Molecular mimicry has been associated with chronicity of parasitic infections. This mechanism can be due to absorption of the host's molecules or to synthesis of similar molecules. P1 has been detected in various parasite species. Previous experiences have shown P1 epitopes in Ascaris lumbricoides's adult parasites. The aim of this study was to analyse absoption of these epitopes by nematode larvae in order to determine the mechanism by which the parasite can express these antigens on their cuticle. Larvae were hatched from the faeces with helminth eggs. Larvae were cultivated in RPMI medium with P1 red cells. The Quantitative Inhibition Agglutination Test was performed using 4 anti- P1 monoclonal antibodies. P1 fresh red cells in bromelin enzymatic medium was used as revealing system. Simil P1 excretory-secretory products were investigated using larvae cultivated in RPMI medium without P1 erythrocytes by the same technique. The larvae which were cultivated with red cells inhibited the agglutination between all anti- P1 monoclonal antibodies and P1 erythrocytes. Simil P1 excretory-secretory products were not identified. It was demonstrated that A. lumbricoides larvae absorb P1 epitopes from the culture medium. It can be concluded that the parasite can absorb this antigen during its life cycle in order to use it in molecular mimicry.

El mimetismo molecular se ha asociado con la cronicidad de las infecciones parasitarias. Este mecanismo puede deberse a absorción de moléculas del hospedador o a síntesis de moléculas similares. P1 ha sido detectado en diversas especies parásitas. Experiencias previas han demostrado epitopes P1 en ejemplares adultos de Ascaris lumbricoides. El objetivo de este trabajo fue estudiar la absorción de estos epitopes por estadios larvales del nematodo, a los fines de determinar el mecanismo de expresión de estos antígenos sobre la cutícula parasitaria. Las larvas fueron eclosionadas a partir de heces con huevos de este helminto. Fueron cultivadas en medio RPMI con eritrocitos P1. Se realizó la Técnica de Inhibición de la Aglutinación Semicuantitativa usando cuatro anticuerpos monoclonales anti-P1. El sistema revelador fue una suspensión de eritrocitos frescos P1 en medio enzimático de bromelina. Se investigaron por la misma técnica productos de excreción-secreción símil P1 usando larvas cultivadas en medio RPMI en ausencia de eritrocitos P1. Las larvas cultivadas con glóbulos rojos inhibieron la aglutinación de todos los anticuerpos monoclonales con los eritrocitos P1. No se identificaron productos de excreción- secreción símil P1. Se ha demostrado que las larvas de A. lumbricoides absorben epitopes P1 del medio de cultivo. Se concluye que el parásito puede absorber este antígeno durante su ciclo de vida para usarlo en el mimetismo molecular.

Hyaluronic acid (HA) particípales in the immune response because it is a constituent of natural mechanical barriers, an inflammation stimulator and a ligand for receptors involved in immunity. Previous experiences have shown that adult specimens and larval concéntrales oí A. lumbricoides have hyaluronan binding capacity. The aim ofthis work was to study the kinetics ofhyaluronic acid capture by this parasite. Work was carried out with an extract of adult specimen and a larval concéntrate. The modlfled test of serum soluble CD44 Detectlon by Aggregatlon Inhlbltlon was used. Kinetics hyaluronlc acid capture by the nematode was assessed by varylng the contad time between HA and parasite, from an initial time to 90 minutes, with 10-minute intervals. CexpAdhE HA ana lexpCP HA were calculated for all the times and they were analysed by Wilcoxon and Friedman Tests The results showed that at initial time of contad, the adult paraslte and the larvae had captured a small amount of HA. The major capture was made at 10 minutes and it was maintained for 50 minutes without significad differences. From that time there was a slight increase in capture and it remaíned so untíi the end of the experiment without considerable variations. This experience demonstrates that at 10 minutes of in vitro contad, A. lumbricoides captures most of the HA, whích suggests that in vivo, the parasite would be able to capture HA quickly for the purpose of modulating the immune response.

