ABSTRACT The objective of the present study was to detect endophytic fungi associated with the seeds of 11 forest species. Ten genera of endophytic fungi were found associated with the seeds of those species. The most frequent fungi found in the seed lots were Aspergillus sp., Penicillium and Fusarium. Trichoderma sp. and Phomopsis sp. were also detected.

RESUMO O objetivo deste trabalho foi detectar fungos endofíticos associados às sementes de 11 espécies florestais. Dez gêneros de fungos endofíticos foram associados às sementes dessas espécies. Os fungos encontrados com maior frequência nos lotes de sementes foram Aspergillus sp., Penicillium e Fusarium. Encontrou-se também Trichoderma sp. e Phomopsis sp.

RESUMO: Duponchelia fovealis (ZELLER, 1847) é uma nova praga do morangueiro em todo o mundo. Visando desenvolver alternativas para seu manejo, objetivou-se avaliar a toxicidade letal e a ação inibidora do desenvolvimento de formulações preparadas a partir de extratos etanólicos de sementes de espécies pré-selecionadas de Annona (Annona mucosa Jacq., Annona muricata L. e Annona sylvatica A. St.-Hil.), ricos em acetogeninas, em comparação com um bioinseticida à base de limonoides [Azamax® 1,2 EC (azadiractina + 3-tigloil-azadiractol), controle positivo] sobre lagartas de D. fovealis. Emulsões aquosas preparadas a partir de extratos etanólicos de sementes de A. mucosa e de A. sylvatica e um bioinseticida à base de limonóide apresentaram baixa toxicidade letal para larvas de D. fovealis; no entanto, eles causaram uma inibição pronunciada de seu desenvolvimento larval. Assim, os efeitos combinados de toxicidade letal e subletal de formulações ricas em acetogeninas e do bioinseticida comercial à base de limonoides podem oferecer um caminho para novas estratégias de controle de D. fovealis em cultivos de morango, especialmente em sistemas de produção de base orgânica.

ABSTRACT: Duponchelia fovealis (Zeller, 1847) is a new pest of strawberry crops worldwide. To develop alternative strategies for its management, we assessed the lethal toxicity and growth inhibitory action of formulations prepared from ethanolic seed extracts of pre-selected species of Annona (Annona mucosa Jacq., Annona muricata L., and Annona sylvatica A. St.-Hil.), which were previously characterized by their high content of annonaceous acetogenins. In addition, the extracts were compared to a limonoid-based bioinsecticide [Azamax® 1.2 EC (azadirachtin + 3-tigloil-azadiractol), positive control] on D. fovealis larvae. Aqueous emulsions prepared from ethanolic seed extracts of A. mucosa and A. sylvatica and a limonoid-based bioinsecticide had low lethal toxicity to D. fovealis larvae; nevertheless, they caused a pronounced inhibition of their larval development. Thus, the combined effects of lethal and sublethal toxicity of acetogenin-rich formulations and the limonoid-based commercial bioinsecticide may offer a route to new control strategies of D. fovealis in strawberry crops, especially in organic-based production systems.

Abstract Xylan degradation is an important step in different industries, such as in biorefinery for biomass hydrolysis. Talaromyces wortmannii is a known fungus due to second metabolite production but only few works showed the xylanolytic potential of this fungus. In this way, the aim of this study was to evaluate the production of xylanolytic enzymes from T. wortmannii DR49 on industrial agro wastes. Cultivation in shake flask showed highest xylanase titration (10.3 U/mL; 9.5 U/mL) for wheat bran (WB) and hydrothermal pretreated sugar cane bagasse (HB); in β-xylosidase production WB and xylose were the best carbon sources (0.57 U/mL; 0.34 U/mL) respectively. STR cultivation revealed that 29°C and pH 6.0 were the best conditions for xylanase (14.5 U/mL) and β-xylosidase (1.7 U/mL) production. T. wortmannii DR49 showed to be a potential candidate for xylanolytic enzymes production using agro wastes in bioreactors, which has never been previously reported in this fungus.

