RESUMEN La COVID-19 es una enfermedad infecciosa ocasionada por el virus SARS-CoV-2. La propagación de este virus se produce principalmente a través de gotitas liberadas por la nariz o la boca de una persona infectada. Aunque se han desarrollado vacunas que permiten reducir efectivamente los efectos que esta infección viral provoca, el método más eficaz para contener la propagación del virus son las numerosas pruebas para detectar y aislar los posibles portadores. Sin embargo, el tiempo de respuesta, combinado con el costo de las pruebas reales, hace que esta opción sea poco práctica. Aquí, comparamos algunas metodologías de machine learning para proponer una estrategia confiable para detectar personas positivas a COVID-19 analizando espectros de saliva obtenidos por espectroscopia infrarroja transformada de Fourier (FTIR). Tras analizar 1275 espectros, con 7 estrategias comúnmente empleadas en el área de machine learning, concluimos que un modelo de regresión lineal multivariante (MLMR) resulta ser la mejor opción para identificar posibles infectados. De acuerdo con nuestros resultados, el desplazamiento observado en la región de la amida I del espectro, resulta fundamental y confiable para establecer una frontera a partir del cambio de pendiente que este provoca. Al ser más ágil y económica que la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR), podría aplicarse confiablemente como estrategia preliminar a RT-PCR.

ABSTRACT COVID-19 is an infectious disease caused by the SARS-CoV-2 virus. This virus's spread is mainly through droplets released from the nose or mouth of an infected person. Although vaccines have been developed that effectively reduce the effects that this viral infection causes, the most effective method to contain the virus’s spread is numerous tests to detect and isolate possible carriers. However, the response time, combined with the cost of actual tests, makes this option impractical. Herein, we compare some machine learning methodologies to propose a reliable strategy to detect people positive to COVID-19, analyzing saliva spectra obtained by Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy. After analyzing 1275 spectra, with 7 strategies commonly used in machine learning, we concluded that a multivariate linear regression model (MLMR) turns out to be the best option to identify possible infected persons. According to our results, the displacement observed in the region of the amide I of the spectrum, is fundamental and reliable to establish a border from the change in slope that causes this displacement that allows us to characterize the carriers of the virus. Being more agile and cheaper than reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), it could be reliably applied as a preliminary strategy to RT-PCR.

SUMMARY: The skin cicatrization is a complex and organized process that involves three phases: inflammatory, proliferative, and remodeling. It is essential to analyze this process biomolecularly, in order to investigate and propose new therapeutic strategies that improve the healing or promote regeneration. The objective of this project was to analyze histological and biomolecularly through Fourier Transform infrared microspectroscopy (FTIRM) and its biochemical mapping function, samples of an excisional skin wound, comparing the morphological and spectroscopic changes between healthy skin and scarred skin. An excisional skin wound healing model was standardized using female, NIH strain 8-week-old mice (n = 16), provoking an excisional wound of 1 cm2. Healthy skin (day 0) and scarring skin (day 15 post-injury) were morphometrical, histological, and biomolecularly analyzed by digital picture analysis, histological technique, and FTIRM with its mapping function. The morphometric analysis showed a reduction of the wound area of 87.6 % at day 15 after wound. Histologically, in the scarred skin a thinning of the epidermis was evidenced, besides reduced cellularity in the dermis, granulation tissue formation, and disorganized collagen fibers were observed. Spectroscopically, changes between the study groups were appreciated, mainly in the lipid bands and in the protein region. The calculation of the areas under the curve and the biochemical mapping showed a lower concentration of keratin and collagen in the scarred skin, as well as collagen fibers disorganization. The ability of the FTIRM to accurately characterize biomolecular changes in cicatrization process was demonstrated, such as the amount of keratin, collagen, and the deposition and ordering of the collagen fibers associated with their maturation.

