Resumo O objetivo deste estudo foi detectar DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea spp.) comercializadas em sete praias do Estado do Pará, Brasil. De acordo com o Programa Nacional de Controle Higiênico Sanitário de Moluscos Bivalves, 100 g da parte comestível dos moluscos são necessários para a análise de microrganismos contaminantes. Neste estudo, 12 ostras foram consideradas equivalentes a 100 g de partes comestíveis na preparação de cada amostra agrupada. No total, 360 ostras foram compradas de 30 vendedores. De grupos de 12 ostras adquiridas por vendedor, foram obtidas 60 amostras agrupadas, compreendendo 30 tecidos branquiais e 30 tratos gastrointestinais. Para a análise molecular, a nested PCR foi realizada para amplificar um produto de 155 pares de bases do gene B1 de T. gondii. Todas as amostras analisadas foram negativas para T. gondii. Os resultados indicam que as amostras de ostras comercializadas em praias do Estado do Pará não foram contaminadas por T. gondii.

Abstract The aim of this study was to detect Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea spp.) sold on seven beaches in the State of Pará, Brazil. According to the National Program for Hygiene and Sanitary Control of Bivalve Mollusks, 100 g of the edible part of mollusks is required to analyze contaminating microorganisms. In this study, 12 oysters were assumed to be equivalent to 100 g of edible parts when preparing each pooled sample. In total, 360 oysters were purchased from 30 vendors. From groups of 12 oysters purchased per vendor, 60 pooled samples were obtained, comprising 30 gill tissues and 30 gastrointestinal tracts. For molecular analysis, nested-PCR was conducted to amplify a 155-base-pair product of the B1 gene from T. gondii. All analyzed samples were negative for T. gondii. Our findings indicate that the oyster samples sold on the beaches in the State of Pará were not contaminated by T. gondii.

RESUMO Analisamos a presença de Leptospira spp. em tecido hepático e renal de marsupiais e roedores silvestres capturados em uma floresta periurbana no leste da Amazônia brasileira. Foram examinados 25 indivíduos de quatro espécies de marsupial e sete de roedor quanto à presença do gene 16S rRNA de Leptospira no DNA extraído de 47 amostras de tecido hepático e renal usando PCR. Detectamos amostras positivas em 12% (3/25) dos indivíduos, em fragmentos renais de duas espécies de marsupial (Didelphis marsupialis e Marmosops pinheiroi) e em um fragmento hepático de uma espécie de roedor (Echimys chrysurus). Estes são os primeiros registros de Leptospira spp. em M. pinheiroi e E. chrysurus, e é o primeiro levantamento molecular de marsupiais e roedores na Amazônia brasileira.

ABSTRACT We analyzed the presence of Leptospira spp. in liver and kidney tissue of wild marsupials and rodents trapped in a periurban forest in the eastern Brazilian Amazon. We examined 25 individuals of four marsupial and seven rodent species for the presence of the 16S rRNA gene of Leptospira in the DNA extracted from 47 liver and kidney tissue samples using PCR. We detected positive samples in 12% (3/25) of the individuals, in kidney fragments of two marsupial species (Didelphis marsupialis and Marmosops pinheiroi) and in a liver fragment of one rodent species (Echimys chrysurus). These are the first records of Leptospira spp. in M. pinheiroi and E. chrysurus and it is the first molecular survey of marsupials and rodents in the Brazilian Amazon.

RESUMO A leptospirose é uma zoonose transmitida pelo contato com urina infectada ou água contaminada com o agente. Estudos de Leptospira spp. em répteis são escassos, apesar da maioria das espécies terem contato com ambientes aquáticos. Avaliamos a presença de anticorpos anti-Leptospira spp. em Podocnemis expansa mantidas no Jardim Zoobotânico da Amazônia, em Belém, Pará, Brasil. Analisamos 74 amostras de soro por meio do teste de aglutinação microscópica usando 31 antígenos vivos de diferentes sorogrupos de Leptospira spp. Trinta amostras (40,5%) foram reagentes contra Leptospira spp., com titulações entre 100 e 3.200 para um ou mais sorogrupos. O sorogrupo Hebdomadis foi o mais prevalente, com 26 (87%) das 30 amostras positivas, seguido por Djasiman, com duas (7%) e Celledoni e Bataviae com uma (3%) amostra cada. A detecção de aglutininas anti-Leptospira spp. em P. expansa sugere que o ambiente aquático é uma via de transmissão para esse patógeno entre quelônios.

