RESUMO Objetivos: Investigar a reprodutibilidade intra-laboratorial dos fenótipos clínicos e avaliar anisotropias ópticas em córneas de coelhos com deficiência de células tronco limbais. Métodos: Lesões ao limbo foram feitas no olho direito de 23 coelhos adultos da Nova Zelândia Branco, usando um protocolo altamente agressivo, que envolveu peritomia limbal em 360 graus, ceratolimbectomia, cauterização por álcali, e remoção mecânica de epitélio remanescente. Os olhos foram clinicamente avaliados por 28 dias, inclusive por citologia de impressão corneal. As córneas que manifestaram um conjunto de alterações típicas de deficiência de células tronco limbais foram coletadas e submetidas à estudos em histopatologia e em anisotropias ópticas. Córneas saudáveis foram usadas como controles. Diferenças de caminho óptico de birrefringência relacionada à organização do colágeno estromal, e dicroísmo linear relacionado à expressão e à orientação das cadeias de glicosaminoglicanos dos proteoglicanos estromais, foram quantificados por microscopia de luz polarizada. Resultados: Um olho apresentou hipópio e foi excluído do estudo. Todos os olhos estudados (n=22) apresentaram sinais de inflamação ocular. A citologia de impressão não detectou células caliciformes na superfície corneal. Doze de 22 córneas manifestaram alterações clínicas típicas de deficiência de células tronco limbais, caracterizado por defeitos epiteliais, infiltrados inflamatórios, opacidade de moderada à severa, e neovascularização. Estudos por microscopia de luz polarizada mostraram que a deficiência de células tronco limbais aumentou a diferenças de caminho óptico corneal em 24,4% (versus controles). As córneas com deficiência de células tronco limbais foram menos dicroicas do que as córneas controle. Conclusões: Coelhos com deficiência de células tronco limbais, para aplicações em estudos pré-clínicos, devem ser rigorosamente selecionados para assegurar homogeneidade experimental, pois há evidências de que protocolos utilizados para indução de deficiência de células tronco limbais não estão associados com boa reprodutibilidade intra-laboratorial de fenótipos clínicos. A deficiência de células tronco limbais, como induzida aqui, alterou as propriedades ópticas anisotrópicas do estroma corneal. Tais alterações são indicativas de mudanças no empacotamento de colágeno e na orientação das cadeias de glicosaminoglicanos dos proteoglicanos. Conhecimentos nessas alterações são importantes para potencializar estratégias que visam a restabelecer a integridade morfofuncional do estromal corneal acometido pela deficiência de células tronco limbais.

ABSTRACT Purposes: To investigate the intra-laboratory reproducibility of clinical features and to evaluate corneal optical anisotropies in a rabbit model of limbal stem cell deficiency. Methods: Limbal injury was induced in the right eye of 23 adult New Zealand White rabbits using a highly aggressive protocol that combined 360 degrees limbal peritomy, keratolimbectomy, alkaline chemical burn, and mechanical removal of the epithelium. Clinical evaluation of the injured eyes was performed for 28 days and included corneal impression cytology. Corneas with a severe clinical outcome set typical of limbal stem cell deficiency were then collected, subjected to a histopathological examination, and examined for optical anisotropies. Corneas from healthy rabbit eyes were used as controls. Differences in optical path due to stromal collagen birefringence, as well as linear dichroism related to the expression and spatial orientation of glycosaminoglycan chains from proteoglycans, were measured from cross-sections under a quantitative polarized light microscope. Results: One eye showed signs of hypopyon and was excluded. Signs of ocular inflammation were observed in all eyes studied (n=22). Corneal impression cytology did not detect goblet cells. Twelve of the 22 corneas presented a clinical outcome set typical of limbal stem cell deficiency, which is characterized by the presence of epithelial defects, inflammatory cells, moderate-to-severe opacity, and neovascularization. Microscopic studies under polarized light revealed that relative to controls, limbal stem cell deficiency caused a 24.4% increase in corneal optical path differences. Further, corneas with limbal stem cell deficiency were less dichroic than controls. Conclusions: These results suggest that rabbit models of limbal stem cell deficiency must be rigorously screened for use in preclinical studies to ensure experimental homogeneity because protocols used to create limbal stem cell deficiency could be not associated with good intra-laboratory reproducibility of clinical features. Limbal stem cell deficiency, as induced herein, altered the optical anisotropic properties of the corneal stroma. Such alterations are indicative of changes in collagen packing and the spatial orientation of glycosaminoglycan chains from proteoglycans. Knowledge of these changes is important to potentiate strategies aimed at restoring the morphofunctional integrity of the corneal stroma affected by limbal stem cell deficiency.

