Abstract The study of xylose reductase (XR) - one of the key enzymes in the production of xylitol - is important in the fermentation process to have maximum efficiency in the bioconversion of xylose to xylitol in lignocellulosic hydrolysate. The aim was to evaluate the effect of agitation rate and dissolved oxygen at 7 L bioreactor scale on the production of xylose reductase (XR) from Candida tropicalis during the bioconversion of xylose into xylitol in the non-detoxified oil palm empty fruit bunch (OPEFB) hydrolysate. The highest xylose consumption (95.5%) and the maximum xylitol production (5.46 g.L-1) were presented under 30% dissolved oxygen and 50 rpm. The maximum XR activity (0.646 U mg-1 protein) was obtained after 144 h of fermentation and at the same conditions of dissolved oxygen and agitation rate mentioned above. The oxygen availability influences the XR activity of C. tropicalis and the xylitol production, observing a xylitol yield factor (YP/S) of 0.27 g.g-1 and volumetric productivity (QP) of 0.33 g.L-1 h-1. At lower dissolved oxygen regardless of the agitation conditions evaluated, an increase in xylitol production was evidenced.

Resumen Contexto: Teniendo en cuenta que el corozo (Bactris guineensis) es una fruta exótica del Caribe colombiano, utilizada localmente en la industria de los alimentos, y que su almendra posee alto contenido oleaginoso (39,43 % ± 0,49), el presente trabajo busca abordar el aprovechamiento del aceite de la almendra del corozo como alternativa en la obtención de biodiésel a través de ultrasonido de sonda directa como medio de agitación. Método: Los ensayos se llevaron a cabo bajo diferentes valores de relación molar alcohol:aceite, concentración de catalizador, amplitud de ultrasonido y tiempo. Para ello se utilizó un diseño central compuesto y se usó la variable de respuesta rendimiento de reacción para determinar las condiciones óptimas para la obtención de biodiésel. Resultados: Se obtuvo un rendimiento máximo de reacción del 81,05 %, al emplear una relación molar alcohol:aceite de 6:1; concentración de catalizador de 0,70 %; amplitud de la sonda de ultrasonido del 20 %, y tiempo de reacción de 15 minutos. Conclusiones: Se demostró que el producto final cumple con la mayoría de las propiedades señaladas por la norma técnica colombiana (NTC) 5444. La implementación del ultrasonido de sonda directa permitió obtener altos rendimientos con tiempos de reacción inferiores a los reportados con los métodos convencionales de agitación, lo cual representa una oportunidad de reducir los gastos energéticos asociados con la producción del biocombustible. Adicionalmente, la diversificación de las materias primas para la fabricación de biodiésel, con el aprovechamiento de los ácidos grasos extraídos de la biomasa residual de B. guineensis, representa una oportunidad para el impulso de la economía regional.

Abstract Context: Corozo (Bactris guineensis) is an exotic fruit from the Colombian Caribbean. It is used locally in the food industry. Corozo has high oleaginous content (39, 43 % ± 0, 49) and it could be an option for the oil industry in Colombia. This study shows the use of Corozo oil as an alternative for biodiesel production using ultrasound with a direct probe as the agitation mechanism. Method: The experiments were carried out under different values to alcohol: oil molar ratio, catalyst concentration, ultrasound intensity, and reaction time. For this purpose, a central compound design was used as the response variable "reaction yield" was used to set the best conditions in biodiesel production. Results: A maximum reaction yield (81, 05 %) was obtained using alcohol: oil molar ratio of 6:1; catalyst concentration of 0,70%; the amplitude of the ultrasound probe of 20% and the reaction time of 15 minutes. Conclusions: It was found biodiesel fulfills most of the properties set by the Colombian technical standard (NTC 5444). Direct probe ultrasound shows high yields with times lower than those reported with conventional methods which represent an opportunity to reduce the energy cost associated with biofuel production. Additionally, the variation of raw materials for the manufacturing of biodiesel through the use of oils from the residual biomass of B. guineensis represents an opportunity to boost the regional economy.

