Resumen Evaluamos las concordancias interlaboratorio, esencial y categórica entre el panel Sensititre YeastOne™ y los métodos de referencia correspondientes al M27 4.a ed. (Clinical and Laboratory Standards Institute [CLSI]) y al EDef 7.3.1 (European Committee on Antifungal Susceptibility Testing [EUCAST]). Estudiamos 67 cepas de Candida de distintas muestras clí nicas y un panel de 9 cepas resistentes a fluconazol y equinocandinas. El mayor porcentaje de concordancia interlaboratorio se observó con anfotericina B (96,8%) y el menor porcen taje con voriconazol (77,2%). La caspofungina mostró un 5,8% de discrepancias muy mayores con el método de referencia del CLSI. Con el del EUCAST, el itraconazol, el posaconazol y la anidulafungina mostraron porcentajes de discrepancias mayores: el 17,6, el 18,1 y el 19,6%, respectivamente. El panel Sensititre YeastOne™ es una alternativa confiable y fácil de usar, que permite detectar especies de Candida resistentes a los antifúngicos, con algunas limitaciones para las equinocandinas. Los resultados son equiparables a los de los métodos de referencia.

Abstract We evaluated the interlaboratory agreement, the essential agreement, and the cate- gorical agreement between the Sensititre YeastOne™ panel and the reference methods M27 4th Edition of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), and the EDef 7.3.1 of the Euro- pean Committee on Antifungal Susceptibility Testing (EUCAST). We studied 67 Candida strains isolated from different clinical samples and 9 Candida strains with resistance to fluconazole and echinocandins. The highest percentage of interlaboratory agreement was observed with amp- hotericin B (96.8%), and the lowest percentage with voriconazole (77.2%). Caspofungin showed 5.8% of very major errors when compared with the CLSI reference method. For EUCAST, itraconazole, posaconazole, and anidulafungin showed high percentages of major errors: 17.6%, 18.1%, and 19.6%, respectively. Sensititre YeastOne™ is a reliable alternative, and easy to perform for detecting Candida species resistant to antifungal drugs, with some limitations for echinocandins. Results are comparable to those of the reference methods.

Resumen Antecedentes: Candida auris es una levadura emergente, informada con frecuencia como resistente a diversos antifúngicos usados comúnmente para tratar infecciones por Candida. Esta especie puede colonizar la piel y tiene gran capacidad de producir brotes en ambientes hospitalarios. Está filogenéticamente relacionada con otras especies de Candida, es mal identificada por los métodos bioquímicos o comerciales, y requiere tecnología específica para su identificación. Reporte de caso: Se informa el primer aislamiento de C. auris en Cali, Colombia en un paciente de 37 años con artritis reumatoide y endocarditis, sin síntomas de sepsis, a partir de la punta de catéter venoso central. La levadura inicialmente se identificó como C. haemulonii por el sistema Phoenix® y posteriormente como C. auris por espectrometría de masas desorción/ionización láser asistida por una matriz con detección de masas por tiempo de vuelo (MALDI-TOF MS). Se determinó la concentración inhibitoria mínima por el método de microdilución en caldo que mostró un aislamiento sensible a fluconazol, itraconazol, voriconazol y anfotericina B. Conclusión: Este informe contribuye al conocimiento de la epidemiología de las infecciones por C. auris en individuos con enfermedad subyacente y describe un aislamiento con un comportamiento diferente a lo indicado en otros estudios.

Abstract Background: Candida auris is an emerging yeast frequently reported as resistant to multiple antifungal drugs commonly used to treat Candida infections. This specie can colonize the patient’s skin and has great ability for producing outbreaks in hospitals. C. auris is phylogenetically related to other Candida species, can be misidentified using conventional biochemical or commercial methods and requires specific technology for its identification. Case report: We report the first isolate of C. auris in Cali, Colombia, from a central venous catheter in a 37-year-old patient with rheumatoid arthritis and endocarditis who did not have symptoms of sepsis. The yeast was initially misidentified as C. haemulonii using the Phoenix system and subsequently identified as C. auris by matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). The broth microdilution method was used to determine the minimum inhibitory concentration; the isolate was susceptible to fluconazole, itraconazole, voriconazole and amphotericin B. Conclusions: This report contributes to knowledge of the epidemiology of C. auris infections in individuals with underlying disease and describes an isolate with a behavior different from what is usually reported.

