RESUMO A captura de iscas-vivas para a pesca esportiva constitui uma atividade importante em comunidades de pescadores. As principais espécies utilizadas para este propósito pertencem ao gênero Gymnotus, o qual compreende inúmeras espécies de natureza críptica que dificulta a identificação baseada na morfologia externa. Os objetivos deste trabalho foram identificar através de sequências parciais do gene COI, espécies de Gymnotus capturadas no Rio Jacaré-Guaçu, Ibitinga, SP, e desenvolver um diagnóstico molecular por meio de PCR-RFLP. Sequências parciais de COI foram comparadas com outras espécies depositadas no GenBank. As sequências foram analisadas no Programa NebCutter para determinar os sítios de restrição e definir as enzimas a serem testadas. A análise fenética pelo método de Neighbor-Joining mostrou que os espécimes pertencem a duas espécies identificadas preliminarmente aqui como G. cf. sylvius e G. cf. cuia, sendo que G. cf. sylvius representou 95,2% dos indivíduos amostrados. As enzimas NlaIII e SacI geraram fragmentos que permitiram discriminar as espécies por meio de PCR-RFLP. Esta análise pode ser usada na identificação precisa destas espécies, fundamental na proposição de monitoramento da pesca de Gymnotus na região e para medidas adequadas de conservação.

ABSTRACT The capture of live bait for sport fishing is an important activity for fishing communities. The main species used for this purpose are members of the genus Gymnotus, which comprises numerous species of cryptic nature that are difficult to identify based on external morphology. The aims of this work were to identify through partial sequences of the COI gene Gymnotus species fished in the Jacaré-Guaçu River, SP, and to develop a molecular diagnostic approach using PCR-RFLP to identify these species. Partial COI sequences were compared to those of other species deposited in GenBank. The sequences were assessed in the NEBCutter program to determine restriction sites in the sequence and the enzymes to be tested. Phenetic analysis performed by Neighbor-Joining method showed that the specimens sampled belong to two species preliminary identified here as G. cf. sylvius and G. cf. cuia, with G. cf. sylvius accounting for 95.2% of the individuals sampled. The enzymes NlaIII and SacI generated fragments that allowed distinguishing the Gymnotus species using PCR-RFLP. This analysis can be used to accurately identify these species, which is fundamental for monitoring Gymnotus fishing and assessing the conservation of this genetic resource.

O estresse é um dos maiores obstáculos na criação de rãs e pode ser causado por fatores como sistemas de criação inapropriados; manejos inadequados bem como outras situações. O objetivo do presente estudo foi avaliar o hemograma, eritrograma e o leucograma da rã-touro (L. catesbeianus) quando expostas ao estresse de diferentes manejos: adensamento e manipulação desenvolvidos no laboratório e repetidos no campo para as devidas comparações em um período experimental de 30 dias. O experimento de densidade foi conduzido com quatro tratamentos: 70 animais m-2 (D70); 100 animais m-2 (D100), Controle; 150 animais m-2 (D150) e 200 animais m-2 (D200) com respectivos 10, 14, 21 e 28 animais/caixa no laboratório. Cada tratamento foi realizado com três réplicas simultâneas. O experimento de triagem foi conduzido com três tratamentos: Tratamento Sem Triagem (ST); Tratamento com Triagem Parcial (TP) a cada 15 dias e Tratamento com Triagem Total (TT) a cada 15 dias. Cada tratamento foi realizado com quatro réplicas simultâneas. A metodologia das análises de sangue seguiu as recomendações internacionais. No presente estudo pode-se observar que os animais experimentados em campo não refletiram a mesma resposta de estresse observada no laboratório nos dois experimentos, o que conferiu a plasticidade destes animais.

