Resumo A microtomografia computadorizada segue o mesmo princípio da tomografia computadorizada utilizada para avaliação dos pacientes, mas neste caso, é empregada para pequenas amostras com alta resolução. De forma não destrutiva, as amostras podem ser escaneadas, e cada fatia obtida é organizada de forma seriada para formar um volume tridimensional (3D). Para análise óssea, é possível obter informações de microarquitetura e composição mineral, permitindo avaliação distinta entre diferentes sítios. De acordo com as características de cada amostra óssea, como amostras de humanos, animais, ossos longos ou achatados, epífise ou diáfise, etc, devem ser definidos os parâmetros pré-escaneamento com a resolução desejada, levando em consideração quais informações serão extraídas da avaliação. Depois do escaneamento e da reconstrução, deve-se proceder com a seleção da região de interesse (ROI), e depois seguir com o processo de binarização, que se caracteriza pela escolha de um limiar que define os voxels que compõem a região de osso e àqueles que compõem a região dos buracos (canais, áreas de reabsorção e espaço medular). No osso trabecular e no reparo os parâmetros avaliados se baseiam nas características das trabéculas e sua conectividade. No osso cortical os parâmetros estão relacionados com a espessura e porosidade. Além dos parâmetros de microarquitetura, também é possível avaliar a densidade mineral óssea, calculada por volume de hidroxiapatita. Outros parâmetros também podem ser mensurados, utilizando técnicas computacionais como a análise de textura. Parâmetros intrínsecos e extrínsecos da qualidade óssea podem ser avaliados pela microtomografia computadorizada. Na odontologia, este método pode ser empregado em estudos que objetivem avaliar doenças, alterações metabólicas e medicamentos com repercussão no metabolismo ósseo, e na avaliação do processo de reparo e de técnicas cirúrgicas.

Abstract Micro computed tomography (µCT) follows the same principle of computed-tomography used for patients, however providing higher-resolution. Using a non-destructive approach, samples can be scanned, and each section obtained is used to build a volume using tridimensional reconstruction. For bone analysis, it is possible to obtain information about the tissue’s microarchitecture and composition. According to the characteristics of the bone sample (e.g. human or animal origin, long or irregular shape, epiphysis or diaphysis region) the pre-scanning parameters must be defined. The resolution (i.e. voxel size) should be chosen taking into account the features that will be evaluated, and the necessity to identify inner structures (e.g. bone channels and osteocyte lacunae). The region of interest should be delimited, and the threshold that defines the bone tissue set in order to proceed with binarization to separate the voxels representing bone from the other structures (channels, resorption areas, and medullary space). Cancellous bone is evaluated by means of the trabeculae characteristics and their connectivity. The cortex is evaluated in relation to the thickness and porosity. Bone mineral density can also be measured, by the amount of hydroxyapatite. Other parameters such as structure-model-index, anisotropy, and fractal dimension can be assessed. In conclusion, intrinsic and extrinsic determinants of bone quality can be assessed by µCT. In dentistry, this method can be used for evaluating bone loss, alterations in bone metabolism, or the effects of using drugs that impair bone remodeling, and also to assess the success rate of bone repair or surgical procedures.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar modificações nas superfícies radiculares sofridas pela aplicação de diferentes agentes químicos, e sua influência sobre a rede de fibrina e adesão de fibroblastos. A partir de 96 incisivos inferiores humanos, 192 blocos de dentina das superfícies vestibular e lingual foram obtidos e divididos aleatoriamente em 6 grupos: Cont-grupo controle, não recebeu nenhum tratamento; Raspagem e alisamento radicular (RAR); Ácido cítrico-SRP; EDTA-SRP; Tetraciclina em cápsula-SRP; Tetraciclina gel-SRP. Após o tratamento da dentina as espécimes foram analisadas: 1, nível de desmineralização e resíduos do produto por microscopia eletrônica de varredura (MEV); 2, adesão dos componentes sanguineos após 20 min na tratamento de superfície por SEM; 3, adesão de fibroblastos após 24h por SEM; 4, o metabolismo celular após 24 h por ensaio MTT. Os dados foram analisados por Fisher Exact, teste one-way ANOVA, seguido pelo teste de Dunn, teste de Tukey e teste de Dunnett (α = 0,05). O ácido cítrico, EDTA e gel tetraciclina resultaram na adequada desmineralização sem remoção completa de camada de smear layer e smear plug sobre a superfície da dentina radicular. Cápsula de tetraciclina produziu grandes resíduos de tetraciclina com várias áreas de desmineralização. Os grupos Gel de tetraciclina e EDTA apresentaram maior adesão de fibroblastos do que os demais grupos experimentais. O maior score de adesão de coágulo sanguineo foi observado nas superfícies tratadas com gel de tetraciclina. EDTA e Gel de tetraciclina removeram a camada de smear layer sobre a superfície da dentina e promoveu adesão da rede de fibrina e de fibroblastos.