Resumen La tecnología de anticuerpos aviares (IgY) ha surgido como una alternativa para la producción de anticuerpos con fines de inmunodiagnóstico. Recientemente produjimos IgY contra alérgenos de ácaros del polvo del grupo 1 de Dermatophagoides sp (Dsp) y Blomia tropicalis (Bt). Estos alérgenos son importantes agentes de sensibilización que contribuyen a la fisiopatología de la rinitis alérgica y el asma en pacientes asentados en áreas tropicales. El propósito del presente estudio fue explorar la utilidad de los IgY para detectar alérgenos de ácaros en ambientes interiores. Se recolectaron 100 muestras de polvo de colchones de asmáticos residentes en dos ciudades de la costa Caribe colombiana. Se utilizó un ensayo inmunoabsorbente indirecto ligado a enzimas (ELISA) casero para detectar los alérgenos de ácaros usando dos IgY (IgY-PO2 e IgY-PO4). Se determinó el límite de detección de los IgY utilizando extractos de cuerpo entero de Dsp y Bt; asimismo, se indagó la especificidad de los IgY frente a un extracto crudo de cucaracha y detection se determinaron la precisión y la exactitud de las mediciones. Ambos anticuerpos reconocieron alérgenos en los extractos de ácaros, incluso en la concentración más baja probada (0,05 μg/ mL), y ninguno reaccionó con el extracto de cucaracha, lo que demuestra su especificidad para los alérgenos de ácaros. Por otro lado, el IgY-PO4 tuvo los mejores resultados de precisión (intraensayo: CV<6,99 %; interensayo: CV≤8,71 %) y exactitud: 80,62 a 100,39 %. Los niveles de alérgenos detectados fueron consistentes con la densidad de ácaros en las muestras. Este estudio destaca la aplicación de IgY-PO2 e IgY-PO4 para la detección de la contaminación por ácaros en ambientes interiores.

Abstract IgY technology has emerged as an alternative for antibody production with immunodiagnostic purposes. Recently, we produced avian antibodies (IgY) against group-1 dust mite allergens of Dermatophagoides sp (Dsp) and Blomia tropicalis (Bt). These allergens are important sensitizing agents that contribute to the pathophysiology of allergy rhinitis and asthma in patients living in tropical areas. The purpose was to explore the utility of IgY for detecting dust mite allergens in indoor environments. We collected 100 samples of dust from mattresses of asthmatic individuals living in two cities on the Colombian Caribbean coast. We used an in-home indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect the mite allergens using two IgYs (IgY-PO2 and IgY-PO4). We determined the IgY detection limit using whole body extracts of Dsp and Bt; likewise, IgY specificity was probed against one crude extract of cockroach, as well as the precision and accuracy of measurements. Both antibodies recognized allergens in the mite extracts, even at the lowest tested concentration (0.05 μg/mL); none reacted with the cockroach extract demonstrating their specificity for mite allergens. On the other hand, IgY-PO4 showed the best precision (intra-assay: CV < 6.99%; inter-assay: CV ≤ 8.71%) and an accuracy: 80.62 - 100.39%. Allergen levels detected were consistent with the mite density present in the dust samples. We confirmed the usefulness of IgY-PO2 and IgY-PO4 for detecting dust mite pollution in indoor environments.

RESUMEN Las lipasas de Carica papaya son biocatalizadores con potencial para la bioconversión de lípidos. Esta investigación estudió la actividad lipolítica (AL) de las fracciones cruda (P3) y libre de proteasas (CPL-p) del látex de C. papaya sobre el aceite de corozo Bactris guineensis. El látex y el aceite se obtuvieron de residuos agroindustriales. Un diseño central compuesto permitió establecer el efecto de la temperatura (T) y el pH sobre la AL de P3 y CPL-p; también se determinó la estabilidad térmica, del pH y los parámetros cinéticos. La AL máxima fue 722,43 ± 1,92 U/g (T= 40°C y pH= 9) y 518,65 ± 4,70 U/g (T = 54°C y pH= 8) para P3 y CPL-p, respectivamente. P3 presentó mayor afinidad (KM = 1,3x104 ± 1,3x103 µM y Vmax = 18,66 ± 0,47 µmol/min) en comparación con CPL-p (KM = 2,6x104 ± 1,1x103 µM y Vmax = 16,58 ± 0,08 µmol/min); y mayor eficiencia en la hidrólisis, debido al alto contenido de ácidos grasos de cadena mediana (láurico y mirístico > 80%). Se concluye, que P3 es un biocatalizador eficiente para la bioconversión del aceite de corozo, demostrando que los residuos de estos frutos son recursos valorizables para sus cadenas productivas.

ABSTRACT Carica papaya lipases are biocatalysts with potential for lipid bioconversion. This research studied the lipolitic activity (LA) of the crude powder (P3) and protease-free (CPL-p) fractions of C. papaya latex on Bactris guineensis (corozo) oil. Latex and oil were obtained from agro-industrial waste. A composite central design allowed to establish the temperature (T) and pH effect on LA of P3 and CPL-p; thermal, pH stabilities and kinetic parameters were also determined. The maximum LA were 722,43 ± 1,92 U/g (T= 40°C y pH= 9) and 518,65 ± 4,70 U/g (T = 54°C y pH= 8) for P3 and CPL-p respectively. P3 showed higher affinity (KM = 1,3x104 ± 1,3x103 µM y Vmax = 18,66 ± 0,47 µmol/min) compared to CPL-p (KM = 2,6x104 ± 1,1x103 µM y Vmax = 16,58 ± 0,08 µmol/min); similarly, greater efficiency in hydrolysis, due to the high content of medium chain fatty acids (lauric and miristic acid > 80%). As a conclusion, the fraction P3 is an efficient biocatalyst for the bioconversion of corozo oil, demonstraring that the residues of these fruits are valuable resources for its production chains.