Stress is one of the major obstacles in frog culture and can be caused by factors such as inappropriate farming systems; inadequate management among other situations. The objective of the present study was to assess the hemogram, erythrogram and leukogram of bullfrogs (L. catesbeianus) when exposed to stress caused by different types of management: density and handling (manipulation), developed in the laboratory and repeated in the field for the appropriate comparisons in a experimental period of 30 days. The density experiment was conducted with four treatments: 70 animals m-2 (D70); 100 animals m-2 (D100), Control; 150 animals m-2 (D150) and 200 animals m-2 (D200), with 10, 14, 21 and 28 animals/box in the laboratory, respectively. Each treatment was performed with three simultaneous replicates. The handling experiment was conducted with three treatments: Treatment Without Handling (WH); Treatment with Partial Handling (PH) every 15 days and Treatment with Total Handling (TH) every 15 days. Each treatment was performed with four simultaneous replications. The methodology of the blood analysis followed international recommendations. In the present study we could observe that the animals of the field experiment did not reflect the same stress response observed in the laboratory in both experiment, which demonstrated the plasticity of these animals.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a adição de Bacillus subtilis, como probiótico, na ração de juvenis de robalo-flecha (Centropomus undecimalis), em regimes de alimentação alternado e contínuo. Foram estocados 660 peixes com comprimento médio de 5,90±0,88 cm e peso médio de 1,92±0,28 g, em 12 tanques-rede de 1,0 m3, com 55 peixes cada um. Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado, com três tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos consistiram de ração adicionada de probiótico, fornecida em regime alternado de 7 dias e em regime contínuo; além de controle sem probiótico na ração. Avaliaram-se: desempenho zootécnico, composição corporal, resposta imune e parâmetros hematológicos. Não houve diferença significativa nos índices zootécnicos e na composição corporal dos peixes tratados com probiótico, em comparação ao controle. Os peixes do regime alternado apresentaram incremento na explosão respiratória e menor contagem total de eritrócitos do que os do regime contínuo e do controle. Os peixes do regime contínuo não diferiram dos do controle. A adição de Bacillus subtilis não promove o crescimento de juvenis de rebalo-peva; no entanto, tem ação imunoestimulante quando fornecido em regime alternado.

The objective of this work was to evaluate the addition of Bacillus subtilis probiotic to the feed of common snook (Centropomus undecimalis) fingerlings, in alternate and continuous regimens. Six hundred and sixty fish, with average length of 5.90±0.88 cm and weight of 1.92±0.28 g, were stocked in 12 cages of 1.0 m3, with 55 fish each. The experimental design was completely randomized, with three treatments and four replicates. The treatments consisted of diet with the addition of probiotic, provided in alternate regimen for 7 days and in continuous regimen; besides a control without probiotic in the feed. Zootechnical performance, body composition, immune response, and blood parameters were evaluated. No significant differences were observed in zootechnical performance indexes and in body composition of fish treated with probiotic, when compared to the control. Fish from the alternate regimen showed an increment in respiratory burst and a lower total erythrocyte count than fish from the continuous regimen and the control. Fish from the continuous regimen did not differ from those of the control. The addition of Bacillus subtilis does not increase growth rates of common snook fingerlings; however, it has an immunostimulant action when supplied in alternate regimen.

Objetivou-se avaliar o desempenho zootécnico e a caracterização histomorfométrica do intestino médio de juvenis de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, variedade GIFT, alimentadas com probiótico, incluído antes e após o processamento de ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e cinco repetições composto pelos seguintes tratamentos: ração peletizada sem probiótico; ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento; ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento. Duzentos e cinqüenta juvenis foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Foram constatadas diferenças para os valores médios do peso total no final do experimento. Após 42 dias de alimentação foram verificadas diferenças significativas na conversão alimentar para tratamentos com as dietas extrusadas comparadas com as peletizadas. Os peixes alimentados com as dietas suplementados com o probiótico apresentaram aumento na espessura da camada epitelial do intestino. O melhor desempenho zootécnico foi observado, na dieta extrusada suplementada de probiótico incorporado após o processamento de ração, e a inclusão de 4.0 x 10(8) CFU g-1 of Bacillus subtilis e 4.0 x 10(8) CFU g-1 of Bacillus toyoi, em dietas peletizadas e extrusadas, promoveu o aumento na espessura da camada epitelial do intestino médio.