Abstract The aim of this study was to evaluated the root surfaces modifications resulted by application of different chemicals agents, and their influence on the fibrin network and fibroblasts attachment. From 96 anterior mandibular human extracted incisor teeth, 192 dentin blocks of buccal and lingual surface were obtained and randomly divided into 6 groups: Cont- control group, which received no treatment; Root surface scaling and root planing (Srp); Citric acid-Srp; EDTA-Srp; Tetracycline capsule-Srp; Tetracycline gel-Srp. After dentin treatments the specimens were analyzed as follows: 1) demineralization level and residues of the product by scanning electron microscopy (SEM); 2) adhesion of blood components after 20 min of surface treatment by SEM; 3) fibroblast attachment after 24 h by SEM; 4) cell metabolism after 24 h by MTT assay. Data were analyzed using Fisher Exact, One-way ANOVA test followed by Dunn's test, Tukey test and Dunnett test (α=0.05). Citric acid, EDTA and Tetracycline gel resulted in adequate demineralization with no completely smear layer and smear plug removal on root dentin surface. Tetracycline capsule produced great tetracycline residues with several demineralization areas. Tetracycline gel and EDTA groups presented more fibroblast fixation than other experimental groups. The highest mean blood clot adhesion score was observed in roots treated with tetracycline gel. EDTA and Tetracycline gel surface treatment removed the smear layer over dentin surface and promoted adhesion of fibrin network and fibroblast cells attachment.

ResumoObjetivoAvaliar o desempenho biológico de ligas de titânio grau IV submetidos a diferentes tratamentos de superfície – jateamento e duplo ataque ácido (Superfície experimental 1; Exp1, NEODENT) e superfície com aumento na molhabilidade (Superfície experimental 2; Exp2, NEODENT) em resposta preliminar de diferenciação e maturação celular.Material e métodoForam plaqueados osteoblastos imortalizados sobre discos de titânio de Exp1 e Exp2 e como controle o poço da placa de cultura sem disco (C). Empregou-se ensaios de viabilidade celular (MTT) em 4 e 24 horas (n = 5), adesão celular em 4 horas (n = 5), dosagem de proteínas totais e fosfatase alcalina normalizada em 4, 7 e 14 dias (n = 5). Os dados foram analisados por ANOVA em fator único seguido de teste de Tukey.ResultadoOs valores de viabilidade celular foram: 4h: C– 0,32±0,01A; Exp1 – 0,34±0,08A; Exp2– 0,29±0,03A. 24h: C– 0,43±0,02A; Exp1– 0,39±0,01A; Exp2– 0,37±0,03A. A contagem de adesão celular foi: C– 85±10A; Exp1– 35±5B; Exp2– 20±2B. Os valores de proteínas totais foram: 4d: C– 40±2B; Exp1– 120±10A; Exp2– 130±20A. 7d: C– 38±2B; Exp1– 75±4A; Exp2– 70±6A. 14 d: C– 100±3A; Exp1– 130±5A; Exp2– 137±9A. Os valores de fosfatase alcalina normalizada foram: 4d: C– 2,0±0,1C; Exp1– 5,1±0,8B; Exp2– 9,8±2,0A, 7d: C– 1,0±0,01C; Exp1– 5,3±0,5A; Exp2– 3,0±0,3B, 14 d: C– 4,1±0,3A; Exp1– 4,4±0,8A; Exp2– 2,2±0,2B. Letras diferentes representam diferenças estatísticas.ConclusãoAs superfícies testadas apresentaram comportamento diferenciado na dosagem de fosfatase alcalina normalizada traduzindo que Exp2 está relacionado com processo de indução de diferenciação celular e Exp1 relacionado com processo de mineralização.

