Abstract Leishmaniasis is an anthropozoonosis with vector transmission, and knowledge regarding the occurrence of this parasitosis in sentinels can contribute to infection and disease control measures in humans. The objectives of this study were to evaluate the occurrence of Leishmania exposure and infection in dogs from urban and rural areas in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná, to evaluate possible risk factors, and to analyze the statistical agreement between the serological techniques that were used. Using a convenience sampling, serum and whole blood samples were collected to perform serological and molecular assays, respectively. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect fluorescent antibody test (IFAT) identified 29/204 (14.2%) and 20/204 (9.8%) seropositive dogs, respectively. Five dogs (2.4%) were seropositive for both serological tests, and four dogs presented high titers in the IFAT. None of the samples tested positive for Leishmania spp. DNA according to polymerase chain reaction analysis. No factors were significantly associated with infection. Leishmania parasites circulate in urban and rural dogs in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná. Despite the absence of clinical cases, seropositive animals with high antibody titers should serve as a warning to the local population that should be properly informed regarding the prevention.

Resumo A Leishmaniose é uma antropozoonose e sua transmissão ocorre através da picada de flebotomíneos de diferentes gêneros, dependendo da localização geográfica. O conhecimento sobre a ocorrência desta parasitose nos reservatórios pode colaborar com medidas de controle da infecção e doença nos humanos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar a ocorrência da infecção por Leishmania, em cães de áreas urbanas e rurais, na região da mesorregião Norte Pioneiro do Paraná; avaliar possíveis fatores de risco à infecção e analisar a concordância estatística entre as técnicas sorológicas utilizadas. Para tanto, foram colhidas 204 amostras de soro e sangue total de cães escolhidos aleatoriamente de municípios da mesorregião Norte Pioneiro do Paraná para a detecção de anticorpos anti-Leishmania spp., pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), e para a detecção de DNA de Leishmania spp. pela reação em cadeia pela polimerase (PCR). Dos 204 cães testados, 29 (14,2%) e 20 (9,8%) foram soropositivos pelo ELISA e RIFI, respectivamente. Cinco cães (2,4%) foram soropositivos em ambos os testes sorológicos. Não foram observados fatores abióticos e bióticos associados à infecção. A concordância entre as técnicas diagnósticas calculada por Kappa foi de 0,34. Conclui-se que, apesar da baixa ocorrência de positividade para leishmaniose e da ausência de casos sintomáticos, os resultados deste estudo devem ser um alerta para a população local por se tratar de uma importante zoonose e, portanto, medidas de prevenção e controle não devem ser negligenciadas.

Abstract The aim of this study was to identify Cryptosporidium species found in cattle and sheep in Paraná, southern region of Brazil. Individual fecal samples from 458 bovines and 101 sheep were submitted for molecular analysis by PCR and nested PCR using specific primers for sequences of the 18S ribosomal unit (rRNA). Positive samples were analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP), followed by genetic sequencing for species confirmation. The occurrence of Cryptosporidium was 11.27% (63/559). The highest occurrence was detected in lambs (12/59, 20.33%). From the 63 positive samples, it was possible to identify the species in 58 of them by RFLP and genetic sequencing. Five species of Cryptosporidium were identified: Cryptosporidium andersoni, Cryptosporidium bovis, Cryptosporidium ryanae, Cryptosporidium xiaoi, and Cryptosporidium parvum. The most prevalent species was C. andersoni (41.38%) and the least predominant was C. parvum (10.34%). The most abundant species of Cryptosporidium in dairy calves were C. andersoni (11/25) and C. ryanae (6/25). Of the 17 positive sheep, nine (52.94%) were infected with C. andersoni. This finding is the first report on the occurrence of C. andersoni in naturally infected sheep in Brazil and the first observation of a high absolute occurrence of this Cryptosporidium species in sheep.