ABSTRACT Leptospirosis is a zoonosis transmitted by contact with infected urine or water contaminated with the agent. Searches for Leptospira spp. in reptiles are scarce although most species have contact with aquatic environments. We evaluated the presence of anti-Leptospira spp. antibodies in Podocnemis expansa housed at the Amazonian Zoobotanical Garden, in Belém, Pará state, Brazil. We analyzed 74 serum samples through the microscopic agglutination test using 31 live antigens from different Leptospira spp. serogroups. Thirty samples (40.5%) were positive against Leptospira spp., with titrations between 100 and 3,200 for one or more serogroups. The Hebdomadis serogroup was the most prevalent, with 26 (87%) out of the 30 positive samples, followed by Djasiman, with two (7%) and Celledoni and Bataviae with one (3%) sample each. The detection of anti-Leptospira spp. agglutinins in P. expansa suggests that the aquatic environment is a transmission route for this pathogen among chelonians.

Resumo Foi avaliada a prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em amostras de soro, coletadas de gatos domésticos, em Belém, Pará, Brasil. Também correlacionou-se a presença de anticorpos contra T. gondii com variáveis ambientais e hábitos de proprietários. Quatrocentas e quarenta e sete amostras de soro de gatos domésticos foram analisadas. Os soros foram testados por ensaio de imunofluorescência indireta, e as amostras de fezes foram analisadas por meio de reação em cadeia da polimerase. Entre os animais analisados, 21,92% (98/447) foram soropositivos. Foi encontrada associação estatística significante em relação à idade e à sorologia entre os animais acima de 1 ano (p <0,01): no grupo de até 1 ano, 12,82% (20/156) dos animais positivos e, no grupo acima de 1 ano, 26,80% (78/291) positivos. Os resultados mostram que os gatos daquela região possuem anticorpos anti-T. gondii, e seus donos não estão cientes da toxoplasmose ou de como evitar sua transmissão.

Abstract We evaluated the prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in the serum samples collected from domestic cats in Belém, Pará, Brazil. We also correlated the presence of T. gondii antibodies with environmental variables and cat-owner habits. Four-hundred and forty-seven serum samples from domestic cats were analyzed. The sera were tested using an indirect immunofluorescence assay. Among the animals analyzed, 21.92% (98/447) were seropositive. A statistically significant association was found in relation to age and serology among the animals over 1 year old (p<0.01): in the group up to 1 year old, 12.82% (20/156) of the animals were positive, and in the group over 1 year old, 26.80% (78/291) were positive. Our results show that the cats in Belém, Pará region have anti-T. gondii antibodies, and their owners are not aware of toxoplasmosis or how to prevent its transmission.

RESUMO: Este trabalho descreve a detecção de aglutininas anti-Leptospira spp. em tracajás (Podocnemis unifilis) na região Amazônica. Obtivemos 98 amostras de soro, as quais foram submetidas ao teste de aglutinação microscópica (MAT), utilizando 31 antígenos de diferentes sorogrupos de Leptospira spp. Das 98 amostras de soro coletadas, 35% (34/98) reagiram apresentando titulações de 100 a 3200; 23,53% dessas amostras (8/34) coaglutinaram na presença de dois ou mais sorovares. O sorogrupo mais comum foi Hebdomadis com 26,9% (7/26), seguido de Semaranga com 23% (6/26), Shermani com 19,2% (5/26), Djasiman com 11,5% (3/26), e Australis com 7,7% (2/26). Bataviae, Javanica, e Sejroe foram representados com apenas uma amostra (3,9%). A presença de tracajás reagentes a anticorpos contra Leptospira spp. implica na exposição ao patógeno.

ABSTRACT: We describe anti-Leptospira spp. agglutinin in yellow-spotted river turtles (Podocnemis unifilis)in the Amazon region. Ninety-eight serum samples from individuals housed at the Bosque Rodrigues Alves Zoobotanical Garden of Amazonia, Belém, PA, Brazil, were subject to the microscopic agglutination test (MAT) using 19 different Leptospira spp. antigen serogroups. Thirty-four of the 98 samples (35%) were reactive, with titers ranging from 100 to 3200, and eight 8 reactive samples (23.5%) co-agglutinated under two or more serovars.The most common serogroup was Hebdomadis (26.9%, 7/26), followed by Semaranga (23%, 6/26), Shermani (19.2%, 5/26), Djasiman (11.5%, 3/26), and Australis (7.7%, 2/26); Bataviae, Javanica, and Sejroewere represented by a single sample each (3.9%). The presence of turtles reactive to anti-Leptospira spp. antibodies implies exposure to the pathogen.