RESUMEN: La cicatrización de la piel es un proceso complejo y organizado que involucra tres fases: inflamatoria, proliferativa y de remodelación. Es indispensable el análisis de este proceso biomolecularmente para investigar y proponer nuevas estrategias terapéuticas que mejoren la cicatrización o promuevan la regeneración. El objetivo de este proyecto fue analizar histológica y biomolecularmente mediante microespectroscopía infrarroja por transformada de Fourier (MFTIR) y su función de mapeo bioquímico, muestras de lesiones excisionales de piel, comparando los cambios morfológicos y espectroscópicos entre piel sana y piel cicatrizada. Se estandarizó un modelo de lesión excisional de piel en ratones hembra de la cepa NIH de 8 semanas de edad (n=16), provocando una herida excisional de 1 cm2. Se analizó piel sana (día 0) y cicatrizada (día 15 post-lesión) morfométrica, histológica y biomolecularmente mediante análisis fotográfico, técnica histológica y MFTIR con su función de mapeo. El análisis morfométrico demostró una reducción del área de la herida en un 87,6 % al día 15 post-lesión. Histológicamente, en la piel cicatrizada se evidenció un adelgazamiento de la epidermis y menor celularidad en la dermis, observándose la formación de tejido de granulación y fibras de colágena desorganizadas. Espectroscópicamente, se apreciaron cambios entre los dos grupos de estudio, principalmente en las bandas de lípidos y en la región de proteínas. El cálculo de las áreas bajo la curva y el mapeo bioquímico mostraron menor concentración de queratina y colágena en la piel cicatrizada, así como desorganización de las fibras de colágena. Se demostró la capacidad de la MFTIR para caracterizar de forma precisa los cambios biomoleculares en la cicatrización, entre ellos la cantidad de queratina, colágena, y el depósito y ordenamiento de las fibras de colágena asociadas a su maduración.

La leucemia linfoide aguda (LLA) es la neoplasia maligna hematológica más común en niños. Se ha podido demostrar un perfil específico de metilación de islas CpG en las regiones promotoras de genes supresores de tumor, que desempeña un papel crítico en el silenciamiento transcripcional y puede ofrecer nuevas opciones de tratamiento. Con el objetivo de determinar este perfil, se analizó el estado de metilación de las islas CpG de la región promotora de cuatros genes supresores de tumor asociados a diferentes etapas del proceso de carcinogénesis, dos p15 y p73 asociados a la regulación del ciclo celular y a la apoptosis y dos E-cadherin y RARβ2, involucrados en la migración y metástasis tumoral. Se analizaron 30 muestras de sangre periférica mediante modificación del ADN con bisulfito sódico y reacción en cadena de la polimerasa específica para metilación y se obtuvo en todos los pacientes, al menos la metilación de un gen (100%) y frecuencias específicas de metilación de 76,67% para el gen p73 (23 pacientes); 56,67% para el p15 (7 pacientes); 16,67% para el E-cadherin (5 pacientes) y 20,0% para el RARβ2 (6 pacientes). La frecuencia de metilación observada en los genes p15 y p73, sugiere el papel importante de esos genes en la patogenia de la LLA y su probable utilidad en el asesoramiento de riesgo y en la selección del tratamiento más adecuado.

Acute lymphocytic leukemia (ALL) is the most common hematologic malignancy in children. A specific methylation profile of CpG islands in the promoter regions of tumor suppressor genes has been demonstrated, which plays a critical role in transcriptional silencing and may offer new treatment options. In order to determine this profile, the methylation status of CpG islands was analyzed in the promoter region of four tumor suppressor genes associated with different stages of carcinogenesis: two associated with the regulation of cell cycle and apoptosis: p15 and p73; and two involved in migration and tumor metastasis: E-cadherin and RARβ2. Thirty peripheral blood samples were analyzed by modification of DNA with sodium bisulfite and chain reaction polymerase specific for methylation. In all patients, the methylation of at least one gene was observed (100%) and additionally, there were specific methylation frequencies of 76.67% for the p73 gene (23 patients); 56.67% for p15 (seven patients); 16.67% for E-cadherin (five patients) and 20.0% for the RARβ2 (six patients). The frequency of methylation observed in p15 and p73 genes suggests the important role of these genes in the pathogenesis of ALL and its usefulness in risk assessment and the selection of the most appropriate treatment.

