ABSTRACT Campomanesia rufa (O. Berg) Nied. is a Myrtaceae species native to the Brazilian Cerrado. As C. rufa is considered endangered, in vitro propagation is an alternative for its conservation. However, the lack of effective disinfection protocols for endophytic microorganisms naturally present in plant tissues hinders the success of micropropagation. In this context, the objective of this study was to isolate, molecular identify, and control endogenous occurring bacteria of C. rufa propagated in vitro. Purified PCR products of bacterial isolates were sequenced by the Sanger method and aligned with homologous sequences using the Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) available in National Centre for Biotechnology Information (NCBI) database. MEGA7 software was used to align all sequences and to draw phylogenetic trees. Survival, shoot height, and efficiency of antibiotics (streptomycin, ampicillin, and chloramphenicol) at different concentrations in the culture medium were evaluated. Different Bacillus sp. strains were observed in the plant tissues. When testing the control of Bacillus sp. with antibiotics, 32 mg L-1 ampicillin caused a significant reduction in bacterial contamination with no effect on explant survival. On the other hand, 256 mg L-1 streptomycin caused the greatest reduction in contamination but was lethal to over 90% of the explants. This study is the first report on the occurrence of endogenous bacteria and their control in the context of in vitro native species conservation.

RESUMO Campomanesia rufa (O. Berg) Nied. é uma espécie mirtácea nativa do Cerrado brasileiro. Considerada uma espécie ameaçada de extinção, a propagação in vitro de C. rufa apresenta-se como uma alternativa para sua conservação. No entanto, a falta de protocolos eficazes para a desinfecção de microrganismos endofíticos naturalmente presentes nos tecidos vegetais dificulta o sucesso da micropropagação. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi o isolamento, a identificação molecular e o controle de bactérias endógenas de C. rufa propagadas in vitro. Produtos de PCR purificados dos isolados bacterianos foram sequenciados pelo método de Sanger. As sequências obtidas foram alinhadas com sequências homólogas usando Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) disponível na National Centre for Biotechnology Information (NCBI). As sequências obtidas neste estudo e as sequências homólogas listadas no GenBank foram alinhadas usando o software MEGA7 para elaborar árvores filogenéticas. Avaliaram-se a sobrevivência, a altura da parte aérea e a eficiência de antibióticos (estreptomicina, ampicilina e cloranfenicol) em diferentes concentrações no meio de cultura. A ocorrência de diferentes cepas de Bacillus sp. foi observada nos tecidos vegetais. Ao testar o controle de Bacillus sp. com antibióticos, o uso de 32 mg L-1 de ampicilina causou uma redução significativa na contaminação bacteriana sem afetar a sobrevivência do explante. Por outro lado, o uso de 256 mg L-1 de estreptomicina causou a maior redução na contaminação, embora esta concentração tenha sido letal para mais de 90% dos explantes. Este estudo é o primeiro relato sobre a ocorrência de bactérias endógenas e seu controle no contexto da conservação in vitro de espécies nativas.

Resumen La afectación cardíaca por tumor carcinoide (síndrome de Hedinger) sigue siendo una causa importante de morbilidad y mortalidad entre los pacientes con síndrome carcinoide y tumores neuroendocrinos metastásicos. El estudio de imagen inicial ante la sospecha clínica es el ecocardiograma transtorácico, el cual es importante para la detección temprana de la afectación cardíaca. La cirugía cardíaca, en casos apropiados, es la única terapia definitiva para el tumor carcinoide con afectación cardíaca y mejora los síntomas del paciente y la supervivencia. El tratamiento es complejo y multidisciplinario; el estado cardíaco, el síndrome hormonal y la carga tumoral son fundamentales para guiar el momento óptimo de la cirugía. Se presenta el caso de una paciente joven, con síndrome de Hedinger con afectación valvular tricúspide y pulmonar, quien recibió tratamiento quirúrgico y tuvo evolución exitosa.