El ácido hialurónico (AH) participa de la respuesta inmune porque es un constituyente de las barreras mecánicas naturales, un estimulador de la inflamación y un ligando de receptores involucrados en la inmunidad. En experiencias previas se demostró que adultos y larvas de Ascaris lumbricoides pueden unir AH. El objetivo de este trabajo fue estudiar la cinética de captación de AH por este nematodo. Se trabajó con un extracto de parásito adulto y un concentrado de larvas. Se utilizó la técnica modificada de Inhibición de la Agregación por Adhesión para detección del receptor CD44 soluble de hialuronato. Se evaluó la cinética de captación de AH por el parásito, variando el tiempo de contacto entre ambos desde un tiempo inicial hasta 90 minutos, con intervalos de 10 minutos. Para todos los tiempos se calcularon los valores de CexpAdhE AH e IexpCP AH que fueron analizados por las pruebas de Wilcoxon y de Friedman. Los resultados mostraron que al tiempo inicial de contacto, el parásito adulto y las larvas captan una pequeña cantidad de AH. A los 10 minutos se produjo la mayor captación que se mantuvo sin diferencias significativas durante 50 minutos. A partir de ese tiempo, hubo un leve incremento en la captación que permaneció sin diferencia significativa hasta el tiempo final. Esta experiencia demuestra que in vitro, A. lumbricoides realiza la mayor captación a los 10 minutos de contacto, por lo que se sugiere que in vivo sería capaz de unir AH rápidamente a los fines de modular la respuesta inmune.

Hyaluronan Acid (HA) has important functions in immunity. Previous experiences have shown that A. lumbricoides's extracts of adult specimens and larval concentrates have hyaluronan binding capacity. The aim of this study was to analyse the HA capture by this helminth. Three extracts of adult specimens ([AE]B,C,D) and 3 larval concentrates ([ALLC1]: 1100 to 1200 larvae/ mL; [ALLC2]: 400 to 600 larvae/ mL and [ALLC3]: 100 to 200 larvae/ mL) were studied. The modified test of serum soluble CD44 Detection by Aggregation Inhibition was used. CexpAdhE AH was defined as the quotient between erythrocytes adhered by the HA in presence and in absence of the parasite, and IexpCP AH was defined as the amount of erythrocytes that stopped adhering due to the HA capture by the parasite in relation to the total number of erythrocytes. The results showed significant differences in CexpAdhE AH and IexpCP AH as the result of larvae concentration and of the extracts. The arithmetic means of CexpAdhE AH and IexpCP AH for the larvae were 0.636 and 0.21 ([ALLC1]); 0.819 and 0.068 ([ALLC2]); 0.97 and 0.013 ([ALLC3]). Medians of CexpAdhE AH and IexpCP AH for the extracts were [EA]C:0.275 and 0.4; [EA]B: 0.20 and 0.43; [EA]D: 0.075 and 0.495. From the experience, it could be assumed that the parasite can capture the HA to interfere in the host's immune response.

El ácido hialurónico (AH) tiene importantes funciones en la inmunidad. En experiencias previas se demostró que extractos de adultos de A. lumbricoides y concentrados larvarios, tienen capacidad de unión a AH. El objetivo de este trabajo fue estudiar la captación de AH por este helminto. Se trabajó con tres extractos del parásito adulto ([EA]B,C,D) y 3 concentrados de larvas ([CLAL1]: 1100 a 1200 larvas/ mL; [CLAL2]: 400 a 600 larvas/ mL y [CLAL3]: 100 a 200 larvas/ mL). Se empleó la técnica modificada de Inhibición de la Adhesión para detección del Receptor CD44 soluble de hialuronato en suero humano. Se definió CexpAdhE AH como el cociente entre los eritrocitos adheridos por el AH en presencia y ausencia del parásito y se definió IexpCP AH, como la cantidad de eritrocitos que se dejaron de adherir debido a la captación de AH por el parásito, referido al número total de eritrocitos. Los resultados mostraron diferencias significativas en CexpAdhE AH y en IexpCP AH, por efecto de la concentración larvaria y del [EA]. Las medias aritméticas de CexpAdhE AH y de IexpCP AH para los concentrados larvarios fueron 0,636 y 0,21 ([CLAL1]); 0,819 y 0,068 ([CLAL2]); 0,97 y 0,013 ([CLAL3]). Las medianas de CexpAdhE AH y de IexpCP AH para los extractos fueron [EA]C 0,275 y 0,4; [EA]B: 0,20 y 0,43; [EA]D: 0,075 y 0,495. La experiencia permitiría suponer que el parásito puede captar AH para interferir en la respuesta inmune del hospedador.

