Abstract The aim of this study was to evaluate the long-term effects of recombinant bovine somatotropin (rbST) on follicle population and ovulatory follicle development in non-lactating dairy cows. Twenty-one Jersey cows were allocated in rbST (n=11) or control (n=10) groups. On day -60, cows in rbST group received 500 mg of somatotropin (s.c. Lactotropin®, Elanco). On day 0, control and rbST cows received an intravaginal progesterone-releasing device (1.9 g, CIDR®, Zoetis) and GnRH (100 mg, IM, Factrel®, Zoetis). On day 8, cows received PGF2α (25 mg, IM, Lutalyse®, Zoetis) and the CIDR® was removed. Twelve hours after device removal (D8), serum, follicular fluid and granulosa cells samples were collected. Serum and follicular concentration of estradiol (E2) and progesterone (P4) were analyzed. Total RNA was extracted from granulosa cells to measure gene expression of LHCGR, STAR, HSD-3B1, CYP11A1, CYP19A1, CYP17A1, IGFR and PAPPA by real-time PCR. Ultrasonography was performed on days -60, -53, -46, -14, -7, 0 and 8 for antral follicle count. Results were analyzed by repeated measures ANOVA and t-test. There was no effect of rbST treatment on the number of follicles during the 60 days period, as well as no effect on serum and follicular fluid E2 and follicular fluid P4 at the moment of follicle aspiration. There was a reduction in PAPPA (P = 0.006), CYP11A1 (P = 0.04) and CYP19A1 (P = 0.002) mRNA levels in granulosa cells of the pre-ovulatory follicle of rbST treated cows. In conclusion, a single dose of rbST did not have long-term effects on antral follicle population, serum and follicular E2/P4 concentrations in non-lactating dairy cows. Despite that, rbST injection decreased granulosa cell expression of genes related to steroidogenesis in the pre-ovulatory follicle.

RESUMO: O objetivo desse estudo foi estimar a soroprevalência da neosporose e os possíveis fatores de risco em rebanhos (Bos taurus taurus) localizados na mesorregião Noroeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Foram coletadas 322 amostras de sangue de bovinos leiteiros, em 18 propriedades localizadas em 17 munícipios desta mesorregião. Um questionário epidemiológico foi aplicado em cada propriedade, contendo questões relacionadas às características gerais dos rebanhos, dados reprodutivos e manejo animal. As amostras de soro foram testadas através do teste de imunoensaio enzimático (ELISA) para Neospora caninum. Os resultados demonstraram uma soroprevalência de Neospora de 88,9% (16/18) entre os rebanhos e 31,1% (100/322) entre os indivíduos. Entre os fatores de risco analisados foi observado que descarte por problemas reprodutivos (OR=0,6), presença de áreas alagadiças (OR=0,5) e venda comercial (OR=0,4) estavam associados a soroprevalência. No entanto, a compra de animais substituídos no rebanho desempenhou um papel significativo na ocorrência da doença (OR=2,2). Os resultados desse estudo sugerem que o Neospora caninum esteve presente nos rebanhos estudados, bem como, existem fatores associados com a soroprevalência nas propriedades da mesorregião do Noroeste do Rio Grande do Sul.

ABSTRACT: The aim of this study was to estimate neosporosis seroprevalence and its associated risk factors in milk herds (Bos taurus taurus) located in the northwestern region of Rio Grande do Sul State, Brazil. Three hundred twenty-two blood samples were collected from dairy cows on 18 farms in 17 cities of this region. An epidemiologic questionnaire was completed for each farm. It consisted of questions about the general characteristics of the herd, reproduction, and animal management. Serum samples were tested for Neospora caninum using a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit. Results indicated a seroprevalence of Neospora in 88.9% (16/18) of herds and 31.1% (100/322) of individuals. Risk factor analyses demonstrated that culling by reproductive disorder (OR = 0.6), flooding (OR = 0.5), and commercial sale (OR = 0.4) were associated with seroprevalence. Nevertheless, the purchase of replacement animals in the herd played an important role in disease occurrence (OR = 2.2). Results of this study suggested that Neospora caninum was present in the studied herds under investigation and that there are risk factors associated with its seroprevalence on the farms of the northwestern of Rio Grande do Sul.