Abstract Cardiac carcinoid tumor involvement (Hedinger’s syndrome) remains a major cause of morbidity and mortality among patients with carcinoid syndrome and metastatic neuroendocrine tumors. The initial imaging study in case of clinical suspicion is the transthoracic echocardiogram, which is important for the early detection of cardiac involvement. Cardiac surgery, in appropriate cases, is the only definitive therapy for carcinoid tumor with cardiac involvement and improves patient symptoms and survival. Treatment is complex and multidisciplinary; cardiac status, hormonal syndrome, and tumor burden are essential to guide the optimal timing of surgery. The case of a young female patient with Hedinger’s syndrome with tricuspid and pulmonary valve involvement, who received surgical treatment and had a successful evolution.

RESUMO No Brasil, mudas de orquídeas são importadas de vários países, como: Holanda, Taiwan e Tailândia e estão sujeitas a inspeções fitossanitárias. Este trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade fitossanitária, com relação aos vírus de mudas de orquídeas importadas e nacionais através de Teste Imunocromatográfico e de RT-PCR. Detectou-se o Cucumber mosaic vírus em amostras de orquídeas importadas em infecção simples ou mista. Embora o CMV não seja um vírus quarentenário brasileiro e nenhum vírus nesta categoria tenha sido detectado, as amostras examinadas evidenciaram a necessidade de fortalecer um programa nacional de indexação de vírus, evitando a introdução de vírus de outros países através de orquídeas importadas, de forma a minimizar os riscos de fontes de inóculo e introdução de potenciais novas variantes desses vírus, disseminando e prejudicando o agronegócio brasileiro.

ABSTRACT In Brazil, orchid seedlings are imported from several countries, such as: Holland, Taiwan, Thailand, and are subject to phytosanitary inspections. This study aimed to evaluate the phytosanitary quality, considering viruses from imported and domestic orchid seedlings, through immunochromatographic test and RT-PCR. Cucumber mosaic virus (CMV) was detected in imported orchid samples as single or mixed infection. Although CMV is not a Brazilian quarantine virus and no virus in this plant category was detected, the examined samples evidenced the need to strengthen a national virus-indexing program, preventing the introduction of foreign viruses via imported orchids, in order to mitigate the risks of inoculum sources and introduction of potential new variants of these viruses, which can spread and impair Brazilian agribusiness.

RESUMO O uso de gramas cultivadas no Brasil cresceu 40% entre 2010 e 2015, sendo que a espécie Zoysia japonica Steud, principalmente a cultivar ‘Esmeralda’, corresponde a 81% do mercado de gramas cultivadas no país. A doença mais importante da grama zoysia, conhecida por “large patch”, é causada por Rhizoctonia solani, ocorrendo nos gramados brasileiros especialmente nos meses de inverno. O objetivo deste trabalho foi contribuir para a identificação e caracterização do grupo de anastomose de isolados de R. solani provenientes de lesões típicas de “large patch” coletados em grama esmeralda de jardins e campos de golfe nos estados de São Paulo e Bahia, Brasil. Os 12 isolados obtidos apresentaram colônias marrom escuro, com crescimento micelial aéreo, hifas multinucleadas, e ausência de zonação concêntrica ou escleródios, bem como exibiram sua maior taxa de crescimento micelial a 25°C. Em experimentos de patogenicidade, os isolados de R. solani, com exceção de três, reduziram o crescimento das plantas de grama zoysia. Baseado na análise das sequencias da região ITS do rDNA, os isolados agruparam com isolados referências do grupo de anastomose AG 2-2 LP. Inferências filogenéticas mostraram que os isolados brasileiros estão agrupados em dois clados que compartilham o mesmo ancestral comum com 96% booststrap. Em um dos clados estão apenas isolados brasileiros e no outro estão também isolados de R. solani AG 2-2 LP americanos e japoneses. Este é o primeiro relato e caracterização de R. solani AG 2-2 LP em grama zoysia no Brasil.