The aim of this work was to study the relationship between serum sialic acid (SSA) and erythrocyte anionic charge (EAC) with erythrocyte aggregation in two groups: diabetic (DBT, n=20) and hypertensive (HT, n=21) patients, compared to a control group (n=20). We worked with anticoagulated blood with EDTA and serum. The erythrocyte aggregation was studied by microscopically observing and quantifying aggregates using an ASP (Aggregate Shape Parameter). The EAC was determined by binding an Alcian blue dye to the membrane sialic acid and SSA was determined by spectrophotometric method with an Erlich reactant. The values of ASP and SSA increased significantly in HT and DBT patients compared to the control group. The HT and DBT groups showed amorphous aggregates, evident in an alteration in the values of ASP, which were significantly higher ( p< 0.005) than in healthy patients. The EAC values were much lower in HT and DBT patients than in the control group (p < 0.0001). In this work, abnormalities in the erythrocyte aggregation could be detected by the values of ASP, EAC and SSA, which might be involved in vascular disorders of diseases such as hypertension and diabetes.

El objetivo de este trabajo fue estudiar la relación del ácido siálico sérico (AS) y la carga aniónica eritrocitaria (CAE) con la agregación eritrocitaria en dos grupos de pacientes: diabéticos (DBT n= 20) e hipertensos (HTA n= 21), comparados con un grupo control (n= 20). Se trabajó con sangre anticoagulada con EDTA y suero. La agregación eritrocitaria se estudió por observación microscópica de los agregados y cuantificación a través de un parámetro de forma denominado ASP (Aggregation Shape Parameter). La CAE se determinó por unión a colorante alcian blue y el AS por método espectrofotométrico con reactivo de Erlich. Los valores de ASP y AS resultaron significativamente aumentados en los HTA y DBT respecto de los normales. Los HTA y DBT presentaron agregados amorfos, lo que se refleja en los valores alterados de ASP, significativamente mayores (p < 0.005) respecto de los individuos normales. Los valores de CAE resultaron significativamente inferiores en los HTA y DBT respecto del grupo control (p < 0.0001). En este trabajo se demostraron anormalidades en la agregación eritrocitaria, detectadas por los valores de ASP, CAE y AS que podrían estar involucradas en las complicaciones vasculares de vasculopatías como la hipertensión y la diabetes.

Polycation - polyethylenglycol copolymers (Semo B86 and Semo B124) were developed for therapeutic uses, especially for the masking of antigenic sites of human erythrocytes to decrease the risk of aloimmunization in blood transfusions. The aim of this work was to optimize the protocol for treating human erythrocytes using these two copolymers in order to improve their hemocompatibility. The influence of the incubation time of human erythrocytes with both copolymers and the alterations produced to the morphology and erythrocyte aggregation capacity were studied using microscopy techniques and digital image analysis. Erythrocytes treated with both copolymers showed no changes in their cellular morphology but alterations in the size distribution and structure of aggregates, which were revealed by an increase in the individual cell percentage and a decrease in the percentage of large aggregates. These effects became more marked as the incubation time increased and were greater for Semo B86. These results enable a better understanding of membrane-polycation interactions and the optimization of the protocol to treat erythrocytes using these compounds. This finding may also be applied to the study of copolymers of similar structure and different therapeutic uses.

Los copolímeros policatión-polietilenglicol Semo B86 y Semo B124 fueron desarrollados con fines terapéuticos, en particular, el enmascaramiento de sitios antigénicos de eritrocitos humanos para disminuir el riesgo de aloinmunización en transfusiones sanguíneas. El objetivo de este trabajo fue optimizar el protocolo de tratamiento de los eritrocitos humanos con estos dos copolímeros para mejorar su hemocompatibilidad. Para ello se estudió la influencia del tiempo de incubación de eritrocitos humanos con los dos copolímeros, analizándose las alteraciones producidas sobre la morfología y la capacidad de agregación eritrocitaria, utilizando técnicas de microscopía y análisis digital de imágenes. Se observó que los eritrocitos tratados con ambos copolímeros, si bien no sufrieron cambios en su morfología celular, presentaron alteraciones en la distribución del tamaño y en la estructura de sus agregados. En particular se observó un aumento del porcentaje de células individuales y una disminución del porcentaje de grandes agregados. Este efecto fue más significativo con el aumento del tiempo de incubación, siendo mayor para el Semo B86. Estos resultados permiten comprender mejor la interacción policatión/membrana y optimizar el protocolo de tratamiento de eritrocitos con estos compuestos, pudiéndose extender a otros copolímeros de estructuras similares con diferentes aplicaciones terapéuticas.

