Este trabalho descreve a padronização de metodologia de análise CLAE para identificação e separação dos aminoácidos glicosilados (blocos de construção) 3, 4, 7 e 8, e seus respectivos precursores. Os aminoácidos glicosilados, contendo unidades de açúcar beta-D-GlcNAc (3 e 7) O-ligadas a aminoácidos de treonina estão envolvidos em eventos de sinalização celular, e os correspondentes isômeros 4 e 8, contendo unidades de alfa-D-GlcNAc, estão relacionados a O-glicanas encontradas em mucinas do parasita Trypanosoma cruzi. A metodologia desenvolvida é vantajosa e eficiente, pois permite a análise de misturas reacionais brutas, evitando exaustivos processos de purificação.

This work describes the standardization of HPLC analysis methodology for the identification and separation of the glycosylated amino acids (building blocks) 3, 4, 7 and 8 and their respective precursors. The glycosylated amino acids containing the sugar units beta-D-GlcNAc (3 and 7) O-linked to threonine amino acids are involved in cellular signalling events, and the correspondent isomers 4 and 8, possessing alpha-D-GlcNAc units are related to O-glycans found in mucins of the parasite Trypanosoma cruzi. The developed methodology is advantageous and efficient as it permits the analysis of crude reaction mixtures, avoiding exhaustive purification processes.

Sete dicetopiperazinas, correspondentes aos ciclos (L)-Pro-(L)-Phe, (L)-Pro-Gly, (L)-Pro-(L)-Pro, (L)-Pro-(L)-Val, (L)-4-OH-Pro-(L)-Leu, (L)-4-OH-Pro-(L)-Phe e (L)-Pro-(L)-Leu, foram isoladas do caldo da cultura do fungo Aspergillus fumigatus. As estereoquímicas relativas e absolutas foram determinadas, respectivamente, com base nos experimentos de NOESY e através de modificação do método de Marfey em CLAE.

Seven diketopiperazines, corresponding to the cyclos (L)-Pro-(L)-Phe, (L)-Pro-Gly, (L)-Pro-(L)-Pro, (L)-Pro-(L)-Val, (L)-4-OH-Pro-(L)-Leu, (L)-4-OH-Pro-(L)-Phe, and (L)-Pro-(L)-Leu, were isolated from the Aspergillus fumigatus fermentation broth. The relative and absolute stereochemistries were determined on the basis of NOESY experiments and by using a modified version of Marfey's method using HPLC, respectively.