ABSTRACT The use of cultivated grasses in Brazil has grown by 40% between 2010 and 2015, and the species Zoysia japonica Steud, especially the cultivar ‘Esmeralda’, corresponds to 81% of the grass market in the country. The most important disease affecting zoysia grass, known as large patch, is caused by Rhizoctonia solani and occurs in the Brazilian lawns particularly during winter months. The aim of this study was to contribute to the identification and characterization of the anastomosis group of R. solani isolates from lesions typical of large patch collected from ‘Esmeralda’ grass at gardens and golf courses in the states of São Paulo and Bahia, Brazil. All 12 obtained isolates presented dark-brown colonies with aerial mycelial growth, multinucleated hyphae and absence of concentric zonation or sclerotia, and showed their greatest mycelial growth rate at 25°C. In pathogenicity experiments, except three out of R. solani isolates, reduced the growth of zoysia grass. Based on the analysis of sequences of the rDNA-ITS region, the isolates clustered with reference isolates of the anastomosis group AG 2-2 LP. Phylogenetic inference showed that the Brazilian isolates are grouped into two clades that shared the same common ancestral with 96% bootstrap. One of the clades includes only Brazilian isolates while the other one also includes American and Japanese R. solani isolates AG 2-2 LP. This is the first report and characterization of R. solani AG 2-2 LP in zoysiagrass in Brazil.

Abstract: Authentication of cell lines is of paramount importance to validate the results from their use in biomedical research. Although isoenzyme polymorphism is the standard method, molecular methods based on mitochondrial DNA (mtDNA) have been developed to replace it. The aim of this study was the improvement of our isoenzyme electrophoretic analysis and the validation of one molecular technique targeted at mtDNA for the authentication of our animal cell lines. The combined method of cellular lysing through osmotic shock, followed by freezing-thawing in N2 to obtain isoenzyme extracts, and with 42 × 106 cells maintained the best efficiency. The superior electrophoretic conditions were PAGE run at 200 V. All cell lines had isoenzymatic mobility corresponding to their species to lactate dehydrogenase, malate-dehydrogenase, and glucose-6-phosphate dehydrogenase isoenzymes, and could be distinguished from each other. Two molecular techniques based on mtDNA were tested, one on the cytochrome b gene and other on cytochrome c oxidase I subunit gene. Due to difficulties in distinguishing all cell lines using only one these techniques, we merged the primers of two methods in such a way that there was a sufficient differentiation of all DNA fragments. The sequencing of these PCR products was also performed to validate these data.

RESUMO: Micovírus são vírus que infectam todos os taxa de fungos. São geralmente crípticos (latentes), mas podem causar pequenas ou imperceptíveis alterações no hospedeiro. Nos fungos fitopatogênicos, os vírus podem interferir com os sintomas e, em alguns casos, reduzir a virulência de seu hospedeiro; por esta razão, são objeto de estudo, por serem um potencial agente de biocontrole e por serem ferramentas importantes para o conhecimento sobre os mecanismos de patogênese de fungos. A presente revisão teve o objetivo de reunir os dados de literatura relacionados aos aspectos gerais da biologia e do comportamento dos micovírus presentes em alguns fungos fitopatogênicos.

ABSTRACT: Mycovirus are viruses that infect all taxa of fungi. They are generally cryptic or latent, but they can induce minor or imperceptible changes in hosts. Mycoviruses can interfere with the symptoms induced by phytopathogenic fungi hosts, and in some cases they reduce the virulence of its host. Therefore, they are objects of study since they are potential biocontrol agents and are important tools for knowledge of fungal pathogenesis mechanisms. The aim of this review was to gather literature data concerning general aspects of biology and behavior of mycovirus, focusing some phytopathogenic mycovirus.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi descrever a ocorrência do Tulip breaking virus (TBV, sinonímia Lily mottle virus - LMoV) quarentenário e do Lily symptomless virus (LSV) e suas análises moleculares, para fornecer dados para a remoção do TBV da lista brasileira de pragas quarentenárias A1, pois este vírus está disseminado pelos principais cultivos comerciais de lírio no Brasil. A ocorrência desses vírus foi detectada em 12 regiões produtoras, por meio da reação de transcrição reversa multiplex (RT-PCR), com uso de iniciadores específicos para os genes das respectivas capas proteicas (CP). Foram sequenciados oito fragmentos de 800 nucleotídeos (nt), obtidos de lírios infectados com LMoV, e nove fragmentos de 600 nt, obtidos de lírios infectados com LSV. A reconstrução da árvore filogenética mostrou um ramo robusto que continha as sequências brasileiras de LMoV, outros isolados de LMoV, TBV e Tulip band breaking virus, o que indica que todos são isolados de LMoV, embora agrupados em dois subgrupos. A análise filogenética também mostrou um ramo robusto que suporta todas as sequências brasileiras e outras de LSV, com exceção de um isolado japonês de LSV. Análises de recombinação também mostraram um isolado recombinante de LMoV, enquanto nenhum evento de recombinação foi detectado em LSV. Lily mottle virus é prevalente em cultivos de lírios no Brasil, em infecções simples e mistas com LSV ou Cucumber mosaic virus (CMV).

