ABSTRACT Background: Clostridioides difficile infection (CDI) is a potentially severe disease that can present with refractoriness, recurrence, and evolution to death. In Brazil, the epidemiology of CDI seems to differ from that of the United States and most European countries, with only one ribotype (RT) 027-related case and a high prevalence of RT106. Objective: The aim of this study was to evaluate the outcomes of CDI and its possible association with ribotypes at a university hospital in Brazil. Methods: A total of 65 patients with CDI were included and stool samples were submitted to A/B toxin detection and toxigenic culture, and toxigenic isolates (n=44) were also PCR ribotyped. Results: Patients’ median age was 59 (20-87) years and there were 16 (24.6%) deaths. The median Charlson comorbidity index (CCI) was 4 (0-15) and 16.9% of the patients had CCI ≥8. The ATLAS score and non-improvement of diarrhea were related to higher mortality. A longer length of hospitalization was related to the enteral nutrition and use of multiple antibiotics. The period between CDI diagnosis and hospital discharge was longer in those who received new antibiotics after diagnosis, multiple antibiotics, and required intensive care treatment. Recurrence was associated with CCI >7. Twenty ribotypes were identified and RT106 was the most frequently detected strain (43.2%). No relationship was observed between the ribotypes and outcomes. CDI was present in patients with more comorbidities. Conclusion: Risk factors for higher mortality, longer hospital stay and recurrence were identified. A diversity of ribotypes was observed and C. difficile strains were not related to the outcomes.

RESUMO Contexto: A infecção pelo Clostridioides difficile (ICD) é uma doença potencialmente grave que pode se apresentar com refratariedade, recidiva e evoluir para óbito. No Brasil, a epidemiologia da ICD parece diferir da dos Estados Unidos e da maioria dos países europeus, com apenas um caso relacionado ao ribotipo (RT) 027 e alta prevalência do RT106. Objetivo: Avaliar os desfechos da ICD e sua possível associação com ribotipos em um hospital universitário do Brasil. Métodos: Um total de 65 pacientes com ICD foram incluídos e amostras de fezes foram submetidas à detecção de toxina A/B e cultura toxigênica e as cepas toxigênicas isoladas (n=44) também foram ribotipadas por PCR. Resultados: A idade mediana dos pacientes foi de 59 (20-87) anos e houve 16 (24,6%) óbitos. A mediana do índice de comorbidade de Charlson (ICC) foi de 4 (0-15) e 16,9% dos pacientes apresentaram ICC ≥8. O escore ATLAS e a não melhora da diarreia foram relacionados a maior mortalidade. Maior tempo de internação esteve relacionado à nutrição enteral e ao uso de múltiplos antibióticos. O período entre o diagnóstico de ICD e a alta hospitalar foi maior naqueles que receberam novos antibióticos após o diagnóstico, múltiplos antibióticos e necessitaram de tratamento intensivo. A recorrência foi associada com ICC >7. Vinte ribotipos foram identificados e o RT106 foi a cepa mais frequentemente detectada (43,2%). Não foi observada relação entre os ribotipos e os desfechos. ICD esteve presente em pacientes com mais comorbidades. Conclusão: Foram identificados fatores de risco para maior mortalidade, maior tempo de internação e recorrência. Uma diversidade de ribotipos foi observada e cepas de C. difficile não foram relacionadas aos desfechos.

RESUMO: Pombos urbanos são conhecidos pela sua capacidade de carrear e disseminar diversos agentes zoonóticos. Estudos tem sugerido que pombos são também relevantes na disseminação de estirpes resistentes a múltiplas drogas. No presente estudo, pombos no ambiente de um hospital veterinário foram amostrados em três diferentes períodos e testados para a presença de Escherichia coli patogênica, Salmonella spp., Staphylococcus spp. e Clostridioides (Clostridium) difficile. Isolados de E. coli de 19 pombos (40.4%) foram positivos para o gene codificador da toxina EAST1. O gene codificador de intimina (eae) do patotipo E. coli enteropatogênica foi encontrada em um isolado (2.1%). Salmonella spp. foi encontrada em nove pombos (19.1%), sendo todos isolados do primeiro período de captura (P < 000.1). S. Typhimurium foi isolado de seis animais e S. Heidelberg de três. A tipagem molecular de isolados de Salmonella spp. por ERIC-PCR demonstrou que oito estirpes possuíam alta similaridade genética entre si, sugerindo a ocorrência de um surto de salmonelose nos animais carreadores. Vinte Staphylococcus (42.5%) foram isolados de 18 animais (38.3%). Oito diferentes espécies foram detectadas, sendo S. xylosus a mais frequente. Duas estirpes de C. difficile não-toxigênica (4.3%) foram isoladas. Uma estirpe de S. Typhimurium, uma de S. aureus e um isolado de C. difficile foram classificados como resistentes a múltiplas drogas antimicrobianas. O presente estudo sugere que pombos capturados no ambiente do hospital veterinário podem atuar como reservatórios e disseminadores de bactérias patogênicas e envolvidas em infecção hospitalar, incluindo E. coli diarreiogênica e Staphylococcus sp., C. difficile e Salmonella spp multirresistente.