Resumo: Os perfis protéicos e a atividade proteolítica dos produtos de excreção/secreção (PE/S) das larvas de primeiro (L1), segundo (L2) e terceiro (L3) estágios de Cochliomyia hominivorax foram estudados em laboratório. Os perfis protéicos foram obtidos por eletroforese em géis de poliacrilamida (SDS-PAGE). Os PE/S de cada fase larval (L1, L2 e L3), tratados com inibidores de proteases, contendo 30μg, 40μg e 50μg de proteína, foram aplicados em géis de poliacrilamida a 10%. A atividade proteolítica dos PE/S na sua forma nativa, foi analisada em géis co-polimerizados com gelatina e por testes colorimétricos usando a azocaseína como substrato, com a caracterização das proteases feita por meio de inibidores sintéticos. Diferentes perfis protéicos foram observados para os instares larvais, com L1 apresentando o perfil mais complexo. Apesar disso, foram observadas várias bandas protéicas comuns a todos os estágios larvais. Os PE/S de todos os instares mostraram atividade proteolítica sobre a gelatina, evidenciada por zonas de proteólise, com predominância de massas moleculares aparentes mais altas em L1, enquanto que para L2 e L3 as zonas de proteólise puderam ser observadas também em regiões de menores massas. Os testes com inibidores de proteases usando a gelatina como substrato mostraram que os PE/S de L1, L2 e L3 eram compostos principalmente de serina-proteases. Adicionalmente, inibição foi observada nos PE/S de L2 tratada previamente com EDTA, um inibidor de metalo-proteases. Os ensaios com a zocaseína revelaram um aumento gradual da atividade proteolítica sobre este substrato com o progresso do desenvolvimento larval, com a mais forte inibição sendo observada após o tratamento com 3,4 dicloroisocumarina (DCI) para os PE/S de L1, L2 e L3. Estes resultados sugerem que as larvas de C. hominivorax produzem diferentes proteases, fato que pode estar relacionado a processos vitais para a sobrevivência do parasita, tais como a penetração nos tecidos dos hospedeiros e nutrição durante os estágios larvais.

Abstract: The protein profiles and proteolytic activity of the excretory secretory products (E/SP) of the first (L1), second (L2) and third (L3) larval stages of Cochliomyia hominivorax were studied in the laboratory. Analysis on the E/SP protein profile was carried out using polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). The E/SP of each larval stage (L1, L2 and L3) treated with protease inhibitors, containing 30μg, 40μg and 50μg of protein, was applied to the 10% polyacrylamide gel. The proteolytic activity of the crude E/SP was analyzed in gels copolymerized with gelatin and by colorimetric assays using azocasein as a substrate, with the characterization of the proteases using synthetic inhibitors. Different protein profiles were observed for the larval instars, with L1 presenting the most complex profile. Nevertheless, various protein bands were observed that were common to all the larval instars. The E/SP of all the instars showed proteolytic activity on gelatin, evidenced by proteolysis zones, predominantly with apparently higher molecular masses in L1, while for L2 and L3 the proteolysis zones could also be observed in regions with lower masses. Tests with protease inhibitors using gelatin as substrate showed that the E/SP of larvae were mainly composed of serine proteases. Additionally, inhibition was observed in L2 E/SP treated previously with EDTA, an inhibitor of metalloproteases. The assays with azocasein revealed a gradual increase of proteolytic activity on this substrate with larval development progress, with the strongest inhibitions being observed after treatments with 3,4-dichloroisocoumarin (DCI) for E/SP of L1, L2 and L3. These results suggest that C. hominivorax larvae produce different proteases, a fact that can be related to the parasite's vital processes for survival, such as penetration into the host's tissues and nutrition during the larval stage.

INTRODUÇÃO: Dado o envelhecimento populacional, torna-se relevante avaliar a sobrecarga e a qualidade de vida de quem cuida dos idosos. Essa prática costuma ser árdua. O cuidador precisa acrescentar, às atividades diárias, tarefas referentes ao idoso, expondo-se a um elevado padrão de burden (sobrecarga), ou aspectos negativos associados ao cuidado de dependentes. Isso pode levar a uma piora da qualidade de vida e consequente adoecimento. OBJETIVOS: Avaliar o perfil sóciodemográfico e a relação entre a sobrecarga e a percepção de qualidade de vida de cuidadores de idosos do Núcleo de Atendimento à Terceira Idade do Exército (Natiex). MÉTODOS: 61 participantes foram investigados a partir dos instrumentos WHOQOL-BREF e Zarit Burden Interview. RESULTADOS: Dos 61 cuidadores avaliados, 78,6% eram do sexo feminino, 75,4% filhas, 50,8% casados, 62,3% com mais de 50 anos e 95,1% exerciam a atividade sem remuneração. Foi identificada uma relação estatisticamente significativa entre o aumento da sobrecarga e a piora da percepção de qualidade de vida (p<0,01). CONCLUSÕES: À medida que aumenta a sobrecarga, ocorre uma piora da percepção de qualidade de vida em todos os domínios: relações, psicológico, físico e ambiental (domínio ambiente teve o maior impacto). Os resultados encontrados foram superiores a outras amostras brasileiras, possivelmente pela maior facilidade do militar a recursos de saúde. Grupos de apoio a cuidadores devem ser estimulados como prevenção primária das morbidades relacionadas ao cuidar, tendo em vista a demanda crescente de idosos dependentes em nosso meio.