Resumo O objetivo deste estudo foi identificar espécies de Cryptosporidium em bovinos e ovinos do Paraná, região sul do Brasil. Amostras de fezes de 458 bovinos e 101 ovinos foram individualmente submetidas à análise molecular por PCR e nested PCR, utilizando-se iniciadores específicos para sequências da unidade ribossomal 18S (rRNA). As amostras positivas foram analisadas pelo polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição (RFLP), seguido de sequenciamento genético para confirmação da espécie. A ocorrência de Cryptosporidium foi de 11,27% (63/559). Observou-se maior ocorrência em cordeiros (20,33%). Das 63 amostras positivas, foi possível identificar as espécies em 58 amostras por RFLP e sequenciamento genético. Foram identificadas cinco espécies de Cryptosporidium: Cryptosporidium andersoni, Cryptosporidium bovis, Cryptosporidium ryanae, Cryptosporidium xiaoi e Cryptosporidium parvum. A espécie mais predominantemente encontrada foi C. andersoni (41,38%) e a menos foi C. parvum (10,34%). As espécies mais abundantes de Cryptosporidium, em bezerros leiteiros, foram C. andersoni (11/25) e C. ryanae (6/25). Dos 17 ovinos positivos, nove (52,94%) estavam infectados com C. andersoni. Este achado é o primeiro relato sobre a ocorrência de C. andersoni em ovinos naturalmente infectados no Brasil e a primeira observação de alta ocorrência absoluta desta espécie de Cryptosporidium em ovinos.

Resumo Este estudo objetivou avaliar os efeitos da auto-hemoterapia como adjuvante no controle de nematódeos gastrointestinais em ovinos. Quatro grupos experimentais foram formados: G1, 10 animais que receberam sangue venoso autólogo; G2, 10 animais que receberam sangue venoso autólogo e vermífugo contendo levamisol; G3, 10 animais que receberam somente vermífugo contendo levamisol; e G4, 10 animais do grupo controle, que não receberam tratamento. Realizamos contagem de ovos nas fezes (ovos por grama, OPG) de estrongilídeos, cultivo de larvas, hemograma, leucograma e dosagem de proteína sérica antes do início do tratamento (D0) e nos dias 14 (D14) e 42 (D42). Houve uma diminuição significativa no OPG dos grupos que receberam levamisole (G2 e G3) do D14 até o final do período experimental. Ao final das avaliações, o OPG médio de G2 e G3 foi significativamente menor do que G1 e G4. O gênero de nematódeo mais comumente encontrado foi Haemonchus (88%) e o menos foi Trichostrongylus (1%). O teste de Redução na Contagem de Ovos nas Fezes (RCOF) de G2 e G3 no D14 foi 98,1% e 97,9%, respectivamente, entretanto, no G1, o RCOF foi zero nos dois dias avaliados. G1 e G2 mostraram aumento significativo na contagem de monócitos em D14 e D42. Houve um aumento significativo nos valores do hematócrito e hemoglobina em G2 e G3, entretanto, um aumento significativo no valor absoluto de hemácias foi observado somente em G2. Duas doses de auto-hemoterapia em intervalos de 21 dias, administradas isoladamente ou como adjuvante do levamisole, não é eficaz no controle de nematóides gastrintestinais em ovinos naturalmente infectados.

Abstract This study aimed to evaluate the effects of autohemotherapy as an adjuvant in the control of gastrointestinal nematodes in sheep. Four experimental groups were formed: G1, 10 animals receiving autologous venous blood; G2, 10 animals receiving autologous venous blood and vermifuge containing levamisole; G3, 10 animals receiving only vermifuge containing levamisole; and G4, 10 animals as the control group receiving no treatment. We performed fecal egg count (eggs per gram, EPG) of strongyles, larval culture, hemogram, leukogram, and serum protein dosage prior to the start of treatment (D0), and on days 14 (D14) and 42 (D42). There was a significant decrease in the EPG of the groups receiving levamisole (G2 and G3) from D14 to the end of the experimental period. At the end of the evaluations, the mean EPG of G2 and G3 was significantly lower than that of G1 and G4. The most common nematode genus was Haemonchus (88%), and the least common was Trichostrongylus (1%). The Fecal Egg Count Reduction Test (FECRT) of G2 and G3 on D14 were 98.1% and 97.9%, respectively, however, in G1, the FECRT was zero on the two days when evaluation took place. G1 and G2 showed a significant increase in monocyte counts on D14 and D42. There was a significant increase in hematocrit and hemoglobin values in G2 and G3, however, a significant increase in the absolute value of red blood cells was observed only in G2. Two doses of autohemotherapy at 21-day intervals, administered alone or as an adjuvant to levamisole, is ineffective in controlling gastrointestinal nematodes in naturally infected sheep.