ABSTRACT: Pigeons are known for their capacity to harbor and spread several zoonotic agents. Studies have suggested that pigeons are also relevant disseminators of multidrug-resistant strains. In this study, pigeons surrounding a veterinary hospital were sampled and tested for the presence of pathogenic Escherichia coli, Salmonella spp., Staphylococcus spp., and Clostridioides (Clostridium) difficile. E. coli isolates from 19 (40.4%) pigeons tested positive for the E. coli heat-stable enterotoxin 1 (EAST1)-encoding gene. The intimin-encoding gene (eae) of enteropathogenicE. coli (EPEC) was found in one isolate (2.1%). Salmonella spp. were found in nine (19.1%) pigeons, all from the first capture event (P < 000.1). S. Typhimurium and S. Heidelberg were isolated from six and three pigeons, respectively. Enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC-PCR) of the Salmonella spp. isolates suggested that eight of the nine strains had a high genetic similarity, supporting the hypothesis of an outbreak of salmonellosis in these pigeons. Twenty (42.5%) staphylococcal isolates were recovered from 18 (38.3%) pigeons. Eight different species were detected, with S. xylosus being the most frequent. Two (4.3%) C. difficile strains were isolated. Three isolates, one each of S. Typhimurium, S. aureus, and C. difficile, were classified as multidrug-resistant strains. The present research suggested that pigeons residing in urban areas can act as reservoirs and disseminators of pathogenic bacteria, including nosocomial pathogens, such as diarrheagenicE. coli and multidrug-resistant Staphylococcus spp., C. difficile, and Salmonella spp.

ABSTRACT Objective: The spinous process separation technique is a less invasive surgical technique for treating lumbar canal stenosis. The objective is to evaluate this technique’s results in treating lumbar canal stenosis. Method: Thirty patients with lumbar spinal canal stenosis underwent surgical treatment using the spinous process separation technique and were evaluated in the 3-year postoperative period using the Denis Pain and Work Scale and by the SF-36 questionnaire and radiographic evaluation of the operated segment. Results: In the evaluation of the Denis pain scale, 21 (70%) patients had no pain (P1), and nine (30%) patients reported minimal low back pain, not needing medication (P2). Denis’ work schedule showed that nine (30%) patients had restrictions on returning to their previous work activity (W2), and 21 (70%) patients were classified as W1. The SF-36 questionnaire showed results of 81.25 for physical aspects (PA), 81.9 for functional capacity (FC), 81.3 for emotional aspects (EA), 64.3 for vitality (V), 65.9 for mental health (MH), 81.98 for social aspects (SA), 75.6 for pain (P) and 68.1 for general health status (GHS). In addition, there were no radiographic signs of instability of the operated vertebral segment in the radiographic evaluation. Conclusion: The decompression of the lumbar spinal canal using the spinous process separation technique showed good results in the evaluated patients three years after the operation. Level of Evidence II, Retrospective Comparative Study.

Resumen: Objetivo: La técnica de separación de la apófisis espinosa es una técnica quirúrgica menos invasiva para el tratamiento de la estenosis del canal lumbar. El objetivo es evaluar los resultados de esta técnica en el tratamiento de la estenosis del canal lumbar. Método: Treinta pacientes con estenosis del conducto raquídeo lumbar fueron intervenidos quirúrgicamente mediante la técnica de separación de la apófisis espinosa, y fueron evaluados en el postoperatorio de tres años mediante la Escala de Dolor y Trabajo de Denis, mediante el cuestionario SF-36 y evaluación radiográfica del segmento operado. Resultados: En la evaluación de la escala de dolor de Denis, 21 (70%) pacientes no presentaron dolor (P1) y nueve (30%) pacientes refirieron dolor lumbar mínimo, sin necesidad de medicación (P2). La escala de trabajo de Denis mostró que nueve (30%) pacientes tenían restricciones para regresar a su actividad laboral anterior (W2) y 21 (70%) pacientes fueron clasificados como W1. El cuestionario SF-36 arrojó resultados 81,25 para aspectos físicos (AF), 81,9 para capacidad funcional (CF), 81,3 para aspectos emocionales (AE), 64,3 para vitalidad (V), 65,9 para salud mental (SM), 81,98 para aspectos sociales (AS), 75,6 para dolor (D) y 68,1 para estado general de salud (EGS). No hubo signos radiográficos de inestabilidad del segmento vertebral intervenido en la evaluación radiográfica. Conclusión: La descompresión del canal espinal lumbar mediante la técnica de separación de apófisis espinosa mostró buenos resultados en la evaluación de un período de 3 años después de la operación de los pacientes evaluados.