INTRODUCTION: As population ages, it becomes relevant to assess the burden and quality of life of caregivers of elderly. This practice is often difficult. The caregiver needs to add to daily activities, tasks for the elderly, exposing themselves to a high standard of burden or negative aspects associated with the care for dependents. This can lead to a worsening of quality of life and consequent illness. OBJECTIVES: To evaluate the socio-demographic profile and the relationship between overload and perceived quality of life of caregivers for the elderly at the Elderly Care Army Center (Natiex). METHODS: 61 participants were investigated through the WHOQOL-BREF and Zarit Burden Interview. RESULTS: Of the 61 elderly assessed, 78.6% were women, 75.4% were daughters, 50.8% married, 62.3% aged over 50 years and 95.1% had activities without pay. We identified a statistically significant relationship between increased overburden and worsening perception of quality of life (p<0.01). CONCLUSIONS: As the burden increases, there is a worsening of the perceived quality of life in all areas: relationships, psychological, physical and environmental (environmental domain showed the greatest impact). The results were higher than other Brazilian samples, possibly due to the easier access of militaries to health care. Support groups for caregivers should be encouraged as a primary prevention of health problems related to care, considering the increasing demand of dependent elderly.

The stomatognathic system has been designed to execute a series of functions, being mastication and deglutition the most recognized and proper of the system. However, whatever affectation that can alter its normal functioning is considered a risk fact that could be the results of occlusal conditions, bruxism, stress, traumatisms, parafunctional habits, and others, being its aetiology multifactorial. The Krogh-Paulsen Test includes nine items allowing evaluating the stomatognathic system function and determining the diagnosis on the existence or not of a temporomandibular joint dysfunction, the risk of suffering it and if there is any disturbance in it. Evaluating the association between the temporomandibular dysfunction risk facts and the items of the Krogh- Paulsen Test. We studied 119 patients assisting the Orthodontics consultation suffering temporomandibular dysfunction; clinical oral examination using the Krogh-Paulsen Test was made to them and dental occlusion was analysed. The presence of stress, unilateral mastication and occlusal interferences induced limitations in oral opening, pain and noise in the temporomandibular join. It was stated a direct relation between risk facts and the items of the Krogh-Paulsen Test in the presence of temporomandibular dysfunction.

Introducción: el sistema estomatognático ha sido diseñado para cumplir una serie de funciones, siendo la masticación y deglución las más reconocidas y propias del sistema. No obstante, cualquier afectación que altere su funcionamiento normal se considera un factor de riesgo que pueden ser provocados por condiciones oclusales, bruxismo, estrés, traumatismos, hábitos parafuncionales, entre otros, siendo su etiología multifactorial. El análisis del Test de Krogh Paulsen incluye nueve ítems que permite evaluar la función del sistema estomatognático y determinar el diagnóstico acerca de la existencia o no de disfunción de la articulación temporomandibular, el riesgo de padecerla y si presenta perturbación en la misma. Objetivo: evaluar la asociación entre los factores de riesgo de la disfunción temporomandibular y los ítems del test de Krogh Paulsen. Métodos: se estudiaron 119 pacientes que asistieron a la consulta de ortodoncia aquejados por disfunción temporomandibular; se les realizó examen clínico bucal utilizando el Test de Krogh Paulsen y se analizó la oclusión dentaria. Resultados: la presencia del estrés, masticación unilateral e interferencias oclusales indujeron la limitación en la apertura bucal, dolor y ruidos en la articulación temporomandibular. Conclusiones: se comprobó una relación directa entre los factores de riesgo y los ítems del Test de Krogh Paulsen en la presencia de disfunción temporomandibular.

Moscas hematófagas são importantes parasitas em sistemas de produção animal, especialmente em condições confinamento. Haematobia irritans, a mosca-dos-chifres, é uma das espécies que mais causam problemas em sistemas de produção de bovinos, devido ao intenso estresse que impõe aos animais. H. irritans é um dos parasitas de bovinos que determinam as maiores perdas econômicas, as quais são significativas em muitas partes do mundo, incluindo a América do Sul. No presente trabalho, populações desta espécie provenientes do Brasil, Colômbia e República Dominicana foram estudadas através da análise do DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD) para avaliar basicamente a variabilidade genética entre as populações. Quinze diferentes iniciadores decamétricos aleatórios foram utilizados na amplificação do DNA genômico, produzindo 196 fragmentos nas três populações de H. irritans. Entre as amostras de H. irritans, a população proveniente da Colômbia foi a que produziu o menor número de bandas polimórficas. Esta alta genética homogeneidade pode ser atribuída à sua origem geográfica, provocada pelo grande isolamento e o baixo fluxo gênico, ao contrário das outras populações americanas, Brasil e República Dominicana. Fragmentos marcadores moleculares, que produzem bandas exclusivas, foram detectados em cada amostra, o que permitiu caracterizar a origem das populações, mas tais marcadores também são potencialmente úteis para outras abordagens, tais como a provável origem das populações brasileiras, colombianas e dominicanas na América do Sul. Índices de semelhança produzidos por análise quimiométrica revelaram uma relação mais estreita entre moscas do Brasil e da República Dominicana, enquanto que as moscas da Colômbia apresentaram a maior diferenciação genotípica em relação às outras populações.

