RESUMO O presente estudo investigou o efeito da desinfecção de ovos férteis de aves caipiras com o uso de óleos essenciais de capim limão (Cymbopogon flexuosus) e chá-de- pedestre (Lippia rotundifolia). Aplicaramse os seguintes tratamentos nos ovos selecionados: 1% (v/v) óleo essencial de capim limão (CL), chá-de-pedestre (CP), associação (CL + CP) e 0,1% (v/v) de amônia quaternária (AQ) (controle positivo). Os ovos foram distribuídos em incubadora e após 21 dias, as aves eclodidas foram contadas e pesadas e os ovos não eclodidos foram quebrados e examinados macroscopicamente para a determinação da fertilidade e o momento da morte embrionária. Determinou-se a ação antimicrobiana dos óleos através das análises quantitativas de mesófilos aeróbios, fungos filamentosos e leveduras e coliformes totais. A mortalidade foi elevada nos tratamentos, a distribuição de mortes nas classes foi superior no tratamento com capim limão. A maior eclodibilidade ocorreu no tratamento com a amônia quaternária. Evidenciou-se a redução na contagem microbiana na aplicação do óleo essencial individualmente ou em associação, superando a aplicação com AQ. Os óleos essenciais de capim limão (Cymbopogon flexuosus) e chá-de-pedestre (Lippia rotundifolia) promoveram a redução da carga microbiana de ovos férteis de aves caipiras.

SUMMARY The effect of the disinfection of fertile eggs of free-range poultry with essential oils from Cymbopogon flexuosus and Lippia rotundifolia was evaluated. The treatments applied to the eggs were (v v-1): 1% essential oil from C. flexuosus (CF), 1% essential oil from L. rotundifolia(LR), 0.1% CF + LR, and 0.1% quaternary ammonia (QA) (positive control). The eggs were incubated for 21 days, the birds from hatched eggs were counted and weighed, and not hatched eggs were opened and examined macroscopically to determine egg fertility, and embryonic death time. The antimicrobial action of the essential oils was determined through quantitative analyses, considering aerobic mesophylls, filamentous fungi, yeasts, and total coliforms. Mortality was high in the treatments, especially in the treatment with essential oil from C. flexuosus. The highest hatchability was found in the treatment with QA. The treatments with singly or combined essential oils were more efficient in decreasing microbial count than QA. The essential oils from C. flexuosus and L. rotundifolia reduced the microbial load of fertile eggs of the free-range poultry evaluated.

RESUMO: A atividade conservante e antioxidante de óleos essenciais são importantes ferramentas para uso na indústria de alimentos e pesquisas são estimuladas na atualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades antioxidantes e a atividade antimicrobiana de óleos essenciais de Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratuse Lippia alba (LA) contra bactérias lácticas e patogênicas com importância em doenças transmitidas por alimentos. A atividade antibacteriana dos óleos foi avaliada por testes de disco-difusão e macrodiluição em caldo, utilizando-se cultura láctica mista de Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus e Streptococcus thermophilus (YF-L903), e Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017). Os compostos dos óleos essenciais foram identificados por cromatografia, mostrando eugenol (79,41%) como composto predominante em S. aromaticum, geranial (31,89%), neral (24,52%) e β-mirceno (25,37%) em C. citratus, e o geranial (33,80%) e neral (25,63%) em L. alba. A atividade antibacteriana confirmou o efeito dose-dependente dos três óleos para todas as bactérias avaliadas, apresentando halos de inibição a partir da concentração de 20μL mL-1. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou melhor atividade antioxidante, com IC 50 IC50 (at concentration capable of generating 50% inhibition) igual a 5.76μg mL-1 e índice de atividade antioxidante (AAI) de 6,94, considerado forte (AAI>2,0) em relação aos demais óleos avaliados. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou excelente atividade antioxidante em menor concentração que anecessário para inibir a cultura láctica, indicando que este óleo pode ser usado como conservante em alimentos processados contendo culturas lácticas.

ABSTRACT: Studies about preservative and antioxidant activity of essential oils have been encouraged in recent years, given their importance to food industry. The aim of the current study was to evaluate the antioxidant properties and antimicrobial activity of essential oils deriving from Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratus and Lippia alba against lactic and pathogenic bacteria responsible for food-borne diseases. Essential oil antibacterial activity was assessed through disc diffusion and macrodilution tests conducted in a mixed lactic culture of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus (YF-L903) and of Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017) strains. Based on the chromatographic analysis results, the essential oils shown to be composed of eugenol (79.41%) which was the prevalent compound in S. aromaticum, geranial (31.89%), neral (24.52%) and β-myrcene (25.37%) in C. citratus, as well as of geranial (33.80%) and neral (25.63%) in L. alba. The observed antibacterial activity confirmed the dose-dependent effect of these three oils on all the assessed bacteria; there was halo inhibition at concentration 20μL mL-1. The essential oil of S. aromaticum presented better antioxidant activity, with IC50 equal to 5.76μg mL-1 and antioxidant activity index of 6.94, and it was considered strong (AAI>2.0) in comparison to the other evaluated oils. This essential oil also presented excellent antioxidant activity at concentrations lower than the one required to inhibit lactic cultures. Based in this outcome, the essential oil from S. aromaticum can be used as preservative agent in processed food whose formulation presents lactic cultures.