ABSTRACT Peroba rosa (Aspidosperma polyneuron) is a native forest species endangered due to intense predatory exploitation. The objective of this study was to evaluate the association and fungi transmission in peroba rosa seeds from four regions of Paraná. Germination and vigor were evaluated using the paper roll method. Sanitary analysis consisted of the detection of endophytic and epiphytic fungi using potato-dextrose-agar medium and Fusarium selective medium. For transmission, non-disinfested seeds were sown in vermiculite and kept in greenhouse. Germination ranged from 9.3% to 60%. Fusarium sp. and Phomopsis sp. were found as epiphytic and also as endophytic. There was transmission of Fusarium sp. and Phomopsis sp. from seeds to seedlings, causing malformation and necrosis on roots and cotyledons.

RESUMO Fungos endofíticos podem ter várias relações com mudas de plantas, desde a patogênese até a proteção e estímulo ao crescimento. O objetivo deste estudo foi isolar e identificar fungos endofíticos em miniestacas de acácia-negra. Miniestacas assintomáticas foram avaliadas e seis espécies de fungos endofíticos foram isoladas e identificadas.

ABSTRACT Endophytic fungi can have several relationships with seedlings, from pathogenesis to protection and growth stimulus. The aim of the present study was to identify endophytic fungi in minicuttings of black wattle. Asymptomatic minicuttings were evaluated and six species of endophytic fungi were isolated and identified.

RESUMO O mofo cinzento, causado por Botrytis cinerea, é responsável por mortalidade em mudas de Eucalyptus benthamii. O controle biológico é uma alternativa, devido à falta de produtos registrados para eucalipto no Brasil. Este estudo avaliou o fungo endofítico Trichoderma atroviride, isolado de eucalipto, para controle de B. cinerea. O ensaio consistiu na aplicação de uma suspensão de esporos de T. atroviride em mudas de E. benthamii, 24, 48 ou 72 horas antes de inocular B. cinerea. Como controle positivo utilizou-se iprodione. Mudas inoculadas foram mantidas em casa de vegetação por 21 dias. A severidade foi avaliada com auxílio de escala de sintomas de 0 (sem lesões) a 4 (alta severidade). Trichoderma atroviride reduziu significativamente a severidade da doença, independentemente do tempo de aplicação prévio, de modo similar ao fungicida.

ABSTRACT Gray mold, caused by Botrytis cinerea, is responsible for mortality of Eucalyptus benthamii seedlings. Biological control is an alternative due to the lack of products registered for eucalyptus in Brazil. This study evaluated the endophytic fungus Trichoderma atroviride, isolated from eucalypt, for controlling B. cinerea. The assay consisted in the application of a spore suspension of T. atroviride on E. benthamii seedlings at 24, 48 or 72 h before B. cinerea inoculation. Iprodione was used as positive control. Inoculated seedlings were maintained in a greenhouse for 21 days. Severity was evaluated based on a scale of symptoms from 0 (no lesions) to 4 (high severity). Trichoderma atroviride significantly reduced the disease severity, independent of the time of previous pulverization, similarly to the fungicide.

O resíduo líquido da indústria de enzimas (LWE) é utilizado como fertilizante por muitos agricultores. Para determinar o impacto do uso de LWE no solo, crescimento e nutrição mineral do pasto nativo, foi executado um experimento com cinco doses de LWE (0, 45, 90, 135 e 180 m³ ha-1), aplicado em um Cambissolo Háplico distrófico, em agosto de 2006. Em 2007 uma única dose de 60 m³ ha-1 foi aplicada em todos os tratamentos. Amostras de solo foram coletadas em quatro profundidades (0-10, 10-20, 20-40 e 40-60 cm) para verificar mudanças nas propriedades químicas do solo. Foram executados cinco cortes para determinar condições nutricionais e produtividade das plantas. No solo constatou-se melhoria nos parâmetros de acidez e disponibilidade de Ca2+, Mg2+, K+ e P, indicando sua ação como corretivo da acidez e fonte de nutrientes. Houve melhoria na qualidade da pastagem através do aumento dos teores de N, K e P nas plantas. O uso de doses do resíduo proporcionou aumentos médios na produtividade (42,6 kg matéria seca m-3 resíduo). Os resultados obtidos indicam que o LWE mostrou-se viável na fertilização de pastagem em Cambissolo ácido de baixa fertilidade.

