Abstract INTRODUCTION: Chagas disease surveillance requires current knowledge on synanthropic triatomines. We analyzed the occurrence and Trypanosoma cruzi infection rates of triatomine bugs in central Brazil, during 2012-2014. METHODS: Triatomines were collected inside or around houses, and T. cruzi infection was determined by optical microscopy and conventional/quantitative polymerase chain reaction. RESULTS: Of the 2706 triatomines collected, Triatoma sordida was the most frequent species in Goiás State, whereas Panstrongylus megistus predominated in the Federal District. Parasites identified were T. cruzi, T. rangeli, and Blastocrithidia sp. CONCLUSIONS: P. megistus and T. sordida sustained the risk of T. cruzi transmission to humans in central Brazil.

INTRODUÇÃO: A competência vetorial de triatomíneos é determinada a partir de estudos sobre biologia e comportamento alimentar em condições de campo e/ou laboratório. Fatores como número de picadas, quantidade de sangue ingerido e tempo de defecação têm implicações na transmissão de tripanosomatídeos. Parâmetros biológicos e comportamentais de Rhodnius neglectus e R. robustus foram comparados experimentalmente para estimar diferenças no potencial de transmissão de tripanosomatídeos. MÉTODOS: Os triatomíneos foram observados diariamente para determinar o período de desenvolvimento ninfal, mortalidade, detecção da fonte alimentar, número de picadas, tempo do repasto sanguíneo, quantidade de sangue ingerido, tempo entre o final do repasto e a primeira defecação e frequência de defecação. RESULTADOS: Apesar do período ninfal de R. neglectus (156,4 ± 25,05d) ter sido menor que o de R. robustus (204,7 ± 13,22d), a mortalidade foi similar entre as espécies (63,8 e 65%, respectivamente). R. robustus e R. neglectus detectaram rapidamente a fonte alimentar, especialmente no primeiro estádio (2,5 e 1,6min, respectivamente). Apesar do tempo de repasto sanguíneo ter sido similar entre as espécies, R. robustus ingeriu em média uma maior quantidade de sangue em todos os estádios, com maiores valores para as ninfas V. As ninfas de R. neglectus picaram mais vezes as fontes alimentares, defecaram mais rápido e mais frequentemente que as de R. robustus. CONCLUSÕES: Sob as condições de laboratório usadas, R. neglectus possui um maior potencial para transmissão de Trypanosoma cruzi e T. rangeli que R. robustus, atributo que deve ser avaliado em infecções experimentais.

INTRODUCTION: The vector competence of triatomine insects is determined by studying their biology and feeding behavior under field and/or laboratory conditions. Factors including the number of bites, the amount of blood ingested and defecation time have implications for trypanosome transmission. The biological and behavioral parameters of Rhodnius neglectus and R. robustus were compared under experimental conditions to estimate differences in the potential transmission of trypanosomes. METHODS: The insects were observed daily to determine the period of nymphal development, mortality, detection of food source, number of bites, time of blood meal intake, amount of blood ingested, time elapsed between the end of the meal and the first defecation and the frequency of defecation. RESULTS: Although the nymphal development of R. neglectus (156.4 ± 25.05d) was lower than that of R. robustus (204.7 ± 13.22d), the mortality between species was similar (63.8 and 65% respectively).R. robustus and R. neglectus quickly located the food source, especially in the first instar (2.5 and 1.6 min, respectively). Although the time of blood meal intake was similar between the species, R. robustus ingested a larger amount of blood on average at all stages and exhibited higher values for the fifth instar. Nymphs of R. neglectus bit more frequently, and they defecated faster and more often than those of R. robustus. CONCLUSIONS: Under laboratory conditions, R. neglectus has a greater potential for transmission of Trypanosoma cruzi and T. rangeli than does R. robustus, an attribute that should be further evaluated in experimental infections.

Psammolestes tertius Lent & Jurberg, 1965 is a sylvatic triatomine bug species that occurs in thornbird nests in Brazil. We studied infestation of 527 nests of Phacellodomus rufifrons Wied, 1821 and Phacellodomus ruber Vieillot, 1817 by P. tertius in eight Brazilian states across the Cerrado and Caatinga ecoregions. Psammolestes tertius occurred in 44% of the nests, mainly in those of P. ruber. Overall, 3,261 specimens (52% nymphs) were captured, with an average of 14 bugs per infested nest (range 1-75). While P. tertius occurrence and age structure (percentage of nymphs) were similar in Cerrado and Caatinga nests, infestation intensity (bugs/infested nest) was higher in the Cerrado. Last-stage nymphs and adults were predominant in P. tertius populations from both P. ruber and P. rufifrons nests. The results indicate that Phacellodomus nests are favourable habitats for P. tertius in the open/dry ecoregions of Brazil. The percentage of adult P. tertius specimens (48%) was higher than that observed in other triatomine species (usually less than 5% under either experimental or natural conditions), suggesting that adult bugs tend to remain in thornbird nests. The stable blood supply provided by resident/breeding birds would favor steady P. tertius infestation of thornbird nests across Brazilian Cerrado and Caatinga ecoregions.

