BACKGROUND Lutzomyia longipalpis-derived cell line (Lulo) has been suggested as a model for studies of interaction between sandflies and Leishmania. OBJECTIVES Here, we present data of proteomic and gene expression analyses of Lulo cell related to interactions with Leishmania (Viannia) braziliensis. METHODS Lulo cell protein extracts were analysed through a combination of two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry and resulting spots were further investigated in silico to identify proteins using Mascot search and, afterwards, resulting sequences were applied for analysis with VectorBase. RESULTS Sixty-four spots were identified showing similarities to other proteins registered in the databases and could be classified according to their biological function, such as ion-binding proteins (23%), proteases (14%), cytoskeletal proteins (11%) and interactive membrane proteins (9.5%). Effects of interaction with L. (V.) braziliensis with the expression of three genes (enolase, tubulin and vacuolar transport protein) were observed after an eight-hour timeframe and compared to culture without parasites, and demonstrated the impact of parasite interaction with the expression of the following genes: LLOJ000219 (1.69-fold), LLOJ000326 (1.43-fold) and LLOJ006663 (2.41-fold). CONCLUSIONS This set of results adds relevant information regarding the usefulness of the Lulo cell line for studies with Leishmania parasites that indicate variations of protein expression.

RESUMO A natureza sempre se forneceu uma fonte inesgotável compostos biologicamente ativos. Desde o início da humanidade, os homens buscaram recursos na fauna e flora para tratar as doenças oculares. Porém, foi somente após a Revolução Industrial que extratos de plantas e substâncias de origem animal puderam ser utilizados com segurança, como foi determinado por estudos controlados de intervenção. Dois grandes desafios enfrentados pela farmacologia foram: desenvolver drogas capazes de reduzir a cegueira pelo glaucoma; e controlar a dor associada à cirurgia ocular. A busca por uma droga que efetivamente reduza a pressão intraocular e controle a progressão do glaucoma levou ao desenvolvimento de diversos hipotensores oculares, como a physostigmine da planta Physostigma venenosum. As propriedades anestésicas da cocaína, extraídas da Erythroxylon coca, finalmente permitiram procedimentos cirúrgicos no olho. Vários novos compostos naturais foram investigados na tentativa de identificar substâncias com potencial para fornecer benefícios adicionais ao tecido ocular e à visão. Evidências emergentes de propriedades anti-inflamatórias, de cicatrização de feridas, antimicrobianas, antioxidantes, antitumorais e antiangiogênicas atribuídas a extratos de plantas e tecidos animais estimularam mais investimentos em pesquisas nessa área. Apesar dos avanços tecnológicos na síntese de drogas, a indústria farmacêutica ainda busca novos princípios ativos a partir de fontes naturais, bem como revisita drogas derivadas já estabelecidas. Embora um grande número de compostos que ocorrem naturalmente seja conhecido, este artigo de revisão concentra-se nas substâncias bioativas com benefícios cientificamente comprovados para os tecidos oculares.

ABSTRACT Nature has always provided an unlimited source of biologically-active compounds. Since the beginning of mankind, humans have sought resources in fauna and flora to treat eye diseases. However, it was only after the Industrial Revolution that extracts of plants and substances of animal origin could be used safely, as has been determined by controlled interventional studies. Two major challenges faced by ocular pharmacology are the following: developing drugs that are able to reduce blindness due to glaucoma; and controlling the pain associated with eye surgery. The search for a drug that effectively lowers intraocular pressure and controls the progression of glaucoma has led to the development of various ocular hypotensive agents, such as physostigmine from the Physostigma venenosum plant. The anesthetic properties of cocaine, extracted from Erythroxylon coca, finally enabled surgical procedures in the eye. Several new natural compounds have been investigated in an attempt to identify substances with the potential to provide additional benefits to eye tissue and vision. Emerging evidence of anti-inflammatory, wound-healing, antimicrobial, antioxidant, antitumor, and antiangiogenic properties attributed to plant extracts and animal tissues has encouraged more investment in research in this area. Despite technological advances in synthesizing drugs, the pharmaceutical industry still seeks new active compounds from natural sources as well as from revisiting already-established naturally derived compounds. Although a large number of naturally-occurring compounds is known, this review article focuses on the bioactive substances with scientifically-proven benefits for ocular tissues.