Farmers have used liquid waste from the enzyme industry as fertilizer. To determine the impact of liquid waste from enzymes (LWEs) on soil properties, plant growth and nutrient content in pasture, an experiment was conducted with five different rates of LWE application (0, 45, 90, 135 and 180 m³ ha-1) to a Cambisol in August 2006. In August 2007, 60 m³ ha-1 of LWE was applied in every treatment. Soil was sampled on four different dates and at four different depths (0-10, 10-20, 20-40 and 40-60 cm) to verify changes in its chemical properties. Soil was improved in terms of acidity and availability of Ca2+, Mg2+, K+ and P in the 0-10 cm layer, indicating that the effect of LWE is corrective concerning these attributes. There was also improvement in pasture quality through increased levels of N, P and K in plants during the first year of waste application. The use of larger doses of LWE led to increases in productivity (42.6 kg dry weight m-3 residues). These results indicate that the application of LWE is feasible for the fertilization of this grassland containing low-fertility acidic Cambisol.

The aim of this study was evaluate, two methods for the detection and identification of sulphate reducing bacteria (SRB): ML medium and PCR with specific primers for SRB groups. SRB were detected through the selective medium only on carbon steel, which showed corrosion. Employing specific PCR primer, SBR were detected from all the metallic components assayed, even those that did not present visible corrosion spots, such stainless steel and copper alloys. Despite the presence or absence of corrosion at the later stages effectively by using the selective medium,, the initial stages of the corrosion could only be detected by the amplification of total DNA with SRB specific primers. The early detection of SRB could be employed for preventing the damages on metal surfaces before the installation of corrosion processes. Strategies for reducing the time spent on SRB isolation and identification could be auxiliary tools for controlling the corrosion of materials.

O presente trabalho objetivou estudar os fungos endofíticos em acículas de árvores jovens de Pinus taeda L. e avaliar o efeito da posição de coleta na árvore. As amostras foram coletadas em duas alturas (30-50 cm e 100-130 cm acima do solo) e nas quatro posições cardeais (norte, sul, leste e oeste), em plantas com 18 meses de idade, localizadas em Colombo, PR, Brasil. As acículas foram submetidas a assepsia e fragmentos com 10 mm de comprimento foram plaqueados em meio BDA e incubados a 28 °C, sob fotofase de 12 h, por 15 dias. Para a identificação, as estruturas reprodutivas dos fungos foram produzidas pelo método do microcultivo. Foram isolados e identificados dezessete gêneros: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Colletotrichum, Coniothyrium, Diplodia, Drechslera, Hansfordia, Monocillium, Nodulisporium, Panidio, Papulaspora, Pestalotiopsis, Phialophora, Pithomyces, Rhizoctonia e Xylaria Alguns morfotipos sem identificação foram Mycelia sterilia e fungos demaciáceos. O número de isolados da altura 30-50 cm foi significativamente maior que na outra altura. Não foi observada diferença significativa no número de isolados entre as posições cardeais de uma mesma altura. Diferenças significativas foram observadas entre os gêneros isolados e Xylaria foi o gênero mais frequente.