Resumo O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Cryptosporidium em bovinos e ovinos da mesorregião norte pioneiro do Estado do Paraná. Para tanto, 317 amostras de fezes destes ruminantes foram colhidas de 16 propriedades de seis municípios do Norte Pioneiro do Paraná. Para detecção de Cryptosporidium spp foi realizada análise molecular pela Técnica de nested-PCR direcionada ao gene 18S rRNA. Das 37 vacas de corte e 115 bezerros de corte analisados, quatro (10,8%) e 14 (12,2%) foram respectivamente positivos para Cryptosporidium . Das 12 vacas e 52 bezerros de leite, um (8,3%) e 14 (26,9%) foram positivos para Cryptosporidium e das 42 ovelhas e 59 cordeiros avaliados, seis (14,3%) e 12 (20,3%) amostras estavam positivas para Cryptosporidium, respectivamente. Bovinos (15,3%) e ovinos (17,8%) foram igualmente suscetíveis à infecção. Todas as propriedades dos municípios de Assaí, Ibaiti e Leópolis apresentaram animais infectados. Este estudo demonstrou que Cryptosporidium ocorre na maioria dos municípios avaliados, sendo que os bezerros de leite apresentam maior risco (Razão de chances=2,66, p-value=0,018) à infecção que os bezerros de corte e que os ovinos são tão suscetíveis à infecção quanto os bovinos e por isso, estudos nesta espécie animal devem ser mais desenvolvidos.

Abstract The aim of this study was to investigate the occurrence of Cryptosporidium in cattle and sheep from the North Pioneer mesoregion of the state of Paraná. For this, 317 stool samples were collected from cattle and sheep on 16 properties in six municipalities in the North Pioneer mesoregion of Paraná. For detection of Cryptosporidium species, molecular analysis was performed using nested-PCR techniques targeting the 18S rRNA gene. Of the 37 beef cows and 115 calves analyzed, four (10.8%) and 14 (12.2%), respectively, were positive for Cryptosporidium. Of the 12 cows and 52 calves, one (8.3%) and 14 (26.9%), respectively, were positive for Cryptosporidium; and of the 42 ewes and 59 lambs, six (14.3%) and 12 (20.3%), respectively were positive for Cryptosporidium. Cattle (15.3%) and sheep (17.8%) were both susceptible to infection. All the properties of the municipalities of Assaí, Ibaiti and, Leópolis presented infected animals. The study showed that Cryptosporidium occurs in most municipalities assessed, that dairy calves had a higher risk (Odds Ratio=2,66, p-value=0,018) for infection than beef calves, and that sheep are just as susceptible to infection as are cattle, and that further Cryptosporidium studies are developed.

Resumo O Parque Estadual Morro do diabo (PEMD) é um significante remanescente de Mata Atlântica no Brasil, e rodeado de propriedades rurais. Nesta área humanos, animais domésticos e silvestres vivem próximos, o que facilita o fluxo de agentes infecciosas entre eles. Nós avaliamos a presença de endoparasitas, por meio de exame coproparasitológico dos animais domésticos de todas as propriedades rurais do entorno do PEMD. Foram amostrados 197 bovinos, 37 equinos, 11 ovinos, 25 suínos, 62 grupos de galinhas, 22 cães e 1 gato, residentes em 10 grandes propriedades privadas e 75 assentamentos rurais. Eimeria spp. estava presente em quase todas as espécies hospedeiras, com excessão de equinos, cães e gatos. Cistos de Giardia estavam presentes somente em bovinos. Nematodes foram encontrados em suínos, ruminantes e equinos em alta prevalência. Ancylostoma, Toxocara e Sarcocystis foram encontrados em cães. Galinhas foram encontradas com coccidia, Ascaridida e Capillaria spp.. Os parasitas encontrados podem causar má nutrição e problemas reprodutivos para seus hospedeiros. Medidas de prevenção e controle da dispersão de endoparasitas podem melhorar a condição de saúde pública, animal e ambiental nesta área.