RESUMO Objetivos: Comparar a concentração no humor aquoso entre as soluções de moxifloxacina 0,5% e gatifloxacina 0,3% sozinhas ou combinadas com corticosteroides, e correlacionar a concentração com a concentração inibitória mínima (MIC) para os agentes microbianos mais comumente relacionados a endoftalmites. Métodos: Pacientes que seriam submetidos a cirurgia de catarata foram selecionados para receber 1 gota a cada 15 min, 1 hora antes do procedimento de uma das seguintes soluções: moxifloxacina (G1), moxifloxacina + dexametasona (G2), gatifloxacina (G3) ou gatifloxacina + prednisolona (G4). Amostras do humor aquoso foram coletadas antes do início da cirurgia. Espectrofotometria de massa por HPLC determinou a concentração do antibiótico nas amostras. Resultados: A concentração media de antibiótico nas amostras foram: G1= 1280,8 ng/mL; G2= 1644,3 ng/mL; G3= 433,7 ng/mL; G4= 308,1 ng/mL. Concentração média entre G1 e 2 (p=0,01), e G3 e 4 (p=0,008). Todas as amostras alcançaram MIC para S. epidermidis; 100% das amostras do G1 e 2, e 97% do G3 e 4 atingiram o MIC para S. aureus fluoroquinolona-sensível; 100% das amostras do G1 e 2, 88% do G3 e 72% do G4 atingiram o MIC para Enterococci (p<0,001); e 100% das amostras do G1 e 2, 59% do G3 e 36% do G4 atingiram o MIC para S. pneumoniae (p<0,001). Para o S. aureus resistente a fluoroquinolona, 23% do G1, 44% do G2, e nenhuma das amostras G3 e 4 atingiram o MIC (p<0,001). Conclusão: Moxifloxacina + dexamethasona demonstrou maior concentração no humor aquoso comparado com a moxifloxacina sozinha. Gatifloxacina + esteróide demonstrou menor penetração na câmara anterior comparado a solução de gatifloxacin sem corticóide. A moxifloxacina foi superior a gatifloxacina considerando o MIC para Enterococci, S. pneumoniae e S. aureus fluorquinolona resistente.

ABSTRACT Purpose: To compare the aqueous humor (AH) concentrations of moxifloxacin 0.5% and gatifloxacin 0.3% solutions alone or when treatment was combined with steroids, and to correlate these concentrations with the minimum inhibitory concentrations (MIC) for the most common endophthalmitis-causing organisms. Methods: Patients undergoing phacoemulsification were enrolled to receive one drop of one of the following solutions: moxifloxacin (G1), moxifloxacin + dexamethasone (G2), gatifloxacin (G3), or gatifloxacin + c (G4), every 15 min, 1h before surgery. AH samples were collected before surgery and analyzed using HPLC-tandem mass spectrometry. Results: The mean antibiotic concentrations in the AH were: G1= 1280.8 ng/mL; G2= 1644.3 ng/mL; G3= 433.7 ng/mL; and G4= 308.1 ng/mL. The mean concentrations statistically differed between G1 and G2 (p=0.01), and G3 and G4 (p=0.008). All samples achieved the MIC for Staphylococcus epidermidis; 100% of the samples from G1 and G2, and 97% from G3 and G4 reached the MIC for fluoroquinolone-sensitive Staphylococcus aureus; 100% of the samples from G1 and G2, 88% from G3, and 72% from G4 reached the MIC for enterococci (p<0.001); and 100% of samples from G1 and G2, 59% from G3, and 36% from G4 reached the MIC for Streptococcus pneumoniae (p<0.001). For fluoroquinolone-resistant S. aureus, 23% from G1, 44% from G2, and no samples from G3 or G4 achieved the MIC (p<0.001). Conclusions: Moxifloxacin + dexamethasone demonstrated a higher concentration in the AH than the moxifloxacin alone. Gatifloxacin + steroids demonstrated less penetration into the anterior chamber than gatifloxacin alone. Moxifloxacin was superior to gatifloxacin considering the MIC for enterococci, S. pneumoniae, and fluoroquinolone-resistant S. aureus.

OBJETIVO: Avaliar a mudança na motilidade ocular e espessura dos músculos medida por ultrassonografia após injeção intramuscular de bupivacaína e toxina botulínica tipo A. MÉTODOS: Oito pacientes (5 mulheres) foram incluidos para avaliar a mudança na motilidade ocular antes e após 1, 7, 30 e 180 dias da injeção de 2 ml de bupivacaína 1,5% e 2,5 U de toxina botulínica tipo A nos músculos agonista e antagonista, respectivamente, de 8 olhos amblíopes. A espessura muscular foi medida antes após 1, 7, 30 dias da injeção através de ultrassonografia ocular 10-MHz (técnica palpebral). RESULTADOS: A média de mudança no alinhamento ocular foi igual a 10 dioptrias prismáticas após 180 dias (n=6). Foi observado um aumento médio de 1,01 mm na espessura muscular após 30 dias da injeção de bupivacaína e 0,28 mm após a injeção de toxina botulínica A medido pela ultrassonografia. Os músculos reto laterais injetados com bupivacaína tiveram um aumento médio de 1,5 mm na sua espessura. CONCLUSÃO: Neste estudo, observou-se uma mudança no alinhamento ocular após 180 dias de injeção intramuscular de bupivacaína e toxina botulínica A. Em geral, houve um aumento da espessura muscular de ambos os grupos de músculos injetados com toxina botulínica A e com bupivacaína após 30 dias da injeção. Essa mudança foi mais pronunciada nos músculos retos laterais após a injeção de bupivacaína.

