Resumo A espécie Cochliomyia hominivorax, conhecida popularmente como mosca da bicheira, é um parasita obrigatório de animais de sangue quente e sua distribuição geográfica estende-se por toda a América do Sul, excetuando-se o Chile. O parasitismo por esta mosca provoca perdas econômicas significativas e tem grande importância no Brasil. São poucos os estudos com foco nos produtos de excreção e secreção desta espécie e este trabalho teve como objetivo estudar as enzimas presentes no produto de secreção e excreção (E/S) dos três estádios larvais de C. hominivorax. O perfil de proteínas foi obtido por eletroforese em gel de poliacrilamida e a atividade proteolítica foi analisada utilizando-se gelatina, azocaseína e Na-benzoil-arginina-nitroanilida (BAPNA) como substrato. Nos produtos de E/S dos três estádios, as proteínas foram detectadas com um peso molecular aparente que variou entre 116 e 20 kDa. No ensaio de azocaseína, em diferentes faixas de pH, a maior atividade proteolítica ocorreu em pH 7,5 para todos os estádios larvais. Os ensaios foram realizados usando-se estes mesmos substratos e as amostras foram tratadas com os inibidores Benzamidina, Pepstatin A, 4-(2-aminoetil)benzenosulfonil fluoreto hidrocloreto (AEBSF), N-α-tosil-L-lisina clorometil cetona (TLCK), N-α-tosil-L-fenilalanina clorometil cetona (TPCK), Ácido etilenodiamino tetra acético (EDTA), Leupeptina e Trans-epoxysuccinyl L-leucylamido-4-guanidino butano (E-64). As proteinases presentes nos produtos E/S de L1 são em sua maioria serina proteases do tipo tripsina e quimotripsina, enquanto que para os produtos E/S de L2 e L3 foi evidenciada a presença de serina proteases e aspartil proteases.

Abstract The species Cochliomyia hominivorax, also known as screwworm fly, is an obligate parasite of warm-blooded animals and its geographic range extends thoughout South America, except Chile. This fly causes significant economic losses and has great importance in Brazil. Few studies have focused on the excretion and secretion products of this species, and this research aimed to study the enzymes present in the secretion and excretion (E/S) products of the three larval instars of C. hominivorax. The E/S profile of proteins was obtained by polyacrylamide gel electrophoresis and proteolytic activity was analyzed using gelatin, azocasein and Na-benzoyl-arginine-nitroanilide as substrates. In E/S products of the three instars, proteins were detected with an apparent molecular weight ranging between 116 and 20 kDa. In the azocasein assay, at different pH ranges, the major proteolytic activity occurred at pH 7.5 for all larval instars. Assays were performed using the same substrates in which the samples were treated with the inhibitors Benzamidine, Pepstatin A, 4-(2-Aminoethyl) benzenesulfonyl fluoride hydrochloride (AEBSF), N-α-tosyl-L-lysine chloromethyl ketone (TLCK), N-α- tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone (TPCK), Ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA), and Leupeptin-trans-Epoxysuccinyl-leucylamido(4-guanidino) butane (E-64). Proteinases present in the E/S product of first larvae instar are mostly serine trypsin and chymotrypsin proteases, whereas for second and third instars serine proteases and aspartyl proteases were predominantly observed. Biochemical characterization of E/S products of all larval stages of C. hominivorax helps to improve the understanding of the physiology and the interaction of this parasite with host tissues.

A alta demanda por açúcares e o desenvolvimento da tecnologia enzimática têm aumentado a produção de adoçantes, principalmente xaropes de glicose e frutose. Este trabalho descreve uma tecnologia para a produção de xaropes de glicose e frutose a partir de amido de mandioca usando enzimas produzidas por microrganismos isolados do solo do Cerrado Brasileiro. Primeiramente, Aspergillus niger e Strepotmyces sp. foram isolados a partir do solo e usados como fontes produtoras de glicoamilase (GA) e glicose isomerase (GI). Após caracterização GA e GI exibiram pH ótimo de 4,5 e 8,0, respectivamente. GA apresentou uma atividade máxima a 60 ºC enquanto que GI a 80 ºC. GA e GI mantiveram 65 e 80%, respectivamente, da atividade inicial, após 180 minutos de incubação a 60 ºC. Os parâmetros cinéticos Km e Vmáx foram 0,476 (mg mL-1) e 8,58 (µmol min-1) para GA e 0,082 (M) e 48,20 (µmol min-1) para GI. A máxima produção de xarope de glicose ocorreu após 24 horas de reação com um rendimento de 98%. A produção de xarope de frutose com 42% (m/v) foi alcançada após 96 horas de reação.

The high demands for sugars and the development of enzymatic technology have increased the production of sweeteners, especially for glucose and fructose syrups. This work describe a technology for glucose and fructose syrups from Brazilian cassava starch using enzymes produced by soil microrganisms isolated from the Brazilian Cerrado soil. Firstly, Aspergillus niger and Streptomyces sp. were isolated from the soil and used as glucoamylase (GA) and glucose isomerase (GI) producer sources. After characterization, GA and GI exhibited optimum pH 4.5 and 8.0, respectively. GA showed maximum activity at 60 ºC and GI at 85 ºC. GA and GI retained 65 and 80%, respectively, of initial activity after 180 minutes of incubation at 60 ºC. The kinetic parameters Km and Vmáx were 0.476 (mg.mL-1) and 8.58 (µmol/minute) for GA and 0.082 (M) and 48.20 (µmol/minute) for GI. The maximum glucose syrups production occurred after 24 hours of reaction with a 98% yield. The production of fructose syrups with 42% (w/v) was reached after 96 hours of reaction.

Este trabalho teve como objetivo comparar vários métodos para a determinação de açúcares redutores (A.R) e totais (A.T) em mel, a fim de suprir carências dos laboratórios de análises de alimentos das indústrias alimentícias e adaptar o método de ADNS (Ácido 3,5-Dinitrossalicílico) para análise de açúcares totais. Foram utilizadas quinze amostras de méis procedentes de diferentes cidades do estado de Goiás. Foram utilizados os seguintes métodos: Antrona, ADNS, complexometria com EDTA (Ácido etilenodiaminotetracético), Cromatografia em Camada Delgada, Fenol Sulfúrico, Lane & Eynon, Luff-Schoorl, Munson-Walker, Refratometria na escala Brix e Somogyi-Nelson. Para açúcares redutores os métodos Luff-School e Munson-Walker foram significativamente diferentes (p>0,05) dos demais, apresentando em geral, valores menores. Para os açúcares totais e sacarose todos os métodos foram significativamente iguais. Os méis não apresentam quantidades de sacarose acima do estabelecido pela legislação vigente do Ministério da Agricultura.

This work had as objective compares several methods for the determination of reducers sugars (R.S) and total (T.S) in honey kindred of supplying to lacks of analyses laboratories' industry foods. Fifteen samples of honeys coming from different cities of the State of Goiás were used. The following methods were used: Antrona, ADNS (3,5-Dinitrissalicilic acid), EDTA (Etilenediaminetetracetic acid) complexometry, Thin Layer Cromatrography, Sulfuric Phenol, Lane & Eynon, Luff-Schoorl, Munson-Walker, Brix refratometry and Somogyi-Nelson. For reducers sugars the methods Luff-School and Munson-Walker were significantly different (p>0,05) of the others, presenting in general, smaller values. For the total sugars and sucrose all the methods were significantly same. The honeys don't present amounts of sucrose above the established for the effective legislation of the Ministry of the Agriculture.