Previous experiences have demonstrated the same ABO System epitopes in A. lumbricoides extracts and in their hosts. The aims of this work were to study ABO antigenic determiner absorption by in vitro culture of the helminth's larvae and to investigate ABO-Blood-Group-like substances in larvae's excretion/ secretion products. Larvae were obtained by hatching of A. lumbricoides eggs. The larvae were collected in 5 tubes with RPMI 1640 medium by the Baermann method. A, B and O erythrocytes were added in 3 of the tubes. The two remaining tubes were used as absorption Negative Control and to investigate larvae's excretion/secretion products. The Semiquantitative Inhibition Agglutination Test was applied by using monoclonal antibodies. The results showed that the larvae may adsorb A, B and H epitopes from the erythrocytes that were added to the culture medium. A and B-Blood-Group-like substances were identified in the excretion/secretion products. The experience can contribute to understand the host's escape mechanism used by A. lumbricoides.

En investigaciones previas se identificaron los mismos epitopes del Sistema ABO en extractos de A. lumbricoides y en sus respectivos hospederos. Los objetivos de este trabajo fueron estudiar la absorción de determinantes antigénicas ABO por cultivo in vitro de estadios larvales de este helminto e investigar la presencia de sustancias Tipo Grupo Sanguíneo ABO en los productos de secreción/excreción de las larvas. Se trabajó con larvas obtenidas de la eclosión de huevos de A. lumbricoides y recolectadas por el método de Baermann en cinco tubos con medio RPMI 1640. En tres de los tubos se adicionaron eritrocitos (A, B y O). Los dos tubos restantes se usaron como control negativo de absorción y para investigar los productos de excreción- /secreción de las larvas. Se aplicaron técnicas de Inhibición de la Aglutinación Semicuantitativa usando anticuerpos monoclonales. Los resultados mostraron que las larvas absorben epitopes A, B y H de los eritrocitos agregados al medio de cultivo. Se identificaron sustancias Tipo A y B en los productos de excreción/secreción de las larvas. La experiencia puede contribuir a la comprensión de los mecanismos de evasión de la respuesta inmune del hospedero utilizados por A. lumbricoides.

El ácido hialurónico tiene importantes funciones en los procesos inflamatorios y de reparación tisular. Debido a la variedad de estrategias utilizadas por los parásitos para evadir la respuesta inmune del hospedador y las múltiples funciones e importancia fisiológica del ácido hialurónico, el objetivo fue estudiar la capacidad de unión a ácido hialurónico de estados larvarios de A. lumbricoides Se trabajó con 4 Concentrados de Larvas obtenidas de la eclosión de huevos de A. lumbricoides y recolectadas por el método de Baermann. Se modificó la técnica de detección de CD44 soluble en suero por Inhibición de la Agregación por Adhesión. Se observó que los 4 Concentrados Larvales unían ácido hialurónico. Los resultados obtenidos permiten suponer la existencia de un receptor con especificidad para ácido hialurónico en A. lumbricoides. Este receptor eventualmente podría competir con los receptores habituales del hospedador. El parásito podría utilizar este mecanismo para evadir la respuesta inmune.

Hyaluronic acid has important functions in inflammatory and tissue reparation processes. Owing to the varied strategies of the parasites to evade the host´s immune response, as well as the multiple functions and physiological importance of hyaluronic acid, the aim was to study the hyaluronan binding capacity by Ascaris lumbricoides larval stages. Larval concentrates were prepared by hatching A. lumbricoides eggs. The larvae were collected by the Baermann method. The test of serum soluble CD44 detection by Agregation Inhibition was modified. All the larval concentrates presented hyaluronan binding capacity. The obtained results allow to suppose the existence of an hyaluronic acid specific receptor in A. lumbricoides. This receptor eventually might compete with the usual receptors of the host. The parasite might use this mechanism to evade the immune response.

Hyaluronan acid has important functions in inflammatory and tissue reparation processes. Its main receptors are CD44, RHAMM and ICAM-I. Owing to the varied strategies of the parasites to evade the host´s immune response, and also considering the multiple functions and physiological importance of hyaluronan acid, the aim was to study if Ascaris lumbricoides has hyaluronan binding capacity. Extracts of A. lumbricoides were prepared by surgical remotion of the cuticle and refrigerated mechanical rupture. The study was done on 36 parasite extracts. The test of serum soluble CD44 Detection by Aggregation Inhibition was modified. Of the 36 extracts studied, 23 presented hyaluronan binding capacity. This fact can possibly be due to the existence of a receptor with hyaluronan acid binding capacity in the parasite, which eventually might compete with the usual receptors of the host. A. lumbricoides might use this mechanism to evade the immune response.