RESUMO As lipases de Carica papaya são biocatalisadores com potencial para bioconversão lipídica. Esta pesquisa estudou a atividade lipolítica (AL) das frações bruta (P3) e livre de protease (CPL-p) do látex de Carica papaya no óleo de Bactris guineensis (corozo). Látex e óleo foram obtidos a partir de resíduos agroindustriais. Um planejamento experimental central composto permitiu estabelecer o efeito da temperatura (T) e pH na atividade de P3 e CPL-p. A estabilidade térmica, de pH e parâmetros cinéticos também foram determinados. A AL máximo foi 722,43 ± 1,92 U/g (T= 40°C e pH= 9) e 518,65 ± 4,70 U/g (T= 54°C e pH= 8) com P3 e CPL-p respectivamente. O P3 apresentou maior afinidade pelo óleo de corozo (KM = 1,3x104 ± 1,3x103 µM e Vmax = 18,66 ± 0,47 µmol/ min) em comparação ao CPL-p (KM = 2,6x104 ± 1,1x103 µM e Vmax = 16,58 ± 0,08 µmol / min). Além disso, a maior eficiência na hidrólise, devido ao alto teor de ácidos graxos de cadeia média (láurico e mirístico > 80%). Conclui-se que a fração P3 é um biocatalisador eficiente para a bioconversão de óleo de corozo, demostrando que os resíduos dessas frutas são recursos valiosos para suas cadeias produtivas.

RESUMEN Este trabajo se propone establecer la relación de la tributación territorial de la ciudad de Manizales con los procesos de mitigación de riesgo medioambiental durante la serie cronológica 2014-2017. Se reflexiona cómo Manizales, durante su desarrollo histórico, se ha venido enfrentando a distintos riesgos a causa de su ubicación geográfica vulnerable desde su planeamiento urbano. Los riesgos propios de la ubicación geográfica de la ciudad presentan importantes dilemas. Por esta razón es importante determinar si se necesita destinar más de los recaudos impositivos o destinar nuevos impuestos para responder a la mitigación de los riegos medioambientales de la ciudad. La principal conclusión es que la asignación directa del presupuesto es una herramienta insuficiente para afrontar los riesgos medioambientales. CLASIFICACIÓN JEL: H23, H71, Q51 CONTENIDO: Introducción; 1. Impuestos municipales en la ciudad de Manizales; 2. Metodología; 3. Análisis de resultados; 4. Conclusiones; Referencias.

ABSTRACT This work's purpose is to establish the relationship between the territorial taxing of the city of Ma- nizales with the processes of environmental risk mitigation during the chronological series of 2014 to 2017. This article reflects on how Manizales, during its historical development, has been facing different risks because of its vulnerable geographical location since its urban planning. The inherent risks of its geographical location are a source of important dilemmas. For this reason, it is important to assign more tax resources and designate new taxes towards the mitigation of the environmental risks of the city. The main conclusion is that this direct assignment of the budget is an insufficient tool for facing the environmental risks. JEL CLASSIFICATION: H23, H71, Q51 CONTENT: Introduction; 1. Municipalities taxes in the city of Manizales; 2. Methodology; 3. Results analysis; 4. Conclusions; Bibliography.

RESUMO Este trabalho propõe estabelecer a relação da tributação territorial da cidade de Manizales, Colômbia, com os processos de redução do risco meio ambiental durante o período de 2014 a 2017. Reflete-se como Manizales, durante seu desenvolvimento histórico, enfrentou diferentes riscos por causa de sua localização geográfica vulnerável a partir de seu planejamento urbano. Os riscos próprios da localização geográfica da cidade apresentam importantes dilemas. Por isso, é importante determinar se é necessário destinar mais das arrecadações obrigatórias ou destinar novos impostos para atender a mitigação dos riscos meio ambientais da cidade. Conclui-se, principalmente, que a designação direta do orçamento é uma ferramenta insuficiente para enfrentar os riscos meio ambientais. JEL RATING: H23, H71, Q51 CONTEÚDO: Introdução; 1. Impostos municipais na cidade de Manizales; 2. Metodologia; 3. Análise de resultados; 4. Conclusões; Bibliografia.