The development of strategies for the adequate control of the vector transmission of Chagas disease depends on the availability of updated data on the triatomine species present in each region, their geographical distribution, natural infections by Trypanosoma cruzi and/or T. rangeli, eco-biological characteristics and synanthropic behavioral tendencies. This paper summarizes and updates current information, available in previously published reports and obtained by the authors our own field and laboratory studies, mainly in northwest of Peru. Three triatomine species exhibit a strong synanthropic behavior and vector capacity, being present in domestic and peridomestic environments, sometimes showing high infestation rates: Rhodnius ecuadoriensis, Panstrongylus herreri and Triatoma carrioni The three species should be given continuous attention by Peruvian public health authorities. P. chinai and P. rufotuberculatus are bugs with increasing potential in their role as vectors according to their demonstrated synanthropic tendency, wide distribution and trophic eclecticism. Thus far we do not have a scientific explanation for the apparent absence ofT. dimidiata from previously reported geographic distributions in Peru. It is recommended, in the Peruvian northeastern Amazon region, the development of field studies on species of the genus Rhodnius, as well as of other triatominae, to evaluate their present Trypanosomatidae vector capacity.

El desarrollo de estrategias adecuadas para el control de la transmisión vectorial de la Enfermedad de Chagas depende: de la disponibilidad de datos actualizados de las especies de triatominos presentes en cada región, de su distribución geográfica, infección natural por Trypanosoma cruzi ylo T. rangeli, características eco-biológicas y tendencias de comportamiento sinantrópico. Este trabajo resume y actualiza la información disponible en la literatura y aquella obtenida en nuestros estudios de campo y de laboratorio desarrollados en los últimos años por los autores, predominantemente, en la región Nor-Occidental del Perú. El resultado de esas observaciones es la detección de que, tres especies de triatominos presentan un importante comportamiento sinantrópico y capacidad vectorial, ocupando ambientes intradomiciliares y peridomiciliares: Rhodnius ecuadoriensis, Panstrongylus herreri y Triatoma carrioni. Las tres especies deben recibir constante atención por parte de las autoridades de Salud Pública Peruana. P. chinai y P rufotuberculatus tienen potencial creciente en su papel de vectores, por la comprobada tendencia sinantrópica, distribución geográfica y eclecticismo trófico. Se desconocen las causas de la aparente ausencia actual de Triatoma dimidiata, dada su presencia constatada anteriormente en el Perú. Se recomienda que en la región Nor-Oriental Amazónica Peruana se realicen en forma urgente estudios sobre las especies del genero Rhodnius y de otros triatominos que permitan evaluar la real capacidad vectorial de los Trypano-somatideos.

O Distrito Federal (DF) do Brasil está localizado no bioma Cerrado, um complexo de fisionomias savânicas incluindo matas de galeria e campos úmidos permanentes (veredas). Triatomíneos silvestres infectados por Trypanosoma cruzi ocorrem na área, mas a transmissão enzoótica de tripanossomatídeos permanece insuficientemente caracterizada. Um estudo parasitológico envolvendo triatomíneos silvestres (166 Rhodnius neglectus coletados em palmeiras da espécie Mauritia flexuosa) e pequenos mamíferos (98 marsupiais e 70 roedores, totalizando 18 espécies) foi conduzido em 18 áreas, principalmente matas de galeria e veredas. Os parasitas foram isolados, identificados morfologicamente e caracterizados por PCR do DNA do cinetoplasto (kDNA) e núcleo (gene mini-exon). Seis R. neglectus, sete Didelphis albiventris e um Akodon cursor estavam infectados por tripanossomatídeos; a infecção em reservatórios silvestres é documentada pela primeira vez no DF. O PCR do kDNA detectou T. cruzi em cinco R. neglectus e o PCR do gene mini-exon revelou T. cruzi I nos isolados de D. albiventris. Um dos insetos mostrou estar infectado por T. rangeli KP1+. Apesar da ocorrência de D. albiventris (um importante reservatório silvestre e peridoméstico) e R. neglectus (um vetor secundário capaz de invadir domicílios) infectados por T. cruzi, um baixo risco de transmissão da doença de Chagas humana seria esperado no DF, considerando a baixa prevalência da infecção apresentada neste trabalho. A evidência molecular apresentada neste trabalho confirma a circulação de T. rangeli KP1+ com R. neglectus como vetor, amplia a distribuição geográfica deste parasita no Brasil e reforça a hipótese de adaptação de populações de T. rangeli (KP1+ e KP1-) a diferentes linhagens evolutivas de espécies de Rhodnius.

