RESUMO: Este estudo teve como objetivo detectar a presença e distribuição de mecA em Staphylococcus spp. no ambiente de produção leiteira em fazendas no Brasil. Foram analisadas 335 amostras de leite de vaca com mastite, 15 amostras de swabs de narinas e mãos de ordenhadores, 14 swabs de teteiras e nove swabs de baldes de ordenha. Inicialmente, as amostras foram submetidas a análises microbiológicas para detecção de Staphylococcus spp. e os isolados positivos foram identificados por PCR para S. aureus e mecA. Todos os isolados de S. aureus portadores do gene mecA foram submetidos à análise de macrorrestrição do DNA por Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE). O gene mecA foi detectado em 6/335 (1,78%) de leite de vaca com mastite, 5/15 (33,3%) e 5/15 (33,3%) de swab de narinas e de mãos, e 4/14 (28,5%) de teteiras. A genotipagem de MRSA realizada por PFGE identificou um total de sete pulsotipos, que foram agrupados em dois clusters. Este estudo identificou a ocorrência e disseminação de MRSA no ambiente das fazendas leiteiras, e também a existência de perfis genéticos distintos entre os isolados.

ABSTRACT: This study detected the presence and distribution of mecA in Staphylococcus spp. in the dairy production environment at farm level in Brazil. We analyzed 335 samples of mastitis cow milk, 15 samples of nostrils and hand swabs from milkers, 14 teat cup swabs, and 9 milking buckets swabs. Initially, the samples were subjected to microbiological analysis to detect Staphylococcus spp. and then S. aureus and mecA positive isolates were identified by PCR. All S. aureus isolates carrying the mecA genes were subjected to DNA macro-restriction analysis by Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE). The mecA gene was detected in 6/335 (1.78%) of mastitis cow milk, 5/15 (33.3%), and 5/15 (33.3%) of nostrils and hand swab, and 4/14 (28.5%) of the teat cup isolates. MRSA genotyping was performed by PFGE, a total of seven pulsotypes were grouped in two clusters. This study identified the occurrence and spread of MRSA at dairy environment of farms, and also the existence of distinct genetic profiles between isolates.

RESUMO: A leptospirose é um grande problema de saúde pública, e os suínos são um dos mais importantes reservatórios e fonte de infecção por Leptospira para o homem. O objetivo deste estudo foi investigar a situação epidemiológica da leptospirose em suínos no estado de Pernambuco, Brasil. Amostras de sangue de 265 suínos foram coletadas e testadas pelo teste de microaglutinação (MAT), e foi aplicado um questionário epidemiológico contendo perguntas sobre características da produção, manejo reprodutivo e aspectos sanitários e de higiene do rebanho para avaliar fatores de risco de infecção. Os dados foram analisados por meio de um modelo de regressão logística. Foi observada ocorrência de 53,1% (143/265) de suínos positivos para Leptospira spp. Os sorovares mais comuns foram Icterohaemorrhagiae (39,1%), Pomona (25,9%) e Shermani (14,0%). Os fatores associados à infecção foram fonte de água parada (p = 0,034; odds ratio - OR = 2,29; intervalo de confiança de 95% - IC95% 1,06-4,93), fazendas onde animais saudáveis são criados com os doentes (OR = 1,69; IC95% 1,04-2,75) e áreas inundadas (OR = 1,65; IC95% 1,01-2,68). Os fatores de risco encontrados neste estudo desempenharam papel importante na disseminação do agente e devem ser evitados, de forma a controlar a doença nos rebanhos estudados.