Abstract: The objective of this work was to describe the occurrence of quarantine Tulip breaking virus (TBV, synonym Lily mottle virus - LMoV) and Lily symptomless virus (LSV), and their respective molecular analyses, to provide data for supporting TBV removal from the Brazilian A1 quarantine pest list, since this virus has spread among the main commercial lily crops in Brazil. The occurrence of these viruses was detected in 12 cultivation areas through multiplex reverse transcription (RT-PCR), using specific primers to genes encoding the respective coat proteins (CP). Eight fragments of 800 nucleotides (nt) obtained from the LMoV-infected lilies and nine fragments of 600 nt from LSV-infected lilies were sequenced. Phylogenetic tree reconstruction showed a robust branch containing the LMoV Brazilian sequences, other LMoV isolates, TBV, and Tulip band breaking virus, suggesting that all are LMoV isolates, although they are clustered into two subgroups. Phylogenetic analysis also showed a robust branch supporting all Brazilian and other LSV sequences, except for an LSV Japanese isolate. Recombination analyses also showed an LMoV recombinant isolate, whereas no recombination events were found among LSV isolates. Lily mottle virus is the prevalent virus in lily crops in Brazil, in single and mixed infections with LSV or Cucumber mosaic virus (CMV).

No Brasil, Anthurium andraeanum tem se destacado como espécie importante para produção de flores e folhas de corte, assim como para cultivo em vaso. Devido ao importante papel das plantas ornamentais na diversificação da agricultura tropical, há grande interesse em conhecer as causas dos problemas que afetam o cultivo de antúrio para melhorar seu potencial produtivo. Este trabalho teve como objetivo identificar o agente causal do mosaico intenso e deformação foliar observados em plantas de antúrios em plantios comerciais em quatro municípios do estado de São Paulo; avaliar a extensão da ocorrência do virus nesses municípios e os métodos para a sua detecção, assim como analisar a reação de genótipos de antúrios em relação a este vírus. Foram amostrados antúrios cultivados em Mogi das Cruzes, Pariquera-Açu, Iguape e Registro. Folhas e espatas de plantas sintomáticas foram utilizadas em ensaios de transmissão mecânica. O vírus induziu sintomas semelhantes aos observados por Cucumber mosaic virus (CMV), em plantas indicadoras, e só foi transmitido quando espatas foram utilizadas como inóculo. Técnicas de PTA-ELISA e RT-PCR foram realizadas para a identificação do CMV em antúrios de todas as propriedades amostradas. Antúrios das variedades IAC, 'Astral', 'Eidibel', 'Garoa' e 'Juréia', e das cultivares 'Caipira' e 'Branco' foram inoculados com CMV e mostraram-se suscetíveis. Alguns dos sintomas observados em antúrios infectados com CMV, embora se assemelhem aos de Dasheen mosaic virus, são mais drásticos por induzir deformação foliar e mosaico intenso. Ambos os vírus são cosmopolitas e transmitidos de modo não persistente por afídeos. Embora o círculo de hospedeiras do CMV seja amplo, o antúrio não consta dessa lista. A eliminação de plantas invasoras, principalmente Commelina sp. e Tradescantia sp., hospedeiras naturais do CMV, a remoção de antúrios sintomáticos e o controle da população de afídeos são recomendações para a cultura de antúrio, uma vez que não há genótipos resistentes disponíveis.

