RESUMO Este estudo avaliou o índice de patogenicidade, a produção de hemolisina e a determinação de sorogrupos de cepas deEscherichia coli isoladas de fígado de aves de postura comercial com um dia de idade. Para este estudo, foram analisados 32 lotes, dos quais 15 foram positivos para o isolamento de E. coli no fígado, totalizando vinte e quatro amostras. A patogenicidade dos isolados foi determinada por inoculação no saco aéreo de pintinhos e classificada como alta, intermediária, baixa ou não-patogênica. Os sorogrupos foram identificados utilizando um conjunto de antissoros anti-O (O1 a O180). A produção de hemolisina foi determinada por semeadura em ágar sangue de galinha (8%) e em placas de ágar sangue de carneiro (8%). Do total de amostras estudadas, 17 (70,83%) foram classificadas como não patogênica, 6 (25%) como de baixa patogenicidade e 1 (4,17%) de alta patogenicidade. Foram identificados 14 sorogrupos diferentes: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132, O141. Cinco cepas não tiveram o sorogrupo identificado. Com relação ao teste de produção de hemolisina, todas as cepas foram consideradas negativas, tanto para o teste realizado com ágar sangue de galinha quanto para o de carneiro. Os resultados obtidos neste estudo demonstram a importância de se identificar as cepas prevalentes deE. colinas diferentes regiões produtoras, podendo ser utilizados em estudos epidemiológicos.

ABSTRACT This work evaluated the index of pathogenicity, the production of hemolysin and determination of serogroups in Escherichia coli strains isolated from liver of commercial laying hens with one day of age. Thirtytwo lots were analyzed, of which 15 were positive for the isolation ofE. coli in the liver, for a total of 24 samples. The pathogenicity in one-day-old chicks was determined by inoculation in air sac and was classified as high, intermediate or low pathogenicity, or non-pathogenic. Serogroups were identified using a set of anti-O antisera (O1 to O180). The production of hemolysin was determined by plating on chicken blood agar (8%) and sheep blood agar (8%). Of the samples studied, 17 (70.83%) were classified as non-pathogenic, 6 (25%) as low pathogenicity and 1 (4.17%) as high pathogenicity. Fourteen different serogroups were identified: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132 and O141, while 5 samples were non-typable. Regarding the test for production of hemolysin, all strains were considered negative for both the test performed with chicken blood agar and that with sheep blood agar. The results of this study demonstrate the importance of identifying the prevalent strains of E. coli in different producing regions, as this information can be used in epidemiological studies.

Caracterizaram-se a linhagem e o grau de diferenciação das células neoplásicas no estudo histopatológico e ultraestrutural da leucose mielóide. Histologicamente as células neoplásicas apresentaram pleomorfismo, núcleos ovais, nucléolos proeminentes, cromatina distribuída de maneira irregular, figuras de mitose atípicas e moderada quantidade de citoplasma contendo granulações eosinofílicas esféricas. Essas características indicam a linhagem mielóide. Ultraestruturalmente evidenciaram-se células com núcleo oval, volumoso, eletrodenso, com predomínio de eucromatina e citoplasma com numerosos grânulos esféricos, eletrodensos e homogêneos, indicando mielócitos com diferenciação para eosinófilos. Constatou-se também a presença de partículas virais tipo-C no espaço intercelular dos túbulos renais, no interior de vesículas intracitoplasmáticas dos mielócitos imaturos presentes na medula óssea e ovário, e PCR positivo para ALV-J.

An ultrastructural and histological study was performed to determine the degree of differentiation of the neoplastic cells. The histological study revealed neoplastic cells with pleomorphism, oval nuclei, prominent nucleoli, irregularly distributed chromatin, atypical mitotic figures and moderate amount of cytoplasm containing spherical eosinophilic granulations, typical features of the myeloid lineage. Ultrastructurally, there were cells with an electron-dense, oval and voluminous nucleus, with predominant euchromatin and cytoplasm containing many spherical, electron-dense and homogeneous granules, indicative of myelocytes with differentiation to eosinophils. Type-C viral particles were also seen in the intercellular space of renal tubules and inside the intracytoplasmic vesicles of immature myelocytes in the bone marrow and ovary. PCR was positive to ALV-J.