Blood-sucking flies are important parasites in animal production systems, especially regarding confinement conditions. Haematobia irritans, the horn fly, is one of the most troublesome species within bovine production systems, due to the intense stress imposed to the animals. H. irritans is one of the parasites of cattle that cause significant economic losses in many parts of the world, including South America. In the present work, Brazilian, Colombian and Dominican Republic populations of this species were studied by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) to assess basically genetic variability between populations. Fifteen different decamer random primers were employed in the genomic DNA amplification, yielding 196 fragments in the three H. irritans populations. Among H. irritans samples, that from Colombia produced the smallest numbers of polymorphic bands. This high genetic homogeneity may be ascribed to its geographic origin, which causes high isolation, low gene flow, unlike the other American populations, from Brazil and Dominican Republic. Molecular marker fragments, which its produced exclusive bands, detected in every sample enabled the population origin to be characterized, but they are also potentially useful for further approaches such as the putative origin of Brazilian, Colombian and Dominican Republic populations of horn fly from South America. Similarity indices produced by chemo metric analysis showed the closest relationships between flies from Brazil and Dominican Republic, while flies from Colombia showed the greatest genotypic differentiation relative to the others populations.

Dípteras hematófagos são importantes parasitas dentro de sistemas de produção de bovinos, especialmente em confinamento. Haematobia irritans, a mosca-dos-chifres, é uma das espécies que maiores problemas causa em sistemas de produção de bovinos, dado ao intenso estresse que impõe aos animais. Um importante aspecto quando se estuda a variabilidade genética dentro das espécies é o estudo da estrutura geográfica destas populações. Buscando-se estimar a similaridade genotípica das diferentes populações brasileiras da mosca do chifre utilizou-se a técnica do DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD-PCR), que mostrou-se eficiente para tal propósito. A utilização dos marcadores moleculares gerados através da técnica de RAPD-PCR tornou possível a identificação da origem geográfica das amostras das diferentes regiões geográficas brasileiras, assim como, estimar o fluxo genotípico entre as diferentes populações brasileiras da mosca-dos-chifres.

Blood-sucking diptera are important parasites in bovine production systems, especially regarding confinement conditions. Haematobia irritans, the horn fly, is one of the most troublesome species within bovine production systems, due to the intense stress imposed to the animals. An important aspect while studying the variability within a species is the study of the geographic structure of its populations and, attempting to find out the genetic flow of Brazilian populations of horn fly, the RAPD technique, which is suited for this purpose, has been used. The use of molecular markers generated from RAPD made it possible to identify the geographic origin of samples from different Brazilian geographic regions, as well as to estimate the genotypic flow among the different Brazilian populations of the horn fly.

An ELISA sandwich for the detection of Giardia lamblia antigens in human faeces was standardized. 175 samples were studied: 77 positive, 61 negative to cysts and/or trophozoites by direct faeces test, and 19 positive to other parasite different from G. lamblia. The sensitivity of the technique was 94,8 % and the specificity 98,3 %. The method detects an antigen concentration of 31 ng. The procedure is simple, sensitive and specific so, it may be useful for diagnosis and in epidemiological studies.

Se normalizó un sandwich ELISA para la detección de antígenos de Giardia lamblia en heces humanas. Se estudiaron 175 muestras: 77 positivas, 61 negativas a quistes y/o trofozoítos por el examen directo de las heces y 19 muestras positivas a otros parásitos diferentes de G. lamblia. La sensibilidad de la técnica fue de 94,8 % y la especificidad de 98,3 %; el método detecta una concentración de antígenos de 31 ng. El procedimiento es simple, sensible y específico, por lo que pudiera ser útil para el diagnóstico y en estudios epidemiológicos.