In Brazil, Anthurium andraeanum (flamingo flower) stands out as an important species for cut leaves and flowers productions, as well as potted cultivation. Due to the fact that ornamental plants play an important part in the tropical agriculture diversification, there is great interest to know the problems that affect anthurium cultivation in order to improve its productive potential. The aims of this study were identify the causal agent of intense mosaic and leaf deformation observed in anthurium commercial crops from four cities of the São Paulo state, Brazil; to assess the extent of the virus occurrence in these cities and the methods for its detection, as well as to analyse the anthurium genotypes reactions in relation to the virus. Anthuriums were sampled from the following cities: Mogi das Cruzes, Pariquera-Açu, Iguape and Registro. Leaves and spathes from symptomatic plants were used in mechanical transmission assays. The virus was transmitted only when spathes were used to prepare the inocula, and it induced Cucumber mosaic virus (CMV)-like symptoms in the indicator hosts. PTA-ELISA and RT-PCR were performed to identify the virus species, since CMV was detected in all agricultural areas sampled. Anthuriums from IAC varieties, 'Jureia', 'Garoa', 'Eidibel' and 'Astral' and from 'Caipira' and 'Branco' cultivars were inoculated with CMV and all of them were susceptible to the virus. Some of the symptoms observed in CMV infected anthuriums although similar to those induced by Dasheen mosaic virus, are more severe for inducing leaf deformation and intensive mosaic. Both viruses are worldwide spread and transmitted by aphid in a non-persistent manner. Although CMV has a wide host range, it was not found in the literature the presence of anthurium as a host to the virus. The eradication of weed plants, mainly Commelina and Tradescantia that are CMV natural hosts, the elimination of the symptomatic anthuriums and control of the aphid population should also be done in the anthurium crop, since anthurium genotypes with resistance for CMV are not available.

Infectious bursal disease virus (IBDV) is classified according to the antigenicity and virulence into classical virulent (cv), very virulent (vv), and antigenic variant strains. The molecular basis for the IBDV antigenic variation is well established and is associated to the capsid protein, VP2 (gene VP2 of segment A), whereas both VP2 and the RNA-dependent RNA polymerase, VP1 (gene VP1 of segment B), have been correlated with the virulence. In this study, seventeen Brazilian IBDV samples previously characterized by the VP2 gene as cv (three) and vv (fourteen) strains were genetically and molecularly analyzed for their VP1 gene. All of the strains kept with the same cv or vv classification except one sample, Br/03/DR. This sample was classified as vv by its VP2 gene, but it was most closely related to the cv strains by its VP1 partial sequence and phylogeny. Studies on the phylogeny of VP1 have suggested a possible reassortment event that originated the vvVP1. In this case, the sample carrying vvVP2 and cvVP1 could be a descendant of IBDV ancestors prior to the reassortment of vvVP1; alternatively, it could be the result of a genetic exchange between the segments of different strains or with a live attenuated vaccine. Nevertheless, this is the first report of natural genetic reassortment of IBDV in Brazil.

El presente trabajo se efectuó con tres tipos de cacao, Theobroma cacao L., Criollo (Porcelana, Guasare y Criollo Merideño San Juan-CMSJ) colectados en el estado Mérida; Trinitario (ICS-1) y Foras tero (IMC-67xOC-61), cosechados en el estado Aragua, con la finalidad de evaluar la calidad del proceso de secado y el comportamiento físico del grano. Se efectuaron registros diarios de peso, pH y acidez titulable (AT) en las almendras , así como porcentaje de testa y acidez volátil (AV) al final del secado. El protocolo utilizado fue un secado gradual, en gavetas de madera durante 6 d. Los resultados muestran que la pérdida de peso en los tipos evaluados, se ajusta a una función polinomial Y = a Xm - b X + c con un coeficiente de correlación entre 0,96 y 0,99. Con relación a la AT en cotiledones de los diferentes tipos evaluados (P>0,001) y porcentaje de cascarilla, el Criollo Porcelana presentó valores superiores a las demás variedades. La humedad se mantuvo constante en todos los cacaos .

Three kinds of cocoa were used in this investigation: Criollos (Porcelana, Guasare y Criollo Merideño San Juan) collected in Mérida State; Trinitario: ICS-1 and the Forastero IMC-67xOC-61, harvested in Aragua State. Registrations of Daily weigh, pH and tritable acidity (TA) in the beans percentage of testa (test/head) and volatile acidity (VA) when the dried stage is over were done. The process used was a gradual dried into wooden drawers during six days. The results have shown that the weigh lost in the samples evaluated are set to a polimonial function Y = a Xm - b X + c, with a correlation rate between 0.96 and 0.99. About the TA to the cotyledons of the evaluated cocoas (P>0,001), the Criollo Porcelana had higher values than the rest of the cocoas, humidity remained constant in all cocoas and the highest percentage of hulls was cocoa presented Porcelana.