PURPOSE: To evaluate the change in ocular motility and muscle thickness measured with ultrasonography after intramuscular injection of bupivacaine and botulinum toxin A. METHODS: Eight patients (five female) were enrolled to measure ocular motility prior and 1, 7, 30 and 180 days after one injection of 2 ml of 1.5% bupivacaine and 2.5 U of botulinum toxin A in agonist and antagonist muscles, respectively, of eight amblyopic eyes. Muscle thickness was measured prior and on days 1, 7 and 30 after injection using 10-MHz ultrasonography (eyelid technique). RESULTS: Mean change in alignment was 10 prism diopters after 180 days (n=6). An average increase of 1.01 mm in muscle thickness was observed after 30 days of bupivacaine injection and 0.28 mm increase was observed after botulinum toxin A injection, as measured by ultrasonography. Lateral rectus muscles injected with bupivacaine had a mean increase of 1.5 mm in muscle thickness. CONCLUSION: In this study, a change in ocular motility was observed after 180 days of intramuscular injection of bupivacaine and botulinum toxin in horizontal extraocular muscles. Overall, there was an increase of muscle thickness in both botulinum toxinum A and bupivacaine injected muscles after 30 days of injection when measured by ultrasonography. This change was more pronounced on lateral rectus muscles after bupivacaine injection.

Diferentes aplicações do azul de tripano (AT) foram descritas para cirurgia intraocular, com elevados patamares de eficácia e segurança. Neste relato, é descrito a aplicação do AT como corante vital para superfíce ocular, de modo a estudar a integridade das células da superfície corneana e conjuntival na superfície ocular. Tal abordagem permite um diagnóstico mais sensível de desordens da superfície ocular, destacando-se disfunção lacrimal ou síndrome do olho seco. O AT tem propriedades distintas da fluoresceína, com a qual se mantém estável em solução permitindo a técnica de coloração dupla que é introduzida.

Different applications of trypan blue (TB) for intraocular surgery have been reported, with very high levels of safety and efficacy. We describe the use of TB as an alternative vital dye for staining the ocular surface to assess the integrity of superficial cell layers of the cornea and the surface environment. This facilitates the diagnosis of various ocular surface disorders, including screening for dry eye disease (DED) among refractive and cataract patients. TB staining properties are different from fluorescein and both are stable in a solution, so that a double staining technique is introduced.

OBJETIVO: Avaliar a eficácia da liofilização da membrana amniótica (MA) para a reconstrução da superfície ocular em coelhos. MÉTODOS: A liofilização é processo de preservação que mantém a MA estável durante longo tempo mesmo em temperatura ambiente. A córnea de um olho de cada coelho macho da raça Nova Zelândia foi marcada e desepitelizada. Essa área desepitelizada foi coberta com: Grupo 1: MA criopreservada (n=6); Grupo 2: MA liofilizada (n=6) e Grupo 3: Não coberta (n=3). A MA nos grupos 1 e 2 e a periferia da córnea no grupo 3 foram suturadas com nylon 10-0. A avaliação clínica foi realizada por um observador cego em relação à hiperemia, neovascularização e edema de córnea e reepitelização nos dia 1, 7 e 30 pós-operatórios. Após o dia 30 os ratos foram eutanizados e suas córneas enviadas para análise histopatológica e ultra-estrutural. RESULTADOS: Dois olhos no grupo 2 foram excluídos da análise devido à infecção. Não foi encontrada diferença estatisticamente significante entre os grupos em relação à avaliação clínica. Na microscopia eletrônica de transmissão, a membrana basal nos grupos de MA liofilizada e controle foi mais contínua e homogênea em relação ao grupo da MA criopreservada. CONCLUSÕES: O processo de liofilização parece ser boa opção para a preservação da membrana amniótica humana para utilização na reconstrução da superfície ocular.