El ácido hialurónico tiene importantes funciones en los procesos inflamatorios y de reparación tisular. Sus principales receptores son CD44, RHAMM e ICAM-I. Debido a la variedad de estrategias utilizadas por los parásitos para evadir la respuesta inmune del hospedador y considerando las múltiples funciones e importancia fisiológica del ácido hialurónico, el objetivo de este trabajo fue determinar si Ascaris lumbricoides tiene capacidad de unión a hialuronato. Se trabajó con 36 extractos de A. lumbricoides obtenidos por remoción quirúrgica de la cutícula y ruptura mecánica refrigerada. Se modificó la técnica de detección de CD44 soluble en suero por Inhibición de la Agregación por adhesión. Los resultados demostraron que 23 de los 36 extractos estudiados tenían capacidad de unión a hialuronato. Este hecho podría deberse a la existencia de algún receptor en el parásito que une hialuronato y que eventualmente competiría con los receptores habituales del hospedador. A. lumbricoides podría utilizar este mecanismo para evadir la respuesta inmune.

P Blood Group has a unique antigen: P1. It was identified in various parasite species. The aim of this work was to determine A. lumbricoides´s Inhibitory Capacity in relation to P1 antigen. The work was based on 11 parasite extracts (AE). The semiquantitative inhibition agglutination technique was used to assess the extracts´ Inhibitory Capacity in relation to P1 antigen. Two series of anti- P1 monoclonal antibody dilutions were prepared. PBS was added to the first series and an equal volume of AE to the second. Suspensions of P1 red cells were used as a revealing system. Monoclonal antibody titres were determined in both series. The agglutination was considered significative when there was a difference of two or more dilutions between the titres. Eight of the 11 extracts studied presented P1 epithopes. Inhibitory power of these 8 extracts was calculated and it was related with their protein concentrations to compare the Inhibitory Capacity among the extracts. The technique used made it possible to prove P System epithopes presence and to compare the extracts´ Inhibitory Capacity in relation to P1 epithopes.

El Sistema de Grupo Sanguíneo P tiene un único antígeno: P1 que fue identificado en varias especies parásitas. El objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad inhibitoria de A. lumbricoides en relación al antígeno P1. Se trabajó con 11 extractos parasitarios (EA). Para evaluar la capacidad inhibitoria de los extractos en relación a los epitopes P1, se realizó la técnica semicuantitativa de inhibición de la aglutinación. Se prepararon dos series de diluciones de anticuerpo monoclonal anti- P1; a la primera se le agregó PBS a todos los tubos y a la otra, igual volumen de EA. El sistema revelador fue una suspensión de eritrocitos P1. Se determinó el título del anticuerpo monoclonal en ambas series. Se consideró significativa la aglutinación cuando hubo una diferencia de 2 o más diluciones entre ambos títulos. De los 11 EA estudiados, 8 presentaron epitopes P1. A estos 8 extractos se les calculó el Poder Inhibitorio y se lo relacionó con su contenido proteico a los fines de poder comparar la capacidad inhibitoria entre los extractos. La técnica aplicada permitió evidenciar la presencia de epitopes del Sistema P en extractos de A. lumbricoides y comparar la capacidad inhibitoria de los extractos en relación a epitopes P1.

Summary Previous experiences have demonstrated P1 epithopes in Ascaris lumbricoides by inhibition agglutination. Haemogglutination kinetics applies the relative optical extinction produced on a light beam transmitted through a suspension of small particles, giving a parametric estimate of the haemagglutination rate.The aim was to use this method for the demonstration of P System epithopes presence in A. lumbricoides extracts. inhibition agglutination test enabled the selection of 10 extracts: 3 with and 7 without P1 epithopes. Kinetics of anti- P1 - P1 erythrocyte control reaction and kinectics of the same reaction with a previous contact between antibody and extract were registered. ³ EOR % values (relative optical extinction variation) for both reactions were calculated and compared between themselves. The results proved P1 epithopes presence in 3 extracts, which had not been detected by inhibition agglutination. The results coincided for the remaining extracts by both methods. Haemogglutination kinetics is simple and fast and it is easily adapted for experiences in which the investigator needs to assess the antibody-antigen reaction by haemogglutination.