RESUMO Objetivou-se estabelecer valores de referência para eletrorretinografia (ERG) de 23 cervídeos anestesiados, de oito espécies neotropicais (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus e Blastocerus dichotomus). Somente os olhos direitos foram estudados. A contenção química foi realizada com cetamina/xilazina, IM, nas seguintes espécies: M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus e O. virginianus. Para o B. dichotomus, foi utilizada a associação de tiletamina/zolazepam e xilazina. Após 20 minutos de adaptação ao escuro, os eletrorretinogramas foram obtidos com aparelho portátil de ERG, utilizando-se o protocolo “QuickRet Check”, em três intensidades de luz: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2 e 10cd.s/m2. Após adaptação à luz, realizou-se a fase fotóptica. Os valores para amplitude da onda A durante a resposta padrão mista de cones/bastonetes em M. americana foram significativamente menores quando comparados aos do B. dichotomus. Não foram observadas outras diferenças entre as espécies. A realização de ERG em cervídeos neotropicais é aplicável utilizando-se aparelho portátil e não demonstrou diferenças quanto à resposta retiniana a diferentes intensidades de luz. Dessa forma, o estilo de vida das espécies é ditado mais pela pressão de seleção do ambiente do que por fatores fisiológicos.

ABSTRACT The aim of this study was to establish normal baseline ERG values of 23 anesthetized deer belonging to 8 neotropical species (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus and Blastocerus dichotomus). Only right eyes were studied. Chemical restraint was performed using xylazine associated with ketamine, IM, for M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus and O. virginianus. A combination of tiletamine/zolazepam diluted in xylazine 2% was used for B. dichotomus individuals. After 20min of dark adaptation, electroretinograms were obtained using a handheld electroretinography (ERG) machine using the QuickRetCheck Protocol at three different light intensities: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2, and 10cd.s/m2. After light adaptation, photopic phase was recorded. A-wave amplitude recorded during pattern mixed rod/cone response in M. americana was significantly lower when compared to B. dichotomus. No other differences were observed between the species studied. ERG in Neotropical deer is applicable using a portable ERG system and did not show differences among species in relation to the retinal response at different light intensities. Therefore, the lifestyle of the species is more dictated by the selection pressure of the environment than by physiological factors.

RESUMO Estruturas oculares de cães braquicéfalos foram estudadas por elastografia acoustic radiation force impulse (ARFI) para estabelecer valores quantitativos e qualitativos de referência relacionados com a forma e a rigidez de algumas estruturas oculares. Foram avaliados 84 olhos de 42 cães braquicéfalos neste estudo. Os animais foram submetidos aos exames físico, laboratorial e aos exames oftalmológicos. Após a confirmação da sanidade dos pacientes, os cães foram submetidos à ultrassonografia e à elastografia ARFI, enfatizando-se o nervo óptico, o corpo ciliar e a lente. Para elastografia qualitativa, foram observadas características homogêneas no corpo ciliar e no nervo óptico. Os humores aquoso e vítreo foram visibilizados como imagens tipo mosaico. A elastografia quantitativa demonstrou velocidades de cisalhamento para nervo óptico de 1,01±0,27m/s, para corpo ciliar temporal de 0,91±0,24m/s e para corpo ciliar nasal de 0,91±0,3m/s. Valores dessas velocidades para lentes apresentaram-se fora do intervalo: X.XXm/s. A elastografia provou ser um procedimento não invasivo e viável para cães. Estabelecidos os parâmetros do grau de rigidez das estruturas oculares, futuramente tais dados servirão como padrão para avaliação de animais com os distúrbios oculares. Os resultados podem ser extrapolados para a pesquisa primária sobre a aplicabilidade da ARFI na avaliação do bulbo ocular em seres humanos.