Background: Pityriasis versicolor is a frequent pathology in Paraguay; however, its epidemiology is unknown. Aim: To determine the frequency of Malassezia species causing pityriasis versicolor and the epidemiological characteristics of the population. Methods: Samples from patients with a presumptive diagnosis of pityriasis versicolor were collected. Laboratory diagnosis was carried out by fresh examination and culture in modified Dixon agar and chromogenic Chromagar Malassezia®, incubated at 32° C, and identification by macro and micromorphological features, biochemical and physiological tests. Results: 102 patients were included (51% female) from 1 month to 63 years of age, the predominant age group was 11-20 years (35.3%). The most frequent location was on the back (60.8%). Hipocromic clinical forms (48%) predominated. The most frequent species was M. globosa (52.9%), followed by M. furfur (24.5%), M. sympodialis (18.6%) and M. slooffiae (6.9%). Conclusions: The observed epidemiology is similar to other South American studies, with no sex distinction, predominantly hypochromic clinical form and as primary responsible species appears M. globosa. This is the first report on species causing pityriasis versicolor in Paraguay and the characteristics of the affected population.

Resumen Introducción: La pitiriasis versicolor es una patología frecuente en Paraguay; sin embargo, su epidemiologia es desconocida. Objetivo: Determinar la frecuencia de especies de Malassezia causantes de pitiriasis versicolor y las características epidemiológicas de la población. Materiales y Métodos: Se recolectaron muestras de pacientes con diagnóstico presuntivo de pitiriasis versicolor. El diagnóstico de laboratorio se realizó mediante examen en fresco y cultivo en agar Dixon modificado y agar cromogénico Chromagar Malassezia®, incubados a 32°C; y la identificación por las características macro y micromorfológicas, pruebas bioquímicas y fisiológicas. Resultados: Se incluyeron 102 pacientes (51% femenino), de 1 mes a 63 años de edad, predominando el grupo de 11 a 20 años (35,3%). La localización más frecuente fue el dorso (60,8%). Predominaron las formas hipocrómicas (48%). La especie más frecuente fue M. globosa (52,9%), seguida de M. furfur (24,5%), M. sympodialis (18,6%) y M. slooffiae (6,9%). Conclusiones: La epidemiología observada es similar a otros estudios sudamericanos, no hace distinción de sexo, se presenta predominantemente en la forma clínica hipocrómica y M. globosa aparece como principal responsable. Este es el primer reporte sobre las especies causantes de pitiriasis versicolor en Paraguay y las características de la población con esta patología.

The degree of antagonism exercised by fungi on geohelminth development varies according to the morphological alterations caused by different fungal species. Saprophytic fungi may exert ovicidal or ovistatic effects. The aim of this study was to apply scanning electron microscopy (SEM) to observe the action of two soil saprophytic species of Chrysosporium (C. indicum and C. keratinophylum) on Toxocara canis eggs. The fungal strains to be tested were incubated for 28 days at 28 °C in 2% water agar with a suspension of unembryonated T. canis eggs. A suspension of T. canis eggs in 2% water agar was used as control group. The assay was done in triplicate for each fungus and the control group. SEM observations were performed on the 4th, 7th, 14th, 21st, and 28th day after inoculation. The effect of the fungi on eggs was evaluated in accordance with the alterations observed on the surface and the changes in the normal characteristics of the eggs. Hyphae around the eggs, appresoria penetrating the shell and changes in the typical egg membrane were observed in this assay. Type 3 effect (alterations that occur both in the embryo and the shell, and hyphal penetration of the eggs) was the prevalent effect. SEM allowed us to observe clearly the morphological alterations in T. canis eggs due to the effect of C. indicum and C. keratinophylum. Both saprophytic species of Chrysosporium alter the egg structure and alterations increase as exposure increases.