The Federal District of Brazil (DF) lies within the Cerrado biome, where open shrubland (savannas) is interspersed with riverside gallery forests and permanent swamps (veredas). Trypanosoma cruzi-infected native triatomines occur in the area, but the enzootic transmission of trypanosomatids remains poorly characterized. A parasitological survey involving sylvatic triatomines (166 Rhodnius neglectus collected from Mauritia flexuosa palms) and small mammals (98 marsupials and 70 rodents, totaling 18 species) was conducted in 18 sites (mainly gallery forests and veredas) of the DF. Parasites were isolated, morphologically identified, and characterized by PCR of nuclear (mini-exon gene) and kinetoplast DNA (kDNA). Six R. neglectus, seven Didelphis albiventris and one Akodon cursor were infected by trypanosomes; wild reservoir infection is documented for the first time in the DF. kDNA PCR detected T. cruzi in five R. neglectus and mini-exon gene PCR revealed T. cruzi I in isolates from D. albiventris. Parasites infecting one bug yielded T. rangeli KP1+ kDNA amplicons. In spite of the occurrence of T. cruzi-infected D. albiventris (an important wild and peridomestic reservoir) and R. neglectus (a secondary vector displaying synanthropic behavior), a low-risk of human Chagas disease transmission could be expected in the DF, considering the low prevalence infection recorded in this work. The detection of T. rangeli KP1+ associated with R. neglectus in the DF widens the known range of this parasite in Brazil and reinforces the hypothesis of adaptation of T. rangeli populations (KP1+ and KP1-) to distinct evolutionary Rhodnius lineages.

A detecção de infestações domiciliares por triatomíneos é fundamental no desenvolvimento de estratégias de controle. Como parte de um estudo amplo sobre triatomíneos vetores de tripanossomatídeos no norte do Peru testamos a aplicação de dois métodos passivos de detecção de infestações intradomiciliares por Rhodnius ecuadoriensis: (i) a caixa de Gómez Núñez (GN) e (ii) folhas de papel. Um método de captura manual também foi empregado. Realizamos o estudo no vale Alto Chicama, Província de Gran Chimú, Departamento de La Liberdad, uma área de baixa infestação domiciliar. A metodologia consistiu inicialmente em procurar ativamente os triatomíneos em todas as casas por captura manual (homem/hora). Posteriormente, instalamos simultaneamente pares de caixas de Gómez Núñez e folhas de papel nos quartos de 207 casas, distribuídas em 19 áreas e monitoradas após dois, quatro e seis meses. A infecção por Trypanosoma rangeli e/ou T. cruzi foi investigada em duas casas com altos índices de infestação por R. ecuadoriensis. 16,9% das 207 casas investigadas pelo método de captura manual estavam infestadas por R. ecuadoriensis. A proporção de casas infestadas variou de 6,2 a 55,5% nas 19 áreas estudadas. A infecção natural por T. rangeli foi observada em R. ecuadoriensis coletados em duas casas, com taxas de infecção de 16,6 a 21,7%, respectivamente. O fato mais interessante foi a taxa de infecção de glândulas salivares variando de 7,4 a 8,3%. Após seis meses, quando os resultados da comparação entre os dois métodos passivos foram analisados, obtivemos 31,4% das caixas de Gomez Nuñez positivas, resultado quase duas vezes superior ao das folhas de papel (15,9%). Os três métodos somados detectaram infestação em 129 das 207 casas estudadas (62,3%) nas 19 áreas estudadas. O número de casas infestadas variou de 6,7% a 92,9%. Não observamos diferenças na positividade das folhas de papel e captura manual. Em áreas com baixas taxas de infestação, a metodologia usada neste estudo parece ser a melhor escolha em pesquisas de populações domésticas de R. ecuadoriensis.

