RESUMO Os inibidores de protease (IPs) fazem parte do sistema de defesa da planta e reduzem a atividade proteolítica das enzimas digestivas de insetos-praga. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar um inibidor de tripsina (AmTI) na semente de Anadenanthera macrocarpa (Benth) (Leguminosae-Mimosoideae). Além disso, tentamos avaliar o mecanismo de defesa das larvas de Anagasta kuehniella contra esse inibidor. Os extratos de sementes de proteína foram purificados usando colunas de Sephadex G-50 e tripsina-Sepharose. A eletroforese revelou que o peso molecular do inibidor era de 25 kDa. A avaliação da estabilidade demonstrou que o inibidor não foi desnaturado em temperaturas de até 60 °C, pH 2-10 e concentrações de até 100 mM de ditiotreitol por uma hora. O inibidor reagiu na proporção de 1:1 com tripsina bovina com uma constante de inibição [Ki] = 2,517 x 10-8. A incorporação do inibidor na proporção de 1 mg por 100 mg da dieta artificial oferecida às larvas de A. kuehniella levou a uma diferença significativa no peso e na sobrevivência das larvas do quarto ínstar em relação ao controle. O AmTI atuou sobre as atividades enzimáticas da tripsina e quimotripsina, não permitindo até o quarto ínstar larval, A. kuehniella, criar adaptações contra o inibidor, pois teve efeito simultâneo no peso e mortalidade larval. Portanto, um novo inibidor de tripsina apresentando atividade inibitória contra as enzimas digestivas tripsina e quimotripsina de A. kuehniella foi isolado, indicando que essas atividades estão correlacionadas com os efeitos deletérios desse inseto.

ABSTRACT Protease inhibitors (PIs) are a part of the plant defense system and reduce the proteolytic activity of the digestive enzymes of insect pests. The current study aimed to isolate and characterize an inhibitor of trypsin (AmTI) within the seed of Anadenanthera macrocarpa (Benth) (Leguminosae-Mimosoideae). Moreover, we tried to assess the defense mechanism of the larvae of Anagasta kuehniella against this inhibitor. Protein seed extracts were purified using Sephadex G-50 and trypsin-Sepharose columns. Electrophoresis revealed the molecular weight of the inhibitor to be 25 kDa. The stability evaluation demonstrated that the inhibitor was not denatured at temperatures of up to 60 °C, pH 2-10, and concentrations of up to 100 mM dithiothreitol for one hour. The inhibitor reacted in a 1:1 ratio with bovine trypsin with an inhibition constant [Ki] = 2.517 ´ 10-8. Incorporating the inhibitor in a 1 mg per 100 mg proportion of artificial diet offered to A. kuehniella larvae led to a significant difference in the weight and survival of larvae of the fourth instar compared to the control. AmTI acted on the enzymatic activities of trypsin and chymotrypsin, not allowing until the fourth larval instar, A. kuehniella, to create adaptations against the inhibitor, as it had a simultaneous effect on larval weight and mortality. Therefore, a new trypsin inhibitor showing inhibitory activity against the digestive enzymes trypsin and chymotrypsin from A. kuehniella was isolated, indicating that these activities are correlated with the deleterious effects of this insect.

O transplante de células-tronco hematopoéticas (TCTH) é terapia consolidada para tratamento de algumas doenças onco-hematológicas, e o suporte transfusional tem, tradicionalmente, sido fundamental para a realização do mesmo. Descrevemos um caso de paciente testemunha de Jeová, portadora de linfoma Hodgkin em terceira remissão parcial, que foi submetida a quimioterapia de altas doses com regime de condicionamento clássico (carmustina, etoposide, citarabina, melfalan) e posterior infusão de células-tronco hematopoéticas sem o uso de hemocomponentes. A paciente apresentou toxicidade hematológica inerente ao procedimento e medidas clínicas de suporte tais como a utilização de eritropoetina, IL 11, antifibrinolítico, entre outras, foram utilizadas na tentativa de minimizar o risco de sangramento e anemia grave. O curso do transplante transcorreu sem complicações graves. Este caso demonstra que o transplante autólogo de células-tronco hematopoéticas sem o uso de hemocomponentes é factível em situações especiais, onde há clara expressão do desejo do paciente associado a condições clínicas favoráveis e acompanhamento médico especialista rigoroso.

Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is standard therapy for the treatment of some hematological neoplasms and support with blood transfusions is considered essential for this procedure. Herein we describe the case of a Jeovah's witness who had Hodgkin's lymphoma in third partial remission and was submitted to high-dose chemotherapy using a classic conditioning regimen (carmustine, etoposide, cytarabine, melphalan) with posterior infusion of autologous peripheral blood stem cells without the use of blood transfusions. The patient had the usual degree of hematological toxicity and was treated with clinical support measures, such as the use of erythropoietin, IL-11 and antifibrinolytics, with the goal of minimizing the risk of bleeding and serious anemia. The HSTC coursed without major complications. This report shows that the autologous peripheral blood stem cell transplantation without the use of blood and platelet transfusions is feasible in special situations, where patients clearly express their wishes and where there is a favorable clinical condition with rigorous medical care provided by specialists.