Abstract Thevetia peruviana is an ornamental shrub grown-up in many tropical region of the world. This plant produces secondary metabolites with biological properties of interest for the pharmaceutical industry. The objective was to determine the secondary metabolites profile of callus and cell suspension cultures of T. peruviana and compare them with those from explant (fruit pulp). Extracts in 50% aqueous ethanol and ethyl acetate were prepared. The phytochemical analysis was performed using standard chemical tests and thin layer chromatography. In addition, total phenolic and flavonoids compounds (TPC and TFC), total cardiac glycosides (TCG) and total antioxidant activity (TAA) was determined during the cell suspension growth. Phenolic chemical profile was also analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). Common metabolites (alkaloids, amino acids, antioxidants, cardiac glycosides, leucoanthocyanidins, flavonoids, phenols, sugars and triterpenes) were detected in all samples. The maximum production of extracellular TCG, TPC, TFC and TAA in cells suspensions were at 6-12 days; in contrast, intracellular content was relatively constant during the exponential grown phase (0 to 12-days). HPLC analysis detected one compound with retention time at 11.6 min; this compound was tentatively identified as dihydroquercetin, a flavonoid with anti-cancer properties. These results provide evidence on the utility of the in vitro cell cultures of T. peruviana for valuable pharmaceutical compounds production.

Resumen Introducción. La obtención de anticuerpos específicos capaces de detectar alérgenos del grupo 1 de ácaros del polvo doméstico representa una estrategia potencial de salud pública para reducir la exposición y la sintomatología clínica asociada con el asma y la rinitis alérgica. Objetivo. Producir y purificar anticuerpos aviares antialérgenos específicos del grupo 1 de los ácaros Dermatophagoides sp.y Blomia tropicalis utilizando la tecnología IgY. Materiales y métodos. Se diseñaron y sintetizaron oligopéptidos que evidenciaran epítopes inmunogénicos de los alérgenos Der p1, Der f1 y Blo t1 empleados posteriormente para producir anticuerpos IgY policlonales en gallinas Hy Line Brown. Las IgY presentes en las yemas de los huevos se purificaron mediante cromatografía tiofílica. Su inmunorreactividad y especificidad se determinaron mediante un inmunoensayo ELISA indirecto y Dot Blot. Resultados. Se obtuvo una reactividad elevada de las IgY contra epítopes de alérgenos presentes en extractos de cuerpo entero de D. farinae, D. pteronyssinus y B. tropicalis. Los niveles más altos de IgY se produjeron entre los días 32 y 40 de inmunización. Los anticuerpos mostraron mayor inmunorreactividad y especificidad en el reconocimiento de proteínas de D. farinae, con un límite de detección mayor de 0,03 µg de proteína total delcaroajo las condiciones experimentales analizadas. Las IgY purificadas no mostraron reactividad significativa frente al extracto de Periplaneta americana. Conclusión. La tecnología IgY permitió la producción de anticuerpos específicos contra alérgenos del grupo 1 de los ácaros del polvo al utilizar oligopéptidos sintéticos no glicosilados. Hasta donde se sabe, esta es la primera vez que se usan estos reactivos inmunológicos para la detección de ácaros de importancia médica.

Abstract Introduction: The use of specific antibodies capable of detecting allergens of the group 1 of house dust mites represents a potential strategy to reduce exposure and clinical symptomatology associated with asthma and allergic rhinitis. Objective: To produce and purify chicken antibodies specific for the dust mites Dermatophagoides sp. and B. tropicalis using the IgY technology. Materials and methods: We designed and synthesized oligopeptides showing immunogenic epitopes of Der p1, Der f1, and Blo t1. These were used to produce IgY antibodies in Hy Line Brown chickens. IgY were extracted from egg yolk using thiophilic chromatography. The immunogenicity and specificity were assayed by indirect ELISA and Dot Blot. Results: We obtained high reactivity of IgY antibodies against epitopes of allergens present in whole body mites extracts of D. farinae, D. pteronyssinus, and B. tropicalis. The highest IgY levels were registered between days 32 and 40 after immunization. The antibodies showed high immunoreactivity and specificity towards D. farinae proteins with detection limits above 0.03 µg of mite proteins under the experimental conditions used. Purified IgY did not show significant reactivity when binding to Periplaneta americana extract. Conclusion: The IgY technology allowed the production of specific antibodies against house dust mites group 1 allergens using non-glycosylated synthetic peptides. To our knowledge, this is the first time that this immunochemicals are used in the detection of mites of medical relevance.