ABSTRACT Eyes from brachycephalic dogs were studied by acoustic radiation force impulse (ARFI) elastography to establish quantitative and qualitative reference values related to the shape and rigidity of some ocular structures. Eighty-four eyes from 42 adult brachycephalic dogs were included in this study. Animals were subjected to physical, laboratory, and ophthalmic examinations. Following confirmation of good health, the dogs were subjected to ultrasonography and ARFI elastography, emphasizing the optic nerve, ciliary body, and lens. On qualitative elastography, homogeneous characteristics were observed on the ciliary body and optic nerve. Aqueous and vitreous humors were visualized as mosaic-like images. Quantitative elastography showed the mean optic nerve shear wave velocity (SWV) was 1.01±0.27m/s, temporal ciliary body was 0.91±0.24m/s, and nasal ciliary body was 0.91±0.3m/s. The SWV of the lens values were out of range, this value was not detectable by this software. Elastography has proved to be a non-invasive procedure and feasible in dogs. The establishmentof the parameters of degree of rigidity of ocular structures will serve as a baseline for animals with eye disorders. Results may be extrapolated to primary research on the applicability of ARFI in the evaluation of ocular bulb in humans.

RESUMO O objetivo deste trabalho foi determinar o equilíbrio dos cascos de equídeos. Foram utilizados 60 animais, sendo estes: 20 equinos da raça Crioula, 20 muares e 20 asininos da raça Pêga. O peso vivo foi estimado por meio de equações de correlação com o perímetro torácico específico a cada espécie. Utilizando-se paquímetro, fita métrica e podogoniômetro, foram mensurados comprimento e largura da ranilha e do casco, altura e ângulo dos talões medial e lateral, comprimento dorsal e ângulo da pinça e perímetro da banda coronária dos cascos dos membros torácicos e pélvicos. Dentro de cada grupo, observou-se que os cascos dos membros pélvicos exibem-se mais estreitos que os cascos dos membros torácicos, e não houve diferença entre o ângulo das pinças de ambos os grupos de membros. A conformação dos cascos dos asininos mostra-se substancialmente divergente do observado nos equinos, estando os muares numa condição intermediária, sendo aqueles menores, mais angulados e com ranilha robusta e proporcionalmente mais desenvolvida. Da mesma forma, os cascos dos asininos proporcionam maior área de apoio em relação aos muares e equinos, em ordem decrescente, mesmo sendo dimensionalmente menores. Conclui-se que os cascos de equinos, muares e asininos apresentam padrões de equilíbrio geométrico específicos, que devem ser levados em consideração no momento do casqueamento e na inferência de desequilíbrios.

ABSTRACT Differences in hoof balance between horses, mules and donkeys were identified in order to form more specific considerations for proper management of the animals. Measurements of the natural dimensions of hooves in sixty animals were used: 20 horses from the Crioulo breed, 20 mules and 20 donkeys from the Pêga breed. Liveweight was estimated using the correlation equations in each species by heart girth. Using a caliper rule, tape measure and hoof gauge, measurements of the length and width of the frog, hoof height, angle of heel, medial and lateral dorsal length, angle of the toe and crown circumference of the hooves of forelimbs and hindlimb were taken. Within each group the hooves of the hindlimbs exhibited narrower measurements than the hooves of the forelimbs and no difference was observed between the hoof angle of both members of groups. The conformation of the hooves of donkeys is shown to be substantially different from that observed in horses, the mules being in an intermediate condition, being smaller, angled and robust frog and proportionally more developed. Similarly, the hooves of donkeys provide greater support area compared to mules and horses, in descending order, even being dimensionally smaller. We conclude that the hooves of horses, mules and donkeys, have specific patterns of geometric balance that must be taken into consideration at the time of trimming and imbalance inferences.

