resinas acrílicas.

PURPOSE: The aim of this study was to assess the efficacy of peracetic acid (PAA) for the disinfection of dental acrylic resins experimentally contaminated with Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. METHODS: Fifteen materials were used for each type of resin (thermosetting, self-curing and microwave-curing). Each material was placed in a test tube containing culture medium with a suspension of each microorganism and then incubated. The materials were rinsed and transferred to other tubes containing 50 mL of water for 5 min, 0.2% peracetic acid for 5 min or glutaraldehyde for 30 min. The materials were placed in the culture agar and incubated. Microbial growth was determined by colony counting after plating. RESULTS: Candida albicans growth was inhibited by peracetic acid and glutaraldehyde treatments. The number of colonies on resins treated with saline was greater than 10(5) CFU/mL. In resins infected with E. coli, S. aureus and P. aeruginosa the colony growth was not inhibited by saline and peracetic acid, but it was totally inhibited by glutaraldehyde. CONCLUSION: Surface disinfection using peracetic acid effectively inhibited C. albicans growth on all acrylic resins.

OBJETIVO: Avaliar o pico de pressão inspiratória e a frequência ventilatória obtidos por socorristas do Corpo de Bombeiros com a utilização de balão autoinflável em modelo de pulmão neonatal pré-termo. MÉTODOS: Estudo observacional descritivo incluindo 31 voluntários dentre 68 socorristas convidados, componentes de duas turmas do Programa de Capacitação Continuada do Corpo de Bombeiros. Durante três minutos, os socorristas ventilaram um simulador analógico de pulmão neonatal pré-termo, utilizando balão autoinflável de tamanho neonatal. Foram captados os picos de pressão inspiratória e a frequência respiratória por meio de um pneumotacógrafo e um monitor gráfico de ventilação. Os dados eram gravados e posteriormente analisados. RESULTADOS: A média do pico de pressão foi de 14,6±8,2cmH2O, sendo menor que 20 em 77,4% das vezes, maior que 40 em 3,2% das vezes, e entre 20 e 40cmH2O em 19,4% das vezes. A média da frequência ventilatória foi de 38,3±10,3 ciclos por minuto, sendo menor que 40 em 51,6% das vezes e entre 40 e 60 ciclos por minuto em 48,4% das vezes; em nenhuma das vezes a pressão atingiu 60 ciclos por minuto. CONCLUSÕES: Os socorristas, na maioria das vezes, não atingiram o nível mínimo desejado de pressão de ventilação e frequência respiratória recomendados em protocolos internacionais durante a ventilação pulmonar neonatal com o balão autoinflável

OBJECTIVE: To evaluate the peak inspiratory pressure and the ventilation rate obtained by paramedics of the Fire Department of Brasília, Brazil, when using a neonatal self-inflating bag on a preterm lung model. METHODS: Descriptive observational study including 31 volunteers, from 68 paramedics invited, who were components of two groups of the Fire Department's Continuous Training Program. For three minutes, the paramedics ventilated an analogical simulator of preterm infant lung using a neonatal self-inflating bag. The peak inspiratory pressure and the respiratory rate were captured by a pneumotachograph and a graphical monitor of ventilation. Data were recorded and analyzed. RESULTS: Mean peak pressures in cmH2O for test lung were 14.6±8.2, being less than 20 in 77.4% of the analyzed pressure curves, more than 40 in 3.2%, and between 20 and 40cmH2O in 19.4% of the curves. Mean ventilation rates were 38.3±10.3 cycles per minute, being less than 40 in 51.6% of the analyzed pressure curves, more than 60 in zero, and between 40 and 60 in 48.4%. In no occasion the pressure reached 60 cycles per minute. CONCLUSIONS: The paramedics, most of the time, did not achieve the advised minimum level of ventilation pressure and ventilation rates recommended by international guide lines during ventilation of a neonatal lung model with a self-inflating bag

Mucopolissacaridose do tipo VI é uma doença de armazenamento lisossômico causada pela deficiência da enzima arilsulfatase B (ASB), de herança autossômica recessiva. Apresentamos os aspectos endócrinos de 3 casos: o primeiro foi diagnosticado numa menina de 6 anos e os outros em dois irmãos, um menino de 4,1 anos e uma menina de 2,9 anos. Nas 3 crianças observaram-se peso e altura normais ao nascimento, fenótipo compatível com mucopolissacaridose a partir dos 2 anos, associado a baixa estatura, sem retardo mental e com glicosaminoglicanos elevados na urina. O hGH estimulado pela clonidina (0,1mg/m²) apresentou picos de 6,2, 5,6 e 4,6ng/ml nos casos 1, 2 e 3. Valores estímulados pela hipoglicemia foram de 30,3, 8,8 e 8,2ng/ml, respectivamente. IGF1 e IGFBP3 feitos nos casos 2 e 3 foram normais. Nos 3 casos, TSH, T4 livre e anticorpos antitireoidianos foram normais, bem como cálcio e fósforo. Durante o seguimento do caso 2 foi detectada insuficiência adrenal secundária prontamente tratada. A idade óssea foi atrasada e a sela túrcica alargada ao RX de crânio. Ressonância magnética feita nos casos 2 e 3 revelou sela vazia. Como em outros nanismos dismórficos, não encontramos deficiências hormonais que pudessem justificar a baixa estatura.

Mucopolysaccharidosis VI is a lisosomal storage disorder caused by deficiency of arylsulfatase B (ASB), inherited as an autosomal recessive trait. We investigated 3 such cases: the first was diagnosed in a 6-year old girl and the other two, a girl and boy siblings, were 2.9 and 4.1y, respectively. The children were normal at birth and the onset of clinical manifestations began at the age of 2y, associated with growth deficiency without mental deterioration. They were screened for inborn errors of metabolism and increased urinary levels of glycosaminoglycans were detected. A clonidine stimulation (0.1mg/m²) for hGH gave peak levels of 6.2, 5.6 and 4.6ng/ml, in cases 1, 2 and 3. In response to insulin-induced hypoglycemia (0.1UI/kg), hGH peak values were 30.3, 8.8 and 8.2ng/ml, respectively. IGF1 and IGFBP3 in cases 2 and 3 were normal. In all, TSH, free T4, anti-TPO, anti-TG antibodies, Ca, and P were normal. On follow-up, secondary adrenocortical insufficiency was detected and treated in case 2. Delayed bone age and elongated sella turcica were found. Pituitary MRI scans showed an empty sella in cases 2 and 3. Like other dysmorphic dwarfisms, we were unable to find hormonal deficiencies that could justify the short stature.