El grado de antagonismo ejercido por los hongos sobre el desarrollo de los geohelmintos depende de la especie fúngica y las alteraciones morfológicas que causan. Los hongos saprofitos pueden tener efecto ovicida u ovistático sobre los huevos. El objetivo fue aplicar la microscopía electrónica de barrido (MEB) para observar la acción de 2 especies de Chrysosporium (C. indicum y C. keratinophylum) saprofitas de suelos, sobre huevos de Toxocara canis.Las especies a ensayar se sembraron en agar agua al 2% con una suspensión de huevos no embri-onados de T. canis y se incubaron 28 días a 28 °C. Como grupo control se utilizó una suspensión de huevos de T. canis en agar agua al 2%. El ensayo se realizó por triplicado para cada hongo y el grupo control. Las observaciones con MEB se realizaron a los 4, 7, 14, 21 y 28 días de incubación. La acción de los hongos se evaluó según las alteraciones en la superficie y los cambios en las características normales de los huevos. En este ensayo se observaron: hifas rodeando los huevos, appresorios penetrando la cubierta y cambios en la membrana característica del huevo, prevaleciendo el efecto tipo 3 (alteraciones que se producen tanto en el embrión como en la cubierta y penetración de hifas al interior de los huevos). La aplicación de la MEB permitió observar claramente que las 2 especies de Chrysosporium saprofitas de suelos, afectan el normal desarrollo de los huevos de T. canis, alteran su estructura y las alteraciones aumentan con el tiempo de exposición.

Human protothecosis is a rare infection caused by algae of the genus Prototheca. Prototheca wickerhamii has been recognized as the main species that causes infection in immunocompromised hosts with deficits in innate or cellular immunity. We report a case of persisting subcutaneous protothecosis in a patient with T-cell large granular lymphocyte leukemia, who also presented a history of disseminated histoplasmosis.

La prototecosis humana es una infección rara causada por algas del género Prototheca. Prototheca wickerhamii ha sido reconocida como la principal especie causante de infección en huéspedes inmunocomprometidos, con déficit de inmunidad innata o celular. Presentamos un caso de prototecosis subcutánea persistente en un paciente con leucemia linfocítica granular de células T, con antecedentes de histoplasmosis diseminada.

The distribution of Aspergillus species in soil has been widely studied all over the world. The aim of this study was the phenotypic and genotypic characterization of species belonging to section Fumigati present in soils from two Argentinian semi-desert areas having different geological conditions. Altogether, 23 isolates belonging to Aspergillus section Fumigati were recovered and identified using a polyphasic approach including phenotypic and molecular identifications. Aspergillus fumigatus sensu stricto and Aspergillus fumigatiaffinis had the highest frequency, of occurrence while isolates closely related to Aspergillus udagawae and Aspergillus felis were rarely observed. A. fumigatiaffinis and isolates closer to A. udagawae were isolated for the first time from Argentinian soils and this is the first report on the occurrence of species belonging to the A. felis clade in South America. Recent scientific interests in biodiversity, as well as the increasing importance of aspergilli as causative agents of human and animal diseases increase the need to understand the diversity and occurrence of these fungi in nature.

La distribución de especies de Aspergillus en el suelo se ha estudiado ampliamente en todo el mundo. El objetivo de este trabajo fue caracterizar fenotípica y genotípicamente las especies pertenecientes a la sección Fumigati presentes en los suelos de dos zonas semidesérticas de Argentina con diferentes geologías. En total, 23 Aspergillus de la sección Fumigati fueron aislados e identificados utilizando un enfoque polifásico incluyendo identificaciones fenotípicas y moleculares. Aspergillus fumigatus sensu stricto y Aspergillus fumigatiaffinis aparecieron con mayor frecuencia, mientras que los aislamientos relacionados a Aspergillus udagawae y a Aspergillus felis se observaron raramente. Este es el primer informe de A. fumigatiaffinis y de aislamientos estrechamente relacionados a A. udagawae en suelos argentinos; también el primero sobre la ocurrencia de especies pertenecientes al clado A. felis en Sudamérica. El emergente interés científico en la biodiversidad, así como la creciente importancia de Aspergillus como agentes causales de enfermedades humanas y animales, aumentan la necesidad de conocer la diversidad y la ocurrencia de estos hongos en la naturaleza.