AbstractObjectiveEvaluate the biological performance of titanium alloys grade IV under different surface treatments: sandblasting and double etching (Experimental surface 1; Exp1, NEODENT); surface with wettability increase (Experimental surface 2; Exp2, NEODENT) on response of preliminary differentiation and cell maturation.Material and methodImmortalized osteoblast cells were plated on Exp1 and Exp2 titanium discs. The polystyrene plate surface without disc was used as control group (C). Cell viability was assessed by measuring mitochondrial activity (MTT) at 4 and 24 h (n = 5), cell attachment was performed using trypan blue exclusion within 4 hours (n = 5), serum total protein and alkaline phosphatase normalization was performed at 4, 7 and 14 days (n = 5). Data were analyzed using one-way ANOVA and Tukey test.ResultThe values of cell viability were: 4h: C– 0.32±0.01A; Exp1– 0.34±0.08A; Exp2– 0.29±0.03A. 24h: C– 0.43±0.02A; Exp1– 0.39±0.01A; Exp2– 0.37±0.03A. The cell adhesion counting was: C– 85±10A; Exp1- 35±5B; Exp2– 20±2B. The amounts of serum total protein were 4d: C– 40±2B; Exp1– 120±10A; Exp2– 130±20A. 7d: C– 38±2B; Exp1– 75±4A; Exp2– 70±6A. 14 d: C– 100±3A; Exp1– 130±5A; Exp2– 137±9A. The values of alkaline phosphatase normalization were: 4d: C– 2.0±0.1C; Exp1– 5.1±0.8B; Exp2– 9.8±2.0A. 7d: C– 1.0±0.01C; Exp1– 5.3±0.5A; Exp2– 3.0±0.3B. 14 d: C– 4.1±0.3A; Exp1– 4.4±0.8A; Exp2– 2.2±0.2B. Different letters related to statistical differences.ConclusionThe surfaces tested exhibit different behavior at dosage of alkaline phosphatase normalization showing that the Exp2 is more associated with induction of cell differentiation process and that Exp1 is more related to the mineralization process.

Devido ao papel crítico dos monócitos / macrófagos (Mϕ) na cicatrização óssea, este estudo avaliou os efeitos de superficies de titânio (Ti) bio-anodizada, ataque ácido e usinada sobre o comportamento Mϕ. As células foram separadas a partir de sangue humano de 10 pacientes, plaqueadas em Ti ou superfícies de poliestireno (controle), e cultivadas durante 72 h. Às 24, 48 e 72 h, a viabilidade celular e IL1β, IL10, TNFα, TGFβ1 e liberação de óxido nítrico foram analisados por ensaio colorimétrico mitocondrial (MTT) e ensaios imunoenzimáticos, respectivamente. PCR em tempo real foi utilizado para verificar a expressão de TNFα e IL-10 às 72 h. Os dados foram submetidos a uma análise de Kruskal-Wallis. IL1β autorização, TNFα e TGFβ1, não foram significativamente diferentes entre as superfícies de Ti (p>0,05). A presença de NO e de IL-10 não foi detectada nas amostras. A viabilidade celular não diferiu entre as amostras cultivadas em Ti e aquelas cultivadas em superfícies de controle, exceto às 24 h (p=0,0033). No que diz respeito aos mediadores avaliados, as características da superfície, não induziu resposta típica de citocinas Th1 ou Th2, embora a morfologia da célula e a topografia foram influenciadas pela superfície de Ti, durante o período inicial.