Resumo Realizou-se inquérito sorológico para Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Leishmania spp. e Trypanosoma cruzi em cães dos municípios de Castanhal e Belém, no Estado do Pará, e estudou-se a associação entre os animais sororeagentes e fatores como sexo, idade, acesso a rua e procedência dos animais. Foram utilizados 269 cães de diferentes idades, sadios, provenientes de abrigos de animais, canil comercial, Centro de Controle de Zoonoses e domiciliados. Utilizou-se a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), com lâminas sensibilizadas de acordo com os seus respectivos antígenos. Das 263 amostras, 100 foram reagentes, com 38,0% de positividade para Toxoplasma gondii, sendo os títulos prevalentes 16UI e 64UI, 15,97% de sororreagentes para anticorpos anti-N. caninum com maior soroprevalência para os títulos 25UI e 50UI. Na pesquisa de anticorpos anti-L. major, 3,42% foram sororreagentes com o título 40UI, sendo o mais prevalente. A pesquisa de anticorpos anti-T. cruzi revelou negatividade em todas as amostras. As variáveis procedência e faixa etária mostraram ser um fator de risco para os animais. Os animais de Belém apresentaram 2,6 vezes mais chances de infecção do que os animais de Castanhal. Os animais na faixa etária de três a sete anos apresentaram 2,27 vezes mais chances de serem sororreagentes do que os cães com até três anos de idade. Não houve associação estatística para as demais variáveis e protozoários pesquisados.

Abstract A serological inquiry was performed to Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Leishmania spp. and Trypanosoma cruzi in dogs from the city of Castanhal and Belém, State of Pará, and the association between seropositive animals and factors such as sex, age, access to the streets and provenance of the animals was studied. 269 healthy dogs with different ages, coming from animal shelters, commercial kennels, Zoonosis Control Centre, and domiciles were used. The Indirect immunofluorescence (IIF) reaction was used with plates sensitized with their respective antigens. Among the 263 samples, 100 were reactant, with 38.0% of positivity for Toxplasma gondii, being 16UI and 64UI the prevalent titers, 15.97% of reagent animals for anti-N. caninum antibodies with higher seroprevalence to titers 25UI and 50UI.At the anti-L. major antibodies research, 3.42% were reagent with the titer 40UI being the prevalent. The research of anti-T.cruzi antibodies revealed negativity in all the samples. The provenance and age range variables have been shown as a risk factor to the animals. The animals from the city of Belém presented 2.6 times more changes of infection than the animals from the city of Castanhal. The animals at the age range from three to seven years old presented 2.27 times more changes of being reagent than the dogs with up to three years old. There was no statistical association to the other variables and protozoa researched.

Abstract INTRODUCTION: Serological surveys are important to assess the health status of wild animals. In this study, antibodies against Leptospira spp, causal agents of leptospirosis, were detected in free-living marsupials in the State of Pará, Brazil. METHODS: Nineteen blood samples collected from marsupials in the municipalities of Peixe-Boi, Viseu, and Castanhal were subjected to microscopic agglutination tests. RESULTS: In total, 36.8% (7/19) of samples were positive, and two exhibited co-agglutination. The most frequent serovars were Icterohaemorrhagiae (60%; 3/5), Panama (20%; 1/5), and Nupezo (20%; 1/5). CONCLUSIONS: Anti-Leptospira spp antibodies currently circulate in free-living marsupials in Northeastern Pará.

RESUMO: Embora estudos sorológicos para leptospirose em iguanas já tenham sido realizados, não a relatos na região amazônica. Portanto, o presente trabalho teve como objetivo pesquisar a presença de anticorpos anti-Leptospira sp. em Iguanas-verdes (Iguana iguana) de vida livre do Parque Mangal das Garças, região metropolitana de Belém, PA, e Norte do Brasil. Foram coletadas 29 amostras de sangue de Iguana-verde (I. iguana) que frequentaram o Parque Mangal das Garças. Para o diagnóstico sorológico da infecção por Leptospira sp. foi empregado o teste de aglutinação microscópica (MAT) com 25 antígenos vivos de Leptospira sp. como antígenos. Observou-se que todas as amostras foram não reagentes, o que sugere não exposição ao agente.