Resumo: Objetivo: A técnica de separação do processo espinhoso é uma técnica cirúrgica menos invasiva para o tratamento da estenose do canal lombar. O objetivo é avaliar os resultados dessa técnica no tratamento da estenose do canal lombar. Método: Trinta pacientes portadores de estenose do canal vertebral lombar foram submetidos ao tratamento cirúrgico por meio da técnica da separação do processo espinhoso, tendo sido avaliados no período de três anos de pós-operatório, por meio da escala de dor e de trabalho de Denis, pelo questionário SF-36 e avaliação radiográfica do segmento operado. Resultados: Na avaliação da escala de dor de Denis, 21 (70%) pacientes não apresentavam dor (P1) e nove (30%) pacientes relataram dor mínima lombar, não necessitando medicação (P2). A escala de trabalho de Denis evidenciou que nove (30%) pacientes apresentavam restrições ao retorno à atividade prévia de trabalho (W2) e 21 (70%) pacientes foram classificados como W1. O questionário SF-36 apresentou resultados 81,25 para aspectos físicos (AF), 81,9 para capacidade funcional (CF), 81,3 para aspectos emocionais (AE), 64,3 para vitalidade(V), 65,9 para saúde mental (SM), 81,98 para aspectos sociais (AS), 75,6 para dor (D) e 68,1 para estado geral de saúde (EGS). Não foram observados sinais radiográficos de instabilidade do segmento vertebral operado na avaliação radiográfica. Conclusão: A descompressão do canal vertebral lombar por meio da técnica de separação do processo espinhoso apresentou bons resultados na avaliação num período de três anos de pós-operatório dos pacientes avaliados. Nível de Evidência II, Estudo Retrospectivo Comparativo.

RESUMO: Nas últimas décadas, houve um aumento global na adoção de répteis como animais de companhia, principalmente tartarugas e jabutis. Considerando a popularidade dos répteis como animais de estimação no Brasil e a notável falta de dados sobre estafilococos potencialmente patogênicos nesses animais, o objetivo deste estudo foi isolar e avaliar a susceptibilidade antimicrobiana de espécies estafilocócicas de jabutis (Chelonoidis carbonaria) saudáveis no Brasil. Durante um período de 12 meses (fevereiro de 2019 a fevereiro de 2020), suabes cloacais de 66 jabutis saudáveis foram coletados no Centro de Triagem de Animais Silvestres em Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil. Os suabes foram plaqueados em ágar manitol salgado para isolamento de estafilococos e a identificação das espécies foi realizada usando MALDI-TOF MS. A susceptibilidade aos antimicrobianos foi investigada pelo método de difusão em disco, e a presença do gene mecA foi investigada por PCR para detectar resistência à meticilina. Dos animais testados, 72,7% foram positivos para o isolamento estafilocócico. Todos os isolados eram estafilococos coagulase-negativos (CoNS), sendo Staphylococcus sciuri (81,3%) e S. xylosus (12,5%) as espécies mais frequentemente isoladas. A maioria dos isolados (56%) foi resistente a pelo menos um antimicrobiano. Alta frequência de resistência foi observada para penicilina (35,5%) e tetraciclina (29,1%). Todas as estirpes foram sensíveis à cefoxitina, cloranfenicol, ciprofloxacina, eritromicina e gentamicina. Todos os isolados foram negativos para o gene mecA. O presente trabalho sugere que jabutis saudáveis são colonizados principalmente por CoNS, especialmente S. sciuri. Metade dos isolados foram resistentes a pelo menos um antimicrobiano, levantando questões sobre o possível papel desses animais como reservatórios de genes de resistência aos antimicrobianos.

ABSTRACT: In the last few decades, there has been a global increase in the adoption of reptiles as companion animals, mainly turtles and tortoises. Considering the popularity of reptiles as pets in Brazil, and a notable lack of data about potentially pathogenic staphylococci in these animals, this study isolated and evaluate the antimicrobial susceptibility of staphylococcal species from healthy tortoises (Chelonoidis carbonaria) in Brazil. During a 12-month period (February 2019 to February 2020), cloacal swabs from 66 healthy tortoises were collected at the Wild Animals Screening Center in Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil. The swabs were plated onto mannitol salt agar for staphylococci isolation, and species identification was performed using MALDI-TOF MS. Antimicrobial susceptibility was investigated using the disk diffusion method, and the presence of the mecA gene was investigated by PCR to detect methicillin resistance. Of the tested animals, 72.7% were positive for staphylococcal isolation. All isolates were coagulase-negative staphylococci (CoNS), and Staphylococcus sciuri (81.3%), and S. xylosus (12.5%) were the most frequently isolated species. The majority of the isolates (56%) were resistant to at least one antimicrobial agent. A high frequency of resistance was observed for penicillin (35.5%) and tetracycline (29.1 %). All strains were susceptible to cefoxitin, chloramphenicol, ciprofloxacin, erythromycin, and gentamicin. All isolates were negative for the mecA gene. The present work suggests that healthy tortoises are mainly colonized by CoNS, especially S. sciuri. Half of the isolates were resistant to at least one antimicrobial, raising questions regarding the possible role of these animals as reservoirs of antimicrobial resistance genes.

RESUMO: Em cães, a terapia antimicrobiana para infecções por Clostridioides (Clostridium) difficile é baseada apenas no uso de metronidazol, limitando as opções de tratamento nos casos de recorrência. O transplante de microbiota fecal (FMT) tem sido utilizado com sucesso em seres humanos com infecções recorrentes por C. difficile, porém a utilidade desse método é ainda amplamente desconhecida em cães. O presente trabalho relata a utilização de FMT para o tratamento de um cão com diarreia crônica-recorrente por C. difficile. A infecção foi confirmada por detecção das toxinas A/B e isolamento de uma estirpe toxigênica do ribotipo 106, linhagem comumente associada a infecção em seres humanos. Após o transplante via colonoscopia, o animal se recuperou do quadro e C. difficile não mais foi encontrado em novas amostras fecais. O presente trabalho sugere que o FMT possa ser útil para o tratamento de quadros de C. difficile em cães, corroborando protocolo atual de tratamento em seres humanos.