The objective of this study was to assess the growth performance and the histomorphometric characterization of the middle intestine of GIFT strain Nile tilapia, Oreochromis niloticus juveniles fed probiotics, added either before or after the feed processing. The experimental design was completely randomized, with five treatments and five replications: pelleted feed without any probiotic; pelleted feed with inclusion of probiotic before the processing; pelleted feed with inclusion of probiotic after the processing; extruded feed without any probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after the processing. Two hundred and fifty juveniles were distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. Differences in the mean values of total weight were found at the end of the experiment. After 42 days of feed intake, significant differences in feed conversion were verified for treatments with extruded diets when compared to the pelleted ones. The fishes fed diets supplemented with probiotic presented increase in the thickness of the epithelium of the intestine. The best zootechnical performance was observed in the extruded diet supplemented with probiotic added after the feed processing. The inclusion of 4.0 x 10(8) CFU g-1 of Bacillus subtilis and 4.0 x 10(8) CFU g-1 of Bacillus toyoi in both the pelleted and the extruded diets promoted an increase in the thickness of the epithelial layer of the middle intestine.

Objetivou-se analisar a viabilidade econômica do uso do probiótico Bacillus subtilis na alimentação de matrinxã Brycon amazonicus, em tanques-rede. O experimento foi conduzido no Polo Regional do Vale do Ribeira, no município de Pariquera-Açu, São Paulo, Brasil, entre fevereiro e julho de 2009. Foram avaliados 960 peixes juvenis, divididos em 12 tanques-rede de 2,7 m³ (1,5 x 1,5 x 1,2 m) em uma área total de 600 m², com profundidade média de 1,50 m. Os testes foram conduzidos com um tratamento testemunha (T1), duas doses de probiótico (T2 = 5 g e T3 = 10 g kg-1 de ração) e quatro repetições. Os resultados mostraram que o T2 proporcionou melhor desempenho zootécnico e econômico da matrinxã na fase de engorda no sistema intensivo de criação.

This study aimed to analyze the economic feasibility of supplement probiotics Bacillus subtilis to "matrinxã" Brycon amazonicus, raised in cages. The experiment was conducted at the Polo Regional Vale do Ribeira, in Pariquera-açu municipality, São Paulo State, Brazil, from February to July 2009. A total of 960 juvenile matrinxã were stocked in twelve 2.7 m³-net cages (1.5 x 1.5 x 1.2 m), in ponds with a total area of 600 m² and an average depth of 1.50 m. The tests were conducted with a control treatment (T1) and two probiotic doses (T2 = 5 g and T3 = 10 g kg-1 of diet) with four replicates. Results showed that T2 produced better economic performance for matrinxã at the juvenile stage in intensive rearing system.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho zootécnico de larvas de matrinxã, Brycon amazonicus, alimentadas com probiótico composto de Bacillus subtilis bioencapsulado em Artemia salina, em diferentes doses. Foram utilizados seis tratamentos, sendo: T0 = controle (sem adição de probiótico), T2,5 = 2,5 g de probiótico, T5,0 = 5,0 g de probiótico, T7,5 = 7,5 g de probiótico, T10,0 = 10,0 g de probiótico e T12,5 = 12,5 g de probiótico por litro de água quando alimentados com A. salina (4h antes da alimentação das larvas) e por quilo de ração (comercial pó 40% proteína bruta) na fase seguinte. Os resultados mostraram heterogeneidade em relação ao crescimento, indicando que na fase larval o probiótico não influenciou no canibalismo.

The aim of this study was to evaluate the growth performance of Brycon amazonicus larvae fed with probiotic consisting of Bacillus subtilis, bioencapsulated in Artemia salina at different doses. Six treatments were used: T0 = control (without probiotic), T2.5 = 2.5 g, T5.0 = 5.0 g, T7.5 = 7.5 g, T10.0 = 10.0 g and T12;5 = 12.5 g per liter of probiotic when fed with A. saline (4h before feeding the larvae); and per kilogram of feed (commercial powder with 40% crude protein) in the next phase. The results showed heterogeneity with regard to growth, indicating that larvae fed with probiotic had no influence on cannibalism.