RESUMO O citrato de sildenafil é um inibidor da fosfodiesterase do tipo 5 (PDE-5), capaz de inibir também a fosfodiesterase do tipo 6 (PDE-6), proporcionando benefícios clínicos e paraefeitos, alguns deles potencialmente relacionados à retina. Foram estudados efeitos do sildenafil sobre a circulação retrobulbar e a retiniana em 27 coelhos machos adultos, da raça Nova Zelândia Branco. Avaliou-se a atividade elétrica da retina antes e ao término dos tratamentos e realizaram-se estudos à imunoistoquímica. Encontrou-se aumento da amplitude da onda b na resposta mista de cones e de bastonetes, após 7 dias de tratamento com citrato de sildenafil. Entretanto, nas demais avaliações e períodos, os valores não divergiram dos basais. Pela imunoistoquímica, não se observou diminuição significativa da expressão das proteínas PDE-5 e PDE-6. Com base nos resultados obtidos, é possível admitir que o citrato de sildenafil não alterou a expressão de PDE-5 e PDE-6, tampouco, a atividade eletrorretinográfica da retina de coelhos machos da raça Nova Zelândia Branco.

Sildenafil citrate is a type-5 phosphodiesterase inhibitor (PDE-5), able to inhibit type-6 phosphodiesterase (PDE-6) as well, providing clinical benefits and paraeffects, some of them potentially related to the retina. The effects of the sildenafil on the retrobulbar and retinal circulation were studied in 27 adult male rabbits of the White New Zealand breed. The electric activity of the retina was evaluated before and at the end of the treatments, and immunohistochemistry studies were conducted. An amplitude increase of the b wave was found in the mixed response of cones and rods after 7 days of treatment with sildenafil citrate. However, in the other evaluations and periods, the values did not differ from the basal ones. Through immunohistochemistry, no significant decrease of the expression of PDE-5 and PDE-6 proteins was observed. Based on the results obtained, it is possible to admit that the sildenafil citrate did not change the expression of PDE-5 and PDE-6, neither the electroretinographic activity of the retina of male rabbits of the White New Zealand breed.

Avaliou-se a pressão intra-ocular (PIO) e estimaram-se as correlações entre PIO e pressão de dióxido de carbono (PaCO2) e pH arterial de cinco caracarás (Caracara plancus), anestesiados com isofluorano (ISO) ou sevofluorano (SEV). Valores basais da PIO foram aferidos em ambos os olhos (M0). Cateterizou-se previamente a artéria braquial para obtenção de parâmetros hemogasométricos e cardiorrespiratórios. Anestesia foi induzida com ISO a 5V% e mantida por 40 minutos com 2,5V%. PIO e amostras de sangue foram avaliadas em diferentes momentos até o final do procedimento. Após recuperação, uma segunda anestesia foi realizada com SEV a 6% e mantida com 3,5%. Os parâmetros foram aferidos nos mesmos momentos estabelecidos previamente. A PIO decresceu significativamente (P=0,012) de M0 em todos os momentos e não houve diferença estatística entre ISO e SEV. Correlações significativas entre PIO e PaCO2 e entre PIO e pH sangüíneo foram observadas apenas para a anestesia com SEV. O pH sangüíneo decresceu paralelamente a PIO, enquanto a PaCO2 aumentou, em carcarás anestesiados com isofluorano e sevofluorano.

The intraocular pressure (IOP) and its correlations with arterial carbon dioxide partial pressure (PaCO2) and arterial pH were studied in five crested caracaras (Caracara plancus) anesthetized with isoflurane (ISO) and sevoflurane (SEV). Baseline IOP values were measured in both eyes (M0). Brachial artery was previously catheterized to obtain blood gas and cardiorespiratory analysis. Anesthesia was induced with 5% ISO and maintained with 2.5% for 40 minutes. IOP measurements and blood samples were evaluated in different moments until the end of the procedure. After recovering, a second anesthesia was induced with 6% SEV and maintained with 3.5%. Parameters were evaluated at the same time points of the previous procedure. IOP reduced significantly (P= 0.012) from M0 at all time points and no significative changes were observed between ISO and SEV anesthesias. Correlation between IOP and PaCO2 and between PIO and blood pH were found only for SEV. IOP and blood pH decreased in parallel with IOP, whereas values of PaCO2 increased in caracaras anesthetized with isoflurane and sevoflurane.