Annona mucosa é uma árvore frutífera da família Annonaceae, produtora de importantes metabólitos secundários de interesse medicinal, como lignanas, acetogeninas e alcaloides. A cultura in vitro de calos representa um importante recurso para a produção contínua de metabólitos, viabilizando a conservação da biodiversidade química e a obtenção controlada de material para estudos biológicos e fitoquímicos. O objetivo deste trabalho foi otimizar a produção de calos friáveis de A. mucosa, avaliando o efeito de diferentes meios nutritivos e fitorreguladores. Segmentos de folha e de hipocótilo de plântulas germinadas in vivo foram utilizados como explantes e inoculados nos meios de cultura MS, WPM e B5 suplementados com picloram (2 - 20µM) isolado ou combinado com as citocininas BAP, KIN ou TDZ (0,2 - 1µM). As culturas foram mantidas a 26±2ºC, no escuro, com subcultivos mensais. A produção de calos foi avaliada por aferição do peso dos calos, após 90 dias. Em todos os tratamentos na presença da auxina picloram, o cultivo de hipocótilos resultou em maior porcentagem de formação de calos, sobretudo no meio de cultura WPM. A associação com TDZ produziu massa calogênica friável altamente proliferativa e ausente de oxidação, alcançando valores superiores àqueles obtidos em trabalhos prévios com a espécie. Os resultados viabilizam o uso do material em suspensões celulares e posterior caracterização fitoquímica para a exploração da produção in vitro de metabólitos da espécie.

The Annona mucosa is a fruit tree of the Annonaceae family that produces a range of secondary metabolites of medicinal interest, such as lignans, acetogenins and alkaloids. The callus culture represents a renewable source of valuable medicinal compounds and controlled supply of material for biological and phytochemical studies. Therefore, this study was carried out to investigate the effects of three nutrient media, different concentrations of picloram and cytokinin types, in order to optimize the biomass yield and friability of calluses of A. mucosa. Leaf and hypocotyl segments from seedlings produced from in vivo seed germination were used as explants, which were inoculated in MS, WPM and B5 culture media supplemented with picloram (2-20µM) only or in addition to the cytokinins BAP, KIN or TDZ (0,2 - 1µM ). Cultures were maintained at 26±2ºC in the dark, with monthly subcultures. After 90 days, biomass production was evaluated. In all treatments, hypocotyl explants provided the highest percentage of callus formation, particularly in WPM. The association with TDZ produced highly proliferative friable callus, with no oxidation, reaching higher values than the previous works with this species. The results enable the use of the calluses produced in cell suspensions and the subsequent phytochemical characterization, in order to explore the in vitro production of metabolites of the species.

RESUMO Foi realizada a estimativa de freqüência de infecção por Leptospira sp. em bovinos do Estado da Paraíba, Brasil. Seis municípios foram escolhidos ao acaso em cada uma das 3 ecorregiões do Estado: Agreste/Litoral, Cariri/Curimatau e Sertão. Estes 18 municípios foram divididos em quadrantes e uma propriedade foi selecionada por quadrante. As amostras de sangue foram coletadas aleatoriamente de, pelo menos, 32 animais por propriedade. Todos os municípios incluídos no estudo (100%) e 87,75% das propriedades apresentaram no mínimo uma amostra positiva para pelo menos uma das 15 diferentes sorovariedades de Leptospira sp. (16 amostras) testadas. Dos 2.343 animais examinados, 759 reagiram positivamente para pelo menos uma das 16 amostras de Leptospira sp. testadas. Quatrocentos e setenta animais reagiram positivamente para múltiplas amostras. A sorovariedade Hardjo, do sorogrupo Sejroe, foi a mais freqüente com 16,05% (95% IC – 12,69% a 19,41%) dos resultados positivos (376 reações positivas). Houve diferenças na freqüência dos resultados positivos para as amostras da sorovariedade Hardjo testadas: amostra Norma (15,62% 95% IC – 12,38% a 18,86%), isolada no Brasil, e a amostra de referência Hardjoprajitino (2,43% 95% IC – 1,12% a 3,75%). As demais sorovariedades apresentaram freqüências inferiores a 2,8%. Os resultados obtidos no presente estudo confirmam que Leptospira interrogans serovar Hardjo é amplamente distribuída no Estado da Paraíba, Brasil.

ABSTRACT A survey was conducted to estimate the frequency of Leptospira sp. infection in cattle in the State of Paraíba, Brazil. A random sample of 6 municipalities was chosen from each of 3 ecoregions of the state: the Agreste/Litoral, the Cariri/Curimatau and the Sertão. These 18 municipalities were broken down into quadrants and one property was selected at random from each quadrant. Random samples were collected from at least eight animals at each property, in four-age categories, summing at least 32 animals per property. All municipalities that were included in the study (100%) and 87.75% of the properties had at least one positive sample for one of the 15 different Leptospira sp. serovars (16 strains) studied. From 2,343 samples, 759 showed positive reaction to, at least, one of the 16 strains tested. Four hundred and seventy animals were positive to multiple strains. The serovar Hardjo, of the Sejroe serogroup, was the most frequent and accounted for 16.05% (95% CI 12.69% to 19.41%) of the positive results (376 positive reactions). There were differences in the frequency of positive results according to the two strains of serovar Hardjo used: strain Norma (15.62% 95% CI 12.38% to 18.86%), isolated in Brazil, and reference strain Hardjoprajitino (2.43% 95% CI 1.12% to 3.75%). The remaining serovars tested had frequencies lower than 2.8%. Results obtained in the present study confirmed that Leptospira interrogans serovar Hardjo is widely spread in the State of Paraíba, Brazil.