A presença de seqüências de DNA associadas à capacidade de captação de ferro (irp-2, fyuA, sitA, fepC, iucA), adesão (iha, lpfA O157/O141, lpfA O157/O154, efa, toxB) e de invasão (inv, ial) e a classificação dentro dos quatro grupos filogenéticos principais de Escherichia coli (Grupos A, B1, B2 e D) foram determinadas, através de PCR, em 30 amostras comensais de E. coli isoladas de frangos e de 49 linhagens APEC (24 isoladas de frangos com septicemia, 14 isoladas de frangos com síndrome da cabeça inchada e 11 isoladas de embriões de galinhas com onfalite). Nenhuma das linhagens apresentou os genes inv, ial, efa, e toxB. Os genes lpfA O157/O154, iucA, fepC e irp-2 foram encontrados em freqüências significativas entre as amostras patogênicas. O gene iucA foi associado com amostras causadoras de septicemia e de síndrome da cabeça inchada. Os genes fepC e irp-2 foram associados a amostras causadoras de síndrome da cabeça inchada. A análise filogenética demonstrou que linhagens comensais e causadoras de onfalite pertenceram principalmente ao Grupo filogenético A, não patogênico. Amostras causadoras de síndrome da cabeça inchada pertenceram, em sua maioria, ao Grupo patogênico D. Linhagens causadoras de septicemia pertenceram aos Grupos A e D. Estes dados sugerem que linhagens APEC causadoras de septicemia provavelmente têm uma origem ancestral múltipla: uma derivada de uma linhagem patogênica e outra de uma linhagem não patogênica que possivelmente evoluiu através da aquisição horizontal de genes de virulência. Amostras causadoras de síndrome da cabeça inchada possivelmente constituem um grupo clonal patogênico. Por outro lado, amostras causadoras de onfalite possivelmente constituem um grupo clonal não patogênico, que, possivelmente causam onfalite devido a uma infecção oportunista. A presença de genes de virulência também encontrados em E. coli de origem humana pode indicar a possível ocorrência de zoonoses causadas por APEC.

The presence of iron uptake (irp-2, fyuA, sitA, fepC, iucA), adhesion (iha, lpfA O157/O141, lpfA O157/O154, efa, toxB) and invasion (inv, ial-related DNA sequences and assignment to the four main Escherichia coli phylogenetic groups (A, B1, B2 e D) were determined in 30 commensal E. coli strains isolated from healthy chickens and in 49 APEC strains isolated from chickens presenting clinical signs of septicemia (n=24) swollen head syndrome (n=14) and omphalitis (n=11) by PCR. None of the strains presented DNA sequences related to the inv, ial, efa, and toxB genes. DNA sequences related to lpfA O157/O154, iucA, fepC, and irp-2 genes were significantly found among pathogenic strains, where iucA gene was associated with septicemia and swollen head syndrome and fepC and irp-2 genes were associated with swollen head syndrome strains. Phylogenetic typing showed that commensal and omphalitis strains belonged mainly to phylogenetic Group A and swollen head syndrome to phylogenetic Group D. Septicemic strains were assigned in phylogenetic Groups A and D. These data could suggest that clonal lineage of septicemic APEC strains have a multiple ancestor origin; one from a pathogenic bacteria ancestor and other from a non-pathogenic ancestor that evolved by the acquisition of virulence related sequences through horizontal gene transfer. Swollen head syndrome may constitute a pathogenic clonal group. By the other side, omphalitis strains probably constitute a non-pathogenic clonal group, and could cause omphalitis as an opportunistic infection. The sharing of virulence related sequences by human pathogenic E. coli and APEC strains could indicate that APEC strains could be a source of virulence genes to human strains and could represent a zoonotic risk.

Streptococcus spp são importantes componentes do biofilme dental sendo Streptococus crista considerado um interessante modelo de interações bacterianas que nele ocorrem. No presente trabalho linhagens de S. crista, foram isoladas do biofilme dental de indivíduos brasileiros, e estudadas em relação a suas características biológicas e ao seu perfil molecular através da técnica do AP-PCR, usando-se os iniciadores RR2, 434, OPR2, OPR8 e OPR13. Os resultados nos permitiram construir um dendrograma de similaridade. A análise do dendrograma de similaridade permitiu a separação das linhagens estudadas em grupos de similaridade. Todos os isolados apresentaram tufo de fibrilas, quando estudados por Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET). Estes isolados foram capazes de se ligar à amilase salivar e de se aderir a células epiteliais bucais. Algumas linhagens, que apresentam tufo de fibrilas e aderência positiva, não foram capazes de coagregar com a Fusobacterium nucleatum, sugerindo que diferentes grupos de adesinas estão presentes nestas amostras.