ABSTRACT: Although, serological studies for leptospirosis in iguanas have already been performed, there is no report in the Amazon region. Therefore, the present study aimed to investigate the presence of anti-Leptospira sp. in free living Iguanas-verdes (Iguana iguana) of Mangal das Garças Park, metropolitan region of Belém, Pará, Northern region of Brazil. Twenty-nine blood samples of Iguana-verde (I. iguana) were collected from Mangal das Garças Park. For the serological diagnosis of Leptospira sp. it was employed microscopic agglutination test (MAT) with 25 live antigens of Leptospira sp. as antigens. It was observed that all samples were non-reactive, suggesting no exposure to the agent.

Resumo A importância do consumo de carne bovina crua ou mal passada na transmissão da toxoplasmose ainda é pouco definida, devido à alta resistência desses animais à infecção. Contudo, em áreas endêmicas, como da Amazônia, onde o consumo de carne bovina é frequente, essa possibilidade precisa ser considerada. O objetivo do presente estudo foi determinar a frequência de anticorpos IgG anti-T. gondii em bovinos de corte abatidos na região metropolitana de Belém, Estado do Pará. Foram coletadas amostras de sangue de 500 animais, de ambos os sexos, em um abatedouro oficial do município de Belém. A detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii foi realizada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), com ponto de corte de 1:64. Anticorpos anti-T. gondii foram encontrados em 203 animais (40,6%), com títulos de 64 em 112 animais (55,2%); 128 em 68 (33,5%); 256 em 15 (7,4%); 512 em 05 (2,5%); e 1.024 em 03 (1.4%). Não foi observada diferença estatisticamente significativa entre machos e fêmeas (p > 0,05). A alta frequência de anticorpos anti-T. gondii, observada nos bovinos de corte abatidos em Belém, indica que a carne desses animais pode ser importante fonte de infecção para humanos e animais domésticos carnívoros, caso venha a ser consumida de forma inadequada.

Abstract The relevance of consuming raw or undercooked beef in the transmission of toxoplasmosis is unclear due to the high resistance of cattle to infection. However, this possibility needs to be considered in endemic areas, such as the Amazon, where the consumption of beef is frequent. The objective of this study was to determine the frequency of anti-Toxoplasma gondii IgG antibodies in beef cattle slaughtered in the metropolitan region of Belem, Pará state, Brazil. Blood samples were collected from 500 animals of both genders in a licensed slaughterhouse in Belém. Anti-T. gondii IgG antibodies were detected by an indirect immunofluorescence assay (IFA) with a cut-off titer of 1:64. Anti-T. gondii antibodies were found in 203 animals (40.6%), with a titer of 64 in 112 animals (55.2%), 128 in 68 animals (33.5%), 256 in 15 animals (7.4%), 512 in 5 animals (2.5%), and 1,024 in 3 animals (1.4%). No significant difference was observed between males and females (p > 0.05). The high frequency of anti-T. gondii antibodies observed in beef cattle slaughtered in Belém indicates that the meat of these animals may be an important source of infection for humans and carnivorous domestic animals when inadequately cooked beef is consumed.

Resumo As leishmanioses são zoonoses vetoriais causadas por protozoários do gênero Leishmania, características de ambientes rurais e periurbanos. A leishmaniose visceral americana (LVA) é causada pela Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, cujo principal vetor no Brasil é Lutzomyia longipalpis. O cão (Canis familiaris) possui papel ativo na transmissão da doença, pois é um reservatório muito próximo do humano e uma fonte de infecção para o flebotomíneo. O aumento do número de casos de leishmaniose felina, descritos na literatura a partir de 1990, sugere que gatos também podem atuar na epidemiologia dessa enfermidade. O presente estudo avaliou a prevalência de anticorpos anti-Leishmania spp. em gatos domésticos (Felis catus) de diferentes bairros do Município de Belém, Pará (PA), pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e pelo Teste de Aglutinação Direta (TAD), utilizando-se como ponto de corte o título de 40 UI. Entre os 443 gatos estudados, 18 (4,06%) apresentaram reação sorológica positiva na RIFI. Os títulos observados foram de 40 UI em 0,90%. No TAD, foi encontrada positividade em 25 (5,64%) animais. Os títulos observados foram de 40 UI, em 4,97% dos gatos, e 80 UI, em 0,68%. A concordância entre os testes foi considerada baixa (coeficiente Kappa: 0,10).