Due to the critical role of monocytes/macrophages (Mϕ) in bone healing, this study evaluated the effects of bio-anodized, acid-etched, and machined titanium surfaces (Ti) on Mϕ behavior. Cells were separated from whole human blood from 10 patients, plated on Ti or polystyrene (control) surfaces, and cultured for 72 h. At 24, 48 and 72 h, cell viability, levels of IL1β, IL10, TNFα, TGFβ1 inflammatory mediators, and nitric oxide (NO) release were analyzed by mitochondrial colorimetric assay (MTT assay) and immunoenzymatic assays, respectively. Real-time PCR was used to verify the expression of TNFα and IL10 at 72 h. The data were subjected to a Kruskal-Wallis analysis. IL1β, TNFα and TGFβ1 release were not significantly different between the Ti surfaces (p>0.05). The presence of NO and IL10 was not detected in the samples. Cell viability did not differ between the samples cultivated on Ti and those cultivated on control surfaces, except at 24 h (p=0.0033). With respect to the mediators evaluated, the surface characteristics did not induce a typical Th1 or Th2 cytokine profile, although the cell morphology and topography were influenced by the Ti surface during the initial period.

Não existem estudos que avaliem a utilização de imunoglobulina A1 (IgA1) como marcador precoce da inflamação peri-implantar. O objetivo deste estudo foi avaliar os níveis de IgA1 do fluido sulcular peri-implantar (PISF) e saliva de pacientes parcialmente desdentados como indicador da mucosite. Vinte e sete pacientes foram examinados para determinar a condição peri-implantar com base na profundidade de sondagem e sangramento à sondagem. Saliva e PISF ao redor de implantes dentários foram coletados e os níveis IgA1 foram avaliados pelo teste Elisa. IgA1 na saliva e PISF destes pacientes foram comparados e suas correlações com parâmetros clínicos foram avaliados. Não foram observadas diferenças nos níveis de IgA1 (821,1 ± 290,6; 779,8 ± 401,5) na saliva e PISF (26,6 ± 20,7; 25,1 ± 20,5) de grupos saudáveis e mucosite, respectivamente (p>0,05). Correlação entre os parâmetros clínicos e IgA1 na saliva ou PISF não foi observada em grupos saudáveis ou mucosite (p=0,607; p=0,826, respectivamente). Estes resultados demonstraram que IgA1 não pode ser utilizada como marcador imunológico da mucosite.

There are no studies evaluating the possible use of immunoglobulin A1 (IgA1) as an early marker for peri-implant inflammation. The aim of this study was to evaluate the IgA1 levels in peri-implant sulcular fluid (PISF) and saliva of partially edentulous patients as an indicator of mucositis. Twenty-seven patients were examined to determine the peri-implant status based on probing depth and bleeding on probing. Saliva and PISF around dental implants were collected and the IgA1 levels were evaluated by Elisa assay. IgA1 in saliva and PISF of these patients were compared and their correlations with clinical parameters were evaluated. Differences in IgA1 levels in saliva (821.1 ± 290.6; 779.8 ± 401.5) and PISF (26.6 ± 20.7; 25.1 ± 20.5) of healthy and mucositis groups, respectively were not observed (p>0.05). Correlation between clinical parameters and IgA1 in saliva or PISF was not observed in healthy or mucositis groups (p=0.607; p=0.826, respectively). These results suggest that IgA1 cannot be used as an immunological marker of mucositis.

INTRODUÇÃO: O reparo ósseo de grandes defeitos é um grande desafio para a cirurgia reconstrutora atualmente. OBJETIVO: O objetivo desse estudo foi realizar avaliação histológica do reparo ósseo em calvária de coelhos depois do uso de enxerto ósseo bovino (Gen-ox-organic®) associado a plasma rico em plaquetas (PRP). MÉTODO: Foram utilizados 12 coelhos, e dois fragmentos ósseos foram removidos da calvária bilateralmente. Então 24 sítios cirúrgicos foram aleatoriamente separados em 3 grupos: coágulo (grupo I), orgânico (grupo II) e orgânico com PRP (grupo III). Depois de quatro semanas, os animais foram sacrificados e a área enxertada foi removida, fixada em formol a 10%, em PBS 0,1M e incluídas em parafina. RESULTADOS: Os parâmetros histológicos analisados foram: área do defeito preenchida com osso neoformado, presença de células gigantes e partículas do enxerto, e neoformação óssea associada com as partículas. Os defeitos do grupo I foram preenchidos com tecido fibroso que condicionou o periósteo e apresentou uma pequena formação óssea na periferia. Nos grupos II e III, um padrão semelhante foi observado e também ausência de partículas do enxerto e células gigantes. Não houve diferença significativa no número de células gigantes, partículas do enxerto e neoformação óssea em volta das partículas entre o material enxertado e o grupo com PRP associado. CONCLUSÃO: Os resultados obtidos indicam que o biomaterial orgânico isolado ou em associação com o PRP não melhoraram a regeneração óssea.

