O agente etiológico da mancha branca do milho (MBM) tem sido alvo de discussão e controvérsia. Inicialmente a doença foi descrita como sendo a mancha foliar de Phaeosphaeria causada por Phaeosphaeria maydis. Outros autores sugeriram a existência de diferentes espécies fúngicas provocando sintomas semelhantes. Recentemente a bactéria Pantoea ananatis foi descrita como sendo o agente causal desta doença. O objetivo deste estudo foi oferecer informações adicionais sobre a correta etiologia da doença proporcionando evidências visuais da presença da bactéria no interior de lesões da MBM por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET) e técnicas moleculares. A MET permitiu visualizar um grande número de células bacterianas nos espaços intercelulares em lesões oriundas de plantas naturalmente e artificialmente infectadas. Estruturas fúngicas não foram visualizadas em lesões jovens. Primers bacterianos para os genes 16S rRNA e rpoB foram usados em reações de PCR para amplificar DNA extraído diretamente de lesões jovens e de lesões necróticas. O oligonucleotídeo universal para fungo, ITS4, foi incluído para identificar a possível presença de estruturas fúngicas nas lesões. Amplificação positiva foi obtida com primers bacterianos, a partir de lesões jovens, natural e artificialmente inoculadas, enquanto que nenhuma amplificação foi observada quando o oligonucleotídeo ITS4 foi usado. Amplificação do DNA com o primer ITS4 foi observada quando o DNA foi extraído de lesões em estádio avançado de necrose. Estes resultados reforçam relatos anteriores que descrevem P. ananatis como patógeno primário da doença e a hipótese de que espécies fúngicas podem colonizar lesões pré-estabelecidas pela P. ananatis.

The etiological agent of maize white spot (MWS) disease has been a subject of controversy and discussion. Initially the disease was described as Phaeosphaeria leaf spot caused by Phaeosphaeria maydis. Other authors have suggested the existence of different fungal species causing similar symptoms. Recently, a bacterium, Pantoea ananatis, was described as the causal agent of this disease. The purpose of this study was to offer additional information on the correct etiology of this disease by providing visual evidence of the presence of the bacterium in the interior of the MWS lesions by using transmission electron microscopy (TEM) and molecular techniques. The TEM allowed visualization of a large amount of bacteria in the intercellular spaces of lesions collected from both artificially and naturally infected plants. Fungal structures were not visualized in young lesions. Bacterial primers for the 16S rRNA and rpoB genes were used in PCR reactions to amplify DNA extracted from water-soaked (young) and necrotic lesions. The universal fungal oligonucleotide ITS4 was also included to identify the possible presence of fungal structures inside lesions. Positive PCR products from water-soaked lesions, both from naturally and artificially inoculated plants, were produced with bacterial primers, whereas no amplification was observed when ITS4 oligonucleotide was used. On the other hand, DNA amplification with ITS4 primer was observed when DNA was isolated from necrotic (old) lesions. These results reinforced previous report of P. ananatis as the primary pathogen and the hypothesis that fungal species may colonize lesions pre-established by P. ananatis.

A antracnose é uma doença freqüente nas hortaliças solanáceas. O agente causal é reportado como o fungo Colletotrichum gloeosporioides. Neste trabalho caracterizou-se a morfologia e a fisiologia de Colletotrichum sp. obtidos de pimenta, pimentão e jiló. A caracterização morfológica se baseou no tamanho e forma dos conídios e na forma dos apressórios de 30 isolados. A caracterização fisiológica foi baseada no crescimento em diferentes temperaturas, utilização de diferentes fontes de carbono e sensibilidade ao fungicida benomyl. Quinze isolados foram cultivados em meio BDA, nas temperaturas de 10, 15, 20, 25, 28, e 30ºC. Trinta e dois isolados foram cultivados em meio mínimo acrescido de glicose, frutose, lactose, maltose, sacarose ou amido. Além disso, 43 isolados foram cultivados em meio BDA suplementado com 0, 1, 10 e 100 mig/mL de benomyl. Os isolados de jiló apresentaram menor sensibilidade ao benomyl e predominância de conídios fusiformes, com ápices afilados e menores dimensões, características semelhantes às citadas para C. acutatum. Os isolados de pimentão e pimenta apresentaram alta sensibilidade ao benomyl e predominância de conídios cilíndricos com ápices arredondados, características citadas para C. gloeosporioides. Apressórios de formato irregular, circular e ovalado foram observados independente do hospedeiro de origem do isolado. O amido foi a fonte de carbono que proporcionou maior desenvolvimento micelial para a maioria dos isolados. A temperatura ótima de desenvolvimento, para todos os isolados, foi próxima a 25ºC, exceto para um único isolado de pimenta, com maior desenvolvimento a 28ºC. A velocidade de crescimento micelial para todos os isolados, em todas as temperaturas testadas, foi semelhante à apresentada pelo isolado padrão de C. acutatum usado no teste. Os isolados de pimentão e pimenta foram os que mostraram maior variabilidade para as características estudadas. Finalmente, ficou demonstrado que C. acutatum também está associado à antracnose nessas solanáceas.