Na aquicultura são utilizados análises da ativação e incremento da migração de macrófagos, com intuito de verificar a capacidade imunológica inespecífica dos peixes frente a um desafio. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi determinar o tempo de migração de monócitos/macrófagos para a cavidade peritoneal em matrinxã, Brycon amazonicus, por meio da técnica de inoculação de leveduras Saccharomyces cerevisiae, e verificar as possíveis alterações dos parâmetros hematológicos após o estímulo. Foram utilizados 30 matrinxãs com peso médio de 101,55 ± 24,50 g e comprimento médio de 19,75 ± 1,72 cm. Os tempos de inoculação utilizados foram 2, 4, 8 e 12 horas, sendo utilizados 6 animais por tempo. Após os períodos de incubação (2, 4, 8 e 12 horas), os exemplares foram anestesiados e alíquotas de sangue foram coletadas por punção do vaso caudal, para a análise: número total de células, contagem diferencial e total dos leucócitos e contagem total de trombócitos, hematócrito, taxa de hemoglobina e índices hematimétricos (VCM, HCM e CHCM). Os resultados mostram que a capacidade fagocítica do macrófago não apresentou diferenças significativas entre os tempos experimentais. Com relação ao índice fagocítico, o tempo de 2 horas representa o tempo em que os macrófagos fagocitaram maior número de leveduras com diferenças significativas em relação aos outros tempos experimentais, indicando que este tempo (2 horas) de incubação foi suficiente para a migração e ativação máxima dos macrófagos da cavidade peritoneal, da espécie estudada. Os valores do número de eritrócitos apresentaram diferenças entre os tempos de incubação. Entretanto, os valores dos outros parâmetros hematológicos não apresentaram diferenças significativas.

In aquaculture, analysis of activation and increased macrophages migration are used in order to verify the ability of the nonspecific immune fish exposed to a challenge. This study aimed to determine the time of macrophages migration in matrinxã, Brycon amazonicus, through the technique of yeast Saccharomyces cerevisiae inoculation, verifying possible changes in hematological parameters. Thirty animals with average weight of 101.55 ± 24.50 g and average length of 19.75 ± 1.72 cm were employed. The experimental inoculation periods were 2, 4, 8 and 12 hours. Thereafter, animals were anesthetized and blood was withdrawn through a caudal puncture for the determination of total erythrocytes number, differential and total leukocyte counts and total thrombocytes count, hematocrit, hemoglobin concentration and calculation of the erythrocytes index. The results for the phagocytic capacity were not significantly different between experimental periods. In the phagocytic index, the period of 2 hours presented the highest rate of phagocytized cells, indicating that 2 hours of incubation was sufficient for the macrophages migration in B. amazonicus. The number of erythrocyte was the only parameter that presented significant difference among periods.

A toxicidade do mercúrio foi avaliada em tilápia, Oreochromis niloticus (Linnaues, 1758) através da análise dos parâmetros hematológicos após exposição a diferentes concentrações sub-letais, durante um período de 14 dias. O bioensaio foi conduzido no laboratório de toxicologia do Instituto de Pesca, SP. Foram utilizados alevinos (12.44 ± 0.84 cm, e 27.13 ± 4.67 g) e aquários com capacidade para 50 litros e preenchidos com água declorada e mais a quantidade de solução de mercúrio (HgCl2) correspondendo as seguintes concentrações: 0,02; 0,002; 0.0002 mg.L-1 Hg. Foram utilizadas 3 repetições de cada concentração e grupo controle. Amostras de sangue foram coletadas de seis animais de cada concentração nos tempos 0, 3, 7, 10 e 14 dias de exposição. Foram avaliados: a contagem de eritrócitos (RBC), concentração de hemoglobina (Hb), hematócrito (Ht), volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), trombócitos totais (Tr), contagem diferencial e total de leucócitos (Lc). Os resultados demonstram que as concentrações de Hg testadas, não alteraram significativamente os parâmetros hematológicos, permitindo concluir que a quantidade de Hg na água não foram suficientes para afetar o quadro hematológico de Oreochromis niloticus.