Experiencias previas demostraron epitopes P1 en Ascaris lumbricoides por inhibición de la aglutinación. La cinética de la hemaglutinación aplica la extinción óptica relativa producida por un haz de luz trasmitido a través de una suspensión de pequeñas partículas, y permite obtener una estimación paramétrica de la tasa de hemaglutinación. El objetivo de este trabajo fue utilizar este método para demostrar la presencia de epitopes del Sistema P en extractos de A. lumbricoides. La técnica de inhibición de la aglutinación permitió seleccionar 10 extractos: 3 con y 7 sin epitopes P1. Se registró la cinética de la reacción Control: anti- P1- eritrocitos - P1 y la cinética de la misma reacción, previo contacto del anticuerpo con el extracto. Se calcularon y se compararon los valores de ³ EOR % (variación en el porcentaje de extinción óptica relativa) para ambas reacciones. Los resultados evidenciaron la presencia de epitopes P1, que no habían sido detectados por inhibición de la aglutinación, en 3 extractos. Para los extractos restantes, hubo coincidencia entre los resultados obtenidos por los dos métodos. La cinética de la hemaglutinación es sencilla, rápida y fácilmente adaptable para las experiencias en que se necesite evaluar una reacción antígeno-anticuerpo a través de la hemaglutinación.

Ascaris lumbricoides puede presentar los mismos epitopes del Sistema ABO que sus hospederos. El objetivo fue estudiar la expresión de epitopes ABO en el parásito por la técnica de Inhibición de la Aglutinación usando diferentes anticuerpos monoclonales y sueros policlonales. Se trabajó con 27 extractos parasitarios (14 de pacientes A, 2 AB, 1 B y 10 de Grupo ABO desconocido). Los extractos de pacientes A, AB y Grupo desconocido fueron enfrentados a anticuerpos monoclonales y suero policlonal de especificidad A; y los de pacientes B, AB y Grupo desconocido a anticuerpos monoclonales y suero policlonal de especificidad B. Se hizo la Inhibición Semicuantitativa a los extractos que inhibieron la aglutinación de algún anticuerpo. Se observó que el 50% de los extractos enfrentados a anticuerpos de especificidad A y el 46% de los enfrentados a anticuerpos de especificidad B inhibieron la aglutinación de forma significativa. Ningún extracto inhibió a la totalidad de los anticuerpos. Todos los anticuerpos reaccionaron con algún extracto, excepto un anticuerpo de especificidad B. La actividad ABO del extracto fue independiente de la clase de inmunoglobulina, concentración y título del anticuerpo; Se observó que sólo depende de la unión del anticuerpo al epitope al cual está dirigido. La heterogeneidad en la expresión de epitopes ABO de A. lumbricoides podría estar involucrada en la evasión de la respuesta inmune del hospedero. Las técnicas de Inhibición utilizadas son sensibles, sencillas, rápidas y económicas. Se concluye que el uso de diferentes anticuerpos monoclonales permite la mejor definición de la especificidad antígeno-anticuerpo.

Ascaris lumbricoides and its hosts can present the same ABO System epithopes. The aim was to study ABO epithopes expression in A.lumbricoides by Inhibition Agglutination Test using different monoclonal antibodies and policlonal sera. We worked with 27 parasite extracts (14 extracts from A Group patients, 2 AB Group 1, B Group and 10 from unknown ABO Group patients). Inhibition Agglutination Test was made facing the extracts from A, AB and unknown ABO Group patients against monoclonal antibodies and policlonal serum of A specificity and the extracts from B, AB and unknown ABO Group patients against monoclonal antibodies and policlonal serum of B specificity. The Semiquantitative Test was made with the extracts which inhibited the agglutination of any antibody. The 50% of the parasite extracts faced against A specificity antibodies and the 46% of the parasite extracts faced against B specificity antibodies significantly inhibited the agglutination in the Semiquantitative Test. No extract inhibited the totality of the antibodies. All the antibodies reacted with some extract, except one antibody of B specificity. The ABO activity in the extracts was independent of the antibody´s immunoglobulin class, titre and concentration and it only was dependent on the antibody union with the epithope at which the antibody is directed. The heterogeneity in the ABO epithopes expression of A.lumbricoides might be involved in the escape of the host´s immune response. The used Inhibition Tests are sensitive, simple, rapid and economic.We conclude that the use of different antibodies alows the best definition of the antigen-antibody specificity.