ABSTRACT: Leptospirosis is a major public health threat, and swine are one of the most important reservoirs and sources of Leptospira infection for man. The aim of this study was to investigate the epidemiological situation of leptospirosis in swine in the state of Pernambuco, Brazil. Blood samples from 265 swine were collected and tested by the microscopic agglutination test (MAT), and an epidemiological form containing questions about animal production characteristics, reproductive management, and sanitary and hygiene aspects of the herd was applied to evaluate infection risk factors. The data were analyzed by means of a logistic regression model. An occurrence of 53.1% (143/265) of swine positives to Leptospira spp. was observed. The most commons serovars were Icterohaemorrhagiae (39.1%), Pomona (25.9%), and Shermani (14.0%). Factors associated with the infection were stagnant water source (p = 0.034, odds ratio - OR = 2.29; confidence interval of 95% - 95%CI 1.06-4.93), farms where the healthy animals are bred with sick ones (OR = 1.69; 95%CI 1.04-2.75), and the properties with flooded areas (OR = 1.65; 95%CI 1.01-2.68). The risk factors found in this study played an important role in the agent dissemination and should be avoided in a way to control the disease in the herds studied.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi investigar a Agalaxia contagiosa em rebanhos do estado de Pernambuco. Foram examinadas 225 cabras e 63 ovelhas, das quais foram colhidas 288 amostras de leite e 100 suabes vaginais. Foram realizadas reações da PCR com iniciadores específicos para Mycoplasma agalactiae e Mycoplasma mycoides cluster. A frequência total de Mycoplasma agalactiae em amostras de leite caprino foi de 12,0% (27/225) e de 5,3% (12/225) para Mycoplasma mycoides cluster. Dos suabes vaginais de cabras as frequências detectadas na PCR foram de 15,4% (12/78) para Mycoplasma agalactiaee 3,8% (3/78) para Mycoplasma mycoides cluster. Em leite de ovelhas a frequência de Ma foi de 4.3% (1/23) e de 7,5% (3/40) para Mycoplasma mycoides cluster. Na análise dos fatores de risco para micoplasmoses verificou-se que rebanhos de caprinos e ovinos mantidos no sistema extensivo são mais prováveis de adquirir micoplasmose quando comparados com o sistema intensivo (odds ratio (OR) 6,2; p=0,004); rebanhos de caprinos e ovinos de corte são mais prováveis de adquirir micoplamsose do que rebanhos de leite (OR 4,8; p=0,011); não realizar limpeza das instalações aumenta as chances de infecção (OR 5,0; p=0,031); não realizar quarentena aumenta as chances das micoplasmoses estudadas (OR 4,6; p=0,042). Conclui-se que M. agalactiae e Mycoplasma mycoides cluster estão envolvidos na síndrome de CA em rebanhos de caprinos e ovinos do semiárido pernambucano.

ABSTRACT: The present study aimed to investigate contagious agalactia (CA) in flocks from Pernambuco State. The study involved 225 goats and 63 ewes; 288 milk samples and 100 vaginal swabs were collected in total. The PCR assays were carried out using specific primers to Mycoplasma agalactiae and the Mycoplasma mycoides cluster. Among the goat’s milk samples,12.0% (27/225) were positive for Mycoplasma agalactiae DNA, while 5.3% (12/225) contained the Mycoplasma mycoides cluster. Of the vaginal swabs taken from goats, 15.4% (12/78) were positive for Mycoplasma agalactiae DNA and 3.8% (3/78) contained the Mycoplasma mycoides cluster. In the case of ewes, 4.3% (1/23) of the milk samples contained Mycoplasma agalactiae DNA, and 7.5% (3/40) were positive for the Mycoplasma mycoides cluster. Vaginal swabs taken from sheep´s were negative. Analysis of risk factors for mycoplasmosis, showed that goats and sheep flocks on the extensive breeding system are more likely to have mycoplasmosis than those on the intensive breeding system (odds ratio (OR) 6.2; p=0.004); meat goat and sheep flocks are more likely to have infection compared to dairy flocks (OR 4.8; p=0.011); unclean animal housing increases the chances of infection (OR 5.0; p=0.031) and not performing quarantine increases the chances of mycoplasmosis (OR 4.6; p=0.042). Based on these findings we conclude that CA syndrome in the semiarid region of Pernambuco state can be associated with Mycoplasma agalactiae and Mycoplasma mycoides cluster.