PURPOSE: To determine the efficacy of freeze-dried amniotic membrane (AM) for reconstruction of the ocular surface in rabbit eyes. METHODS: The sterilized, freeze-dried amniotic membrane (lyophilized or FD-AM) is a preservative method that uses the drying by freezing process to maintain the AM well preserved for a long time even at room temperature. This paper is an experimental animal interventional study. One eye of each of 15 male New Zealand rabbits (1.5 - 3.0 kg) had the central cornea marked with a 6.0 mm trephine. The marked area was deepithelialized with a No.15 blade. The denuded corneal surface was covered as follows: Group 1: cryopreserved AM (n=6); Group 2: freeze-dried AM (n=6); and Group 3: not covered (control group, n=3). The AM in group 1 and 2 and the periphery of the denuded area in group 3 were secured with continuous 10-0 nylon sutures. The clinical evaluation was made by a blinded observer and graded on a four-point scale (1= minimal, 4= marked) for conjunctival and ciliary hyperemia, eyelid edema, corneal neovascularization, corneal opacity and reepithelialization on postoperative (PO) days 1, 7 and 30 . After PO day 30, the rabbits were euthanized and their corneas were sent for histopathological and ultrastructural analysis to evaluate tissue inflammation, reepithelialization, and basement membrane integrity. RESULTS: Two eyes in group 2 had a corneal infection and were excluded from the analysis. No statistically significant differences among the three groups were found (p>0.05) regarding the clinical evaluation on 1st, 7th and 30th PO days. On transmission electron microscopy, the basement membrane in lyophilized and control groups was more continuous and homogeneous than in the glycerol group. CONCLUSIONS: The freeze-drying method seems to be a good option to preserve human amniotic membrane to be used in ocular surface reconstruction. This preservative method reduces the preservation costs and may enhance the use of AM, facilitating its storage and transport.

OBJETIVO: Comparar dois métodos de preservação de esclera humana, liofilização e álcool 95%, em diferentes períodos de tempo. MÉTODOS: Foram avaliados 96 fragmentos de seis escleras humanas. Metade das amostras foi submetida ao processo de liofilização e metade conservada em álcool 95%. Dois fragmentos de cada grupo foram avaliados pelas colorações de hematoxilina-eosina e tricrômio de Masson e submetidos a técnica de imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina e colágeno 1, após 18, 45, 90 e 174 dias de preservação. Os espécimens foram classificados de acordo com o paralelismo (PF:0-2) e integridade (IF:0-1) das fibras de colágeno e expressão imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina (FIB:0-3) e colágeno 1 (COL-1:0-3). A análise estatística foi realizada por meio dos testes de Friedman e Wilcoxon e o valor de p menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significante. RESULTADOS: Verificaram-se diferenças significantes em três situações: (i) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 174 dias quando comparado aos 90 dias; (ii) maior expressão imuno-histoquímica para o anticorpo COL-1 nas amostras de escleras liofilizadas após os 18 dias iniciais de preservação; (iii) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 18 e 174 dias quando comparado às escleras preservadas em álcool. CONCLUSÕES: A preservação de tecido escleral por liofilização mostrou-se técnica tão eficaz quanto a preservação em álcool, apresentado vantagem quando considerada a integridade das fibras de colágeno. A liofilização mostra-se benéfica por permitir a estocagem do tecido em temperatura ambiente e com prazo de validade estendido.

PURPOSE: To compare the effect of preserving sclera samples in either 95% ethanol or freeze-dried. METHODS: Ninety-six samples of human sclera were studied. Half of them were freeze-dried and half preserved in 95% ethanol. Preservation periods of 18, 45, 90 or 174 days were studied. Automated immunostaining was carried out in the Ventana BenchMarkR LT platform using collagen 1 and fibronectin antibodies. Histological staining was also performed with hematoxilin-eosin and Masson trichrome. Samples were classified according to the degree of collagen fiber parallelism (0-2), intensity of Masson staining (0-2), and the expression of both antibodies (0-3). Friedman and Wilcoxon tests were applied to compare preservation methods and p-values below 0.05 were considered to ensure statistical significance. RESULTS: Relevant results were found in three situations: (i) Friedman's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group rehydrated after 174-days as compared to the 90-day group; (ii) Wilcoxon's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group after 18 and 174 days as compared to the ethanol group; (iii) the freeze-dried group disclosed higher immunohistochemical expression for COL-1 antibody in the sclera samples rehydrated after 45, 90 and 174 days as compared to the ones rehydrated after 18 days. CONCLUSION: Histological and immunohistochemical analysis showed freeze-drying to be a superior method for sclera preservation as compared to 95% ethanol. This technique provides an easy method to manipulate tissue, with longer shelf life, and storage at room temperature.