Streptococcus ssp are important components of the dental biofilm and Streptococcus crista is considered to be an interesting model of bacterial interactions taking place in this biofilm. In the present work, S. crista strains were isolated from the dental biofilm of Brazilian individuals and studied with respect to their biological characteristics and their molecular profile by means of AP-PCR techniques, using the RR2, 434, OPR2, OPR8, and OPR13 primers. Results allowed us to build a similarity dendrogram. Analysis of the similarity dendrogram allowed the separation of the studied strains into similarity groups. All isolates presented fibril tufts by Transmission Electron Microscopy (TEM). These isolates were able to bind to salivary amylase and to adhere to mouth epithelial cells. Some strains displaying fibril tufts and positive adherence were not able to co-aggregate with Fusobacterium nucleatum, suggesting that different adhesin groups are present in these strains.

Examinando 52 espécimes fecais de bezerros com diarréia de fazendas da região de Jaboticabal, SP, Brasil, uma das amostras de Escherichia coli isoladas, quando analisada pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), demonstrou a presença dos genes que codificam para a enterotoxina termolábil do tipo LT-II. Este é o primeiro relato de amostra de E. coli enterotoxigênica, isolada de bezerros com diarréia no Brasil, contendo os genes para codificação da enterotoxina LT-II. Encontram-se apenas citações de isolamento no Brasil de amostras de E. coli LT-II+ de alimentos de origem animal.

Examining 52 samples of stools from calves with diarrhea from the region of Jaboticabal, SP, Brazil , one of the strains of Escherichia coli isolated, as examined by the Polymerase Chain Reaction (PCR), harbored the genes encoding for the LT-II thermolabile enterotoxin. This is the first report on the isolation of enterotoxigenic E. coli from calves with diarrhea in Brazil harboring the genes for LT-II enterotoxin. In our country, strains of LT-II + E. coli have been reported to occur only in foods of animal origin.

Uma amostra (S32) de Clostridium perfringens tipo A foi isolada de um caso de enterite catarral em leitões. Esta amostra foi capaz de aderir a células HeLa mostrando um índice de adesão (AI) de 25,15 ± 1,26 (media ± 1 erro padrão da media). Tratamento das células bacterianas com tripsina (0,25mg/ml) diminuiu 70%-80% e metaperiodato (10mg/ml) aboliu significantemente a adesão, sugerindo que a estrutura responsável por esta adesão era provavelmente uma glicoproteína. O tratamento pelo calor das suspensões bacterianas (100ºC/5min) diminuiu o AI ao nível dos controles negativos. Soro de coelho anti-S32 inibiu a aderência a células HeLa até a diluição de 1:640, pelo menos. O teste da alça ligada de leitão recem nascido demonstrou que a amostra S32 era capaz de aderir às células epiteliais intestinais, conforme demonstrado pela coloração de Gram de secções histológicas do intestino dos animais inoculados. O estudo em Microscópio Eletrônico de Transmissão demonstrou que a amostra S32 de Cl. perfringens mostrava um material de natureza fibrilar frouxa, ao contrário da amostra Jab-1 (controle negativo) que demonstrava uma aparência "nua ou lisa". A estabilização das células bacterianas com antissoro homólogo (S32), seguida de coloração com vermelho de rutenio, revelou de maneira mais nítida que longos materiais fibrilares, de aparência frouxa, se estendendo para longe da célula bacteriana, ligando por vezes estas células entre si. A possibilidade desta estrutura ser uma adesina para esta amostra de Cl. perfringens tipo A, talvez desempenhando um papel na patogenia da enterite catarral de leitões, depende de mais estudos.

One strain (S32) of Clostridium perfringens type A was isolated from a case of catarrhal enteritis of piglets. This strain was able to adhere to HeLa cells showing an adherence index (AI) of 25.15 ± 1.26 (mean ± 1 standard error of the mean). Treatment of the bacterial cells with trypsin (0.25mg/ml) decreased in 70%-80% the AI and metaperiodate (10mg/ml) abolished completely the adherence, suggesting that the structure responsible for this phenomenon was probably a glycoprotein. Heating of bacterial suspensions (100ºC/5 min) before carrying out the adhesion test decreased the AI rendering it equal to the negative controls. Rabbit homologous S32 antiserum inhibited the adherence up to dilutions of 1: 640, at least. The piglet ileal loop assay, carried out with strains S32 and Jab-1 (negative control) demonstrated that the strain S32 was able to adhere to the intestinal epithelial cells when examined after Gram staining. Transmission electron microcopy (TEM) demonstrated that S32 strain displayed a loose fibrillar material not seen with Jab-1. Stabilization of the bacterial cells with homologous antiserum of strain S32, followed by staining with rhuteniun red, revealed loose long fibrillar material on the outer surface of the cells, that sometimes could be seen spreading out from the cells and linking bacterial cells. The question whether this structure might be an adhesin for this strain of Cl. perfringes type A, perhaps playing a role in the pathogenesis of the catarrhal enteritis of piglets, is dependent on further studies.

