RESUMO: A avaliação das propriedades histológicas e da expressão de genes e proteínas em biópsias tem sido determinante para o entendimento da fisiopatologia, o diagnóstico e o prognóstico das enfermidades. Entretanto, a obtenção de biópsias do casco é um procedimento com limitações devido à ausência de técnicas e instrumentos específicos. O objetivo foi desenvolver e testar, na espécie bovina, um instrumento cirúrgico especificamente desenvolvido para realização de biópsias de casco nominado lamelótomo de Falcão-Faleiros (INPI, BR102013018765-8). Utilizaram-se cinco bovinos adultos que foram sedados, contidos em decúbito lateral e tiveram dois dígitos anestesiados. Em seguida, uma serra circular acoplada a uma microretífica foi usada para o desgaste do estrato córneo na parede dorsal até próximo do estrato lamelar. Após incisões retilíneas delimitando a borda interna da área desgastada, utilizou-se o lamelótomo para obtenção da amostra. Os fragmentos de 16mm de comprimento e 6mm de profundidade foram fixados em formalina e processados para histologia com colorações HE, PAS, Shorr e tricrômico de Masson. Nenhum dos animais apresentou claudicação ou complicação relevantes no período pós-opertório. As amostras foram consideradas adequadas quanto à integridade das lâminas e à preservação de sua arquitetura. Obtiveram-se média de 85 lâminas epidérmicas viáveis por biópsia. Conclui-se que o lamelótomo de Falcão-Faleiros é apropriado e seguro para a obtenção de biópsias de casco em bovinos, se mostrando promissor para uso em estudos clínicos e na rotina de diagnóstico de problemas podais em bovinos.

ABSTRACT: The histological and molecular analysis of biopsy samples are fundamental steps for the understanding of physiopathology, diagnosis and prognosis of the diseases. However, harvest of tissue biopsies from hoof lamellar tissue is a procedure with limitations due to lack of effective surgical instruments and techniques. The aim of the current study is to develop and test in vivo a surgical instrument with the specific purpose of harvesting lamellar tissue in cattle. A prototype called Falcão-Faleiros’ lamellotome (INPIBR102013018765-8) was designed, produced and tested. After sedation, five adult cattle were restrained in lateral recumbency and locally anesthetized in two digits. The stratum corneum was worn down using a rotary tool coupled to a 3/8” high-speed cutter until the soft tissue proximity was reached. Next, the inner edge of the worn area was bounded with a scalpel. The lamellotome was introduced to obtain and hold the sample. The histological specimens of 16mm length by 6mm depth were stained with HE, PAS, Masson’s thricome and Shorr. The structures of interest were differentiated in the histological analysis without technical artifacts and a mean number of 85 epidermal laminae per sample were counted. No relevant lameness or wound complication were seen following the procedure. In conclusion the technique using the lamellotme was effective in obtaining lamellar tissue biopsy samples without causing clinical harm in cattle. The procedure showed potential to be used in clinical research or even as a supplementary diagnosis method for routine bovine podiatry.

RESUMO: Estudos prévios têm demonstrado alterações radiográficas em cascos de equinos obesos. Os objetivos foram estudar, com avaliação radiográfica, a relação espacial entre estojo córneo e falange distal de éguas jovens da raça Campolina com e sem obesidade. Foram utilizadas 22 éguas entre três e cinco anos de idade, sendo analisadas varáveis de adiposidade e medidas radiográficas dos cascos dos membros torácicos de éguas com escore corporal de 5 a 7/9 (Grupo Controle) e de 8 a 9 (Grupo Obeso). Foram feitas comparações entre os grupos e correlacionaram-se as variáveis de adiposidade entre si, variáveis adiposidade com variáveis casco e variáveis de casco entre si. Utilizou-se o teste t de Student para variáveis paramétricas e o teste Mann-Whitney para as não-paramétricas, para as medidas de correlação, utilizou o teste de Pearson para duas amostras paramétricas e o teste de Spearman para comparações que envolvam pelo menos uma variável não paramétrica (P<0,05). Os resultados demonstraram que éguas Campolinas obesas, ainda jovens, já apresentam indícios de alteração na relação espacial entre estojo córneo e falange distal.

ABSTRACT: Previous studies have demonstrated radiographic changes in the hoof of obese horses. The objective was to study through radiographic evaluation the spatial relationship between the hoof capsule and the distal phalanx of Campolina mares with and without obesity. Twenty-two Campolina mares 3 to 5 years old were used. We analyzed adiposity variables and radiographic measurements of the hoof of both forelimbs of mares with body condition score from 5 to 7/9 (Control group) and from 8 to 9 (Obese group). Comparisons were made between groups using the Student t test for parametric variables and the Mann-Whitney test for the nonparametric ones. Pearson or Spearman tests were used to evaluate the correlation among parametric and nonparametric variables respectively (P<0.05). Evidences of changes in the spatial relationship between the hoof capsule and the distal phalanx were observed in obese Campolina young mares.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar o reparo da cartilagem hialina equina, por meio de análises macroscópica (através de videoartroscopia) e histológica (através de fragmentos de biopsia), em defeitos condrais induzidos na tróclea lateral do fêmur tratados pela técnica de microperfurações subcondral associada ou não com administração intra-articular de cartogenina. Foram utilizados seis equinos pesando em média (±DP) 342±1,58 kg, com a idade aproximada de 7,2±1,30 anos e escore corporal de 7,1±0,75, que foram submetidos a videoartroscopia para indução da lesão condral de 1 cm2 na tróclea lateral do fêmur e realização da técnica de microperfuração do osso subcondral de ambos os joelhos. Foram realizadas quatro aplicações semanais com 20 μM de cartogenina intra-articulares em um dos joelhos (grupo tratado) e solução de ringer com lactato na articulação contralateral (grupo controle). Após o período de 60 dias, foram feitas as avaliações macroscópicas, através de videoartroscopias, e histológicas, através de biopsia. Não foram observadas diferenças significativas nos escores macroscópicos e histológicos para reparação condral entre animais dos grupos tratados e não tratados (P>0,05). De modo geral, a porcentagem média de cartilagem hialina no tecido de reparo (17,5%) foi condizente com a literatura internacional usando outros tipos de perfuração condral. Entretanto, não se observaram diferenças estatísticas entre grupos (P>0,05). A terapia com cartogenina, segundo protocolo utilizado, não produziu melhora do processo cicatricial em lesões condrais induzidas e tratadas com microperfurações na tróclea lateral do fêmur em equinos.