We report a case of mycotic keratitis caused by Lasiodiplodia theobromae in a 60-year-old man with a history of ocular trauma with vegetable matter. Ophthalmological assessment with slit-lamp and microbiological evaluation of the corneal ulcer by conventional microbiological techniques were performed. Mycology study of the corneal scraping showed the presence of fungal filaments and the isolate was identified as Lasiodiplodia theobromae. Patient was treated with natamycin 5% and fluconazole 0.2% for 37 days. The infection was controlled but the corneal scars required a cornea transplant. This is the first case of keratitis by Lasiodiplodia theobromae in Paraguay. Difficulties in the management of these cases, which often requires surgical procedures, are discussed.

Se presenta un caso clínico de queratitis causada por Lasiodiplodia theobromae en un agricultor de 60 años de edad, con antecedentes de un trauma ocular con un vegetal. Se realizó un examen oftalmológico con lámpara de hendidura y estudio microbiológico de la úlcera corneal por técnicas microbiológicas convencionales. El examen micológico del raspado corneal reveló la presencia de hifas septadas y el cultivo fue identificado como Lasiodiplodia theobromae. El paciente fue tratado con natamicina al 5% y fluconazol al 0,2% durante 37 días. La infección fue controlada, sin embargo, el paciente quedó con cicatrices corneales y con necesidad de trasplante. Es el primer caso de queratitis por Lasiodiplodia theobromae en Paraguay. Se discute la dificultad de manejo de estos casos que a menudo requieren procedimientos quirúrgicos y trasplante de córnea.

Cryptococcosis is a fungal infection caused by yeast species of Cryptococcus genus, particularly Cryptococcus neoformans/Cryptococcus gattii species complex. The knowledge of the cryptococcosis casuistic in northeastern Argentina is scarce and there is no information about the molecular types circulating in this area. The aim of this study was to genotyping C. neoformans/C. gattii complex clinical isolates obtained at Hospital "Dr. Julio C. Perrando", Resistencia city (Chaco, Argentina), in order to determine species, variety and molecular type. During two years and one month 26 clinical isolates were studied. Using conventional and molecular methods one isolate was identified as C. gattii VGI type, and 25 isolates as C. neoformans var.grubii; 23 of these belonged to VNI type and two belonged to VNII type. This data is a contribution to the knowledge of cryptococcosis epidemiology in Argentina and the first report about C. neoformans/ C. gattii complex molecular types from clinical isolates in northeastern Argentina.

La criptococosis es una infección fúngica causada por levaduras del género Cryptococcus, particularmente las del complejo Cryptococcus neoformans/Cryptococcus gattii. El conocimiento sobre la casuística de la criptococosis en el nordeste argentino es exiguo y no se tiene información sobre los tipos moleculares circulantes. El objetivo de este estudio fue realizar la caracterización genética de los aislamientos pertenecientes al complejo C. neoformans/C. gattii obtenidos en el Hospital «Dr. Julio C. Perrando» de la ciudad de Resistencia (Chaco, Argentina), con el fin de determinar especie, variedad y genotipo. Durante dos años y un mes se estudiaron 26 aislamientos clínicos. Mediante métodos convencionales y moleculares, un aislamiento fue identificado como C. gattii genotipo VGI y los 25 restantes como C. neoformans var.grubii, 23 de los cuales correspondieron al genotipo VNI y dos al genotipo VNII. Estos datos son una contribución al conocimiento de la epidemiología de la criptococosis en la Argentina y el primer informe sobre genotipos del complejo C. neoformans/C. gattii de origen clínico en el nordeste argentino.