Six hundred and ninety three male inmates from three penitentiaries, two (A and B) maximum-security systems and one (C) minimum-security facility, located in Campinas, State of São Paulo, Brazil were studied for the presence of human immunodeficiency virus (HIV) antibodies, using a cross-sectional design. The search for anti-HIV antibodies in 693 samples of sera collected was carried out by two serological tests: (a) the Microparticle enzyme immunoassay-HIV-1 and HIV-2 (MEIA) (Abbott Laboratories) and (b) the Western Blot-HIV-1 (WB) (Cambridge Biotech Corporation) to confirm positive results with MEIA. Sera reactivity for HIV antibodies was 14.4%. The highest frequency of anti-HIV antibodies was found in the A and B maximum-security prisons: 17% and 21.5%, respectively. In prison C, the frequency of reagents was 10.9%. Seventy three inmates, initially negative in the MEIA test, were checked again five and seven months later. Three of them, all from the maximum-security facilities, became reactive in the MEIA test, with confirmation in the WB, suggesting that serological conversion had occurred after imprisonment.

Alguns vírus das famílias Retroviridae, tais como, o Vírus do Linfoma Humano de Células T ( HTLV); Herpesviridae, tais como o Vírus Citomegálico (CMV) e da Hepatite B (HBV) podem ser co-transmitidos com o Vírus da Imunodeficiência Adquirida (HIV). Uma vez que prisioneiros estão expostos a diversos fatores de risco envolvidos na transmissão do HIV e dos vírus acima mencionados, prisioneiros do sexo masculino do Complexo Penitenciário de Campinas, SP, Brasil, incluindo aqueles que eram HIV+ e HIV-, foram examinados para a presença de anticorpos anti- HTLV-I/II; anticorpos IgG e IgM anti-vírus citomegálico e a presença do antígeno de superfície do HBV (HbsAg). A presença de anti- HTLV-I/II foi determinada pela técnica de Western Blot, enquanto IgG e IgM anti-CMV e a pesquisa do HbsAg foram feitas por ensaio Imunoenzimático (MEIA-Abbott Lab). Com relação à pesquisa de anti-HTLV-I/II, 58,3% (14/24- número de positivos/número total de soros examinados) foram reagentes entre os soros HIV+. Contrariamente, apenas 12,5% (3/24) entre os soros HIV- mostraram reações positivas para anti- HTLV-I/II. Porcentagens de 97,7% (43/44) e 95% (38/40) foram obtidas, respectivamente para os soros anti-HIV+ e anti-HIV-, em relação à pesquisa de IgG anti-CMV. No que concerne à IgM anti-CMV 11,36% (5/44) e 2,5% (1/40) foram os achados para os soros anti-HIV+ e anti-HIV-, respectivamente. A presença do HbsAg foi encontrada em 12,8% (5/39) dos soros que eram HIV+.

Some viruses of the families Retroviridae, such as Human T Lymphotropic Virus (HTLV); Herpesviridae as the Cytomegalovirus (CMV) and Hepadnaviridae such as the Hepatitis B Virus (HBV) are liable to be co-transmitted with the Human Immunodeficiency Virus (HIV). Since prisoners are exposed to several and important risk factors involved in the transmission of HIV and the above mentioned viruses, male inmates from the penitentiary complex of Campinas, SP, Brazil, including HIV + and HIV - ones, were examined for the presence of HTLV-I and/or II antibodies; IgG and IgM anti-CMV antibodies, and the research of the superficial hepatitis B antigen (HBsAg). The presence of anti-HTLV-I and/or II was determined by the Western Blot (WB) technique, whereas IgG and IgM anti-CMV and the search of HBsAg were carried out by the Microparticle Enzyme Immunoassay (MEIA-Abbott Lab).With regard to anti-HTLV-I and/or II, 58.3% (14/24-Number of positive reactions/number of sera examined) were reactive among the anti-HIV positive sera. Conversely, only 12.5% (3/24) among the HIV- negative sera showed positive reactions to HTLV-I and/or II antibodies. When looking for IgG anti-CMV percentages of 97.7% (43/44) and 95% (38/40) were obtained for anti-HIV positive and negative sera, respectively. As to IgM anti-CMV antibodies 11.36% (5/44) and 2.5% (1/40) of reactive sera were found for anti-HIV positive and negative, respectively. The HBsAg was found in 12.8% (5/39) of the sera which were anti-HIV positive.