O considerável potencial terapêutico de tempol (4-hidroxi-2,2, 6,6-tetrametil-1piperiniloxila) e nitróxidos cíclicos relacionados como antioxidantes tem estimulado inúmeros estudos de suas reações com espécies reativas derivadas de oxigênio. Em comparação, as reações de nitróxidos com oxidantes derivados do óxido nítrico têm sido investigadas menos frequentemente. Todavia, essas reações são relevantes porque o tempol é também capaz de proteger animais de injúrias associadas a condições inflamatórias, as quais são caracterizadas por uma aumentada produção de óxido nítrico e derivados oxidantes. Aqui, discutimos estudos recentes abordando os mecanismos pelos quais nitróxidos cíclicos atenuam a toxicidade de oxidantes derivados do óxido nítrico. Como um exemplo, apresentamos dados que demonstram que o tempol protege camundongos do dano hepatotóxico promovido por altas doses de acetaminofeno e discutimos o possível mecanismo de proteção. Com base nos estudos sumarizados, é proposto que nitróxidos atenuam a injúria tecidual em condições inflamatórias devido principalmente a sua capacidade de reagir rapidamente com ambos, dióxido de nitrogênio e radical carbonato. Em conseqüência, os nitróxidos são oxidados ao cátion oxamônio correspondente, o qual, por sua vez, pode ser reciclado ao nitróxido através de reações com espécies precursoras, como peroxinitrito e peróxido de hidrogênio, ou com redutores celulares. Um possível mecanismo auxiliar de proteção é a regulação negativa da expressão da sintase do óxido nítrico induzível. As possíveis implicações terapêuticas desses mecanismos são abordadas.

The substantial therapeutic potential of tempol (4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy) and related cyclic nitroxides as antioxidants has stimulated innumerous studies of their reactions with reactive oxygen species. In comparison, reactions of nitroxides with nitric oxide-derived oxidants have been less frequently investigated. Nevertheless, this is relevant because tempol has also been shown to protect animals from injuries associated with inflammatory conditions, which are characterized by the increased production of nitric oxide and its derived oxidants. Here, we review recent studies addressing the mechanisms by which cyclic nitroxides attenuate the toxicity of nitric oxidederived oxidants. As an example, we present data showing that tempol protects mice from acetaminophen-induced hepatotoxicity and discuss the possible protection mechanism. In view of the summarized studies, it is proposed that nitroxides attenuate tissue injury under inflammatory conditions mainly because of their ability to react rapidly with nitrogen dioxide and carbonate radical. In the process the nitroxides are oxidized to the corresponding oxammonium cation, which, in turn, can be recycled back to the nitroxides by reacting with upstream species, such as peroxynitrite and hydrogen peroxide, or with cellular reductants. An auxiliary protection mechanism may be down-regulation of inducible nitric oxide synthase expression. The possible therapeutic implications of these mechanisms are addressed.

O objetivo do presente estudo foi analisar freqüências alélicas e genotípicas para o gene codificador da cadeia beta do fibrinogênio em pacientes com doença arterial periférica (DAP). Foram estudados 44 pacientes caucasóides do sexo masculino com sintomas clínicos e comprovação angiográfica de DAP, com idade entre 38 e 79 anos (62±8,6 anos). Entre eles, 22 apresentaram obstrução aterosclerótica nas artérias ilíacas, femorais e/ou carótidas e 22 tinham aneurisma de aorta torácica, abdominal ou tóraco-abdominal. O grupo controle foi constituído por 56 indivíduos, sem história clínica de DAP ou alterações ao exame clínico, com idades variando de 43 a 80 anos (59±9,2 anos). Foram excluídos os indivíduos com doença renal, doença hepática ou diabetes mellitus. A análise do polimorfismo genético da cadeia do fibrinogênio foi realizada por PCR (polimerase chain reaction) e RFLP (restriction fragment lenght polimorphism) com a endonuclease Bcl I, identificando-se três genótipos: B1/B1, B1/B2 e B2/B2. A análise estatística incluiu teste exato de Fisher, calculo do odds ratio, teste de Kruskal Wallis e análise de variância (ANOVA). Admitiu-se erro a igual a 5%, com nível de significância para P<0,05. O alelo B1 foi o mais prevalente em pacientes e controles (0,819 e 0,857, respectivamente; P=0,5605), com prevalência do genótipo B1/B1 nos pacientes (65,9%) e controles (71,4%; P=0,6639), seguido de B1/B2 (31,8; 28,6%, respectivamente; P=0,8268). Em conclusão, DAP, independente do tipo de lesão obstrutiva ou aneurismática, apresenta-se indiferente ao polimorfismo Bcl I do fibrinogênio, portanto, sem influência dos alelos B1 e B2 para fibrinogênio e seus respectivos genótipos na doença.