The study of Malassezia has been postponed for many years due to its nutritional requirements and its morphological variability. Molecular biology methods led to a taxonomic revision of this genus and to a new interest for its clinical importance. Nowadays, 11 Malassezia species are known, 10 are lipophilic, having similar morphological, physiological and biochemical characteristics, therefore, conventional techniques are not useful to differentiating them. Molecular methods are an accurate tool in the identification and they lead to a better knowledge of the ecology and epidemiology of this genus. Noteworthy antifungal susceptibility variations have been observed in some species, although there is not a standard method for these yeasts. There are few data about their biochemical characteristics, and the enzymes they produce might be important virulence factors, favouring host tissue invasion. Malassezia has been recognised as a member of the normal human and animal skin. Its implication in pathologic processes, including skin diseases to systemic infections, is the main issue in current investigations in order to determine the real pathogenic role of these yeasts.

El estudio del género Malassezia se mantuvo postergado durante años debido a sus estrictos requerimientos nutricionales y su variabilidad morfológica. La posibilidad de su aislamiento y la aplicación de métodos moleculares condujeron a la revisión taxonómica del género y a la renovación en el interés por su importancia clínica. Actualmente se conocen 11 especies, 10 lipofílicas, y dado que muchas de ellas tienen características morfológicas, fisiológicas y bioquímicas similares, las técnicas convencionales no resultan satisfactorias para diferenciarlas. Actualmente, los métodos moleculares prometen una mejor diferenciación y permiten avanzar en el conocimiento de la ecología y epidemiología de este género. Se han observado notables variaciones en la sensibilidad antifúngica de algunas especies, aunque no existe un método estandarizado para evaluar la relevancia clínica. Si bien poco se conoce sobre la bioquímica de estas levaduras, se ha observado que las enzimas que producen favorecen la invasión de los tejidos del hospedador, por lo que serían un importante factor de virulencia. Malassezia ha sido reconocido como comensal de piel humana y animal, pero su implicancia en procesos patológicos, que incluyen desde afecciones cutáneas hasta infecciones sistémicas, ha centrado la atención de recientes investigaciones en determinar el verdadero rol patogénico de estas levaduras.

Para avaliar as idades em que os agentes etiológicos das micoses sistêmicas iniciam a infecção, testes cutâneos da histoplasmina e paracoccidioidina foram realizados cm 344 crianças de ambos os sexos, com idades entre 2 e 15 anos. Foram selecionadas de amostra estatisticamente significante da população da cidade de General San Martin (Nordeste da Argentina). Os testes Foram analisados 48 horas após a injeção e considerados positivos se uma enduração de 5 mm ou mais estivesse presente. Anticorpos circulantes foram também avaliados pela imunodifusão em gel de agar. A média de infecção para o H. capsulatum foi de 9.2% e pertencia às crianças de 4 a 14 anos, sem diferença significante entre os sexos. Cinco criancas de 2 a 14 anos foram positivas para paracoccidioidina (1.6%). Nenhuma das crianças tinha anticorpos específicos nem sinais de micose ativa. Resultados mostram que infecção pelo H. capsulatum pode ser encontrada a partir da idade de 4 anos, enquanto para o P. brasiliensis o limite inferior de idade foi de 2 anos. Estes achados podem contribuir para o melhor conhecimento sobre a infecção infantil por fungos, numa região geográfica onde não foram encontradas referências anteriores.

In order to estimate ages at which etiological agents of systemic mycoses initiate infection, histoplasmin and paracoccidioidin skin tests were performed in 344 children of both sexes, between 2 and 15 years old. They were selected from a statistically significant population sample Gral. San Martín city (Northeast Argentina). Tests were read 48h after injection and considered positive if a 5 mm on larger induration was present. Circulating antibodies were also evaluated by agar gel immunodiffusion. The overall infection rate for H. capsulatum was 9.2%, belonging to children from 4 to 14 years old, without significant differences among sexes. Five children from 2 to 14 years old were positive to paracoccidioidin (1.6%). None of the children had specific antibodies neither signs of active mycosis. Results show H. capsulatum infection can be found from age 4, while for P. brasiliensis the lower limit was two years old. These findings may contribute to better knowledge on infantile fungal infection in a geographical region where no previous references can be found.