Anthracnose is a very frequent disease of solanaceous crops. The causal agent is reported as Colletotrichum gloeosporioides. In this work, Colletotrichum sp. isolates from hot pepper, sweet pepper and garden egg were characterized based on some of their morphological and physiological characteristics. Morphological characterization was based on the size and shape of conidia and the shape of the apressoria of 30 isolates. Physiological characterization was based on growth in different temperatures, use of different carbon sources and sensitivity to benomyl. Fifteen isolates were cultured on PDA under 10, 15, 20, 25, 28 and 30ºC. Use of carbon sources was achieved by culturing 32 isolates on minimal medium supplemented with glucose, fructose, lactose, maltose, sucrose or starch. To establish benomyl sensitivity, 43 isolates were cultured on PDA supplemented with 0, 1, 10 and 100 mug/mL of the fungicide. Garden egg isolates were less sensitive to benomyl and showed mainly fusiform conidia, with acute ends, similar to C. acutatum. Isolates from hot pepper and sweet pepper were highly sensitive to benomyl and showed mainly cylindrical conidia, with round ends, similar to C. gloeosporioides. Irregular, clavate or circular apressoria were observed in all isolates. Starch was the carbon source that led to the greater mycelial development of most isolates. The optimal temperature for almost all isolates was near to 25ºC, except for an isolate from hot pepper, which developed better at 28ºC. The mycelial growth rates of all isolates, for all tested temperatures, were similar to those showed by C. acutatum used as reference. The isolates collected from sweet pepper and hot pepper showed the greatest variability among the studied characteristics. Finally, it was shown that C. acutatum is also associated to anthracnose in solanaceous crops.

A bactéria Xylella fastidiosa possui uma ampla gama de plantas hospedeiras que inclui espécies de pelo menos 28 famílias de mono e dicotiledôneas. Em cafeeiro (Coffea spp.), a ocorrência dessa bactéria foi relatada previamente em cultivares da espécie Coffea arabica. Estudos foram realizados para determinar a presença de X. fastidiosa em diferentes espécies e híbridos interespecíficos de cafeeiro. As amostragens foram realizadas em dois anos consecutivos. As espécies de cafeeiro examinadas foram: C. kapakata, C. canephora, C. racemosa, C. arabica, C. dewevrei, C. stenophylla e C. eugenioides. Também foram incluídos neste estudo híbridos interespecíficos de C. arabica: C. arabica x C. dewevrei, C. arabica x C. eugenioides, C. arabica x C. racemosa e C. arabica x C. robusta. Foram coletadas amostras de ramos plagiotrópicos de diferentes plantas para cada espécie e híbrido. A detecção de X. fastidiosa nas amostras foi realizada utilizando os testes serológicos de DAS-ELISA e imunofluorescência indireta. A bactéria foi detectada nas sete espécies e nos quatro híbridos de cafeeiro examinados. Entretanto, as plantas aparentemente não apresentavam sintomas de infecção por X. fastidiosa. A espécie C. arabica apresentou a maior proporção de amostras positivas e maiores valores de absorbância no teste de DAS-ELISA. Em contraste, as espécies C. racemosa e C. dewevrei foram as que apresentaram menores proporções de amostras positivas para presença de X. fastidiosa, como também menores valores de absorbância no teste de DAS-ELISA.

The bacterium Xylella fastidiosa has a large host range, including species of 28 different mono and dicotiledoneous plant families. On coffee (Coffea spp.), X. fastidiosa was previously reported only on the species Coffea arabica. Studies were carried out to determine the presence of X. fastidiosa in different species and interspecific hybrids of coffee. The species of coffee included in this study were the following: C. kapakata, C. canephora, C. racemosa, C. arabica, C. dewevrei, C. stenophylla and C. eugenioides. The interespecific hybrids of C. arabica examined were the following: C. arabica x C. dewevrei, C. arabica x C. eugenioides, C. arabica x C. racemosa and C. arabica x C. robusta. Samples were collected from plagiotropic branches of different plants for each species or hybrid. Four replicates were examined for each coffee accession examined. Detection of X. fastidiosa in the samples was determined by DAS-ELISA and indirect immunofluorescence. The bacterium was detected in all seven species and four hybrids of coffee studied. However, the plants did not show any symptom of infection by X. fastidiosa. The species C. arabica showed the highest proportion of positive samples and the largest absorbance values in the DAS-ELISA test. In contrast, the species C. racemosa and C. dewevrei showed the lowest proportion of positive samples for the presence of X. fastidiosa, as well as, the lowest absorbance values in the DAS-ELISA test.