Resumen Se investigó la actividad de las fracciones crudas (P3) y libres de proteasas (CPL-p) del látex de Carica papaya en la lipólisis y metanólisis del aceite de canola. Las fracciones P3 y CPL-p fueron extraídas de frutos de C. papaya colectados en el departamento del Atlántico (Colombia), obteniéndose rendimientos de extracción del 26,89±0,26 y 4,85±0,04 g/100 g de látex fresco, respectivamente. La actividad lipasa de CPL-p, determinada mediante titulación de ácidos grasos fue 58,4% mayor con respecto a P3. Ambas fracciones fueron evaluadas como catalizadores en la producción de ésteres metílicos de ácidos grasos (EMAG. Como catalizador de referencia se usó la lipasa B de Candida antarctica (Novozyme 435®). Las reacciones se llevaron a cabo en un bioreactor tipo batch durante 48 h, a 200 rpm y 50 ºC. Las condiciones de reacción con P3 y CPL-p fueron: 6g de aceite, 20 %p/p de n-hexano, 15 %p/p del catalizador y relación molar metanol/aceite de 3:1. Los porcentajes de conversión obtendios fueron: P3 = 31,55±1,01 %, CPL-p = 38,48±0,76 % y Novozyme-435 = 62,96±0,63 %. Estos resultados demuestran el potencial de CPL-p en la hidrólisis de aceites de interés en la industria de los alimentos. Sin embargo, bajo las condiciones experimentales usadas en el presente estudio, su aplicación en la producción de EMAG fue limitada. Se concluye que el látex del fruto de C. papaya, de los árboles que se cultivan en la región del Caribe colombiano, es un subproducto agroindustrial con un alto potencial en la bioconversión de lípidos.

Abstract The activity of crude (P3) and protease-free (CPL-p) fractions of latex from Carica papaya in the lipolysis and methanolysis of canola oil were investigated. P3 and CPL-p fractions were extracted from C. papaya fruits collected in the department of Atlántico (Colombia), obtaining extraction yields of 26.89 ± 0.26 and 4.85 ± 0.04 g/100 g of fresh latex, respectively. The lipase activity of the CPL-p, determined by titration of the fatty acids was 58.4% greater than P3. Both fractions were evaluated as catalysts in the production of fatty acid methyl esters (FAME). The lipase B from Candida antarctica (Novozyme 435®) was used as a reference catalyst. All reactions were carried out in a batch-type bioreactor for 48 h, at 200 rpm and 50 ºC. The conditions of reaction with P3 and CPL-p were: 6 g oil, 20 %w/w n-hexane, 15 %w/w catalyst, methanol/oil molar ratio of 3:1. The conversions obtained were: P3 = 31.55 ± 1.01 %, CPL-p = 38.48 ± 0.76 % and Novozyme 435 = 62.96 ± 0.63 %. These results demonstrate the potential of CPL-p for the hydrolysis of vegetable oils used in the food industry. However, under the experimental conditions used in the present study, its application in the production of FAME is limited. It is concluded that the latex of the papaya´s fruit, from the trees that are grown in the Colombian Caribbean region, is an agroindustrial by-product with a high potential in lipid bioconversion.

RESUMEN En esta investigación se sintetizó biodiesel mediante transesterificación enzimática del aceite extraído de residuos del corozo Bactris minor, provenientes de una industria de jugos del departamento del Atlántico, usando como catalizador la lipasa de Candida antarctica. Se obtuvo un porcentaje optimizado de extracción del aceite del 40% usando el Método Soxhlet. La caracterización fisicoquímica del aceite, basada en las normas técnicas colombianas, produjo los siguientes resultados: índice de refracción 1,40; acidez 0,09% expresado en % ácido laurico; índice de yodo 29,80±0,44 g I2/100g aceite; índice de saponificación 127,66±0,77 mg KOH/g aceite; densidad 0,9143 g/mL y humedad 0,27±0,03%. El perfil de ácidos grasos, determinado por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, mostró un contenido mayoritario de ácido láurico (C12:0), con un porcentaje de 65% en peso. La transformación del aceite en esteres de metilo se confirmó cualitativamente por cromatografía en capa fina y cuantitativamente por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, obteniéndose un porcentaje de conversión óptimo del 62%. Este estudio presenta una alternativa de aprovechamiento para los desechos provenientes de la industria del corozo Bactris minor de la región, generando productos de alto valor agregado y reduciendo el nivel de impacto negativo de los residuos sobre el medio ambiente.