Resumo Objetivou-se com este trabalho identificar a ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas (sea, seb, sec e seg) e do gene da toxina 1 responsável pela síndrome do choque tóxico (tst) em isolados de Staphylococcus aureus procedentes de casos de mastite bovina, no estado de Pernambuco, Brasil. Foram analisados 93 isolados e observou-se a presença de genes toxigênicos em 20 (21,6%) deles, dos quais 11 (55,0%) foram positivos para o gene tst, sete (35,0%) para o gene sec e dois (10,0%) para o gene seg. Dentre os 20 isolados que amplificaram na PCR para presença dos genes sec, seg e tst, 16 (80,0%) foram positivos apenas para um gene e quatro (20,0%) foram positivos para dois genes (sec e tst). Das 17 propriedades de onde as amostras tiveram origem, sete (41,2%) apresentaram amostras positivas para pelo menos um dos genes sec, seg e tst. Este é primeiro registro de ocorrência dos genes codificadores das enterotoxinas SEC e TST-1 em amostras de leite de vacas com mastite no estado de Pernambuco, Brasil.

Abstract The objective of this study was to identify the occurrence of genes expressing staphylococcal enterotoxin (sea, seb, sec, and seg) and the toxin gene 1 of toxic shock syndrome (tst) in Staphylococcus aureus coming from cases of bovine mastitis in the state of Pernambuco, Brazil. We analyzed 93 isolates and we observed the presence of toxigenic gene in 20 (21.6%) samples, of which 11 (55.0%) were positive for tst gene, seven (35.0%) for the sec gene, and two (10.0%) for the seg gene. Of the 20 isolates amplified in PCR for the presence of the sec gene, seg and tst, 16 (80.0%) were positive for only one gene and four (20.0%) were positive for two genes (sec and tst). Of the 17 properties from which the samples originated, seven (41.2%) had positive samples for at least one of the genes sec, seg, and tst. This is the first record of the occurrence of the genes encoding the enterotoxin SEC and TST-1 in milk samples from cows with mastitis in the state of Pernambuco, Brazil.

Abstract The aim of this study was to detect the IS900 region of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) in bovine milk samples using real-time polymerase chain reaction (qPCR) and conventional PCR, and to study the agreement between these tests. A total of 121 bovine milk samples were collected from herds considered positive for MAP, from the State of Pernambuco, Brazil. MAP DNA was detected in 20 samples (16.5%) using conventional PCR and in 34 samples (28.1%) using qPCR. MAP DNA was detected in all of the 6 animal farms studied. Moderate agreement was found between qPCR and conventional PCR results, where the sensitivity and specificity of conventional PCR in relation to qPCR were 50% and 96.6%, respectively. Thus, the IS900 region of MAP was found in bovine milk samples from the State of Pernambuco. To the best of our knowledge, this is the first report of MAP DNA found in bovine milk in Northeast Brazil. We also demonstrated the qPCR technique is more sensitive than conventional PCR with respect to detection of MAP in milk samples.

RESUMO: Objetivou-se com este estudo analisar os aspectos epidemiológicos e caracterizar espacialmente a infecção por Leptospira spp. em ovinos no estado de Pernambuco, Brasil. Para compor a amostragem do estudo, foram colhidas 426 amostras de animais com idade igual ou superior a um ano, não vacinados, e submetidas à reação de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Para o estudo dos fatores de risco, aplicou-se um questionário investigativo padronizado, constituído por perguntas objetivas ao criador, referentes às características gerais da propriedade, ao manejo produtivo, reprodutivo e sanitário. Das 426 amostras analisadas, 83 (19,5%; IC 15,9 - 23,6%) foram positivas; entre elas, o sorovar de maior prevalência foi o Autumnalis (32,4%). Foram observadas diferenças significativas entre sexo (OR = 0,38; I.C. 0,14 - 0,99), sistema de criação (OR = 2,03; I.C. 1,07 - 3,84), tipo de rebanho (OR = 2,28; I.C. 1,39 - 3,72), ausência do acesso de ratos a ração (OR = 0,55; I.C. 0,34 - 0,91) e restrição a águas de superfície (OR = 0,60; I.C. 0,37 - 0,99). A infecção por Leptospira spp. está distribuída nos rebanhos ovinos e são múltiplos os fatores que podem influenciar sua ocorrência. A implantação de programas de educação em saúde e o treinamento da mão de obra em métodos de prevenção e controle da leptospirose e outras doenças infecciosas podem ser úteis na redução dos casos de infecção e na diminuição das perdas econômicas causadas por esta enfermidade.