RESUMO No trabalho foi avaliado o efeito antimicrobiano do óleo capim limão (Cymbopogon citratus) microencapsulado frente a cepas de Escherichia coli (ATCC8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Salmonella enterica subsp. enterica (ATCC 6017), e a estabilidade do óleo em ração de frangos de corte. O teste de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) do óleo essencial de capim-limão microencapsulado foi determinado pelo método de macrodiluição (tubo) utilizando as concentrações de 160μL/mL, 80μL/mL, 40μL/mL, 20μL/mLe 10μL/mL. A concentração do óleo de 80μL/mL apresentou melhores resultados frente às três bactérias. Para a avaliação da estabilidade foram separados e armazenadas porções de 200g de ração misturadas com o óleo essencial de capim limão na dosagem de 120μL/g de ração, foram preparadas porções de ração sem a presença do óleo essencial para teste controle, os resultados mostraram que o óleo permaneceu ativo até sete dias, com redução significativa de 3,08 UFC para S. aureus, 3, 01 para E. coli e 3,10 S. entérica. Conclui-se que, óleo essencial de capimlimão microencapuslado tem atividade antibacteriana na concentração de 80 μL/mL frente à Escherichia coli, S. entérica e S. aureus e promove a estabilidade da ração no período de sete dias mesmo na presença da matéria orgânica que é fonte de nutrientes para patógenos.

SUMMARY The antibacterial effect of microencapsulated lemon grass (Cymbopogon citratus) essential oil on strains of Escherichia coli (ATCC8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538) and Salmonella enterica subsp. enterica (ATCC 6017), and the stability of this oil in feeds for broiler chickens were evaluated. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined by the macrodilution method, using the microencapsulated lemon grass essential oil at concentrations of 160 μL mL−1, 80 μL mL−1, 40 μL mL−1, 20 μL mL−1, and 10 μL mL−1. The oil concentration of 80 μL mL−1 presented the best results against the three bacteria evaluated. Samples of 200 g of feed mixed with 120 μL g−1 of the microencapsulated lemon grass essential oil was stored to evaluate the oil stability. Feed without microencapsulated lemon grass essential oil was prepared as control. The oil remained active for seven days, with significant reduction of S. aureus (3.08 CFU), E. coli (3.01 CFU), and S. enterica (3.10 CFU). The microencapsulated lemon grass essential oil at concentration of 80 μL mL−1 had antibacterial effect against the E. coli, S. enterica and S. aureus, and maintained stability of the feed for seven days, even with presence of organic matter, which is source of nutrients for pathogens.

Resumo: Objetivou-se determinar atividade antisséptica do óleo essencial de Lippia origanoides na presença de leite bovino. A composição química do óleo essencial de alecrim pimenta foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM), sendo detectados 53 compostos, dos quais 16 foram identificados (>0,1% área total). O carvacrol (32,7%), p-cimeno (23%), timilmetil éter, cariofileno (7,98%) e o γ-terpineno (5,40%) foram os componentes mais abundantes. A concentração inibitória mínima para Staphylococcus aureus ATCC 25923 e E. coli ATCC 8739 foi de 60μL/mL, enquanto para Salmonella Choleraesuis ATCC 35640 foi de 90μL/mL. A concentração bactericida mínima foi de 120μL/mL para as três bactérias. Avaliou-se a atividade antisséptica do óleo essencial na concentração de 120μL/mL na presença de leite bovino sobre as mesmas cepas bacterianas. O óleo em estudo apresentou efeito inibitório do crescimento das cepas em diferentes tempos de ação (p<0,05). S. aureus apresentou maiores índices de inibição após 5 min de contato e Escherichia coli e Salmonella Choleraesuis após 15 min. O óleo essencial de alecrim-pimenta revelou ser um potencial antimicrobiano natural, mesmo na presença de matéria orgânica constituída de uma matriz nutricional complexa que é o leite bovino.

Abstract: This study aimed to determine the antiseptic activity of the essential oil of Lippia origanoides in the presence of bovine milk. The essential oil chemical composition was determined by gas chromatography-mass spectrometry (CG EM) 53 compounds were detected, of which 16 were identified (>0.1% total area). The carvacrol (32.7%), p-cymene (23%), thymil methyl ether (10.03%), caryophyllene (7.98 %) and γ-terpinene (5.40%) were the most abundant components. The minimum inhibitory concentration for Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 8739 was 60uL/mL, as for this Salmonella Choleraesuis ATCC 35640 was 90uL/mL. The minimum bactericidal concentration was 120μL/mL for all three bacteria. We evaluated the antiseptic activity of the essential oil in the concentration of 120μL/mL in the presence of bovine milk for the same bacterial strains. The oil under study It showed an inhibitory effect of growth of the strains in different action times (p <0.05). S. aureus showed higher inhibition rates after 5 min of contact and E. coli and Salmonella Choleraesuis after 15 min. The essential oil Lippia origanoides proved to be a natural antimicrobial potential even in the presence of organic matter consists of a complex nutritional matrix is bovine milk.