Desenvolveu-se uma reação em cadeia de polimerase (PCR) para amplificação do altamente conservado gene VP3 e da região 5' do gene VP1, para o diagnóstico do vírus da anemia das galinhas (CAV), diretamente em amostras de campo de órgãos de frangos de corte com suspeita clínica da doença. A comparação entre o PCR VP3/VP1 com isolamento viral in vivo indicou 100% de concordância dos resultados, com 13 amostras positivas e três negativas em ambos os testes. Órgãos de outros 24 lotes de frangos com lesões e história clínica compatível com CAV foram testados com o PCR VP3/VP1 e com um PCR de referência com primers conhecidos para o gene VP1. Dezenove amostras resultaram positivas e uma negativa em ambos os PCR e quatro foram positivas apenas no PCR VP3/VP1. Estes resultados indicam que o PCR VP3/VP1 é um teste de diagnóstico sensível e específico, aplicável como alternativa ao método caro e demorado de isolamento viral in vivo e especialmente considerando-se amostras do CAV não adaptáveis a cultivos de células MSB-1.

A PCR assay was designed for amplification of the highly conserved VP3 gene and a 5' region of the VP1 gene, for the diagnosis of CAV in organ samples of broiler flocks suspected of chicken infectious anemia. A comparison of the VP3/VP1 PCR with in vivo virus isolation revealed 100% agreement of the results, with 13 positive and 3 negative samples in both assays, indicating that the VP3/VP1 PCR is a specific diagnostic method. Tissues from additional 24 broiler chicken flocks, with CAV-like lesions and clinical history were then tested only by the VP3/VP1 PCR and a reference PCR with published primers for the VP1 gene. Nineteen samples resulted positive and one negative in both PCR, while another 4 samples were positive only in the VP3/VP1 PCR. These results indicate that the VP3/VP1 PCR is a sensitive, specific diagnostic test, suitable as an alternative to the expensive and time consuming in vivo virus isolation method, specially considering the difficult diagnosis of CAV strains not readily adaptable to MSB-1 cell culture.

RESUMO Escherichia coli não é um componente da microbiota entérica de psitacídeos e a presença da bactéria nestas aves está associada à ocorrência de diarréias, doenças respiratórias e septicemias. Este trabalho avaliou a colonização intestinal por Escherichia coli em psitacídeos criados sob diferentes condições de biossegurança. Foram analisados 85 “swabs” de cloaca, através de exames bacteriológicos (cultura, isolamento e identificação bioquímica). Os resultados mostraram diferenças significativas na colonização intestinal por E. coli em psitacídeos, com 20% (10/50) de aves positivas no criatório conservacionista e 80% (28/35) no criatório recreacionista. Os dados evidenciam a importância da biossegurança, uma vez que o estado sanitário das aves alojadas em cativeiro pode ser influenciado pela finalidade do criatório.

ABSTRACT Escherichia coli is not considered a member of psittacine gut flora and the presence of the bacteria has been associated with enteric disorders, respiratory diseases and septicaemia. This survey determined the gut colonization by Escherichia coli on psittacine birds, raised under different biosecurity levels. The 85 cloacal swabs were examined by bacteriologic cultural methods. The results showed significant differences on E. coli gut colonization, with 20% (10/50) positive psittacine birds on conservationist farms and 80% (28/35) in a recreational zoo. This data suggests the importance of biosecurity level on the sanitary condition, sinced it can be influenced by aviary activity.

This report describes the production of cytotoxic necrotizing factor (CNF) by an Escherichia coli strain isolated from clinical bovine mastitis with clinical signs of toxemia The animal had hemorrhages and necrosis of the mammary glands, and died within 24 hours after the onset of clinical signs. In addition to CNF identification, alpha-haemolysin and siderophores production were also characterized in this strain. This report reinforce the association of CNF and alpha-haemolysin production in E. coli virulence associated with clinical cases of severe bovine mastitis.