OBJETIVO: Apresentar um modelo experimental de análise qualitativa e quantitativa de células tronco mesênquimais proveniente da gordura de coelhos obtido por lipectomia. A gordura poderia ser uma grande fonte de obtenção de células tronco mesenquimais, criando condições para a reparação de tecidos lesados. MÉTODOS: Foram removidos os panículos adiposos (2-3 cm) da região cervical de Coelhos Nova Zelândia (n = 10) por lipectomia. Os panículos foram fragmentados e lavados com PBS e, posteriormente, dissociados enzimaticamente com tripsina / EDTA. As células extraídas do panículo adiposo foram incubadas em meio de cultura DMEM e após 20 dias, foi realizada uma análise quantitativa da adesão de primeira e segunda passagem das células mesênquimais em garrafas de cultura. RESULTADOS: Foram extraídas 1,62 x106 cel/ mL células totais de gordura (CTG) with 98% de viabilidade. Essas células foram levadas para o cultivo e após 20 dias, foi realizada a primeira passagem (1pd) sendo quantificadas 2,88 x10(6) cel/mL células tronco mesênquimais (CTM). Na segunda passagem (2pd) foi obtido 4,28 x10(6) cel/mL CTM. CONCLUSÃO: A lipectomia do paniculo adiposo é um método muito satisfatório para extrair células tronco a partir de gordura, quantitativamente e qualitativamente.

PURPOSE: To present an experimental model of qualitative and quantitative analysis of mesenchymal stem cells from fat of rabbits obtained by lipectomy. The fat could be a great source for obtaining mesenchymal stem cells and to create conditions for repairing injured tissues by bioengineering. METHODS: New Zealand rabbits (n= 10) adipose panicle (2-3 cm) were removed by lipectomy, fragmented and washed with PBS and enzymatically dissociated with trypsin/EDTA. Lately, these cells were incubated in culture medium DMEM and after 20 days, was performed quantitative analysis of the accession of first and second mesenchymal cells in cell culture bottles. RESULTS: The fat total cells (CTF) were 1.62 x10(6) cells/mL and presented 98% of viability. These cells were taken for cultivation and after 20 days were counted 2.88 x10(6) cells/mL MSC. The same was done and after 20 days we quantified 4.28 x10(6) cells/mL MSC. CONCLUSION: The lipectomy of adipose panicule is a very satisfactory method to extract stem cells from fat, quantitatively and qualitatively.

OBJETIVO: Avaliar a técnica mais promissora para a coleta de células tronco adultas de medula óssea de coelhos para a utilização do mesmo como modelo experimental na medicina regenerativa. MÉTODOS: Foram utilizados 30 coelhos divididos em 2 grupos: GRUPO A, n=8, onde realizamos a coleta de sangue de medula óssea (MO) da crista ilíaca e grupo B, n=22, onde realizamos a coleta de sangue da medula óssea da epífise do fêmur. Após as coletas, realizamos a separação das células mononucleadas através do gradiente de densidade (Ficoll-Hystopaque). Através da câmara de Neubauer realizamos a contagem das células mononucleadas por ml. Testamos a viabilidade celular através do método Tripan Blue. RESULTADOS: Na coleta de sangue de MO na crista ilíaca obtivemos a média de 1 ml durante 1 hora de procedimento cirúrgico, obtendo a quantidade de 3,6 .10(6) células/ml, enquanto que a punção na epífise do fêmur obtivemos a média de 3 ml durante 30 minutos de procedimento cirúrgico obtendo a quantidade de 11,79.10(6) cél./ml diminuindo o óbito dos animais. CONCLUSÃO: A análise para a obtenção de maior número de células mononucleadas/ml de sangue de medula óssea de coelho foi mais satisfatória na região da epífise do fêmur em comparação com a crista ilíaca.

PURPOSE: To assess the technique for the collection of rabbit bone marrow stem cells from different regions to be used as an experimental model in regenerative medicine. METHODS: Thirty rabbits were allocated into 2 groups: GROUP A, n=8, animals that underwent bone marrow blood (BMB) harvesting from the iliac crest; and GROUP B: including 22 rabbits that underwent BMB harvesting from the femur epiphysis. After harvesting, mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation (Ficoll - Histopaque). The number of mononuclear cells per ml was counted in a Neubauer chamber and cell viability was checked through Tripan Blue method. RESULTS: Harvesting from the iliac crest yielded an average of 1 ml of BMB and 3,6.10(6) cells/ml over 1 hour of surgery, whereas an average of 3ml of BMB and 11,79.10(6) cells./ml were obtained in 30 min from the femur epiphysis with a reduced animal death rate. CONCLUSION: The analysis for the obtention of a larger number of mononuclear cells/ml from rabbit bone marrow blood was more satisfactory in the femur epiphysis than in the iliac crest.

OBJETIVO: Realizar avaliação através de tomografia computadorizada (TC) de implantes de carbono vítreo poroso (CVP) e silicone (S) para sua utilização na substituição óssea no esqueleto craniofacial de ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos Wistar divididos em: Grupo A (n=20), implantes subperiostais de CVP no crânio. Após o momento da eutanásia os animais foram divididos em dois subgrupos: A I: 10 animais, estudados no 7(0) dia pós-operatório (PO) e AII: 10 animais, estudados no 28(0) PO. No grupo B (n=20), os ratos foram submetidos ao implante de silicone no crânio. Todas outras etapas foram idênticas ao grupo A, com a designação de subgrupos BI e BII. Foi realizada tomografia computadorizada com cortes axiais de 1 mm de espessura para obtenção de imagens tridimensionais. A escala de Hounsfield foi utilizada para avaliação da radiodensidade dos implantes. Testes estatísticos não paramétricos foram utilizados para analisar os resultados. RESULTADOS: O volume do implante foi mantido ao 7(0) PO nos dois grupos, mas ao 28(0) PO, ocorreu uma redução no volume do implante no grupo A, não observada no grupo B. Os estudos tomográficos demonstraram a presença de uma pseudo-cápsula ao redor dos implantes no grupo B, não observada nos implantes de CVP. Os implantes de silicone permaneceram inalterados na TC, mas os de CVP apresentaram modificação na sua radiodensidade e deformação (p<0,05). CONCLUSÃO: Na avaliação, através de TC, os implantes de CPV apresentam maior deformação que os de S, o que os torna inadequados para substituição do osso membranoso no crânio de ratos.

PURPOSE: Evaluate by CT the use of porous vitreous carbon (PVC) and silicon (S) implants as the replacement bone in the craniofacial skeleton of rats. METHODS: 40 rats divided in: Group A (n=20) PVC submitted to the implant of a fragment in skull. After the euthanasia, the animals were divided into two subgroups: A I: 10 animals, studied in the 7th postoperative day (P.O) and AII: 10 animals, studied in the 28th P.O. In group B, S, 20 rats were submitted to S implant in the skull. All other steps were identical to group A, with designation of subgroups BI and BII. CT with beams in axial cuts of 1 mm thickness to obtain 3-D information It was used Hounsfield scale for evaluate the radio density of the implant. They were used non parametric tests to analyze the results. RESULTS: The 7th PO boss remained in the two groups, but for 28th PO, observed reduction in the volume of the implant in Group A, not observed in group B. CT studies noticed different radio densities around all of S prostheses (pseudo-capsule), that don't appeared in CPV implants. The S has remained unchanged in the CT, but the CPV has had a modification in its radio density (p<0,05), in all implants. CONCLUSION: In CT evaluation the implants of CPV have greater deformation that the S, which makes them not suitable for replacement of membranous bone in the rat skull.