Abstract Leishmaniasis is a vector-borne zoonotic disease caused by protozoa in the genus Leishmania, typical of rural and peri-urban environments. The causative agent of American visceral leishmaniasis is Leishmania (Leishmania) infantum chagasi and the main insect vector in Brazil is Lutzomyia longipalpis. Dogs (Canis familiaris) are important in the transmission of the disease, as a reservoir closely related to humans and an infection source for phlebotomine vectors. Since 1990, an increasing number of feline leishmaniasis cases have been reported, suggesting that domestic cats (Felis catus) might be involved in the epidemiology of the disease. The present study analyzed the prevalence of anti-Leishmania spp. antibodies in naturally infected domestic cats from various neighborhoods in the municipality of Belém, Pará, Brazil, using the indirect immunofluorescence assay (IFA) and the direct agglutination test (DAT). Among the 443 samples tested, 18 (4.06%) presented positive reactions in the IFA. The observed titers were 40 IU in 4.97% of the samples and 80 IU in 0.90%. In the DAT test, positive results were found in 25 (5.64%) of the samples. The observed titers were also 40 IU (4.97%) and 80 IU (0.68%). The agreement rate between the two tests was considered low (Kappa coefficient = 0.10).

Brucelose e leptospirose são enfermidades bacterianas amplamente disseminadas e o cão é importante fonte de infecção e reservatório para ambas, podendo eliminar o agente no meio ambiente, e transmiti-lo para humanos e/ou outros animais. O presente estudo teve como objetivo pesquisar a ocorrência de cães reagentes para anticorpos contra Leptospira spp., Brucella canis e B. abortus em Belém e Castanhal, Pará, Amazônia, Brasil. Foram colhidas de forma aleatória 156 amostras no município de Belém e 158 amostras em Castanhal. A pesquisa de anticorpos anti-B. canis foi realizada pela técnica de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) com e sem tratamento do soro com 2-mercaptoetanol (IDGA-2ME) e para pesquisa de anticorpos anti-B. abortus foi utilizada a técnica de Soroaglutinação Rápida com antígeno acidificado tamponado (AAT). Para pesquisa de anticorpos contra-Leptospira spp. utilizou-se a Técnica de Aglutinação Microscópica (MAT). Nenhum animal reagiu para Brucella abortus e um animal foi reagente para B. canis na IDGA, porém foi negativo na IDGA-2ME. Dezessete por cento dos cães (47/274) apresentaram anticorpos contra-Leptospira spp., com predominância do sorovar Canicola. Os cães de Belém e Castanhal não são fontes de infecção para B. abortus e B. canis, no entanto são reservatórios de diferentes sorovares de Leptospira spp.

Brucellosis and leptospirosis are widely spread bacterial infections and dogs are the most important source of infection and reservoir for diseases. Dogs can disseminate the agents in the environment and transmit them to humans and/or other animals. The objective of this study was assess the occurrence of reactive to antibodies anti-Leptospira spp., Brucella canis and B. abortus in Belém and Castanhal, State of Pará, Amazon, Brazil. A total of 156 samples were randomly collected in the city of Belém and 158 samples in Castanhal. The anti-B. canis antibodies research was performed by Agar Gel Immunodiffusion (AGID) with and without 2-mercaptoethanol serum treatment (AGID-2ME). To assess the anti-B. abortus antibodies, the technique of Fast Seroagglutination with buffered acidified plate antigen (BAPAT) was used. For anti-Leptospira spp. antibodies research, the Microscopic Agglutination Technique (MAT) was used. No animal reacted to Brucella abortus and one animal was reactive to B. canis at the AGID, but it was negative to the AGID-2ME test. Seventeen percent of dogs (47/274) presented anti-Leptospira spp. antibodies, with prevalence of serovar Canicola. The dogs from Belém and Castanhal are not source of infection for B. abortus and B. canis, however, they are reservoirs for different serovars of Leptospira spp.

Descrevem-se os parâmetros hematológicos, urinários, perfil sorológico de aglutininas antibrucélicas e resultados de isolamento bacteriano de swab vaginal, líquido prostático e hemocultura de 12 cães naturalmente infectados por Brucella canis. Observaram-se flutuação dos resultados sorológicos, ausência de isolamento de B. canis nos diversos materiais colhidos e valores hematológicos e urinários predominantemente normais. Discute-se o diagnóstico de brucelose canina em nível individual.

This work describes the serology, bacterial isolation of vaginal swabs and hemoculture and hematological and urinary values of twelve dogs naturally infected wilth Brucella canis. Flutuation of positive results in the serology, absence of isolation of B. canis in the hemoculture and vaginal swabs, and normality of haematological and urinary parameters were observed in the infected animals.