OBJETIVO: Comparar, por microscopia eletrônica, a integridade anatômica e a presença de fatores de crescimento e citocinas da membrana amniótica preservada com glicerol/MEM (1:1) e dimetilsulfóxido puro. MÉTODOS: As membranas amnióticas preservadas em glicerol/MEM (1:1) ou dimetilsulfóxido puro foram processadas para microscopia eletrônica de transmissão e varredura. Como controle, membrana amniótica fresca foi imediatamente fixada após coleta e processada para microscopia eletrônica. As citocinas e os fatores de crescimento avaliados foram: TGF-beta- fator transformador de crescimento beta; TGF-beta ativ- fator transformador de crescimento beta ativado; EGF- fator recombinante de crescimento epitelial humano; FGF-4- fator de crescimento fibroblástico 4; FGF-beta- fator de crescimento fibroblástico básico; IL-4- interleucina 4; PGE2- prostaglandina E2; IL-10- interleucina 10; KGF- fator de crescimento de queratinócito; HGF- fator de crescimento de hepatócito. RESULTADOS: As membranas amnióticas do grupo controle apresentavam epitélio íntegro, com microvilos na superfície e complexos juncionais entre as células e a membrana basal. As membranas amnióticas preservadas em glicerol/MEM tinham aspecto semelhante às do controle, com maior altura das células epiteliais. Já as membranas amnióticas preservadas em dimetilsulfóxido mostraram redução das junções intercelulares e destacamento do epitélio da membrana basal. As citocinas e fatores de crescimento não apresentaram diferenças entre os grupos, exceto FGF-4, FGF-beta, PGE2 e KGF. CONCLUSÕES: A membrana amniótica preservada em meio glicerol/MEM apresentou melhor integridade tecidual, com menor desprendimento do epitélio da membrana basal, em comparação com a preservada no dimetilsulfóxido puro. Os fatores de crescimento e citocinas estavam, em sua maior parte, preservados com as duas técnicas de preservação.

PURPOSE: To compare the anatomical structure and the presence of growth factors and cytokines of amniotic membrane preserved in glycerol/MEM (1:1) or undiluted dimethyl sulfoxide through electron microscopy. METHODS: Amniotic membrane preserved in glycerol/MEM (1:1) or undiluted dimethyl sulfoxide were processed for transmission and scaning electron microscopy. As control, freshly collected amniotic membrane was fixed and processed for electron microscopy. The cytokines and growth factors assessed were: TGF-beta (transforming growth factor beta); TGF-b activ (activated transforming growth factor beta); EGF (epidermal growth factor); FGF-4 (fibroblast growth factor 4); bFGF (basic fibroblast growth factor); IL-4 (interleukin 4); PGE2 (prostaglandin E2); IL-10 (interleukin 10); KGF (keratinocyte growth factor); HGF (hepatocyte growth factor). RESULTS: Amniotic membrane from the control group showed intact epithelium, with surface microvilli and junctional complexes between the cells and the basal membrane. Glycerol/MEM preserved amniotic membrane had similar aspect to the control, with higher epithelial cells. Those amniotic membranes preserved in dimethyl sulfoxide disclosed less intercellular junction and detachment of the epithelium from the basal membrane. The cytokines and growth factors did not disclose significant differences, except for FGF-4, bFGF, PGE2 and KGF. CONCLUSIONS: Amniotic membrane preserved in glycerol/MEM showed a better tissue structure, with less detachment of the epithelium from the basal membrane, in comparison to undiluted dimethyl sulfoxide. The majority of the growth factors and cytokines were kept with both techniques of preservation.

OBJETIVO: Avaliar o efeito da eletro-acupuntura na prevenção da catarata induzida por selenito de sódio em modelo experimental. MÉTODO: Cinqüenta filhotes de ratos Wistar foram randomizados em 5 grupos: no Grupo 1 (Controle, n=10) nenhum procedimento foi realizado. Grupo 2 (Selenito, n=10), selenito de sódio (30 µmoles/kg) foi injetado por via subcutânea no décimo dia de vida. No Grupo 3 (Anestesia, n=10), filhotes receberam a mesma dose de selenito e sofreram anestesia inalatória com éter etílico durante 10 minutos diariamente por 1 semana. Grupo 4 (eletro-acupuntura, n=10), os animais sofreram os mesmos procedimentos do Grupo 3, porém também receberam eletro-acupuntura (2 Hz, 50 mA) aplicada nos pontos Neiguan (PC 6) e Guangming (GB37) durante o período de anestesia. Grupo 5 (Sham, n=10), os ratos foram submetidos aos mesmos procedimentos que o Grupo 4, porém as agulhas foram aplicadas em pontos falsos. O desenvolvimento da catarata foi avaliado após uma semana por lâmpada de fenda. RESULTADOS: Todos os animais controles (Grupo 1) não desenvolveram catarata. Todos os ratos dos grupos 2, 3 e 5 desenvolveram catarata grave. No Grupo 4 (eletro-acupuntura), 45% dos olhos não desenvolveram catarata e trinta por cento desenvolveram catarata menos grave que aos Grupos 2, 3 e 5. A diferença entre os grupos foi estatisticamente significante (p<0,001). A média do grau de opacificação do cristalino nos Grupos 1 e 4 foi mais baixo que nos Grupos 2, 3 e 5 (p<0,001). CONCLUSÃO: Eletro-acupuntura diminuiu a taxa de formação de catarata induzida por selenito em filhotes de ratos quando as agulhas foram aplicadas em pontos de acupuntura específicos.