O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes níveis de gordura na dieta de vacas em lactação, sobre a resposta superovulatória e qualidade embrionária. Foram utilizadas dezoito vacas Jersey (420±70,6kg de peso vivo; 22,2±1,7kg de leite) agrupadas em blocos de acordo com a data de parição e ordem de lactação e aleatoriamente distribuídas nos tratamentos. As dietas consistiram de: controle- dieta a base de milho e farelo de soja contendo 4,0% de extrato etéreo (EE); médio- dieta controle adicionada de sebo bovino para aumentar o extrato etéreo da dieta para 6,0% e alto- dieta controle adicionada de sebo bovino para se obter extrato etéreo de 8,0% na dieta. Todos os animais foram superovulados duas vezes (aos 90 e 130 dias pós-parto), sendo as coletas realizadas sete dias após a inseminação artificial (IA). As estruturas coletadas foram avaliadas para estágio de desenvolvimento e qualidade embrionária (IETS, 1999). Não foram encontradas diferenças significativas com relação ao número de estruturas coletadas, corpos lúteos, embriões de grau um e dois, e embriões de grau quatro. O grupo que recebeu alta (2,9±0,4) gordura apresentou maior número de embriões de grau três em relação aos grupos controle (0,2±0,4) e médio (0,0±0,5). A adição de sebo para aumentar o EE em dietas vacas lactantes não melhorou a resposta superovulatória e a qualidade embrionária.

This experiment aims at evaluating the effects of dietary fat to lactating dairy cows, on the superovulatory response and embryo quality. Eighteen high producing lactating Jersey cows (420±70.6kg of live weight, 22.2±1.7kg of milk/day) were grouped according to calving date and lactation order, and randomly assigned to one of the three treatment diets. The control group received a basic diet with corn and soybean bran, containing 4.0% ether extract, the medium group received the control diet with additional tallow to increase the ether extract content to 6.0% and the high group treatment received the control diet with additional tallow to increase the ether extract content to 8.0%. All cows were twice superovulated, at 90 and 130 days postpartum. The structures recovered (7 days after artificial insemination) were evaluated for developmental stage and quality grade (IETS, 1999). The results shows no difference on structures number, embryos grade one and two, grade four and corpora lutea number, for the tested treatments. The cows groups that receive high fat diet (2.9±0.4) had higher number of grade three embryos in relationship to control (0.2±0.4) and medium (0.0±0.5) groups. Addition of tallow to diets to increase EE levels to lactating cows did not increase the superovulatory response and embryo quality.

No sistema de PIV em bovinos, tem sido obtida uma elevada porcentagem de embriões machos. Este experimento foi realizado para determinar se a presença de glicose no meio de cultivo afeta a proporção macho:fêmea (M:F) dos embriões bovinos PIV a partir da FIV com espermatozóides preparados pelos métodos do swim-up (S) ou do gradiente de Percoll (P). Após a MIV, os COCs foram divididos em dois grupos e inseminados com espermatozóides preparados por um dos métodos. Os zigotos foram cultivados em meio com ou sem 5,56mM de glicose, totalizando 4 tratamentos: S-Gli, S+Gli, P-Gli e P+Gli e 48h após a inseminação, os embriões de cada tratamento foram submetidos à sexagem por PCR (n=845). O efeito da glicose no meio de cultivo sobre a proporção M:F dos embriões PIV a partir dos dois métodos foi semelhante (teste do c²), resultando em uma porcentagem de machos menor do que 50% no estágio de 2-C (S: 30,8%; P: 23,8%: P<0,01) e maior do que 50% no estágio de 8-C (S: 79,4%; P: 68,8%: P<0,01). Estas porcentagens foram diferentes (P<0,05) das observadas quando os embriões foram cultivados sem glicose, tanto no estágio de 2-C (S: 48,5%; P: 41,5%) como no de 8-C (S: 62,5%; P: 50,8%). A presença de glicose não afetou a proporção M:F no total de embriões produzidos (S: 56,7%; P: 49,0%), que foi semelhante à observada na ausência de glicose (S: 55,7%; P: 46,2%). Portanto, a glicose exacerbou a diferença na velocidade de desenvolvimento entre os embriões machos e fêmeas.

In the bovine IVP system, it has been obtained a high percentage of male embryos. This experiment was carried ou to determine if the glucose presence in the culture medium affects the sex ratio of bovine embryos IVP from the IVF with spermatozoa prepared for the swim-up (S) or Percoll gradient (P) methods. After the IVM, the COCs had been divided in two groups and inseminated with spermatozoa prepared for one of the methods. The zygotes had been cultivated in medium with or without 5.56mM of glucose, totalizing 4 treatments: S-Glu, S+Glu, P-Glu and P+Glu, and 48h post-insemination, the embryos of each treatment had been sexed for the PCR method (n=845). The effect of glucose in the culture medium on sex ratio of embryos IVP from the two methods was similar (c² test), resulting in a percentage of males lower than 50% in the 2-C stage (S: 30.8%; P: 23.8%: P<0.01) and higher than 50% in the 8-C stage (S: 79.4%; P: 68.8%: P<0.01). These percentages were different (P<0.05) of the observed when the embryos were cultivated without glucose, as much in the 2-C stage (S: 48.5%; P: 41.5%) as in the 8-C stage (S: 62.5%; P: 50.8%). The glucose presence did not affect the sex ratio in the total of produced embryos (S: 56.7%; P: 49.0%), that was similar to the observed in the glucose absence (S: 55.7%; P: 46.2%). Therefore, the glucose exacerbated the difference in the development speed between the female and male embryos.