Abstract Morro do Diabo State Park (MDSP) is a significant remnant of the Atlantic Rain Forest in Brazil and is surrounded by rural properties. In that area, wild and domestic animals and humans are in close contact, which facilitates the two-way flow of infectious diseases among them. We assessed endoparasites in domestic livestock from all rural properties surrounding MDSP. There were sampled 197 cattle, 37 horses, 11 sheep, 25 swine, 21 dogs, one cat and 62 groups of chickens from 10 large private properties and 75 rural settlements. Eimeria spp. was present in almost all hosts, excepted in horses, dogs and cats. Giardia cysts were present only in cattle. Nematodes were found in swine, ruminants and horses in high prevalence. Ancylostoma, Toxocara and Sarcocystis were found in dogs. Chickens were found with coccidia, Ascaridida and Capillaria spp.. These parasites can cause malnutrition and reproductive disorders for their hosts. Strategies to prevent and control the spread of endoparasites can improve wildlife, animal and human health in this area.

Resumo Eficiências da doramectina, fenbendazole e nitroxynil, utilizados individualmente ou associadamente, foram determinadas através do Teste de Redução na Contagem de Ovos nas Fezes (RCOF) e cultivo de larvas. Os grupos experimentais foram os seguintes: G1 (ovinos tratados com doramectina), G2 (fenbendazole), G3 (nitroxynil), G4 (doramectina + fenbendazole), G5 (doramectina + nitroxynil), G6 (fenbendazole + nitroxynil), G7 (doramectina + fenbendazole + nitroxynil) e G8, não tratados. Os helmintos foram considerados resistentes a doramectina e ao fenbendazole isoladamente e às associações doramectina + fenbendazole, fenbendazole + nitroxynil, e doramectina + fenbendazole + nitroxynil, com taxas de RCOF variando de 62-83%. Helmintos foram considerados suspeitos de resistência ao nitroxynil e apresentaram baixa resistência, quando esta droga foi associada à doramectina. Dos tratamentos isolados, o fenbendazole demonstrou total eficácia (100%) contra Cooperia. Doramectina (G1) foi moderadamente efetiva contra Haemonchus e insuficientemente ativa contra Cooperia, e o nitroxynil efetivo contra Haemonchus (93,2%) e insuficientemente ativo contra Cooperia (0%). Concluiu-se neste estudo que os nematódeos do rebanho são resistentes à doramectina, fenbendazole e nitroxynil, e que, ainda que associadas, não devem ser utilizadas no rebanho por não melhorarem a eficiência anti-helmíntica nem a efetividade contra Haemonchus e Cooperia e por não apresentarem custo-benefício justificado.

Abstract The anthelmintic efficiency of doramectin, fenbendazole, and nitroxynil, used individually or in combination, was determined by the Fecal Egg Count Reduction (FECR) test and cultivation of larvae of anthelminthic-treated sheep grouped as follows: G1 (doramectin), G2 (fenbendazole), G3 (nitroxynil), G4 (doramectin + fenbendazole), G5 (doramectin + nitroxynil), G6 (fenbendazole + nitroxynil), G7 (doramectin + nitroxynil + fenbendazole), G8 (untreated). In addition to individually used doramectin and fenbendazole, the helminths were also resistant to the combination of doramectin + fenbendazole; nitroxynil + fenbendazole; and doramectin + nitroxynil + fenbendazole, with their FECR rates ranging from 62-83%. The helminths showed possible nitroxynil-resistance, but had low resistance when the drug was administered in combination with doramectin. The evaluation of individual helminth species revealed that fenbendazole was fully effective against Cooperia; doramectin (G1), moderately effective against Haemonchus and insufficiently active against Cooperia; nitroxynil, effective against Haemonchus and insufficiently active against Cooperia. It was concluded from the results that herd nematodes are resistant to doramectin, fenbendazole, and nitroxynil, and that the combined use of the drugs not only fails to significantly improve the anthelmintic efficiency against Haemonchus and Cooperia, but is also cost-ineffective.