ABSTRACT In this research, biodiesel was produced by enzymatic transesterification of the oil extracted from the corozo Bactris minor residues and the lipase Candida antarctica as a catalyst. The percentage of optimum oil yield was 40%, obtained by extraction with Soxhlet Method. The physicochemical characterization of oil based on colombian technical standards produced the following results: refractive index 1.40; acid value 0.09%; iodine number 29.80±0.44 g I2/100 g oil; saponification value 127.66 ±0.77 mg KOH/g oil; density 0.9143 g/mL and moisture content 0.27±0.03%. The fatty acid profile was performed by gas chromatography coupled to mass spectrometry, obtaining as a majority acid, the lauric acid (C12:0), with a percentage of 65% by weight. The transformation of the corozo oil into the methyl esters (biodiesel) was confirmed qualitatively by thin layer chromatography, and quantitatively by gas chromatography coupled to mass spectrometry an optimum conversion rate of 62% was obtained. In this way, an alternative of use is presented for waste from the Bactris minor industry of the region, generating products with high added value and reducing the level of negative impact of the waste on the environment.

Abstract Blomia tropicalis allergens are a risk factor for allergy in tropical countries. The allergenic extracts are valuable reactants for house dust mite hypersensitivity diagnostic and its biological control. The objective was to evaluate the immunochemical properties of B. tropicalis extracts produced from in vitro cultures. This work was not intended to produce extracts for clinical application B. tropicalis specimens were established from mites isolated from domestic dust in Barranquilla, Colombia. The mites free of culture medium were used to obtain the extracts. The yield of extraction was determined by Bradford assay and the electrophoretic profile by SDS-PAGE. The presence of hydrolase enzymes was determined by Api® Zym and the immunogenicity was evaluated by Western blot where serum IgE binding proteins were identified. The maximum production of mites in the cultures was 0.9 g/300 g of medium. The yield of protein extraction was 3.61% (± 0.42). All the extracts showed enzymatic activity for trypsin, alpha-amylase, chymotrypsin associated. The Western blot confirmed the serum IgE binding proteins. We showed a simple and fast method to obtain B. tropicalis extracts with enzymatic and allergenic activity.

Resumen Los alérgenos de Blomia tropicalis son un factor de riesgo para el desarrollo de alergias en países tropicales. Los extractos alergénicos son reactantes valiosos para el diagnóstico de la hipersensibilidad alérgica a los ácaros y su control biológico. El objetivo fue evaluar las propiedades inmunoquímicas de extractos de B. tropicalis producidos desde cultivos in vitro. Este trabajo no tuvo como propósito producir extractos de aplicación clínica. Los ejemplares de B. tropicalis se establecieron a partir de ácaros aislados del polvo doméstico en la ciudad de Barranquilla, Colombia. Los ácaros libres de medio de cultivo se usaron para la obtención de los extractos. El rendimiento de la extracción se determinó mediante ensayo Bradford y el perfil electroforético por SDS-PAGE. La presencia de enzimas hidrolasas se determinó por Api® Zym y la inmunogenicidad se evaluó mediante Western blot donde se identificaron proteínas de unión a IgE sérica. La producción máxima de ácaros en los cultivos fue de 0,9 g/300 g medio. El rendimiento de extracción de proteínas fue de 3,61 % (± 0,42). Todos los extractos presentaron actividad enzimática tripsina, alfa-amilasa y quimotripsina. Western blot confirmó la presencia de proteínas de unión a IgE sérica. Presentamos un método sencillo para obtener extractos del ácaro B. tropicalis con actividad enzimática y alergénica.

Ulomoides dermestoides es usado en medicina tradicional oriental para aliviar enfermedades inflamatorias y como afrodisíaco. En Colombia, comunidades campesinas lo consumen para el tratamiento del asma. El propósito de este estudio fue obtener extractos acuosos del cuerpo entero de U. dermestoides y explorar su potencial para inhibir enzimas involucradas en la biosíntesis de reguladores de la inflamación, la 15-lipoxigenasa (15-LOX) y las ciclooxigenasas COX-1 y COX-2 (COXs). Los extractos se obtuvieron con tampón salino fosfato 0,01M (PBS) y bicarbonato de amonio 0,1M (NH4HCO3), en presencia de un detergente (Tween-20 o Dodecilsulfato sódico, SDS). Posteriormente se determinó el contenido de proteínas totales solubles, el perfil electroforético y las actividades enzimáticas a 19 hidrolasas. Las inhibiciones 15-LOX y COXs se midieron por método colorimétrico y por inmunoensayo enzimático, respectivamente. El rendimiento más alto de proteínas se obtuvo con el tampón PBS/SDS (1,603 %p/p). Este extracto mostró 13 bandas electroforéticas mayoritarias, con tamaños entre 8,8 y 151,2 kDa; también, se demostraron actividades enzimáticafosfosfohidrolasas, peptidasas, esterasas, B-glucoronidasa, a-glucosidasa, N-acetil-B-glucosaminidasa y a-manosidasa. Todos los extractos mostraron actividad inhibitoria dual 15-LOX y COXs. Las inhibiciones 15-LOX y COX-1 más altas se obtuvieron con el extracto obtenido con PBS/SDS (15-LOX: 62,8±2,0%; COX-1: 88,5±3,9%). Adicionalmente, un análisis de regresión lineal simple mostró que no hay asociación entre la concentración de proteínas y la inhibición 15-LOX (valor p = 0,493), este resultado sugiere que la actividad anti-lipooxigenasa podría ser debido a compuestos no proteicos.