The present work aimed to study the endophytic fungi in Pinus taeda needles and to evaluate the effect of sample points in the tree. Samples were collectd in two different heights (30-50 cm and 100-130 cm over ground) and cardinal positions (North, South, East and West) in plants with 18 months old, located at Colombo, PR, Brazil. The needles were sucessively washed in sterile destilled water, 70 % ethanol, NaHClO 3 %, 70 % ethanol and sterile destilled water. Needle fragments of 10 mm of lenth were plated in PDA medium, incubated at 28 °C, fotophase 12h to 15 days. The reproductive structures of fungi were produced by microculture technique. Seventeen genera were identified: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Colletotrichum, Coniothyrium, Diplodia, Drechslera, Hansfordia, Monocillium, Nodulisporium, Panidio, Papulaspora, Pestalotiopsis, Phialophora, Pithomyces, Rhizoctonia and Xylaria. Some non identified morphotypes were Mycelia sterilia and dematiaceous fungi. The number of isolates from the 30-50 cm height was significantly higher than the other. No differences were observed on number of isolates among cardinal positions at the same height. It was observed significant differences were observed among the isolated genera and Xylaria was the most frequent genus.

O Brasil vem perdendo espaço no mercado internacional devido à piora da qualidade do café. As substâncias tóxicas liberadas pelos fungos além de alterarem a qualidade da bebida, também podem ser prejudiciais à saúde dos consumidores. O objetivo do presente trabalho foi o isolamento de fungos a partir de grãos de café da variedade IAPAR 59, relacionando-os com a qualidade da bebida. Foram realizadas colheitas de grãos da árvore e do solo em diferentes tempos (0, 30, 60, 90 e 120 dias). O isolamento dos fungos foi feito pelo método Pour-plate e para a identificação dos fungos utilizou-se o Microcultivo e a Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Houve diferença significativa no número absoluto de fungos encontrados nos grãos da árvore (5393), em relação aos grãos coletados no solo (1523). Foram identificados 7 gêneros: Absidia, Acremonium, Aspergillus, Fusarium, Mucor, Paecilomyces e Penicillium. Verificaram-se elevados níveis de Ocratoxina A em algumas amostras de café. A bebida perdeu a qualidade em função do tempo de permanência dos grãos na árvore e no solo, portanto, para a obtenção de uma bebida de melhor qualidade, deve-se evitar a permanência prolongada dos grãos em seus locais de origem.

Brazil is losing space in the international market due to the worsening in the quality of the coffee. The toxic substances released by fungi besides altering the quality of the drink, can also be harmful to the consumers' health. The purpose of this work was the isolation of fungi from coffee beans of the variety IAPAR 59 to analyze their effect on the quality of the drink. Grains were harvested from trees and were picked from the ground at different times (0, 30, 60, 90, and 120 days). The isolation of the fungi was made by the method "Pour-plate", and the Microcultive and Electronic Scanning Microscopy (MEV) was used to identify the fungi. There was a significant difference in the absolute number of fungi found in grains from trees (5393) in relation to the grains picked from the ground (1523). Seven genera were identified: Absidia, Acremonium, Aspergillus, Fusarium, Mucor, Paecilomyces e Penicillium. High levels of Ochratoxin A in some samples of coffee were identified. The drink lost quality according to the harvest time and the period the beans were left in the ground. In order to guarantee a better quality of the drink, it is recommended avoiding leaving the beans in their places of origin for too long before harvesting.

Paecilomyces lilacinus apresenta potencial para controle de pragas. O objetivo deste trabalho foi analisar o crescimento micelial e a produção de esporos de linhagens de P. lilacinus em resíduos agro-industriais e meios comerciais. Este estudo sugere fontes alternativas para produção de fungos com potencial biotecnológico para desenvolvimento de bioprodutos.

Paecilomyces lilacinus has potential for pests control. We aimed to analyze mycelial growth and spore production in P. lilacinus strains in several agro-industrial residues and commercial media. This study suggests alternative nutrient sources for fungi production and that the biotechnological potential of agro-industrial refuses could be employed in byproducts development.