ABSTRACT: In dogs, antimicrobial therapy for Clostridioides (Clostridium) difficile infection (CDI) is based solely on metronidazole, leaving limited treatment options in case of recurrent disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) has been successfully used in humans with recurrent CDI, whereas the usefulness of this approach is largely unknown in dogs. In the present study, a dog with a chronic-recurring diarrhea was treated with FMT via colonoscopy. CDI was confirmed by A/B toxin detection and isolation of toxigenic C. difficile from ribotype 106, a strain also commonly associated with nosocomial infection in humans. The dog recovered well after the procedure and C. difficile was no longer isolated from its stool sample. The present research suggested that FMT could be a useful tool to treat recurrent CDI in dogs, corroborating the actual protocol in humans.

RESUMO: Clostridioides (Clostridium) difficile é o principal agente envolvido em diarreias associadas ao uso de antimicrobianos em seres humanos e um enteropatógeno de grande relevância em quadros de diarreia em potros e equinos adultos. Em adição, estudos tem sugerido que animais são possíveis reservatórios de estirpes toxigênicas de C. difficile para humanos. Apesar da importância na saúde animal e humana, a epidemiologia da infecção por C. difficile (ICD) é ainda pouco conhecida. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo caracterizar seis casos de diarreia por C. difficile ocorridos em Minas Gerais, Brasil. Com exceção de um animal, todos os equinos incluídos no presente estudo desenvolveram ICD após antibioticoterapia, três dos quais durante a hospitalização. Coinfecção por Salmonella Heidelberg e S. Infantis foi detectada em três casos, tornando o tratamento antimicrobiano desafiador. Todos os animais recuperaram após administração de metronidazol. Os isolados obtidos no presente estudo foram sensíveis a metronidazol e vancomicina, porém três estirpes foram resistentes a moxifloxacina e duas a clindamicina. Os isolados foram classificados como ribotipos 126 (n=4), 078 (n=1) e 014/020 (n=1), todos previamente relatados em seres humanos com ICD no Brasil e em outros países.

ABSTRACT: Clostridioides (Clostridium) difficile is the main causative agent of antimicrobial-related diarrhea in humans and a major pathogen-associated enteric disorder in foals and adult horses. Moreover, studies have suggested that animals are a possible reservoir of toxigenic C. difficile strains for humans. Despite this known importance, the epidemiology of C. difficile infection (CDI) in equine is still largely unknown. Therefore, this study described six cases of equine CDI occurring in Minas Gerais, Brazil, including the characterization of the isolates. All but one equine included in this research developed CDI after antimicrobial therapy, three of which occurred during hospitalization. Coinfection with Salmonella Heidelberg and S. Infantis was detected in three cases, making the antimicrobial treatment challenging. All animals recovered after metronidazole administration. All C. difficile isolates were susceptible to metronidazole and vancomycin, while three were resistant to moxifloxacin and two were resistant to clindamycin. The isolates were classified as RT126 (n = 4), RT078 (n = 1), and RT014/020 (n = 1), all previously reported infecting humans and animals worldwide.

RESUMO CONTEXTO: O Transplante de microbiota fecal (TMF) é uma importante opção terapêutica para a infecção recorrente ou refratária pelo Clostridioides difficile, sendo método seguro e eficaz. Resultados iniciais sugerem que o TMF também desempenha papel relevante em outras afecções cuja patogênese envolve a alteração da microbiota intestinal. No entanto, seu uso sistematizado é pouco difundido, especialmente no Brasil. Na última década, surgiram múltiplos relatos e séries de casos utilizando diferentes protocolos para o TMF, sem padronização de métodos e com taxas de resposta variáveis. No Brasil, poucos casos isolados de TMF foram relatados sem a implantação de um Centro de Transplante de Microbiota Fecal (CTMF). OBJETIVO: O principal objetivo deste estudo foi descrever o processo de implantação de um CTMF com banco de fezes, em hospital universitário brasileiro, para tratamento de infecção recorrente e refratária pelo C. difficile. MÉTODOS: O CTMF foi estruturado dentro dos critérios exigidos e aprovados por organismos internacionais como o Food and Drug Administration, Grupo Europeu de Transplante de Microbiota Fecal e em consonância com os aspectos epidemiológicos e regulatórios nacionais. RESULTADOS: Foi estabelecida toda uma plataforma envolvida na estruturação de um centro de transplante com fezes congeladas. Determinou-se os critérios para seleção de doadores, processamento e armazenamento de amostras, manejo dos receptores antes e após o procedimento, uniformização de vias de administração do substrato fecal e seguimento a curto e longo prazo dos pacientes transplantados. A seleção dos doadores foi conduzida em três etapas: pré-triagem, avaliação clínica e exames laboratoriais. Boa parte dos candidatos foram excluídos na primeira (75,4%) e segunda etapa (72,7%). Os principais critérios clínicos de exclusão foram: diarreia aguda recente, excesso de peso (IMC ≥25 kg/m2) e distúrbios gastrointestinais crônicos. Quatro dos 134 candidatos foram selecionados após a triagem completa, com taxa de detecção de doadores de 3%. CONCLUSÃO: A implantação de um CTMF, inédito no nosso meio, possibilita o acesso de pacientes com infecção recorrente e refratária pelo C. difficile a tratamento inovador, seguro, com elevada taxa de sucesso e pouco disponível no Brasil. A seleção apropriada de doadores qualificados é vital no processo de implantação de um CTMF. A avaliação clínica rigorosa dos doadores permitiu o uso racional de recursos para realização de exames laboratoriais. Um CTMF possibilita tratamento sob demanda, em maior escala, menos personalizados, com mais segurança e rastreabilidade. Este protocolo fornece subsídios para a realização de TMF em países emergentes.