Mercury toxicity in tilapia, Oreochromis niloticus, (Linnaeus, 1758) was investigated by the hematological parameters after long-term (14 days) exposure to various Hg concentrations (0.02, 0.002, 0.0002mg/L Hg). Test groups were set up with three replicates for each concentration, plus the control group. Blood samples were collected from six individuals for each concentration at 0, 3, 7, 10 and 14 days of exposure. The hematological parameters analyzed were: total red blood cell count (RBC), hemoglobin concentration (Hb), hematocrit (Ht), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), total white blood cell count (WBC) and differential leukocyte counts and total thrombocyte count (Tr). There were no significant differences among the mean hematological values at the different Hg concentrations indicating that Hg at the concentrations studied was not toxic to tilapia.

Cem exemplares adultos de tilápia, Oreochromis niloticus, foram inoculadas intraperitonealmente com 10(8) UFC de Mycobacterium marinum e outras 100 foram mantidas sem inoculação. Inicialmente, o sangue de 6 exemplares não inoculados foi colhido e considerado como "tempo zero". Do grupo dos inoculados foi retirado sangue de 6 animais por colheita, 1, 3, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 e 84 dias após inoculação. Os parâmetros hematológicos: hematócrito (Hct), taxa de hemoglobina (Hgb), contagem de eritrócitos (RBC), foram determinados e os índices hematológicos (VCM, HCM e CHCM), calculados. Foram determinados também o número de trombócitos e o número total e diferencial de leucócitos. Não ocorreram alterações nos valores de Hct, Hgb, HCM e CHCM. Entretanto houve diminuição dos valores de RBC e VCM. Os valores médios de RBC e Hct dos animais no "tempo zero" foram maiores e os de VCM e HCM, menores que os dos animais inoculados. Ocorreu neutrofilia e, após 3 dias de inoculação, ocorreram linfocitose e neutropenia nos animais. No 49º. dia após inoculação bacteriana, ocorreu monocitose.

A hundred adult of tilapia, Oreochromis niloticus, were inoculated intraperitoneally with 10(8) c.f.u. of Mycobacterium marinum. Other 100 speciemns were maintained without inoculation. Blood samples of six inoculated animals were collected at 01, 03, 07, 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 and 84 days after inoculation. Initially, six specimens were taken from the non inoculated group ("time zero"). The haematological parameters determined were: haematocrit (Hct), haemoglobin concentration (Hgb), total erythrocytes count (RBC), hematological indexes (MCV, MCH and MCHC), thrombocyte count (Tr), leukocyte count (WBC) and leukocyte differential count. There were no changes in Hct, Hgb, MCH and MCHC. However, the mean values for RBC and MCV decreased. The mean values for RBC and Hct of specimens from the "time zero" group were higher and the MCV and MCH lower than in inoculated animals. Occurred neutrophilia, and, at 72 h there was lymphocytosis and neutropenia. By the 49th day after bacterial inoculation, there was monocytosis.

The present work describes mean values of hepatosomatic relation (HSR), splenosomatic relation (SSR) and viscerosomatic relation (VSR) in mullet, Mugil platanus Günther, 1880 (Mugilidae) from Cananéia lagoon-stuarine region, São Paulo, Brazil. Parasites of the following taxonomic categories were found in the respective organs - gills: Monogenean helminths, Trichodinidae, Copepoda and Hirudinea; blood: Haemogregarina mugili Carini, 1932 (Apicomplexa) e Trypanosoma froesi Lima, 1976 (Sarcomastigophora) and liver: cysts of Phagicola sp. The average values of red blood cells count (RBC), hemoglobin rate (Hb), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) of male, female and indifferentiaed, were similar. However, the hematocrit (Hct) in male was higher than female and indifferentiaed. It was not observed significant differences in HSR, SSR and VSR between male and female. Nervertheless, the VSR in indifferentiaed mullet was higher than for male and female.

