RESUMO OBJETIVO Investigar a presença das mutações no gene Angiopoietina (ANGPT1) e gene Plasminogênio (PLG) em pacientes com Angioedema Hereditário (AEH) com inibidor C1 esterase (C1-INH) normal e negativos para mutação do gene F12. MÉTODOS Foram avaliados pacientes com diagnóstico clínico de AEH sem deficiência ou disfunção de C1-INH e negativos para mutação do gene F12. Realizou-se extração, quantificação e diluição do DNA a uma concentração de 100 ng/uL, em seguida amplificação do DNA (PCR) para avaliação molecular do exon 2 do gene ANGPT1 e do exon 9 do gene PLG para identificação das mutações c.807G>T.p.A119S e c.988A>G p.K330E, respectivamente. O produto da PCR foi avaliado em eletroforese em gel de agarose 1%. Foi realizado o sequenciamento pelo método de Sanger. As análises dos eletroferogramas foram realizadas pelo programa FASTA®. RESULTADOS Foram sequenciadas amostras de 15 mulheres, idade entre 10 e 60 anos, com níveis séricos de inibidor de C1 esterase e C4 normais variando de 22 a 39mg/dL e 10 a 40mg/dL, respectivamente. Não foram identificadas mutações nos éxons analisados dos genes ANGPT1 e PLG. Entretanto no gene PLG foram encontrados polimorfismo de nucleotídeo único (SNP), em duas pacientes homozigotas e cinco heterozigotas. CONCLUSÃO Mais estudos sobre SNP são necessários para esclarecer estes achados pois eles podem ser utilizados como marcadores moleculares do AEH e alvo para novos tratamentos.

SUMMARY OBJECTIVE To investigate the presence of the Angiopoietin 1 (ANGPT1) and Plasminogen (PLG) mutations in patients with Hereditary Angioedema (HAE) and normal C1 esterase inhibitor (C1-INH) levels, who do not harbor the F12 gene mutation. METHODS Patients clinically diagnosed with HAE but without C1-INH deficiency or dysfunction and F12 gene mutation were evaluated. DNA extraction, quantification, and dilution were performed at a concentration of 100 ng/µL, followed by a DNA amplification (PCR) for molecular evaluation of exon 2 of the ANGPT1 gene and exon 9 of the PLG gene for identification of mutations c.807G>T / p.A119S and c.988A>G / p.K330E, respectively. The PCR product was evaluated in 1% agarose gel electrophoresis. Sequencing was performed using the Sanger method. The electropherograms were analyzed using the FASTA® program. RESULTS DNA samples from 15 women were sequenced. Their ages ranged from 10 to 60 years and the normal C1 esterase and C4 inhibitor serum levels ranged from 22 to 39 mg/dL and from 10 to 40 mg/dL, respectively. No mutations were detected in the analyzed exons of ANGPT1 and PLG. However, a single-nucleotide polymorphism (SNP) was detected in two homozygotic and five heterozygotic patients. CONCLUSION Further studies are needed to evaluate these SNPs and scrutinize their potential for use as molecular markers of HAE and as novel therapeutic targets.

RESUMO A doença de Petri é grave, complexa e de difícil controle em videiras no mundo. O principal agente causal desta doença é o fungo Phaeomoniella chlamydospora. Este fungo ocorre também na planta daninha de vinhedo Convolvulus arvensis. No Brasil, este fungo foi encontrado somente em videiras. Assim, o objetivo do presente estudo foi efetuar um levantamento fitossociológico de plantas daninhas em uma área com diferentes cavalos de videiras, em um campo de produção de mudas, em uma área experimental com videira e em diferentes áreas com plantio comercial de videira e verificar quais espécies poderiam estar hospedando o fungo P. chlamydospora. Para o levantamento fitossociológico das plantas daninhas, lançava-se um quadrado ao acaso, por dez vezes, no local, contando, identificando e amostrando todas as espécies. Para verificar as espécies hospedeiras do fungo, realizou-se isolamento do tecido vascular das plantas em meios de cultura e extração de DNA do mesmo tecido vegetal seguido de PCR com primers específicos do fungo do gene do fator de elongação (Pchlamy-EF-F 5’-CTCATTATCACATTTTGCTGC-3’ e Pchlamy-EF-R 5’-GAGAACAGTCAGTGATGAGC-3’). Em todo o levantamento, foram detectadas 46 espécies de plantas daninhas em 17 famílias, destacando-se as famílias Asteraceae e Poaceae com o maior número de espécies cada. Não foi detectado de maneira convencional e nem molecularmente o fungo P. chlamydospora infectando plantas daninhas, ressaltando a ocorrência da doença de Petri apenas em videiras.

ABSTRACT Petri disease is serious, complex and difficult to control in vines worldwide. The main causal agent of this disease is the fungus Phaeomoniella chlamydospora. This fungus also occurs in the vineyard weed Convolvulus arvensis. In Brazil, this fungus was found only in grapevines. Thus, the aim of the present study was to carry out a phytosociological survey of weeds in an area with different vine rootstocks, as well as in a field of seedlings production, in an experimental area with vines and in different areas with commercial vineyards, besides verifying which weed species could be hosting the fungus P. chlamydospora. For the phytosociological survey of weeds, a square was randomly cast ten times at the site, followed by counting, identification and sampling of all species. To verify host species of the fungus, vascular tissue of plants was isolated in culture media and DNA extraction from the same plant tissue was carried out followed by PCR with specific primers of the fungus for the elongation factor gene (Pchlamy-EF-F 5’-CTCATTATCACATTTTGCTGC-3’ and Pchlamy-EF-R 5’-GAGAACAGTCAGTGATGAGC-3’). Considering all surveyed fields, 46 weed species were detected in 17 families, especially Asteraceae and Poaceae, which had the largest number of species. Using conventional or molecular methods, the fungus P. chlamydospora was not detected infecting weeds, which highlights that Petri disease occurs only in grapevines.