ABSTRACT BACKGROUND: Fecal microbiota transplantation (FMT) is an important therapeutic option for recurrent or refractory Clostridioides difficile infection, being a safe and effective method. Initial results suggest that FMT also plays an important role in other conditions whose pathogenesis involves alteration of the intestinal microbiota. However, its systematized use is not widespread, especially in Brazil. In the last decade, multiple reports and several cases emerged using different protocols for FMT, without standardization of methods and with variable response rates. In Brazil, few isolated cases of FMT have been reported without the implantation of a Fecal Microbiota Transplantation Center (FMTC). OBJECTIVE: The main objective of this study is to describe the process of implanting a FMTC with a stool bank, in a Brazilian university hospital for treatment of recurrent and refractory C. difficile infection. METHODS: The center was structured within the criteria required by international organizations such as the Food and Drug Administration, the European Fecal Microbiota Transplant Group and in line with national epidemiological and regulatory aspects. RESULTS: A whole platform involved in structuring a transplant center with stool bank was established. The criteria for donor selection, processing and storage of samples, handling of recipients before and after the procedure, routes of administration, short and long-term follow-up of transplant patients were determined. Donor selection was conducted in three stages: pre-screening, clinical evaluation and laboratory screening. Most of the candidates were excluded in the first (75.4%) and second stage (72.7%). The main clinical exclusion criteria were: recent acute diarrhea, overweight (body mass index ≥25 kg/m2) and chronic gastrointestinal disorders. Four of the 134 candidates were selected after full screening, with a donor detection rate of 3%. CONCLUSION: The implantation of a transplant center, unprecedented in our country, allows the access of patients with recurrent or refractory C. difficile infection to innovative, safe treatment, with a high success rate and little available in Brazil. Proper selection of qualified donors is vital in the process of implementing a FMTC. The rigorous clinical evaluation of donors allowed the rational use of resources. A transplant center enables treatment on demand, on a larger scale, less personalized, with more security and traceability. This protocol provides subsidies for conducting FMT in emerging countries.

RESUMO: As leishmanioses representam um complexo de doenças de caráter crônico de alta importância na saúde pública mundial e com distribuição geográfica ampla. A apresentação clínica variada e a baixa sensibilidade e especificidade de alguns métodos para a detecção da doença tornam complexo o diagnóstico da leishmainiose visceral canina (LVC). Entre os diversos testes laboratóriais disponíveis, estudos tem sugerido que a pesquisa de parasitos no líquido sinovial (LS) pode ser uma ferramenta auxiliar no diagnóstico da LVC. Apesar disso, inexistem estudos avaliando a relação entre o estágio clínico da doença e a detecção de Leishmania sp. no LS. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a detecção de amastigotas de Leishmania sp. no LS de cães acometidos por diferentes estádios da doença. Foram avaliados 48 cães, sendo 12 negativos para LVC (grupo controle negativo, G1) e 36 soropositivos. O grupo 2 (doença moderada, G2) incluiu animais classificados no estádio II da doença, enquanto o grupo 3 (doença grave, G3) abrangeu animais classificados em estádio III. Na análise do líquido sinovial dos cães, o parasito foi visualizado em seis (33,3%) cães do G2 e 16 (88,9)% dos cães de G3 (p=0.0437). O presente trabalho sugere que a análise do LS apresenta alto valor como ferramenta suplementar no diagnóstico da LVC. Em adição, o presente estudo indica, pela primeira vez, que o teste apresenta uma sensibilidade maior em animais que apresentam a forma grave da doença.

ABSTRACT: Leishmaniasis represents a complex of chronic diseases with a broad geographic distribution and a high significance in public health worldwide. The varied clinical signs in conjunction with the low sensitivity and specificity of canine visceral leishmaniasis (CVL) detection methods make diagnosis of the disease complex. Among the several available laboratory tests, studies have suggested that the detection of parasites in synovial fluid (SF) is a good auxiliary tool in the diagnosis of CVL. However, no study has evaluated the influence of the clinical stage of CVL in the detection of Leishmania sp. in SF. This study aimed to evaluate the detection of Leishmania sp. amastigotes in the SF of dogs at different stages of the disease. The negative control group (G1) comprised 12 dogs that tested negative for CVL. Thirty-six other dogs, tested serologically positive for CVL, were divided into two groups: Group 2 (G2), which included animals at stage II of the disease (moderate; n=18), and Group 3 (G3) included animals at stage III of the disease (severe; n=18). The analysis of SF revealed the presence of parasites in six (33.3%) dogs from G2 and in 16 (88.9%) dogs from G3 (p=0.0437). The present research suggested that SF analysis is of high value as a supplementary tool in the diagnosis of CVL. As a new finding, the present study also indicated that this test has a higher sensitivity in animals presenting with more severe stage of the disease.