OBJETIVO: avaliar o efeito do tamoxifeno no perfil lipídico e renal de ratos controles e diabéticos. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos fêmeas Wistar (180-220g peso corporal), divididos randomicamente em 4 grupos: C (n=10, receberam veículo), T (n=10, tratados com tamoxifeno, 0,3mg/kg/dia), D (n=10, diabéticos induzidos por estreptozotocina, 45mg/Kg) e DT (n=10, diabéticos tratados com tamoxifeno). Foram dosados os analitos, glicose, colesterol total, triglicérides, proteínas totais, albumina, uréia e creatinina utilizando Kits Labtest através do analisador Cobas Mira (Alemanha,1996). RESULTADOS: o grupo T apresentou diminuição do colesterol total e triglicérides em relação ao C, e o grupo D um aumento em relação aos demais. Para as proteínas totais foi observado um aumento no Grupo T em relação ao C. A albumina diminuiu nos grupos D e DT em relação aos grupos C e T. Nos níveis de uréia houve um aumento no grupo D e DT em relação aos grupos C e T. CONCLUSÃO: Em relação ao perfil lipídico foi constatado que durante o período de 60 dias o tratamento com tamoxifeno promoveu uma diminuição dos níveis séricos de colesterol e triglicérides, mesmo associado a condição de Diabetes mellitus.

OBJECTIVE: To evaluate the effect of tamoxifen in the lipidic and renal profile in diabetic and control rats. METHODS: 40 female Wistar rats had been used (180-220g corporal weight), divided randomly in 4 groups: C (n=10, received vehicle), T (n=10, treated with tamoxifen, 0.3mg/kg/day), D (n=10, diabetic induced by streptozotocin, 45mg/Kg) and DT (n=10, diabetic treated with tamoxifen). Glucose, total cholesterol, triglyceride, total proteins, albumin, urea and creatinin were analyzed using Labtest Kits through the Cobas Mira analyzer (Germany, 1996). RESULTS: Group T presented a reduction of total cholesterol and triglyceride in relation to C, and group D an increase in relation to the other ones. About the total proteins it was observed an increasing in Group T in relation to C. The albumin diminished in groups D and DT in relation to C and T. The urea levels increased in groups D and DT in relation to C and T. CONCLUSION: In relation to the lipidic profile it was evidenced that during the period of 60 days the treatment with tamoxifen promoted a reduction in cholesterol and triglyceride levels in the serum, even associated to the condition of Diabetes mellitus.

Paciente portador de leucemia mielóide crônica, com irmã HLA-compatível foi submetido a transplante alogênico de medula óssea. No dia +90 pós-TMO foi diagnosticado doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) extensa e iniciado protocolo alternado de imunossupressão com altas doses de ciclosporina A e prednisona. O seguimento ambulatorial foi complicado, com granulocitopenia intermitente e quadros frequentes de sinusite e pneumonia. Um ano após o transplante, o paciente apresentou rouquidão e voz anasalada. Foi realizada uma biópsia de corda vocal mas nenhum agente infeccioso pode ser identificado. Na diminuição das doses das drogas imunossupressoras, houve piora da DECH crônica e foi reiniciado esquema de doses altas no dia +550. Três meses após, permanecendo o quadro de DECH fora do controle, foi tentado imunossupressão com azatioprina sem sucesso. Novo episódio de rouquidão foi observado no dia +700, mas nenhum agente pode ser identificado em nova biópsia de corda vocal. Após um mês, o paciente apresentou secreção nasal sanguinolenta e foi realizada uma raspagem cirúrgica dos seios maxilares. Scedosporium apiospermum foi identificado nas culturas iniciando-se itraconazol na dose de 800 mg/dia. O paciente desenvolveu falência respiratória progressiva e foi a óbito em 15 dias.

A forty-year-old man underwent an allogeneic BMT from his HLA identical sister. GvHD prophylaxis was done with cyclosporine (CyA), methotrexate and prednisone (PDN). On day +90 extensive GvHD was noted and higher doses of immunosuppressive drugs alternating CyA with PDN were initiated. Patient's follow-up was complicated by intermittent episodes of leukopenia and monthly episodes of sinusitis or pneumonia. One year after BMT, the patient developed hoarseness and nasal voice. No etiologic agent could be identified on a biopsy sample of the vocal chord. Upon tapering the doses of immunosuppressive drugs, the patient had worsening of chronic GvHD and was reintroduced on high doses of cyclosporine alternating with prednisone on day +550. Three months later, GvHD remained out of control and the patient was started on azathioprine. On day +700, hoarseness and nasal voice recurred. Another biopsy of the left vocal chord failed to demonstrate infection. Episodes of sinusitis became more frequent and azathioprine was withheld 3 months after it was started. One month later, the patient had bloody nasal discharge and surgical drainage of maxillary sinuses was performed. Histopathology showed hyphae and cultures grew Scedosporium apiospermum. ltraconazole 800 mg/day was initiated. The patient developed progressive respiratory failure and died 15 days later.