Ulomoides dermestoides is used in traditional oriental medicine to alleviate inflammatory diseases and as an aphrodisiac. In Colombia, rural communities consume it as treatment for asthma. The purpose of this study was to obtain aqueous extracts of whole body of U. dermestoides and explore their potential to inhibit enzymes involved in the biosynthesis of inflammation regulators, 15-lipoxygenase (15-LOX) and cyclooxygenases COX-1 and COX-2 (COXs). Extracts were obtained with phosphate buffered saline 0.01M (PBS) and ammonium bicarbonate 0.1M (NH4HCO3) in the presence of one detergent (Tween-20 or Sodium dodecyl sulfate, SDS). Then, total soluble protein, electrophoretic profile and enzymatic activities at 19 hydrolases were determined. Inhibition of 15-LOX and COXs were measured by colorimetric method and enzymatic immunoassay respectively. The highest protein yield was obtained with PBS/SDS buffer (1.603 %p/p). This extract showed 13 major electrophoretic bands with molecular weights between 8.8 and 151.2 kDa; also, enzymatic phosphohydrolase, peptidase, esterase, B-glucuronidase, a-glucosidase, N-acetyl-B-glucosaminidase and a-mannosidase activities were proven. All extracts showed dual inhibitory activity for 15-LOX and COXs. The higher inhibitions for 15-LOX and COX-1 were obtained with PBS/SDS extract (15-LOX: 62.8±2%; COX-1: 88.5±3.9%). Additionally, a simple linear regression analysis showed non-relationship between the protein concentration and 15-LOX inhibition (p value = 0.493). This result suggests that anti-lipoxygenase activity could be due to non-protein compounds.

Abstract: Ulomoides dermestoides (Fairmaire, 1893) is a beetle used in alternative medicine treatments in some South American countries. The objective of this study was to evaluate the cytotoxic and genotoxic effects of phenolic fractions (PF) from U. dermestoides . The PF were separated from crude extracts in acetone (PFAc) and ethanol (PFEtOH). The total phenolic content (TPC) was determined by Folin-Ciocalteu test. Volatile and semi-volatile compounds presents in crude extracts were identified by GC-MS; moreover, phenolic fractions were analyzed by HPLC-MS. The cellular viability, after exposition to phenolic fractions, was determined by Trypan blue exclusion test and MTT reduction assay on immortalized human keratinocyte cell line (HaCat); the degree of DNA damage was detected by alkaline comet-DNA assay. The TPC in PFAc and PFEtOH were: 11.34±0.88 mgGAE/g and 6.52±1.28 mgGAE/g, respectively (mean.dif: 4.951; p value = 0.0000). In both samples, HPLC-MS showed a pseudo-molecular ion [M-H]− at m/z 153, tentatively identified as protocatechuic acid. The results of cytotoxic assays suggest that the viability of HaCat cells depends on the concentration and exposure time of each treatment. Furthermore, the comet assay revealed moderate genotoxic effect after 48 hours of exposure to PFAc (40 to 160 μg.mL−1); cytotoxic/genotoxic activity of this fraction could be related to the higher phenol contents.

Resumen: Ulomoides dermestoides (Fairmaire, 1893), es un escarabajo usado en medicina alternativa en algunos países de Sudamérica. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto citotóxico y genotóxico de fracciones fenólicas (FF) de extractos de U. dermestoides . Las FF se separaron desde extractos acetónicos (FFAc) y etanólicos (FFEtOH). El contenido de fenoles totales (CFT) se determinó mediante ensayo de Folin-Ciocalteu. Compuestos volátiles y semi-volátiles, presentes en los extractos crudos, se identificaron mediante CG-EM; por otra parte, las FF se analizaron por HPLC-EM. La viabilidad celular, después de exposición a las FF se determinó mediante la prueba de exclusión con azul de tripano y el ensayo de reducción con MTT, usando la línea celular de queratinocitos humanos inmortalizados (HaCat); el grado de daño en el ADN se detectó mediante el ensayo de ADN-cometa alcalino. CFT en FFAc y FFEtOH fueron: 11,34±0,88 mgAGE/g y 6,52±1,28 mgAGE/g, respectivamente (dif.media: 4,951; p value = 0.0000). En ambas muestras, HPLC-EM mostró un ion pseudo-molecular [M−H]− a 153m/z, identificado tentativamente como ácido protocateuico. Los resultados de los ensayos de citotoxicidad sugieren que la viabilidad de células HaCat depende de la concentración y el tiempo de exposición a cada tratamiento. Además, el ensayo cometa reveló efecto genotóxico moderado después de 48 h de exposición a FFAc (40 a 160 μg.mL−1). La actividad citotóxica/genotóxica de esta fracción podría estar relacionada con el contenido más alto de fenoles.