RESUMO: Um potro de 10 dias de idade foi admitido com histórico de decúbito e fraqueza generalizada aguda, com progressão para episódios de convulsão e morte. A avaliação post mortem demonstrou onfalite necropurulenta e meningoencefalomielite fibrinopurulenta. Salmonella Typhimurium foi isolada do material purulento coletado do sistema nervoso central. A ausência de diarreia e lesões entéricas associadas à presença de onfalite sugerem que o umbigo foi possivelmente a porta de entrada do agente. O isolado de S. Typhimurium apresentou resistência a cefalotina e ampicilina e resistência intermediária a enrofloxacina, drogas utilizadas para o tratamento de salmonelose. Este é o primeiro relato de S. Typhimurium levando a alterações encefálicas e medulares em potro. A salmonelose deve ser considerada, portanto, como diagnóstico diferencial em potros neonatos com alterações neurológicas, mesmo na ausência de enterocolite.

ABSTRACT: A 10-day old foal presented with a history of acute recumbency and generalized weakness, that progressed to seizure episodes and death. Post mortem examination revealed necrotizing and purulent omphalophlebitis and fibrinopurulent meningoencephalomyelitis. Salmonella Typhimurium was isolated from the central nervous system and determined to be the cause of the meningoencephalomyelitis. Due to the lack of evidence of gastrointestinal disease, the umbilical cord was considered the most likely portal of entry of the bacteria. The isolated S. Typhimurium was resistant to ampicillin and cephalotin, and partially resistant to enrofloxacin. These drugs are commonly used in the treatment of salmonellosis. This is the first report of S. Typhimurium affecting the brain and spinal cord of a foal. Salmonellosis should be considered a differential diagnosis in foals with neurologic signs, even in the absence of enterocolitis.

RESUMO: Um coelho de seis anos de idade da raça Fuzzy Lop foi encaminhado a um hospital veterinário devido a uma queixa de claudicação. Além de uma subluxação vertebral, duas estruturas radiopacas e bem delimitadas foram identificadas pela avaliação radiográfica. Em um exame ultrassonográfico, as massas foram caracterizadas como formações parenquimatosas e heterogêneas, apresentando mineralização difusa e com formação de artefatos de reverberação, sugerindo a presença de gás. Estas duas estruturas foram extirpadas durante uma laparotomia e Clostridium tertium foi isolado. Este é o primeiro relato de infecção por C. tertium em um animal de estimação.

ABSTRACT: A 6-year-old Fuzzy Lop rabbit was referred to a veterinary hospital with a complaint of lameness. In addition to a vertebral subluxation, two radiopaque and well-defined structures were revealed by radiographic evaluation. Ultrasonographically, the masses were characterized as parenchymal structures with diffuse mineralization and formation of reverberation artifacts, suggesting presence of gas. These two structures were excised during a laparotomy and Clostridium tertium was isolated. To the best of our knowledge, this is the first report of C. tertium infection in a pet animal.

RESUMO: O objetivo do presente estudo é descrever e caracterizar um surto nosocomial provocado por S. Typhimurium multirresistente em bezerros hospitalizados em um hospital escola de medicina veteriária localizado no Brasil. Sessenta e três (96,9%) bezerros apresentaram letargia, hipertermia e diarreia profusa e, apesar do tratamento, vinte e seis animais (41,2%) morreram. Cinco animais foram necropsiados e amostras fecais de seis bezerros foram coletadas. As estirpes isoladas foram submetidas a testes de susceptibilidade a antimicrobianos pelo método de disco-difusão e foram genotipadas pelo ERIC-PCR. Lesões macroscópicas sugestivas de salmonelose, como enterite fibrinonecrótica e hepatoesplenomegalia, foram observadas. Salmonelose foi confirmada pelo isolamento de S. Typhimurium em amostras fecais e órgãos de sete animais. Dos sete isolados, seis apresentaram 100% de similaridade ao ERIC-PCR, sugerindo ocorrẽncia de transmissão nosocomial de S. Typhimurium entre os bezerros hospitalizados. Com excessão de uma estirpe, todas foram resistentes a marbofloxacina, enrofloxacina, florfenicol, oxitetraciclina e trimetoprima/sulfametoxazol, agentes antimicrobianos amplamente utilizados para o tratamento humano e animal. Esse é o primeiro estudo que demonstra um surto nosocomial de estirpes de S. Typhimurium resistentes a múltiplas drogas em um hospital veterinário no Brasil, enfatizando a necessidade de medidas preventivas que reduzam os riscos aos animais hospitalizados e a pessoas que entrarem em contato com esses animais.

