Resumo A morte súbita dos citros (MSC) é uma doença de alto impacto destrutivo e tem levado à erradicação de milhões de plantas de laranja-doce na região Sudeste do Brasil, nos últimos 15 anos. Embora o agente causal da MSC ainda não tenha sido determinado, evidências demonstraram que esta doença pode ser transmitida por um vetor biótico. A incidência de MSC em cultivares de laranja-doce está relacionada ao porta-enxerto, sendo que a combinação com limoeiro ‘Cravo’ é a mais afetada. Por outro lado, há evidências de relação entre plantas sintomáticas para MSC e a presença de um vírus, denominado Citrus sudden death associated virus (CSDaV) e/ou com Citrus tristeza virus (CTV). Com base nessas informações, o objetivo deste estudo foi determinar a presença de CSDaV e CTV e a associação entre eles, em onze porta-enxertos para laranjeira ‘Valencia’. Os resultados apresentados aqui sugerem diferenças relacionadas à presença de CSDaV e CTV em diferentes porta-enxertos para laranja ‘Valencia’, não havendo relação entre a presença de CSDaV e CTV.

Abstract Citrus sudden death (CSD) is a highly destructive disease and has caused the eradication of millions of trees in southern Brazil within the last 15 years. In spite of the exact cause of CSD has not been determined, evidences have shown that this disease can be transmitted by biotic vectors. Disease incidence in sweet orange scions is related to the rootstock, and the combination with ‘Rangpur’ lime is the most affected. On the other hand, there are evidences of a relation between CSD affected trees and the presence of the Citrus sudden death associated virus (CSDaV) and/or Citrus tristeza virus (CTV). Based on such information, this study has been carried out to determine the presence of CSDaV and CTV, and the association between each other in eleven rootstocks for ‘Valencia’ sweet orange. The results presented herein showed differences related to the presence of CSDaV and CTV in different rootstocks for ‘Valencia’ sweet orange and no relation between the presence of CSDaV and CTV.

This paper introduces the basics of peptide mass spectra interpretation applied to proteomics and is directed to chemists, biochemists and biologists. The manuscript presents a well detailed protocol aiming to serve as a first choice guide for understanding peptide sequencing. The tutorial was elaborated based on both a thorough bibliographic revision and the author's experience. In order to prove the applicability of the proposed guide, spectra obtained on different instruments have been successfully interpreted by applying the presented rational.

Xylella fastidiosa foi a primeira bactéria fitopatogênica que teve seu genoma completamente seqüenciado. A identificação de diversos genes, através de similaridade de seqüências, indicou os possíveis mecanismos de patogenicidade da bactéria. Entretanto, a determinação da função de um gene requer a confirmação experimental e, neste aspecto, a expressão heteróloga é uma poderosa ferramenta. X. fastidiosa coloniza somente o xilema das plantas hospedeiras e a identificação putativa de diversos genes semelhantes a enzimas que degradam a parede celular vegetal, estimularam o presente estudo de catacterização destas enzimas. A clonagem da ORF Xf-818 de X. fastidiosa no vetor de expressão pET20b possibilitou a produção da proteína heterologamente em E. coli. O emprego de IPTG a 0,4 mmol L-1 com 12 h a 32°C, possibilitou as melhores condições para E. coli produzir a proteína heteróloga. Clones de E. coli que expressam Xf-818, apresentam atividade celulásica, degradando eficientemente a celulose. A identificação de Xf-818 como uma endoglicanase foi assim confirmada.

Xylella fastidiosa's genome was the first of a plant pathogen to be completely sequenced. Through comparative sequence analysis many genes were identified and, among them, several potentially involved in plant-pathogen interaction. However, the biological role of each gene should be assigned experimentally. On this regard, heterologous protein expression is a powerful tool to produce proteins from such genes, allowing their characterization. X. fastidiosa lives inside xylem vessels and eventually would degrade pit membranes from xylem cells to move radialy into the host. The identification of several putative plant cell wall degrading enzymes on X. fastidiosa genome prompted the assession of the function of such proteins. The open reading frame (ORF) Xf-818 was cloned into expression vector pET20b and E. coli cells harboring such plasmid exhibited cellulase activity. Using IPTG at 0.4 mmol L-1 with a 12 h incubation at 32°C are the best conditions to produce higher amounts of heterologous protein. The enzyme degrades cellulose confirming the endoglucanase activity of Xf-818.