Neste trabalho foram avaliadas as alterações histopatológicas no tecido renal de curimbatá Prochilodus lineatus, através de bioensaio agudo provocado pela contaminação da água por 0,2mil/litro de solução de Dipterex 500 (Trichlorfon) diluído em solução aquosa. Alterações comportamentais dos peixes pertencentes ao grupo contaminado, foram observadas a partir de 24 horas após o início da exposição. O tecido renal coletado após 24 horas de exposição apresentou aumento do espaço intercapsular com glomérulos atróficos, hipertrofia das células dos túbulos renais, extravasamento sangüíneo a partir de capilares e áreas de necrose. Após 48 horas o tecido renal apresentou dilatação glomerular, perda do conteúdo celular do epitélio capsular parietal e da membrana basal, inchaço, vacuolização e granulações finas e grossas no citoplasma das células tubulares e focos de necrose acentuada.

Studies were carried out to analyse the kidney histopathological alterations of "curimbatá", Prochilodus lineatus, were analyzed. An acute bioassay was made by the water contamination with 0.2muml/l of Dipterex 500 (Trichlorfon). The kidney tissue collected after 24 hours of exposure showed an enlargement of intercapsular space with glomerular atrophy, hypertrophy of the kidney tube cells, with small granules on its cytoplasm and little nuclear alteration. Blood overflowing from capillaries with pyknotic nuclei and vacuoles in the cytoplasm it was also noticed. After 48 hours, the kidney tissue showed glomerular expansion, impossibility to visualize the intercapsular space as well as cytoplasm limit of many cells. The parietal capsular epithelium and the basal membrane presented loss of cell content, the tubular cells appeared swollen vacuolated and with thin and thick cytoplasmatic granulations. Some of the cell nuclei kept relatively regular form with a condensed chromatin on its central region, while others showed themselves relatively small and pyknotics advancing to a cariolisis and necrosis focus.

This Study was carried out at the Salmoniculture Experimental Station "Dr. Ascanio de Faria", in Campos do Jordão, São Paulo. Brazil. The aim was to compared the hematology of triploid and diploid rainbow trout, Oncorhynchus mykiss Walbaum, 1792, by sex and gonadal maturation stages. Blood was obtained from 144 individuais for determinati-ons of: haemoglobin rate (Hb), haematocrit (Ht), erythrocyte count (Er), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular haemoglobin (MHC), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), and differential leucocyte counts. The ploid was determinated by measuring the erythrocyte major axis, in fresh and stainncd smears. Triploid rainbow trout had a large eiythrocyte diameter, mean erythrocyte volume and mean haemoglobin concentration, but lower erythrocyte count than diploid. Lymphocytes was the most frequent cell in peripherical blood.There was no dilTerence between males and females for ali parameters here analysed. The haematological analyses showcd signiffleant increase with the dcvelopment of gonadal maturation stages.

This study involved 344 Mullets, Mugil platanus Günther, 1880, captured in the estuarine region of Cananeia, São Paulo, Brazil (25º00'S, 47º55'W). The following data were recorded for each fish: total weight, total length, haemoglobin ratio (Hb), haematocrit (Ht), erythrocyte count (Er), differential leucocyte count (lymphocytes, monocytes, neutrophils, basophils and "other cells") and haematometric indices; MCV, MCH, and MCHC. The sex and stage of gonadal maturity (undifferentiated, juvenile, resting, maturing, mature, and spent) were determined by macroscopical inspection of the gonads. Parasitological inspections revealed the following infestations: Gills - Trichodinidae, Monogenea, Copepoda, and Hirudinea. Liver: cysts of Digenea. Intestine: Nematoda, Digenea and Acanthocephala. Blood: Trypanosoma sp. and Haemogregarina sp. Analysis of variance was done to evaluate how far blood and gill parasitism had any effect on total length, total weight, the biological condition factor or the measured blood parameters. Significant differences were found for the haematocrit (infested versus noninfested by Trichodinidae) and for MCHC (infested versus noninfested by Trichodinidae and Copepoda). No differences were found with regard to leucocytes.