ABSTRACT: The present study aimed to describe and characterize a nosocomial outbreak caused by a multidrug resistant Salmonella Typhimurium in hospitalized calves at a veterinary medical teaching hospital from Brazil. Sixty-three (96.9%) calves showed lethargy, hyperthermia and profuse diarrhea and despite treatment, 26 (41.2%) animals died. Five animals were necropsied and stool samples of six calves were collected. The isolated strains were subjected to antimicrobial susceptibility test by disc-difusion method and were fingerprinted by ERIC-PCR. Macroscopic lesions suggestive of salmonellosis, such as fibrinonecrotic enteritis and hepatosplenomegaly were observed. Salmonellosis was confirmed by isolation of S. Typhimurium from stool samples and organs from seven affected animals. Six out of seven isolates of S. Typhimurium, exhibited 100% of similarity at ERIC-PCR, suggesting occurrence of nosocomial transmission of S. Typhimurium among the hospitalized calves. All but one S. Typhimurium isolated were resistant to marbofloxacin, enrofloxacin, florfenicol, oxytetracycline and trimethoprim/sulfamethoxazole, antimicrobial agents largely used for humans and animal treatment. This is the first study of a nosocomial outbreak of multidrug resistant S. Typhimurium in a veterinary hospital in Brazil and highlighted the need for preventive measures to reduce the risks for inpatients and humans in contact with animals.

RESUMO: Infecções por Staphyloccocus pseudintermedius (SP) na pele de cães tem sido objeto de estudos, uma vez que esses microrganismos geralmente apresentam resistência múltipla à antibióticos. Este estudo teve como objetivo identificar e avaliar a susceptibilidade antimicrobiana das cepas de SP isoladas de cães com otite. Amostras de ambas orelhas de 52 cães com otite (n=104) foram incluídas. As bactérias foram cultivadas em ágar Muller-Hinton suplementado com 5% de sangue equino e incubadas a 37ºC por 24 a 48h. Todas as colônias foram submetidas à avaliação bioquímica para identificação de estafilococos. A identificação das colônias como SP foi confirmada pela reação em cadeia da polimerase. A susceptibilidade antimicrobiana das cepas SP foi avaliada pela técnica de difusão em disco. A presença do gene mecA foi avaliada em todos os isolados de SP por PCR. 44 estirpes de SP foram isoladas de 31 cães (31/52, 59,6%). 75% das cepas foram suscetíveis a cefalexina e 93,2% à amoxicilina mais ácido clavulânico. Menos de 23% das estirpes eram suscetíveis à penicilina. Para antimicrobianos não beta-lactâmicos, 63,6% apresentaram resistência ao sulfametoxazol-trimetoprim, 61,4% à tetraciclina e 38,64% à enrofloxacina. A frequência de resistência a aminoglicosídeos foi de 27,3% para gentamicina. A resistência a oxacilina in vitro foi detectada em 13 das 44 estirpes (29,55%). Um total de 12 amostras (27,3%) foram positivas para mecA, cinco das quais foram suscetíveis à oxacilina na difusão em disco. 26 amostras (59,1%) foram resistentes a três ou mais classes de antimicrobianos e classificadas como multirresistentes. Nossos resultados mostram elevada frequência de isolados SP e multiresistentes para os antimicrobianos comumente usados em veterinária.

ABSTRACT: Infections by Staphyloccocus pseudintermedius in the skin of dogs have been object of studies, since such microorganisms often present multiple resistance to antibiotics. This study aimed to identify and evaluate the antimicrobial susceptibility of Staphylococcus pseudintermedius (SP) strains isolated from dogs with otitis. Swabs from both ears of 52 dogs with otitis (n=104) were included. Bacteria were cultured using Muller-Hinton agar (supplemented with 5% equine blood and incubated at 37°C for 24 to 48 hours. All colonies underwent biochemical evaluation for identification of staphylococci. The identity of colonies as SP was confirmed by polymerase chain reaction. The antimicrobial susceptibility of SP strains was evaluated by disk diffusion. The presence of the gene mecA was evaluated in all SP isolates by PCR. Forty-four SP strains were isolated from swabs of 31 dogs (31/52, 59.6%). Seventy-five percent of the strains were susceptible to cephalexin and 93.2% to amoxicillin plus clavulanic acid. Less than 23% of the strains were susceptible to penicillin. For non-beta-lactam antimicrobials, 63.6% of the strains showed resistance to sulfamethoxazole-trimethoprim, 61.4% to tetracycline, and 38, 64% to enrofloxacin. Aminoglycoside resistance rate was 27.3% for gentamicin. Resistance to oxacillin in vitro was detected in 13 of the 44 strains (29, 55%). A total of 12 strains (27.3%) were positive for mecA gene and five of these 12 strains were susceptible to in vitro oxacillin. Twenty-six (59, 1%) strains were resistant to three or more classes of antimicrobials, and classified as multi resistant. Our results showed high frequency of SP and multi resistant isolates to antimicrobials commonly used in veterinary.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi descrever e caracterizar, pela primeira vez, dois surtos de salmonelose causados por Salmonella Ndolo em potros e bezerros do Brasil e comparar esses isolados com Salmonella Ndolo previamente identificada em répteis assintomáticos. Os animais infectados apresentaram febre, letargia e diarreia profusa. Os isolados foram submetidos a testes de susceptibilidade a antimicrobianos e foram caracterizados conforme a presença de genes de virulência e diversidade genética, utilizando-se o ERIC-PCR. Salmonella Ndolo foi identificado em amostras fecais de dois potros e quatro bezerros. Um isolado de bezerro foi resistente a amoxicilina/ácido clavulanico, trimethoprima/sulfametoxazol e florfenicol. Estirpes de dois outros bezerros foram resistentes a oxitetraciclina. Todos os genes de virulência testados foram identificados nos isolados e dois grandes grupos de estirpes geneticamente relacionadas foram identificados pelo ERIC-PCR, um para cada surto. Esse é o primeiro relato de Salmonella Ndolo em animais domésticos e sintomáticos. Previamente, esse sorovar foi identificado apenas em infecções humanas. A presença de fatores de virulência relevantes em todos os isolados e a detecção de estirpes multirresistentes a antimicrobianos destaca a importância do monitoramento de sorovares associados a salmonelose em animais domésticos.