La toxocariasis es una zoonosis común en países en desarrollo, como Colombia. La ingesta accidental de huevos de Toxocara sp representa la principal vía de transmisión al humano, por tanto, la vigilancia de la contaminación ambiental es una de las principales estrategias en la prevención de la toxocariasis. El objetivo fue optimizar una metodología para evaluar la contaminación del suelo porhuevos de Toxocara canis. Las muestras de suelo se colectaron en un parque público en la ciudad de Barranquilla (Colombia). Los huevos de Toxocara se aislaron mediante centrifugación/floculación con MgSO4 (r=1,20), ZnSO4 (r=1,18), NaCl (r=1,18) y solución de Sheather (r=1,27). El ADN del parásito se extrajo y se identificó mediante amplificación del ITS-2-ADNr (PCR-ITS-2) del T. canis y posterior secuenciación de nucleótidos. El análisis ANOVA indicó diferencia estadísticamentesignificativa (p <0,05) entre las concentraciones de ADN obtenidos con las soluciones de floculación utilizadas para aislar los huevos. Los resultados del test de Tukey sugieren que la solución modificadade Sheathers es la mejor para la floculación. El análisis PCR-ITS-2 mostró resultado positivo para T. canis en 7 de 13 muestras examinadas (53,84%). En conclusión, se demuestra que el método propuestoes eficiente por la detección de T. canis en muestras de campo

Toxocariasis is a common zoonosis in developing countries, such as Colombia. Accidental ingestion of Toxocara sp. eggs represents the principal form of transmission in humans. Therefore, monitoring of environmental contamination is the better strategy for preventing the toxocariasis. The objective was to optimize a methodology for assessing soil contamination caused by Toxocara canis eggs. The soil samples were collected from a public park in the city of Barranquilla (Colombia). The Toxocara eggs were isolated by centrifugation/flocculation with MgSO4 (r = 1.20), ZnSO4(r= 1.18), NaCl (r= 1.18) and Sheather solution (r= 1.27). The parasite DNA was extracted and identified through amplification of ITS-2- DNAr (PCR-ITS-2) of T. canis and subsequent nucleotidesequencing. ANOVA analysis indicates a statistically significant difference (p <0.05) between the DNA concentrations obtained with the flocculation solutions used to isolate eggs. Tukey test results suggest that the modified Sheather´s solution is better for the flocculation. The PCR-ITS-2 analysis showed positive results for T. canis in 7 out of 13 samples examined (53.84 %). In conclusion, it is shown that the proposed method is efficient for the detection of T. canis in field samples

Las isoflavonas de la soja son metabolitos secundarios conocidos como fitoestrógenos por su similitud estructural con el 17b-estradiol. La daidzeina y la genisteina son las principales isoflavonas de la soja. Debido a su capacidad de unión a los receptores de estrógeno (RE) >son consideradas moduladores selectivos de los receptores de estrógenos (MSRE). El consumo dietario de isoflavonas es relacionado con la disminución de los síntomas de la menopausia, prevención de enfermedades cardiovasculares y de otras enfermedades crónicas como la diabetes mellitus. Las isoflavonas han sido propuestas también para el tratamiento de algunos tipos de cáncer y la prevención de la osteoporosis; sin embargo, existe gran controversia sobre los posibles efectos estrogénicos en niños púberes y prepúberes alimentados con fórmulas a base de proteína de soja. El objetivo de este trabajo es presentar una revisión sistemática de la química de las isoflavonas de la soja y sus efectos sobre la salud del hueso en adultos y niños.

The soy isoflavones are secondary metabolites known as phytoestrogens because of its structural similarity to 17b-estradiol. Genistein and Daidzein are the main soy isoflavones. Due their binding ability to estrogen receptors (ER) they are considered as selective estrogen receptor modulators (SERM). The dietary intake of isoflavones has been associated with decreasing menopause symptoms, prevention of cardiovascular disease and some chronic diseases such as diabetes mellitus. Also, the isoflavones have been proposed for the treatment of certain kind of cancer and osteoporosis prevention, but there is a lot of controversy about the possible estrogenic effects in pubertal and prepubertal children who have been fed with soy protein-based formulas. The aim of this research is to present a systematic review of the soy isoflavone chemistry and their effects on bone health in adults and children.