Resumo Vários fatores extratireoidianos como idade, raça, doenças concomitantes e fármacos podem influenciar na função e no diagnóstico do hipotireoidismo em cães. As alterações nas concentrações dos hormônios tireoidianos decorrentes de doenças não tireoidianas é denominada de síndrome do eutireoideo doente. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da leishmaniose visceral na função da tireoide em cães sem sinais de hipotireoidismo, com ou sem azotemia. Os animais positivos para leishmaniose foram divididos em seis grupos (albumina nornal ou diminuída, creatinina normal ou elevada, uréia normal ou elevada) e foi avaliado o efeito nesses grupos das concentrações séricas do hormônio estimulante da tireoide (TSH), tiroxina total (TT4) e da tiroxina livre (FT4). Os cães positivos para leishmaniose, pelo teste de ELISA, apresentaram concentrações séricas de TSH mais elevadas do que os animais soronegativos, enquanto que as concentrações de TT4 e FT4 em cães com leishmaniose foram menores (P <0,01) quando comparadas com as dos cães saudáveis. No entanto, os resultados estavam no intervalo dos valores para os animais eutireoideos. Nos cães seropositivos para leishmaniose, a TT4 apresentou diferença estatística significativa (P <0,04) no grupo com hipoalbuminemia em relação ao grupo com normoalbuminemia, respectivamente, 1,01ug/dL e 1,4ug/dL. Concluiu-se que os cães positivos para a leishmaniose visceral não desenvolveram síndrome do doente eutireóide, embora as concentrações de TT4 e a FT4 estivessem reduzida e de TSH elevada em relação aos cães sem leishmaniose.

Abstract Several non-thyroid factors such as age, breed, concomitant diseases and use of certain drugs might influence the diagnosis of hypothyroidism in dogs. Changes in the concentrations of thyroid hormones due to non-thyroid illnesses are named euthyroid sick syndrome. The aim of this study was to evaluate the influence of visceral leishmaniasis on thyroid function in dogs without clinical signs of hypothyroidism, with or without azotemia. Positive animals for leishmaniasis were divided into six groups (absence or presence of hypoalbuminemia, normal or increased creatinine, normal or increased urea). The effect on these groups was evaluated on the thyroid-stimulating hormone (TSH), total thyroxine (TT4) and free thyroxine (FT4) concentrations. Dogs that were positive for leishmaniasis, by ELISA test, presented thyroid-stimulating hormone serum concentrations greater than seronegative animals, while total thyroxine and free thyroxine in dogs with leishmanisis were lower (P≤0.01) when compared to healthy dogs. However, the results were within the values for euthyroid animals. In seropositive dogs for leishmaniasis, TT4 showed statistically significant difference (P≤0.04) in the group with hypoalbuminemia compared to the group with normoalbuminemia, respectively, 1,01ug/dL and 1.4 g/dL. Based on this study, we could conclude that positive dogs for visceral leishmaniasis have not presented euthyroid sick syndrome, although when compared to healthy dogs, FT4 and TT4 were reduced and TSH increased.

O hipertireoidismo é uma doença endócrina comum em gatos, resultante da excessiva secreção dos hormônios tireoidianos (tiroxina-T4 e triiodotironina-T3), possui caráter multissistemico e provoca várias alterações nos parametros bioquímicos. A creatina quinase (CK) é uma enzima que tem sua atividade sérica aumentada em diversas enfermidades e, na medicina veterinária, é principalmente utilizada para avaliar lesões no músculo esquelético, músculo cardíaco e tecido hepático. O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência da atividade sérica da CK em gatos com hipertireoidismo e suas associações com alterações clínico-patológicas e com a tiroxina total (TT4) e livre (FT4). A atividade sérica da CK foi avaliada em 19 gatos com hipertireodismo espontâneo, com TT4 variando de 34,88-294,98nmol L-1 e FT4 variando de 2,83-52,9nmol L-1. Sua atividade estava elevada em 47,3% dos gatos (≥250U L-1) e apresentou diferença estatística (P<0,05) entre gatos com ou sem doença cardíaca. A CK apresentou associação fraca com os paramêtros bioquímicos avaliados. Neste estudo, não foi possível estabelecer uma associação clara entre o hipertireoidismo e o aumento da CK. Contudo, os resultados encontrados da atividade da CK encorajam a realização de novos estudos, para uma compreensão mais profunda da elevação da CK no hipertireoidismo.