O setor citrícola enfrenta sérios problemas representados por doenças de flores e frutos jovens que, além de diminuir a produtividade, depreciam os frutos pelo aspecto que conferem aos mesmos. Tais doenças são representadas, principalmente, pela mancha preta dos frutos cítricos (MPC) e pela queda prematura dos frutos cítricos (QPFC), onde a medida predominante de controle é a pulverização com produtos químicos. Entretanto, os custos financeiros e ambientais de aplicações com tais produtos, aliado às crescentes restrições à presença de resíduos, estão a exigir o estudo de novas alternativas. Entre estas, o controle biológico surge como alternativa importante. Sabendo-se que, o conhecimento da biodiversidade dos seres vivos é importante para determinação de suas funções potenciais, o presente trabalho teve por objetivo estudar a diversidade genética, através de marcadores moleculares AFLP, de 32 isolados de B. subtilis com a finalidade de se encontrar, dentre os mesmos, um (ou mais isolados) que apresentasse maior similaridade com o isolado ACB-69, o qual apresenta potencial para o controle da doença. Diante disso, os resultados obtidos neste trabalho, permitiram concluir que: a) os isolados de B. subtilis estudados agruparam-se no filograma de distância genética, independente da procedência ou do hospedeiro; b) os isolados ACB-69 e ACB-83, com potenciais para o controle da queda prematura dos frutos cítricos, compartilham da mesma ancestralidade, o que pode ser inferido pela metodologia aplicada; c) em termos biológicos; o isolado ACB-83 merece mais estudos quanto à viabilidade de controle de doenças de citros, como a queda prematura dos frutos cítricos e a manha preta dos frutos cítricos, sob condições de campo.

The Brazilian citriculture faces with severe problems concerning blooming and young fruit diseases, which cause crop losses and fruit depreciation for market. Such diseases are represented by the postbloom fruit drop (PFD) and by the black spot of citrus (CBS) whose control measures are predominantly through chemical products. However, the economical and environmental disadvantages associated with chemical treatments besides the increasing restrictions on the residuals of pesticides are strong factors that demand new control measures. Among them, the biological control stands out as being an important alternative. Former studies were carried out in laboratory and field conditions aiming at knowing the potentiality of Bacillus subtilis isolates in the control of the above mentioned diseases. Among the tested isolates, the ACB-69 showed the higher control efficiency. This project was undertaken in order to study, by means of AFLP molecular markers, the genetic diversity of 32 isolates of B. subtilis with the aim of discovering isolates as efficient as ACB-69, which could show a comparable control when tested under natural conditions of the disease occurrence. It was found from the results gathered here that: (i) the studied isolates of B. subtilis were grouped in the phylogram of a genetic distance, regardless of the precedence or host; (ii) the isolates ACB-69 and ACB-83, with potential for the control of the postbloom fruit drop, share the same ancestry, which is inferred by the methodology employed here; (iii) in biological terms, the isolate ACB-83 demands additional studies concerning its feasibility on the control of both diseases in field conditions.