PURPOSE: To investigate whether electroacupuncture can prevent selenite-induced cataract in an experimental model. METHODS: Fifty Wistar rat pups were randomized into 5 groups of 10 animals: Group 1 (control), no procedure was performed; Group 2 (selenite), sodium selenite (30 micromoles/kg body weight) was injected subcutaneously between postpartum days 10 to 12; Group 3 (anesthesia) received the same dose of selenite and underwent ether inhalation anesthesia during 10 minutes daily for one week; Group 4 (electroacupuncture) underwent the same procedure of Group 3, but also receiving electroacupuncture (2 Hz, 50 mA) applied to the Neiguan (PC6) and Guangming (GB37) acupoints during the anesthesia period; and Group 5 (Sham) underwent the same procedures of Group 4, but needles were applied to non-acupoints. The development of cataract was assessed one week later, and its density was graded by slit lamp biomicroscopy. RESULTS: All control rats lenses (Group 1) were clear. Groups 2, 3 and 5 rats developed more severe cataract or complete opacification. In Group 4 (electroacupuncture), 45% of eyes did not develop cataract while thirty per cent developed less severe cataract than Groups 2, 3 and 5. The between-group difference was statistically significant (p<0.001). Lens opacification grade in Groups 1 and 4 was lower than in the Groups 2, 3 and 5 (p<0.001). CONCLUSION: Electroacupuncture effectively decreased selenite-induced cataract formation rate in pup rats when needles were applied at specific acupoints.

OBJETIVO: Avaliar a esterilidade do cianoacrilato Super Bonder® e sua atividade biocida sobre microrganismos. MÉTODOS: Para verificação de contaminação, vinte amostras de cianoacrilato Super Bonder® foram aplicadas em meio "brain heart infusion" (BHI) e incubadas a 37º C. Após 7 dias de incubação, foram retiradas e semeadas em placas de ágar sangue, chocolate e Sabouraud. Para determinação do efeito biocida, as cepas Staphylococcus xylosis, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa da American Type Culture Collection (ATCC) foram utilizadas em três diferentes modelos, alterando a maneira de aplicação do adesivo cianoacrilato Super Bonder® (em microescavações, em tubos e sobre o ágar). RESULTADOS: Não foi observado crescimento positivo nas amostras de cianoacrilato semeadas em "brain heart infusion". Nas placas com microescavações observou-se crescimento de P. aeruginosa e inibição de S. aureus e S. xylosis. Após a retirada do adesivo, houve crescimento bacteriano em todas as microescavações. Nas placas semeadas com S. aureus e S. xylosis houve formação aparente de halos de inibição, o que não ocorreu com P. aeruginosa. Como resultado não é verdade que não foi demonstrado atividade biocida do cianoacrilato em relação às bactérias S. aureus, S. xylosis e P. aeroginosa. CONCLUSÃO: Os testes de esterilidade realizados demonstraram que o cianoacrilato Super Bonder® é alternativa segura quanto à esterilidade. Não foi demonstrado nenhum efeito bacteriostático ou bactericida em relação a S. aureus, S. xylosis e P. aeruginosa, o que indica a necessidade da manutenção da antibioticoterapia.

PURPOSE: To evaluate the sterility of the Super Bonder® cyanoacrylate and its biocide activity on microorganisms. METHODS: For verification of contamination, twenty samples of Super Bonder® cyanoacrylate were applied to brain heart infusion (BHI) media and incubated at 37° C. After 7 days of incubation, they were plated on blood, chocolate and Sabouraud agar. For the determination of the biocide effect, Staphylococcus xylosis, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa strains of the American Type Culture Collection (ATCC) were used in three different models, modifying the way Super Bonder® cyanoacrylate application (in microholes, pipes and on the agar). RESULTS: No positive growth was observed on the plated samples of cyanoacrylate in brain heart infusion. In the plates with microholes, growth of P. aeruginosa and inhibition of S. xylosis and S. aureus were observed. After removal of the adhesive, bacterial growth in all microholes was observed. In the plates with S. xylosis and S. aureus the presence of an apparent inhibition halo, that did not occur with P. aeruginosa was observed. CONCLUSION: The performed tests of sterility demonstrated that Super Bonder® cyanoacrylate is a safe alternative, regarding sterility, for treatment of small corneal perforations. No bacteriostatic or bactericidal effects were demonstrated with the tested cyanoacrylate, regarding S. aureus, S. xylosis and P. aeruginosa.