The aim of this study is to determine the occurrence of creatine kinase (CK) serum activity in cats with hyperthyroidism and its associations with clinical-pathological alterations and with total (TT4) and free (FT4) thyroxin. CK serum activity was evaluated in 19 cats with spontaneous hyperthyroidism, with TT4 ranging from 34.88-294.98nmol L-1 and FT4 ranging from 2.83-52.9pmol L-1 and also by serum biochemical analysis, including the activity of CK, alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), gamma-glutamyl transferase (GGT), cholesterol and bile acids. The reference value for CK considered in this study was of 110-250U L-1. CK serum activity was evaluated in 19 cats with spontaneous hyperthyroidism, with TT4 ranging from 34.88-294.98nmol L-1 and FT4 ranging from 2.83-52. 9pmol L-1. Its activity CK was elevated in 47.3% of cats (≥250U L-1) and presented statistical difference (P<0.05) between cats with or without cardiac disease. CK presented weak association with all parameters in biochemical analysis. In this study, it was not possible to establish a clear association between hyperthyroidism and the increase of CK. However, it is important to highlight the inclusion of CK activity in the routine examinations for the evaluation of hyperthyroidism and for further studies to be developed.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar a frequência de ocorrência e a variedade de parasitas intestinais de animais silvestres de vida livre. Amostras de fezes de mamíferos e aves silvestres de centros de reabilitação dos Estados do Mato Grosso do Sul e São Paulo, foram analisadas pelos métodos de sedimentação e de centrífugo-flutuação. Foram encontrados ovos, oocistos, cistos e/ou trofozoítos de parasitas em 71% das amostras. Oocistos deCryptosporidium sp. foram detectados em amostras de fezes de gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) e maritacas (Pionus maximiliani). Cistos de Giardiaforam identificados nas fezes de um veado catingueiro (Mazama gouazoubira). Entre os parasitas mais comuns, foram encontrados ovos de Toxocara cati, Toxascaris leonina eAncylostoma tubaeforme, além de ovos de Cestoda. Vários ovos de Enterobius sp. foram encontrados nas fezes de bugio (Alouatta seniculus). Neste trabalho concluiu-se que, apesar de pequeno o número de amostras, a diversidade de parasitas encontrados foi relevante. Informações adicionais sobre a endofauna parasitária em animais silvestres são necessárias, pois podem sugerir a interação e proximidade com animais domésticos e/ou o homem. Além disso, maiores estudos sobre os parasitas de animais silvestres de vida livre são primordiais para a compreensão da intensidade de alterações antrópicas no meio silvestre.

The objective of this study was to investigate the frequency of occurrence and variety of intestinal parasites among free-living wild animals. Fecal samples from wild mammals and birds at rehabilitation centers in the states of Mato Grosso do Sul and São Paulo were analyzed by sedimentation and flotation-centrifugation methods. Parasite eggs, oocysts, cysts and/or trophozoites were found in 71% of the samples. Cryptosporidiumsp. oocysts were detected in fecal samples from oncillas (Leopardus tigrinus) and scaly-headed parrots (Pionus maximiliani). Giardia cysts were identified in the feces of a gray brocket (Mazama gouazoubira). Among the most common parasites found, there were eggs from Toxocara cati,Toxascaris leonina and Ancylostoma tubaeforme, and from Cestoda. Several Enterobiussp. eggs were found in the feces of red howler monkeys (Alouatta seniculus). It can be concluded from this study that despite the small number of samples, the diversity of parasites found was noteworthy. Additional information about parasite endofauna in wild animals is needed, since their presence might suggest that there could be proximity to and interactions with domestic animals and/or humans. In addition, further studies on parasites from free-living wild animals are of prime importance for understanding the intensity of anthropic changes in wild environments.