El sector citrícola enfrenta serios problemas representados por enfermedades en las flores y en frutos jóvenes que además de disminuir la productividad, devalúan los frutos por el aspecto que le dan a los mismos. Tales enfermedades están representadas, principalmente, por la mancha negra de los frutos cítricos (MNC) y por la caída prematura de los frutos cítricos (CPFC), donde la medida predominante de control es la pulverización con productos químicos. Entretanto, los costos financieros y ambientales de las aplicaciones con estés productos químicos, sumado a las crecientes restricciones de la presencia de residuos, están a exigir el estudio de nuevas alternativas de control. Entre estas, el control biológico surge como una alternativa importante. Estudios fueron anteriormente realizados, bajo condiciones de laboratorio y de campo, con el objetivo de determinar la potencialidad de aislados de Bacillus subtilis en el control de las enfermedades mencionadas arriba, puesto que, uno aislado, el ACB-69 fue el que presentó la mejor eficiencia de control. Frente a lo anteriormente expuesto y, sabiendo que, el conocimiento de la biodiversidad de los seres es importante para la determinación de sus funciones potenciales, el presente proyecto de investigación tuvo como objetivo estudiar la diversidad genética, a través de marcadores moleculares AFLP, de 32 aislamientos de B. subtilis con la finalidad de se encontrar, dentro los mismos, uno (o más aislados) que presentase mayor semejanza con el ACB-69 y que cuando testado, bajo condiciones naturales de ocurrencia de las enfermedades, si puede encontrar similar control. En función de los resultados experimentales obtenidos, se concluyo que: (a) los aislados de B. subtilis estudiados se agruparon en el filograma de distancia genética, independiente de la procedencia o del huésped; (b) los aislados ACB-69 y ACB-83, con potencial para el control de la caída prematura de los frutos cítricos, comparten la misma ancestralidad, lo que puede ser evaluado por la metodología aplicada; c) en términos biológicos, el aislado ACB-83 merece mas estudios cuanto a la viabilidad de control de las enfermedades caída prematura de los frutos cítricos y de la mancha negra, bajo condiciones de campo.

O cultivo e comercialização de plantas ornamentais têm aumentado consideravelmente nos últimos anos. Para suprir a demanda comercial, diversas variedades de Hemerocallis sp. e Impatiens hawkeri têm sido desenvolvidas pelas qualidades apreciáveis como flores com diversidade de formas e cores. Com o objetivo de caracterizar o tobamovirus isolado de Hemerocallis sp. (tobamo-H) e Impatiens hawkeri (tobamo-I) provenientes dos EUA e São Paulo, respectivamente, assim como estabelecer relações filogenéticas entre os isolados e outras espécies de Tobamovirus, foram realizados extrações do RNA, RT-PCR, seqüenciamento do gene da capa protéica e análises filogenéticas. Quando foram comparadas seqüências homólogas de tobamovirus, valores superiores a 98,5% de identidade, ao nível de nucleotídeos, foram obtidos com isolados do Tomato mosaic virus (ToMV). Em relação ao tobamo-H, foi encontrado 100% de identidade com o ToMV isolado de tomateiro da Austrália e do Peru. Com base em análise de máxima verossimilhança (MV), sugere-se que o tobamo-H e tobamo-I compartilham um ancestral comum com ToMV, Tobacco mosaic virus, Odontoglossum ringspot virus e Pepper mild mottle virus. A topologia da árvore reconstruída a partir de MV mostra um grupo monofilético, sustentado por 100% de "bootstrap", formado por vários isolados de ToMV de diferentes hospedeiras, incluindo ornamentais, a partir de diferentes localizações geográficas. Os resultados indicam que Hemerocallis sp.e I. hawkeri estão infectados pelo ToMV, sendo esse o primeiro relato desse vírus em ornamentais, no Brasil.

The culture and commercialization of ornamental plants have considerably increased in the last years. To supply the commercial demand, several Hemerocallis and Impatiens varieties have been bred for appreciated qualities such as flowers with a diversity of shapes and colors. With the aim of characterizing the tobamovirus isolated from Hemerocallis sp. (tobamo-H) and Impatiens hawkeri (tobamo-I) from the USA and São Paulo, respectively, as well as to establish phylogenetic relationships between them and other Tobamovirus species, the viruses were submitted to RNA extraction, RT-PCR amplification, coat-protein gene sequencing and phylogenetic analyses. Comparison of tobamovirus homologous sequences yielded values superior to 98.5% of identity with Tomato mosaic virus (ToMV) isolates at the nucleotide level. In relation to tobamo-H, 100% of identity with ToMV from tomatoes from Australia and Peru was found. Based on maximum likelihood (ML) analysis it was suggested that tobamo-H and tobamo-I share a common ancestor with ToMV, Tobacco mosaic virus, Odontoglossum ringspot virus and Pepper mild mottle virus. The tree topology reconstructed under ML methodology shows a monophyletic group, supported by 100% of bootstrap, consisting of various ToMV isolates from different hosts, including some ornamentals, from different geographical locations. The results indicate that Hemerocallis sp. and I. hawkeri are infected by ToMV. This is the first report of the occurrence of this virus in ornamental species in Brazil.