OBJETIVO: Analisar as variações de custo das drogas para tratamento do glaucoma no mercado farmacêutico, nos últimos 30 anos, em intervalos de 10 anos. MÉTODOS: A partir dos Dicionários de Especialidades Farmacêuticas, dos anos de 1972, 1982, 1992 e 2002 nos quais foram anotadas as drogas utilizadas no tratamento do glaucoma, suas apresentações e laboratórios. Foram analisados os valores dos medicamentos no mercado brasileiro, nos diferentes anos, por meio do Guia Farmacêutico Brasíndice. Para análise dos dados, os preços foram convertidos para o dólar americano na época e estudada a relação percentual entre o preço dos medicamentos e o salário mínimo vigente na época, considerando-se como unidade de referência do produto os valores por mililitro, comprimido ou grama, dependendo da apresentação do fármaco. RESULTADOS: O número de laboratórios e medicações antiglaucomatosas variaram nestes últimos trinta anos. Drogas como a pilocarpina e acetazolamida continuam sendo utilizadas. Há predominância do uso de mióticos nos primeiros anos do estudo, e de beta-bloqueadores nos últimos anos. O custo médio das medicações disponíveis no mercado aumentou principalmente na última década. CONCLUSÃO: O preço dos medicamentos antiglaucomatosos variou de forma considerável no período estudado, bem como o tipo de medicação usada no tratamento.

PURPOSE: To analyze price variations of drugs used to control glaucoma, during the last 30 years, at 10-year intervals. METHODS: Drugs to treat glaucoma, as well as their presentations and laboratories were selected from the 1972, 1982, 1992 and 2002 editions of the Dictionary of Pharmaceutical Specialties. The price of medicines in the Brazilian market were analyzed, in the different decades, using the pharmaceutical guide "Brasíndice". For analysis of the data, the prices were converted to American dollars and the relationship between the medicine and the minimum wage was analyzed. As unit of the product, the values per milliliter, oral tablet or gram, depending on the presentation, were considered. RESULTS: The number of laboratories and antiglaucoma medications varied in the last thirty years. Drugs such as acetazolamide and pilocarpine still continue to be used. Parasympathomimetic drugs have predominantly been used in the first years of the study, and the beta-blockers in the last years. The average cost of available medications in the market has increased in the last decade. CONCLUSION: The price of antiglaucoma drugs varied considerably in the studied period as well as the type of drug used in the treatment.

Objetivo: Avaliar a contaminação bacteriana dos frascos de soro autólogo após o uso tópico. Métodos: Frascos de soro autólogo utilizados por pacientes portadores de várias doenças de superfície ocular foram submetidos à cultura após o seu uso tópico. Foram cultivados os resíduos de 127 frascos de colírios de soro autólogo usados por pacientes após a devolução do frasco vazio ao laboratório. Resultados: Os resultados das culturas realizadas demonstram que 76,03% dos frascos estavam contaminados. O total de 92 microrganismos foram encontrados: Staphylococcus coagulase-negativo (35,86%), Alcaligenes sp (21,73%), Klebsiella sp (20,65%) e Bacillus sp (9,78%) e outras bactérias (11,94%). Conclusões: Verificamos que a contaminação dos frascos pode ocorrer tanto por microrganismos presentes na microbiota normal quanto por microrganismos da pele e meio ambiente. Estes resultados ressaltam a risco de contaminação dos frascos no momento da instilação. Futuras investigações serão feitas em busca de contaminação fúngica e relacionando a microbiota dos pacientes com os microrganismos isolados dos frascos.

Purpose: To evaluate bacterial contamination of autologous serum eyedroppers after topical use. Methods: Autologous serum eyedroppers used for ocular surface diseases were submitted to culture after topical use. A total of 127 eyedroppers was cultivated after the patients had used the drops and returned them to the laboratory. Results: We found that 76.03% of the eyedroppers were contaminated. Nine-two microorganisms were found: coagulase-negative Staphy-lococcus (35.86%), Alcaligenes sp (21.73%), Klebsiella sp (20.65%) and Bacillus sp (9.78%). Conclusion: The eye-dropper contamination can be caused by normal flora and by skin and environmental microorganisms. These results show the contamination risk at the moment of instillation. Further research will be done to evaluate fungal contamination and to correlate the patient's normal flora with microorganisms found in the eyedroppers.

