RESUMO: Hyptis marrubioides (Lamiaceae) é uma planta medicinal nativa do Cerrado brasileiro. Técnicas de propagação in vitro fazem uso de elicitores para alterar as vias metabólicas, afetando a produção de moléculas qualitativa e quantitativamente. Este trabalho teve como objetivo avaliar como os elicitores abióticos ácido salicílico (SA) e nitrato de prata (SN) nas concentrações de 30µM ou 60µM influenciam no crescimento de plântulas de Hyptis marrubioides por dois diferentes métodos de cultivo in vitro. O teor de rutina foi quantificado por CLAE-DAD. Em comparação com uma cultura não tratada, os extratos metanólicos de H. marrubioides cultivados em meio MS por 10 dias, seguidos de cultura em meio MS contendo SN (30µM) por 20 dias, apresentaram 1,28 vezes maior teor de rutina. Em um segundo experimento, as plântulas foram cultivadas em meio MS por 20 dias, e então o elicitor desejado foi adicionado à cultura e deixado em contato com o meio por três e seis dias. SA (30µM) forneceu os melhores resultados na produção de rutina, sendo 16,56 vezes maior do que o controle após seis dias. SN (30µM) aumentou o teor de rutina em 1,17 vezes. Nas duas concentrações avaliadas durante os experimentos de elicitação, nem SA nem SN alteraram os parâmetros de crescimento, como comprimento da parte aérea, número de folhas ou peso fresco e seco das plântulas de H. marrubioides cultivadas in vitro em relação ao controle. Com base nestes resultados, os elicitores abióticos SA e SN forneceram com sucesso Hyptis marrubioides in vitro com maior conteúdo de rutina.

ABSTRACT: Hyptis marrubioides (Lamiaceae) is a medicinal plant that is native from Brazilian Cerrado. In vitro propagation techniques make use of elicitors to alter metabolic pathways, affecting how molecules are produced both qualitatively and quantitatively. This research aimed to evaluate how abiotic elicitors salicylic acid (SA) and silver nitrate (SN) at concentrations of 30µM or 60µM influence Hyptis marrubioides seedling growth by two different in vitro culture methods. The rutin content was quantified by HPLC-DAD. Compared to an untreated culture, the H. marrubioides methanolic extracts cultured in MS medium for 10 days followed by culture in MS medium containing SN (30µM) for 20 days had 1.28 times higher rutin content. In a second experiment, seedlings were cultured in MS medium for 20 days, and then the desired elicitor was added to the culture and allowed to remain in contact with the medium for three and six days. SA (30µM) gave the best results: rutin production was 16.56-foldhigher than the control after six days. SN (30µM) increased the rutin content by 1.17-fold. At the two concentrations evaluated during the elicitation experiments, neither SA nor SN altered the growth parameters shoot length, leaf number, and fresh and dry weight of H. marrubioides seedlings grown in vitro as compared to the control. Based on these results, the abiotic elicitors SA and SN successfully provide Hyptis marrubioides with increased rutin content in vitro.

O babaçu é uma palmeira oleaginosa, que se propaga via sementes. A contribuição das técnicas de cultura de tecidos é de grande importância, pois acelera sua propagação. Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito dos reguladores NAA, BAP e KIN na germinação e no crescimento in vitro de embriões zigóticos de babaçu. Para isso foram feitos três ensaios: Ensaio (I) interação de NAA (0, 1 e 2 µM) e KIN (0, 1 e 2 µM); Ensaio (II) interação de NAA (0, 1 e 2 µM), KIN (0, 1 e 2 µM) e BAP (1 µM); Ensaio (III) interação de NAA (0, 1 e 2 µM), KIN (0, 1 e 2 µM) e BAP (2 µM). Aos 30, 60, 90 e 120 dias de cultivo, avaliou-se o comprimento médio das plântulas e aos 120 dias germinação, índice de velocidade de germinação, crescimento do pecíolo cotiledonar, formação de parte aérea, raiz, calos e oxidação. Verificou-se que os melhores resultados para formação do pecíolo cotiledonar e o comprimento médio de plântulas foram obtidos com a utilização de 1 µM de BAP no meio de cultivo, e que a concentração de 2 µM de NAA favoreceu a formação de raízes.