Os objetivos deste estudo foram investigar a ocorrência de Toxoplasma gondii e comparar os resultados obtidos no Teste de Aglutinação Modificada (MAT), Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e o bioensaio em camundongos. Para tanto, 40 galinhas de criação livre de oito fazendas em áreas limítrofes ao Pantanal da Nhecolândia, Mato Grosso do Sul, foram eutanasiadas e amostras de sangue, o cérebro e o coração foram coletados. A frequência de anticorpos anti-T. gondii encontrada nas galinhas foi de 67,5% (27 amostras), considerando como ponto de corte a diluição 1:5. Entre as amostras analisadas, 7 (25,9%) foram positivas na diluição 1:5, 3 (11,1%) em 1:10, 2 (7,4%) em 1:20, 3 (11,1%) em 1:320, 1 ( 3,7%) em 1:640, 3 (11,1%) em 1:1.280, 2 (7,4%) em 1:2.560, 4 (14,8%) em 1:5.120 e 2 (7,4%) em 1:10.240. A partir da mistura de amostras de tecidos (cérebro e coração) das galinhas analisadas, 16 (40%) apresentaram bandas eletroforéticas compatíveis com T. gondii por PCR (gene B1). Na comparação das técnicas, revelou-se 59,26% de positividade na PCR entre os animais soropositivos no MAT (ponto de corte 1:5). Dos 141 camundongos inoculados, seis (4,44%) morreram de toxoplasmose aguda entre 15 e 23 dias após a inoculação. Os camundongos que sobreviveram foram sacrificados 74 dias após a inoculação, sendo encontrados 28 cistos nos cérebros de 10 grupos distintos. Das galinhas soropositivas, foram realizados 27 bioensaios e obtidos 11 (40,7%) isolados. Um maior número de isolamentos ocorreu em camundongos que foram inoculados com tecidos de galinhas que tinham altos títulos de anticorpos anti-T. gondii. Infecção crônica em camundongos foi observada em nove grupos (33,3%) de cinco propriedades diferentes. Entre os camundongos que sobreviveram, 25,6% foram positivos para T. gondii no MAT (1:25). Dos camundongos positivos na PCR, 87,5% também foram positivos no MAT. Já entre os camundongos PCR negativos 5,2% foram positivos para T. gondii no MAT. Concluiu-se através deste estudo que a ocorrência de infecção pelo T. gondii nas propriedades rurais estudadas foi alta, que a PCR direcionada ao gene B1, não confirma a viabilidade do parasita, porém pode ser utilizada como método de triagem para a seleção de galinhas infectadas por T. gondii, que os animais com título maior que 10 devem ser priorizados para a seleção de animais para bioensaio, pois para eles, as chances de isolamento do parasita são maiores e que a soroconversão em camundongos infectados experimentalmente não é um bom indicador de isolamento do agente.

The aim of this study was to investigate the occurrence of Toxoplasma gondii and compare the results obtained in the Modified Agglutination Test (MAT), Polimerase Chain Reaction (PCR) and bioassay in mice. In order to accomplish this, 40 free-range chickens from eight farms in neighboring areas to the Pantanal in Nhecolândia, Mato Grosso do Sul, were euthanized and blood samples, brain and heart were collected. The occurrence of anti-T. gondii antibodies found in chickens was 67.5% (27 samples), considering as a cutoff point the dilution 1:5. Among the samples analyzed, 7 (25.9%) were positive in the dilution 1:5, 3 (11.1%) in 1:10, 2 (7.4%) in 1:20, 3 (11.1%) in 1:320, 1 ( 3.7%) in 1:640, 3 (11.1%) in 1:1280, 2 (7.4%) in 1:2560, 4 (14.8%) in 1:5120 and 2 (7.4%) in 1:10.240. From the mixture of tissue samples (brain and heart) from the chickens analyzed, 16 (40%) presented electrophoretic bands compatible with T. gondii by PCR (gene B1). In the comparison of techniques, 59.26% positivity in PCR was revealed among animals that were seropositive in MAT (cutoff 1:5). From 141 inoculated mice, six (4.44%) died of acute toxoplasmosis between 15 and 23 days after inoculation. Surviving mice were sacrificed at 74 days after inoculation, and a total of 28 cysts were found in the brains of 10 distinct groups. From the seropositive hens, 27 bioassays were performed and 11 (40.7%) isolates were obtained. A greater number of isolations happened in mice that were inoculated with tissues from chickens that had high titers for anti-T. gondii antibodies. Chronic infection in mice was observed in nine groups (33.3%) from five different properties. Among the surviving mice, 25.6% were positive for T. gondii in MAT (1:25). From mice positive in PCR, 87.5% were also positive in MAT. Among the PCR-negative mice, 5.2% were positive for T. gondii in MAT. It can be concluded through this study that the occurrence of infecton by T. gondii in the rural properties studied was high, that PCR directed to gene B1 does not confirm the viability of the parasite, but it can be used as a screening method for the selection of chickens infected by T. gondii, that the animals with titer greater than 10 must be prioritized for the selection of animals for bioassay, since for them, the chances of isolating the parasite are greater and that seroconversion in experimentally infected mice is not a good indicator for isolating the agent.