RESUMO Objetivo: Determinar a flora microbiana ambiental dos centros cirúrgicos oftalmológicos, com os aparelhos de ar condicionado ligados ou não. Metodologia: Placas de cultura foram colocadas por tempo determinado ao lado do campo, durante a cirurgia, em 7 centros cirúrgicos ambulatoriais e 7 hospitalares da cidade de São Paulo. Resultados: Foram isoladas 258 colônias de microrganismos, sendo 228 colônias de bactérias e 30 colônias de fungos. Do total das bactérias, encontrou-se 78% de cocos Gram-positivos coagulase negativa (Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus saprophyticus) e 22% de outras bactérias (Staphylococcus aureus, bacilos difteróides e Bacillus sp). Do total de microrganismos encontrou-se 11,6% de fungos (Cladosporium sp, Penicillium sp, Microsporum Sp, Fusarium sp, Candida sp e outros sem corpos de frutificação). O número de colônias obtidas com o ar condicionado desligado foi menor que o obtido com o ar condicionado ligado. Conclusão: O trabalho ressalta a importância da fonte de infecção pós-operatória, proveniente da contaminação ambiental. A flora microbiana encontrada é muito semelhante à da encontrada na literatura.

SUMMARY Purpose: To determine the environmental microbialflora in ophthalmologic surgical centers, with air conditioners on and off. Method: Culture plates were located for an established time beside the field during surgery, in seven outpatient surgical centers and seven surgical hospitals in São Paulo City. Results: 258 microorganism colonies were isolated, among them 228 bacterial colonies and 30 fungal colonies. Among the total bacterial colonies 78% coagulase-negative Gram-positive cocci (Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus saprophyticus) and 22% of other bacteria (Staphylococcus aureus, diphtheroid bacilli and Bacillus sp) were found. Of the microorganisms wefound; 11.6% werefungi (Cladosporium sp, Penicillium sp, Microsporum sp, Fusarium sp, Candida sp, and others without fructification bodies). The amount of colonies obtained with the air conditioner off was smaller than that with the air conditioner on. Conclusion: The project points out the significance of a postoperative infection source arising from environmental contamination. The microbial flora found is very similar to that listed in the literature.

RESUMO Introdução: O fator tissular ativador do plasminogênio, um componente do sistema fibrinolítico, ativa o plasminogênio em plasmina, que degrada a rede de fibrina. O t-PA recombinante (rt-PA) tem sido utilizado em oftalmologia para diminuir as complicações fibrino-proliferativas pós-operatórias. A preparação comercial excede a dose preconizada para uso oftalmológico e o custo por injeção poderia ser reduzido se o produto fosse dividido em doses. Objetivo: Avaliar se o rt-PA, para uso cardiológico, pode ser diluido e utilizado em oftalmologia, se a atividade é mantida após estocagem e, eventualmente determinar quais os melhores métodos de estocagem e de utilização. Materiais e métodos: Este trabalho estudou a atividade inicial do rt-PA em placa de fibrina, a atividade residual, após 6 meses de conservação em freezer à -20ºC e à -70ºC; e ainda a esterilidade do material. Resultados: A atividade residual após 6 meses de conservação em freezer à -70ºC foi 40,7% da atividade inicial e em congelador de geladeira à -20ºC foi 34,9%. Se descongelado e deixado à temperatura ambiente 24 horas antes de ser testado a atividade residual cai para 27,9%. Conclusão: O rt-PA manteve-se estéril após 6 meses, independente da forma de estocagem. A melhor forma de conservação foi o freezer à -70ºC. A utilização do rt-PA deve ser portanto imediata após o descongelamento.

SUMMARY Introduction: The tissue plasminogen activator (t-PA), a fibrinolitic system component, activates the plasminogen into plasmin, which degrades the fibrin net. The recombinant tissue plasminogen activator has been used in ophthalmology to control the post-operative fibrin formation complications. The comercial t-PA available has a higher dose than necessary in ophthalmology. If it can be shared in doses the coasts will reduced. Purpose: To check if the comercial rt-PA, for cardiologic use, can be, diluted and used in ophthalmology, and if the activity remains after storage, and eventualy determine the best storage and utilization methods. Material and methods: The rt-PA initial lytic activity was studied on fibrin net substract, and residual activity after long term storage at -20ºC and -70ºC. The material sterility was tested in culture plates. Results: The rt-PA activity after 6 months storage at -70ºC was 40,7% of non storage rt-PA activity, and at -20ºC it was 34,9%. Samples kept at -20ºC for 6 months and then left at roam temperature 24 hours before testing, showed an activity of 27,9%. No contamination was found in any sample. Conclusion: The best way tested of storage rt-PA is at -70ºC. And in arder to keep the total potential activity, it should be used immediately after defrost.