INTRODUCTION: The osseous repairing in big imperfections is a great challenge for the restored surgery in nowadays. OBJECTIVE: The objective of this study was to make an histological evaluation of the osseous restore in rabbit's calvaria after the bovine osseous graft's (Gen-ox-organic®) usage associated with plasma rich in platelet (PRP). METHOD: It was used 12 rabbits and 02 osseous fragments were removed from bilaterally calvarium. So among 24 surgical sites were randomly, divided in 03 groups: coagulum (group I), organic (group II) and organic with PRP (group III). After 04 weeks the animals were sacrificied and the grafted area was removed, fixed in formaldehyde at 10% in PBS 0,1M and included in paraffin. RESULTS: The histologic parameters analysed were: imperfection area filled up with neoformed, gigantic cells and graft's particles, and osseous neoformation associated with the particles. The group's I imperfections were filled up with fibrous tissue that conditioned the periosteum and presented a small osseous formation in the perimeter. In groups II and III, a similar pattern was observed and also with graft's particles and gigantic cell's absence. There was no significative difference in gigantic cells, graft's particles and neoformation's numbers around the particles between the grafted material and the group with PRP associated. CONCLUSION: The obtained results show that the isolated organic biomaterial or in association with PRP did not improve the osseous regeneration.

O objetivo deste estudo foi avaliar a microinfiltração em restaurações diretas e indiretas em resina composta por meio de estereomicroscopia e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Trinta incisivos bovinos foram lixados de forma a produzir uma plataforma incisal, simulando a face oclusal de um molar humano. Cada dente recebeu dois preparos proximais com 8º e término cervical em esmalte ou dentina. Uma cavidade foi restaurada pela técnica direta com Filtek Z250/Single Bond, e a outra pela técnica indireta com Solidex/RelyX ARC/Single Bond. As amostras foram armazenadas em água a 37°C por 24 horas e então imersas em solução de 50% de nitrato de prata por 6 horas em recipiente escuro. As amostras foram lavadas em água corrente, imersas em solução reveladora e expostas à luz fluorescente por 12 horas. Os dentes foram seccionados para avaliação da penetração do marcador em lupa estereoscópica e MEV. Não houve diferença entre as técnicas direta e indireta para o término em esmalte, porém, para o término em dentina, a técnica indireta resultou em menor infiltração. MEV mostrou infiltração similar à da lupa estereoscópica. A análise por meio de lupa estereoscópica e MEV melhora a avaliação da microinfiltração.

The aim of this study was to evaluate the microleakage of direct and indirect composite inlays by stereomicroscopy and scanning electron microscopy (SEM). Thirty bovine incisors were ground to obtain an incisal platform, simulating the occlusal surface of a human molar. Each tooth received two 8° proximal cavities with cervical finishing line prepared in dentine or enamel. One of the cavities was filled with Filtek Z250/Single Bond, using the direct technique, and the other was filled with with Solidex/Rely X ARC/Single Bond, using the indirect technique. The samples were stored in water at 37°C for 24 hours and placed in a 50% silver nitrate solution for 6 hours in a dark container. Next, the samples were washed under running water, immersed in a developing solution and exposed to fluorescent light for 12 hours. The teeth were then severed and evaluated for dye penetration by stereomicroscopy and SEM. There were no significant differences between the direct and indirect techniques for the cervical finishing line in enamel, but for the finishing line in dentin, the indirect technique allowed less microleakage than the direct technique. SEM analysis showed leakage similar to that observed by stereomicroscopic analysis. The use of stereomicroscopic and SEM evaluations improves microleakage analysis.