The objective of this study was to analyze the frequencies of the alleles and genotypes of the gene encoder of the fibrinogen b-chain in patients suffering from peripheral artery disease. A total of 62 male Caucasoid patients with ages varying from 38 to 79 years old were studied. All the patients had clinical symptoms of peripheral artery disease, which was later confirmed by angiography. Forty of the patients had atherosclerotic obstructions of the iliac, femoral or carotid arteries and 22 suffered from aneurysms of the thoracic, abdominal or thoracoabdominal aortas. All the patients were submitted to surgery. A control group was formed of 62 individuals, with ages ranging from 43 to 80 years old, without clinical histories or alterations in their clinical examinations of peripheral artery disease. Individuals with renal disease, liver disease or diabetes mellitus were excluded. Analysis of the fibrinogen b-chain was performed using polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism with Bcl I endonuclease. Three genotypes, B1/B1, B1/B2 and B2/B2 were identified. Statistical analysis was made using the Fisher Exact test, odds ratio, Kruskal-Wallis test and variance analysis (ANOVA). A p-value = 0.05 was considered significant. The B1 allele was the most prevalent in both patients and the control group (0.819 and 0.857, respectively), with prevalence of the B1/B1 genotype in patients and controls (65.9% vs. 71.4% respectively), followed by B1/B2 (31.8% vs. 28.6% respectively). No significant difference was observed in relation to the Bcl I polymorphisms of the fibrinogen b-chain and obstructive and aneurysmal peripheral artery disease. In conclusion, the B1 and B2 polymorphisms of the fibrinogen b-chain and their respective genotypes do not have any influence in peripheral artery disease.

A heterogeneidade genética da apolipoproteína E (apo E) tem sido associada com o perfil lipídico e acidente vascular cerebral aterotrombótico (AVC at); no entanto, esta associação permanece inconclusiva. OBJETIVO: Avaliar a relação entre as isoformas da apo E e o AVC at pela determinação da frequência de seus alelos e genótipos, associados ao perfil lipídico, em pacientes com a doença. MÉTODO: Foram estudados 207 indivíduos distribuídos em 2 grupos, consistindo de 107 pacientes com AVC e 100 indivíduos sem sintomas clínicos da doença. Amostras de sangue periférico foram obtidas de pacientes e controles para investigação molecular da apo E (alelos épsilon2, épsilon3 e épsilon4) e para análise do perfil lipídico. RESULTADOS: O alelo épsilon3 foi o mais comum e sua prevalência foi significantemente mais elevada em pacientes (0,93) comparada com controles (0,86; p=0,024). O alelo épsilon2 foi raramente encontrado, especialmente em pacientes (0,02 versus 0,05 em controles; p=0,191). A presença do alelo épsilon4 não foi associada com AVC, apresentando frequência reduzida em pacientes (0,05) quando comparada com controles (0,09; p=0,011). Apesar de níveis médios elevados do perfil lipídico terem sido encontrados em pacientes quando comparados com controles, com significância estatística para valores de colesterol total (CT) (203,6md/dL±57,98, e 181,9mg/dL±68,47, respectivamente; p=0,003) e colesterol de baixa densidade (LDLc) (131,4mg/dL±52,60 e 116mg/dL±56,38, respectivamente; p=0,014), esses resultados se mostraram independentes da presença do alelo épsilon4. No grupo controle, os valores mais elevados de CT e LDLc ocorreram na ausência do alelo épsilon4, confirmando o efeito conflitante dos alelos da apo E sobre os lipídios plasmáticos e sobre o AVC at. CONCLUSÃO: As isoformas da apo E não podem ser consideradas fator de risco isolado para AVC at e não mostram associação com o perfil lipídico neste estudo.

The genetic heterogeneity of apolipoprotein E (apo E) has been associated with lipid profile and atherothrombotic stroke, however this association remains inconclusive. OBJECTIVE: To evaluate the relationship between the isoforms of apo E and atherothrombotic stroke, by ascertaining the frequency of its alleles and genotypes associated with the lipid profile in patients with stroke. METHOD: A total of 207 individuals were divided into two groups, consisting of 107 patients with stroke and 100 individuals without clinical symptoms of the disease. Blood samples were taken from patients and controls for molecular investigation of the apo E (epsilon2, epsilon3 and epsilon4 alleles) for the analysis of the lipid profile. RESULTS: The epsilon3 allele was the most common and its prevalence was significantly higher in patients (0.93) compared to the controls (0.86; p=0.024). The epsilon2 allele was rarely seen specifically in patients (0.02 versus 0.05 in controls, p=0.191). The epsilon4 allele was not associated with stroke showing a reduced frequency in patients (0.05) when compared to controls (0.09; p=0.011). Although higher average levels of lipid profile were found in patients when compared to controls, with statistical significance for the values of total cholesterol (TC) (203.6mg/dL±57.98 and 181.9mg/dL±68.47 respectively; p=0.003) and low-density lipoprotein cholesterol (LDLc) (131.4mg/dL±52.60 and 116mg/dL±56.38, respectively; p=0.014), these were independent of the presence of the epsilon4 allele. In control group the higher TC and LDLc values occurred in the absence of the epsilon4 allele, confirming the conflicting effect of the alleles of apo E on the plasmatic lipids and atherothrombotic stroke. CONCLUSION: The isoforms of apo E cannot be regarded as an isolated risk factor for stroke and do not show association with lipid profile in this study.