ABSTRACT: The present study aimed to describe and characterize, for the first time, two outbreaks of salmonellosis caused by Salmonella Ndolo in foals and calves in Brazil and compare the isolated strains with S. Ndolo previously identified in asymptomatic reptiles. The affected calves and foals presented fever, lethargy, and profuse diarrhea. Isolated strains were subjected to antimicrobial susceptibility testing, characterized according to virulence genes, and fingerprinted by ERIC-PCR. Salmonella Ndolo was identified in fecal samples from two foals and four calves. One isolate from a calf was resistant to amoxicillin/clavulanic acid, trimethoprim/sulfamethoxazole, and florfenicol. Strains from two other calves were resistant to oxytetracycline. All virulence genes tested were present in the isolates, and two major clusters of closely related strains were identified by ERIC-PCR, each per outbreak. This is the first report of Salmonella Ndolo infection in domestic and symptomatic animals. Previously, this serovar had been identified only in human infections. The presence of relevant virulence genes in all Salmonella Ndolo isolates and the detection of antimicrobial multi-resistant strains highlighted the importance of monitoring serovars associated with salmonellosis in domestic animals.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de microrganismos no mel produzido pela abelha sem ferrão jandaíra (Melipona subnitida). Trinta e cinco amostras foram avaliadas e todas foram positivas para bactérias mesofílicas, coliformes a 45 ºC, fungos e leveduras. Staphylococcus spp. foi identificado em 85,7% enquanto Bacillus foi detectado em 34,3% das amostras de mel. Clostridium perfringens e C. botulinum foram detectados em 40% e 2,8% das amostras respectivamente. Salmonella spp. e C. difficile não foram detectados. O presente trabalho revelou uma grande diversidade de microrganismos no mel produzido por jandaíra.

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the presence of microorganisms in honey produced by the stingless bee (SB) jandaíra (Melipona subnitida) from the semiarid region of Brazil. Thirty-five samples were analyzed and all of them were positive for mesophilic bacteria, coliforms at 45°C, fungi, and yeast. Staphylococcus spp. were identified in 85.7%, while Bacillus spp. were detected in 34.3% of honey samples. DNAs of Clostridium perfringens and C. botulinum were detected in 40% and 2.8% of the samples, respectively. Salmonella spp. and C. difficile were not detected. The present research revealed a great diversity of microorganisms in honey produced by jandaíra.

RESUMO: Apesar da reconhecida importância de Clostridium perfringens como enteropatógeno de pequenos ruminantes, pouco se sabe sobre a frequência dos genótipos ou do papel de fatores de virulência adicionais de C. perfringens em cabras saudáveis, dificultando o diagnóstico laboratorial da infecção causada por esse micro-organismo. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo caracterizar C. perfringens de amostras de fezes de cabras adultas saudáveis. Amostras de fezes de 250 cabras saudáveis de 17 rebanhos diferentes em Minas Gerais, Brasil, foram submetidas ao isolamento e genotipagem de C. perfringens. C. perfringens tipo A foi isolado de 189 (75,6%) cabras, enquanto C. perfringens tipos C e D foram detectados em um animal (0.4%) cada. Todos os isolados foram negativos para os genes codificadores das toxinas NetB, NetE, NetF e enterotoxina. Os resultados apresentados confirmam C. perfringens tipo A como parte da microbiota de cabras saudáveis e sugere que C. perfringens tipos C e D são raramente encontrados em caprinos saudáveis.

ABSTRACT: Despite the known importance of Clostridium perfringens as an enteropathogen in small ruminants, little is known about the role of its additional virulence factors or the frequency of the various C. perfringens genotypes in healthy goats; this complicates the laboratory diagnosis of the infections caused by this microorganism. In light of this, the aim of the present study was to isolate and genotype C. perfringens from stool samples from healthy goats in Brazil. Stool samples from 250 apparently healthy adult goats from 17 different herds in Minas Gerais, Brazil were collected, and isolation and genotyping of C. perfringens was performed. C. perfringens type A was isolated from 189 (75.6%) goats, whereas C. perfringens types C and D were each detected in one goat (0.4%). All isolates were negative for enterotoxin-, NetB-, NetE-, and NetF-encoding genes. These results confirmed C. perfringens type A as part of the microbiota in these animals, and they suggested that C. perfringens type C and D are rarely isolated from healthy goats.