Previous experiences have shown ABO epithopes presence in Ascaris lumbricoides. The aim of this work was to determine the inhibitory capacity of A. lumbricoides in relation to ABO epithopes by light diffraction of suspended particles method (Light Scattering). Eight parasite extracts (AE) from B Group patients and 4 AE from A Group patients (AE with and without ABO epithopes) were selected. The AE were faced against dilutions of monoclonal antibody (anti A or anti B). The exceeding antibody was neutralized with isogroup erythrocytes. The optical extinction of the agglutinates was measured. The agglutination percentage versus antibody dilution was graficated. Titre-50 (T-50) was calculated. Inhibitory Power (IP) was defined as the relation between T-50 of the studied extract and T-50 of the control extract The protein concentration of the AE was determined to express IP/ protein gram. IP values for the AE with ABO epithopes were greater than 1. The IP/ protein gram made it possible to obtain representative values of the ABO epithopes amount in each extract l. The utilization of this method enabled corroboration of the ABO epithopes presence and comparison of the inhibitory capacity for these epithopes between different extracts.

Experiencias previas demostraron la presencia de epitopes ABO en Ascaris lumbricoides. El objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad inhibitoria del parásito para estos epitopes por cuantificación de la hemaglutinación aplicando el método de difusión lumínica por partículas en suspensión. Se seleccionaron 8 extractos parasitarios (EA) de pacientes grupo sanguíneo B y 4 de grupo A (con y sin epitopes ABO). Los EA fueron enfrentados a diluciones de antisuero monoclonal (anti A o anti B) y el antisuero excedente fue neutralizado con eritrocitos de isogrupo. Se midió la extinción óptica de la aglutinación resultante. Se graficó el porcentaje de aglutinación en función de la dilución del antisuero para calcular Título-50 (T-50). Se definió Poder Inhibitorio (PI) como la relación entre el T-50 del EA estudiado y el T-50 de un EA control. Se determinó la concentración proteica del extracto para expresar PI/ gramo de proteína. Los valores de PI para los EA con epitopes ABO fueron mayores a 1. El cociente PI/ gramo de proteína permitió obtener valores representativos de la cantidad de epitopes presentes. La utilización de este método corroboró la presencia de epitopes ABO en los extractos y comparó la capacidad inhibitoria de diferentes extractos para estos epitopes.

Previous experiences have demonstrated the same ABO system and P system antigens in A. lumbricoides extracts and in their hosts. The aim was to show the behavior of an A. lumbricoides extract from an O Group patient against monoclonal antibodies of different specificities. Agglutination Inhibition Tests were carried out facing the extract against monoclonal antibodies (anti A 2.23; anti B 2.54; anti B 2.62; anti AB 2.39 and anti H 2.72) in optimal concentrations. Suspensions of O Group fresh red cells were used as revealing system. The extract only inhibited the agglutination of anti H 2.72 with O erythrocytes. The semiquantitative Agglutination Inhibition Test of the extract was made against two series of anti H 2.72 dilutions by using O Group fresh red cells as revealing system. A difference of five dilutions between the titers of both series has been observed and the presence of H Antigen in the extract has been significantly confirmed. The fact that the extract did not inhibit the agglutination against anti A, anti B and anti AB has corroborated our previous observations about absence of A and B epitopes in A. lumbricoides extracts from O Group patients. The results of the preceding studies and this experience have demonstrated the membrane glycoconjugated importance in A. lumbricoides. They could be involved in molecular mimicry for this parasite.