Babassu is a highly productive oil plant that is propagated from seed. Therefore, tissue culture techniques are of great importance because propagation is accelerated. The objective of this study was to evaluate the effect of growth regulators, NAA, BAP, and KIN, on in vitro germination and on the growth of babassu zygotic embryos. Three trials were conducted. For trial (I), the interaction between NAA (0, 1, and 2 µM) and KIN (0, 1, and 2 µM) were studied; for trial (II), the interactions among NAA (0, 1, and 2 µM), KIN (0, 1, and 2 µM), and BAP (1 µM) were studied; and for trial (III), the interactions among NAA (0, 1, and 2 µM), KIN (0, 1, and 2 µM), and BAP (2 µM) were studied. At 30, 60, 90, and 120 days of culture, we assessed average seedling height, and at 120 days, we assessed germination, the germination speed index, cotyledonary petiole growth, oxidation, and the formation of shoots, roots, and calluses. The best results for cotyledonary petiole formation and average seedling height were obtained when using 1 µM of BAP in the culture medium. We also found that the 2 µM of NAA favored root formation.

Objetivou-se com este estudo, estabelecer um protocolo de germinação e cultivo in vitro de murici (Byrsonima cydoniifolia A. Juss.) a partir de embriões zigóticos. Para isso, foram feitos três ensaios: no ensaio I, testou-se a assepsia do embrião, nos tempos de exposição de 5, 10, 15, 20, 25 e 30 minutos no hipoclorito de sódio a 2,5% com e sem a imersão em álcool 70%. No ensaio II, para a germinação de embriões, testou-se os meios de cultivo MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) e WPM (LLOYD; McCOWN, 1980) nas concentrações de sais de 25, 50 e 100%, com e sem a adição de sacarose. No ensaio III, avaliou-se o crescimento de plântulas em meios de cultivo MS e WPM nas concentrações de sais de 25, 50 e 100%. Verificou-se que a imersão de 1 minuto em álcool 70% e 25 minutos em hipoclorito de sódio (2,5%) foi adequado para evitar contaminações não sendo fitotóxico para o embrião de murici. Para a germinação dos embriões, o meio de cultivo com água-ágar é o mais adequado e para o crescimento de plântulas é o meio de cultivo WPM 50%.

The objective of this study is to establish an in vitro germination and cultivation protocol for murici (Byrsonima cydoniifolia A. Juss.) using zygotic embryos. Therefore, three assays were performed: in assay I, embryo asepsis was tested at exposure times of 5, 10, 15, 20, 25, and 30 minutes in 2.5% sodium hypochlorite, with or without immersion in 70% alcohol; in assay II, MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) e WPM (LLOYD; McCOWN, 1980) culture media were tested at salt concentrations of 25, 50, and 100%, with or without the addition of sucrose, to germinate the buds; in assay III, seedling growth was evaluated in MS and WPM culture media at salt concentrations of 25, 50 and 100%. Sodium hypochlorite (2.5%) with or without 70% alcohol was used to avoid contamination because it was not toxic to murici embryos. Water-agar was the most appropriate culture medium for bud germination, and 50% WPM was appropriate for seedling growth.

A regeneração in vitro de plantas de Passiflora suberosa foi obtida a partir de discos foliares. Folhas foram retiradas de plantas germinadas em casa de vegetação, imersas em solução comercial de hipoclorito de sódio (3:1), durante 20 minutos. Discos foliares de 0,5 cm de diâmetro, com a face adaxial em contato com o meio de cultura, foram introduzidos em placa de petri. Organogênese foi obtida utilizando-se meio MS acrescido de 0,5 ou 1,0 mg L-1 de BAP (6-benzilaminopurina). Após 4 a 8 semanas, observou-se formação de calos nas bordas dos discos foliares. Os calos formados foram transferidos para meio MSM, acrescido de 1,0 mg L-1 de GA3 (ácido giberélico), sob fotoperíodo de 16 horas. Desenvolvimento de gemas adventícias foi obtido a partir dos calos, sendo estas alongadas e enraizadas no mesmo meio de cultura, após periódicas repicagens, e aclimatadas em casa de vegetação.

In vitro regeneration of plantlets was obtained from Passiflora suberosa leaf discs. Leaves from plants germinated in the greenhouse were collected and immersed in commercial sodium hypochlorite solution (3:1), during 20 minutes. Leaf discs (0.5 cm in diameter) were obtained and placed with the adaxial side in contact with the culture medium in petri dishes. Organogenesis was obtained when MS medium was supplemented with 0.5 or 1.0 mg L-1 BAP (6-benzylaminopurine), after four to eight weeks, callus proliferated from the edge of the discs. After induction, calli were transferred to modified MS media supplemented with1.0 mg L-1 GA3, under 16-hour photoperiod. Development of adventitious shoots was obtained from the callus tissues and the shoots were elongated and rooted in the same culture medium and acclimatized in the greenhouse.