Two passive methods in the assessment of intradomiciliary infestation by Rhodnius ecuadoriensis were tested: (i) the Gomes Nuñez sensor box (GN), (ii) sheets of white typing paper and (iii) one active timed manual method. The study was carried out in the Alto Chicama River Valley, Province of Gran Chimú, Department of La Libertad. The study design consisted of an initial searching of triatomines inside of the domestic environment by the manual capture active procedure (man/hour) covering all the studied houses. Then, matched pairs of GN boxes and paper sheets were simultaneously installed in the bedrooms of 207 households distributed in 19 localities. A comparative prospective trial of these passive detection devices were monitored at 2, 4 and, finally 6 months follow-up. Parasitological Trypanosoma rangeli and/or T. cruzi infections were investigated in two houses with high level of infestation by R. ecuadoriensis. 16.9% of the 207 households investigated by an initial active manual method were infested with R. ecuadoriensis. The proportion of infested houses fluctuated from 6.2 to 55.5% amongst the 19 localities investigated. T. rangeli natural infection was detected in R. ecuadoriensis specimens collected in two households. Parasite rates in the bugs ranged from 16.6 to 21.7% respectively. The most striking fact was an average rate of salivary gland infection ranging from 7.4 to 8.3%. At the end of the sixth month period, a cumulative incidence of 31.4% of positive GN boxes against 15.9% for paper sheets was recorded. All three methods combined detected domestic infestation in 129 (62.3%) of the 207 houses studied in the 19 localities. The range of houses infested varies from 6.7% to 92.9%. In areas with low bug density infestation rates, the methodology experienced in our studies, seems to be the best choice for investigations on domestic R. ecuadoriensis populations.

FUNDAMENTOS: O PCR tem alta sensibilidade no diagnóstico da LTA, mas é caro e distante da prática. A cultura e o esfregaço são práticos, mas pouco sensíveis. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi comparar os dois últimos métodos, buscando maior sensibilidade e menor custo. MÉTODOS:Foram comparados três meios de cultura no isolamento de leishmânia: Difco agar sangue + Schneider + soro bovino fetal (20%); Difco agar sangue + Schneider + urina humana (2%); Schneider + urina humana (2%). Foram comparadas, também, duas técnicas de pesquisa de amastigotas: esfregaço realizado com biópsia, ou raspado através de palito (matchstick). RESULTADOS: Os índices de positividade e contaminação (29 a 33% e 8 a 11%, respectivamente, p>0.05) foram semelhantes na comparação dos cultivos. Os esfregaços com biópsia, ou palito também não tiveram diferenças significativas (14 e 19%, respectivamente, p> 0,05). A Leishmania (Viannia) braziliensis predominou. CONCLUSÃO: No Brasil, a urina pode substituir o soro fetal bovino. Há vantagem na relação custo/benefício. A urina não tem custo enquanto 500ml de soro bovino fetal custa 185 dólares.

BACKGROUND: PCR is a highly sensitive procedure for the diagnosis of LTA, but it is expensive and not readily available. Culture and smearing are practical, but they lack sensitivity. OBJECTIVE: The objective of this work is to compare the latter two methods in order to achieve a higher sensitivity at a lower cost. METHOD: Three culture media were compared in the process of isolating leishmaniasis: blood Agar Difco + Schneider + 20% fetal calf serum; Difco + Schneider + human sterile urine (2%); Schneider with sterile human urine (2%). Moreover, two techniques were compared for the demonstration of amastigotes: biopsy performed with smears, or matchstick scrapping RESULTS: The positivity and contamination indices (29-to-33% and 8-to-11%, respectively, p>0.05) were similar when comparing the cultures. The smears carried out by biopsy or the matchstick scrapping procedure had no significant differences (14 and 19%, respectively, p>0.05). Leishmania (Viannia) braziliensis predominated. CONCLUSION: In Brazil, urine may substitute fetal calf serum. The cost-to-benefit ratio is advantageous. Urine has no cost, while the market value of 500 ml of fetal calf serum is $US 185.

In a study of 51 stocks of Leishmania isolated from patients with cutaneous leishmaniasis in Três Braços, Bahia, Brazil 49 were characterized as L. braziliensis braziliensis. Only two L. mexicana stocks were identified. One was subspeciated as L. mexicana amazonensis. The other differed from this species and to date remains unspeciated. The biological parameters, isoenzyme analysis and monoclonal antibody findings relating to these two strains are discussed. Transmission of parasites of the mexicana complex to man have been rare in this region during the 8 years of study of the human infection.

Del estúdio de 51 stocks de Leishmania aislados de pacientes humanos de leishmaniasis cutaneomucosa en Três Braços, Bahia, Brasil, los autores describen, en detalle, el análisis de los dos únicos stocks de L. mexicana, identificando uno de ellos como L. mexicana amazonensis. El otro aislado permanece en posición taxonómica no definida pues considerándosele como un miembro de L. mexicana, encuéntranse dificultades para su identificación subespecífica. Evaluan también los parâmetros biológicos e isoenzimáticos y discuten el papel de los anticuerpos monoclonales en la tipificación de éstos stocks. Los autores remarcan la rareza de la transmisión de parásitos del complejo L. mexicana en esta región, aun cuando estudien epidemiológicamente por mais de 8 anos la infección humana.