A partir de 1728 fragmentos de hastes e folhas de soja (Glycine max (L.) Merril). provenientes de plantas do campo e de casa de vegetação, coletadas cerca de 20 e 40 dias após a germinação das sementes, 297 fungos endofíticos foram isolados. Os gêneros encontrados foram: Alternaria, Cladosporium, Curvularia, Chaetomium, Scopulariopsis, Drechslera (todos dematiáceos) além de Colletotrichum, Fusarium, Acremonium, Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces e Mycelia sterilia. Foram detectadas diferenças qualitativas e quantitativas entre os isolados, em relação a micobiota de hospedeiros provenientes do campo e de casa de vegetação com maior frequência de fungos isolados de plantas no campo em comparação com as de casa de vegetação. Houve diminuição da frequência de fungos com a idade das plantas crescidas no campo, ocorrendo o inverso com as da casa de vegetação, mas em ambos os casos, não houve diferença no número de fungos isolados de hastes e de folhas. Houve em plantas crescidas no campo uma maior incidência nas regiões próximas ao solo o que não ocorreu nas plantas provenientes da casa de vegetação. Os resultados podem ser de utilidade do ponto de vista biotecnológico pelo uso de endófitos introduzidos deliberadamente em plantas visando o controle biológico de pestes ou promoção de crescimento vegetal.

A total of 297 endophytic fungi were isolated from 1728 leaf and stem fragments collected about twenty and forty days after germination from soybean (Glycine max (L.) Merril) plants grown in the field and a greenhouse. The fungi belonged to eight groups, six dematiaceous genera (Alternaria, Cladosporium, Chaetomium, Curvularia, Drechslera and Scopulariopsis) and the non-dematiaceous genera Acremonium, Aspergillus, Colletotrichum, Fusarium, Paecilomyces and Penicillium along with some Mycelia sterilia.. There were qualitative and quantitative differences in the type and number of isolates obtained from greenhouse and field-grown plants, with more isolates being obtained from the latter. No difference was found in the number of fungi isolated from leaves and stems irrespective of where the plants was grown. For was field-grown plants, the number of isolates decreased as the plants aged and more fungi were found in tissues near the soil, while for greenhouse-grown plants the number of isolates increased as the plants aged but in this case no more fungi were isolated from those tissues nearer the soil. These results could have biotechnological relevance for the biological control of pests or plant growth promotion.

FUNDAMENTOS: As micoses superficiais e cutâneas têm surgido com grande prevalência no Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. OBJETIVOS: Avaliar o método do calcofluor white (CFW) mediante comparação com o método do hidróxido de potássio (KOH). MÉTODOS: Foram analisadas 74 amostras de raspados de pele, unha, couro cabeludo e cabelo de 62 pacientes de ambos os sexos em diferentes idades. O material foi coletado nos Ambulatórios de Dermatologia, Dermatopediatria e Pronto Atendimento do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná, entre outubro de 1995 e março de 1996. Os espécimes foram analisados por ambos os métodos e comparados no presente trabalho. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística do Qui-quadrado. RESULTADOS: Os resultados obtidos indicaram o CFW tão efetivo quanto o KOH. O hidróxido de potássio apresentou 38 (51%) resultados positivos e 36 (49%) negativos. O calcofluor white foi positivo em 35 (47%) amostras e negativo em 39 (53%). CONCLUSÃO: Os dados revelaram igual eficácia entre os métodos avaliados; no entanto, o método do calcofluor white necessita de um laboratório equipado com microscópio de imunofluorescência.

BACKGROUND: Superficial and cutaneous mycosis have appeared with great prevalence at the Clinical Hospital of the Parana State Federal University. OBJECTIVES: To evaluate the calcofluor white method (CFW) in comparison with the potassium hydroxide method (KOH). METHODS: 74 samples of skin, nail, scalp and hair scrapings were analyzed in 62 male and female patients of different ages. The material was collected at the Dermatology, and Dermatopediatric Clinics and Emergency Department of the Federal University of Parana State Clinical Hospital from October 1995 to March 1996. The specimens were analysed by both methods, and compared in this study. The results were submitted to Qui-square statistical analysis. RESULTS: The results obtained indicated CFW was as effective as KOH. Potassium hydroxide showed 38 (51%) positive and 36 (49%) negative results. Calcofluor white showed positive results in 35 (47%) samples and negative results in 39 (53%) samples. CONCLUSION: The data revealed equal efficiency in the two methods evaluated. On the hand, the calcofluor white method requires a laboratory equipped with an immunofluorescence microscope.