ABSTRACT: This study aimed to analyze epidemiological aspects and spatial characteristics of Lesptospira spp. infection among sheep in Pernambuco state, Brazil. A total of 426 samples were collected from unvaccinated animals aged 1 year or older, and submitted to Microscopic Agglutination Test (MAT). To study the risk factors, a standardized investigative survey of sheep farmers, with objective questions, was conducted to establish the general characteristics of the farm property production, reproductive management, and health plan. From 426 samples analyzed, 83 (19.5%; CI 15.9 - 23.6%) were positive; among them, the most prevalent serovar was Autumnalis (32.4%). Significant differences were observed between gender (OR = 0.38; CI 0.14 - 0.99), production system (OR = 2.03; CI 1.07 - 3.84), types of herd (OR = 2.28; CI 1.39 - 3.72), absence of rodents to the grain storage (OR = 0.55; CI 0.34 - 0.91), and restriction to surface waters (OR = 0.60; CI 0.37 - 0.99). Leptospira spp. infection is disseminated in sheep herds, and multiple factors can influence its occurrence. Health education programs and worker training in prevention and control of leptospirosis and other infectious diseases may be useful to reduce infection rates and economic losses caused by this disease.

Em março de 2012 foi diagnosticado um surto de doença reprodutiva em rebanho bovino no Estado da Paraíba, Brasil. Foram examinadas 32 vacas e dois touros da raça Girolando. As vacas apresentaram sinais de doença reprodutiva como repetição de cio, vulvovaginite granular, infertilidade e abortos. As amostras de suabes vaginais e prepuciais foram colhidas e submetidas a isolamento bacteriano e PCR. As reações da PCR para Mollicutes e Ureaplasma spp. foram realizadas com os iniciadores MGSO-GPO3 e UGP'F-UGP'R, respectivamente. Na Nested PCR para Ureaplasma diversum, os iniciadores usados foram UD1, UD2, UD3 e UD4. Para isolamento bacteriano, as amostras foram diluídas de 10-1 até 10-5, semeadas em meio "UB", líquido e placa, sendo incubadas por até 21 dias a 37ºC em jarra de microaerofilia. A frequência de Mollicutes detectada na PCR foi de 65,6% e para Ureaplasma spp. foi de 50,0%, enquanto que para U. diversum foi de 15,6%. No isolamento a frequência de Mollicutes foi de 57,1% e para Ureaplasma spp. foi de 28,6%. No ágar "UB" foi visualizado o crescimento misto de Mycoplasma spp. e Ureaplasma spp. em seis amostras. Foi confirmado o envolvimento de micro-organismos da Classe Mollicutes em surto de doença reprodutiva em vacas no sertão paraibano.

In March of 2012 was investigated a reproductive disease outbreak in cattle herds from Paraíba State, Brazil. Were examined 32 cows and two bulls Giroland breed. The cows showed signs and symptoms of reproductive failure such as repeat breeding, granular vulvovaginitis, infertility and abortions. Vaginal and preputial mucous samples were collected for analysis by PCR and isolation. The PCR reactions for Mollicutes and Ureaplasma spp. were realized with primers MGSO and GPO3, and UGP'F and UGP'R respectively. The nested PCR assay for Ureaplasma diversum was realized with primers UD1, UD2, UD3 and UD4. For bacteriologic isolation, obtained samples were diluted up to 10-1 at 10-5, inoculated into liquid and solid "UB" medium, and incubated for up to 21 days, at 37ºC in microaerophilie jar. In the PCR reactions the frequency of Mollicutes detected in the analyzed vaginal mucous samples was 65.6, for Ureaplasma spp. was 50.0, while for U. diversum was 15.6. The frequency for isolation of Mollicutes was of 57.1 and for Ureaplasma spp. was of 28.6. In the UB agar was visualized growth of Mycoplasma spp. and Ureaplasma spp., associated in six of the samples. In the cows the presence of Mollicutes and Ureaplasma spp. was confirmed for the reproductive disease outbreak in the semiarid region of Paraiba.