Experiencias previas han demostrado los mismos antígenos del Sistema ABO y del Sistema P en extractos de A. lumbricoides y en sus huéspedes. El objetivo fue mostrar el comportamiento de un extracto de A. lumbricoides de un paciente Grupo O frente a anticuerpos monoclonales de diferentes especificidades. Se hicieron pruebas de Inhibición de la Aglutinación enfrentando el extracto contra anticuerpos monoclonales (anti A 2.23; anti B 2.54; anti B 2.62; anti AB 2.39 y anti H 2.72) en dosis óptimas. El sistema revelador fue una suspensión fresca de eritrocitos Grupo O. El extracto sólo inhibió la aglutinación de anti H 2.72 con eritrocitos O. Se hizo la inhibición de la aglutinación semicuantitativa del extracto frente a dos series de diluciones de anti H 272 usando eritrocitos frescos Grupo O como sistema revelador. Se observó una diferencia de 5 diluciones entre los títulos de ambas series y se confirmó significativamente la presencia de antígeno H en el extracto. La no inhibición de la aglutinación del extracto frente a anti A, anti B y anti AB ha corroborado nuestras observaciones previas sobre ausencia de epitopes A y B en extractos de pacientes Grupo O. Los resultados de los estudios previos y de esta experiencia, han demostrado la importancia de los glicoconjugados de membrana en A. lumbricoides, los que podrían estar involucrados en el mimetismo antigénico para este parásito.

The aim of this study was to investigate the blood viscosity profile and to evaluate the influence of plasmatic (fibrinogen) and cellular (erythrocyte aggregation) factors in a group of hypertensive patients, compared with a normotensive group. We worked with anticoagulated blood of both non diabetic hypertensive patients (n=31), and healthy individuals (n=40). The plasmatic viscosity and whole blood determination were obtained with a cone-plate viscometer. Erythrocyte aggregation was studied by microscopical observation and quantified by an Aggregate Shape Parameter (ASP), defined as the relation projected area/perimeter. Fibrinogen was determined by the Clauss method with a coagulometer. A comparison between these groups led us to assert that whole blood viscosity was significantly higher in hypertensive patients than in the controls at all shear rates. Plasma viscosity values only showed significant differences between both groups at low shear rate (1.15 a 11.56 seg-1). The hypertensive patients showed irregular and amorphous aggregates so that ASP appeared significantly higher (p< 0.001) in patients with hypertension (0.69 ± 0.11) than in healthy subjects (0.25 ± 0.12). Fibrinogen appeared slightly higher (p<0.01) in the hypertensive group than in the normal group. Several hemorheological parameters play important roles in the pathogenesis of hypertension. Among these factors, several hemorheological parameters could be altered in hypertension (hematocrit, plasma fibrinogen level, erythrocyte deformability and aggregability, plasma and whole blood viscosity). An increased RBC aggregation has been identified as an important factor responsible for disturbing blood rheological behavior in the microcirculation. The present study demonstrates an abnormal erythrocyte aggregation, which was detected by increased ASP values that could be responsible for vascular complications in hypertension.

El objetivo de este trabajo fue investigar el perfil de viscosidad sanguínea y evaluar la influencia de factores plasmáticos (fibrinógeno) y celulares (agregación eritrocitaria) en un grupo de pacientes hipertensos comparados con un grupo de paciente normotensos. Se trabajó con sangre anticoagulada de pacientes hipertensos no diabéticos (n= 3) e individuos sanos (n = 40). La viscosidad plasmática y de sangre entera se determinaron con un viscosímetro cono-plato. La agregación eritrocitaria se estudió por observación microscópica de los agregados y cuantificación a través de un parámetro de forma denominado ASP (Aggregation Shape Parameter), definido como la relación de área proyectada respecto al perímetro. El fibrinógeno se determinó con un coagulómetro por el método de Clauss. Los valores de viscosidad de sangre entera resultaron significativamente aumentados en los pacientes hipertensos respecto de los normales para todas las velocidades estudiadas. Los valores de viscosidad plasmática sólo presentaron diferencias significativas a bajas velocidades de corte (1.15 a 11.56 seg-1). Los pacientes hipertensos presentaron agregados amorfos e irregulares, lo que se refleja en los valores alterados de ASP, significativamente mayores (p<0.001) en paciente hipertensos (0.69 ± 0.11) respecto de los individuos normales (0.25 ± 0.12). Los valores de fibrinógeno resultaron ligeramente superiores en los pacientes hipertensos respecto del grupo control (p< 0.01). Numerosos parámetros hemorreológicos juegan un papel importante en la patogénesis de la hipertensión. Entre estos factores hemorreológicos, varios parámetros podrían estar alterados en la hipertensión (hematocrito, fibrinógeno plasmático, deformabilidad y agregación eritrocitaria, viscosidad sanguínea y plasmática). En este trabajo, se pudo demostrar anormalidades en la agregación eritrocitaria, detectada por los valores de ASP que podría estar involucrado en las complicaciones vasculares de la hipertensión.