Abstract The aim of this study was to evaluate the joint cartilage repair by macroscopic (via arthroscopy) and histological (biopsy fragments) analyses in chondral defects induced into equine femoral trochlea treated by microperforation associated with or without intra-articular administration of kartogenin. Six horses weighing 342±1.58 kg (mean ± SD), aged approximately 7.2±1.30 years and with a body condition score of 7.1±0.75, were used. The horses underwent arthroscopy for induction of 1-cm2 chondral lesions in lateral femoral trochlea immediately treated by microperforation of the subchondral bone of both knees. Four weekly intra-articular injections of kartogenin (20μM) in one knee (treated group) and Ringer lactate solution in the contralateral joint (control group) were performed during the postoperative period. After 60 days, macroscopic evaluations were performed by video-arthroscopy, and biopsy samples of the repair tissue were taken for histopathological healing evaluation. No significant change was observed in macroscopic and histological scores for chondral healing between treated and untreated groups (P>0.05). The overall mean percentage of hyaline cartilage in both groups (17.5%) was consistent with other international studies using other types of chondral microperforation; however, no statistical differences were observed between groups (P>0.05). In conclusion, the therapy with kartogenin, according to the used protocol, did not produce any macroscopic and histological healing improvement in induced chondral lesions treated with microperforations in equine femoral trochlea.

Essential oils are known for their insect control potential, which is mainly attributed to the presence of terpenes that interfere with hormonal and physiological processes of arthropods. The aim of the present study was to evaluate the effects of essential oil from the leaves of Eugenia sulcata Spring ex Mart., Myrtaceae, on the development of two species of agricultural pest insects, Dysdercus peruvianus and Oncopeltus fasciatus.Results showed that the essential oil induced mortality, and reduced numbers of adults. Topical treatment of Oncopeltus fasciatus using pure essential oil caused significant mortality rates (96.67%), while Dysdercus peruvianus had a higher tolerance, with 80% mortality at the end of the experiments. Results suggest that essential oil from the leaves of Eugenia sulcata may be used in agriculture for insect pest control.

A adenite equina é uma enfermidade economicamente importante de equinos, causada por Streptococcus equi subsp. equi. Seu diagnóstico pode ser confirmado de forma direta, por meio de isolamento bacteriano e de PCR, ou de forma indireta, por meio de ELISA, método baseado na detecção de anticorpos séricos. O objetivo deste estudo foi clonar, expressar e caracterizar a proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi, avaliar sua utilização como antígeno em um ELISA indireto e determinar a capacidade do teste de distinguir soros de animais negativos, vacinados e positivos. Para tal, foi inicialmente realizada a clonagem do gene que codifica para a proteína SeM e sua expressão em Escherichia coli. Posteriormente, a proteína produzida foi caracterizada e utilizada como antígeno em um teste de ELISA indireto. Para avaliação do teste, foram utilizadas amostras de soro de 40 potros negativos, de 46 equinos vacinados com uma vacina comercial contra adenite equina e de 46 equinos com diagnóstico da doença. O teste demonstrou alta sensibilidade e especificidade, permitindo discriminar entre soros negativos e positivos, positivos e de animais vacinados, e negativos e de animais vacinados. Assim, conclui-se que a proteína rSeM produzida pode ser usada como antígeno para o diagnóstico da enfermidade e que o ELISA descrito pode ser útil para avaliar o estado imunológico do rebanho.

Strangles is an economically important horse disease caused by Streptococcus equi subsp. equi. The diagnosis can be confirmed either directly by bacterial isolation and PCR or by ELISA, which is an indirect method based on the detection of serum antibodies. The aim of this study was to clone, express and characterize the SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi, evaluate its use as antigen in indirect ELISA and determine its performance to distinguish sera of negative, vaccinated and positive animals. This was initially performed by cloning the gene encoding the SeM protein and its expression in Escherichia coli. Subsequently, the protein produced was characterized and used as antigen in ELISA. Serum samples for evaluation were taken from 40 negative foals, 46 horses vaccinated with a commercial vaccine against strangles and 46 horses diagnosed with the disease. The test showed high specificity and sensitivity, allowing discrimination between negative and positive, positive and vaccinated animals, and vaccinated animals and negative sera. Thus, it was concluded that the protein produced rSeM, which can be used as antigen for disease diagnosis, and the described ELISA might be helpful to evaluate the immune status of the herd.

The objective of this research was to evaluate the interference of ethanol consumption by female rats with cytokines involved in the sepsis process and its correlation with mortality, the main outcome of sepsis. Female Wistar rats in estrus phase were evaluated in three experiments. Experiment 1 (n=40) was performed to determine survival rates. Experiment 2 (n=69) was designed for biochemical analysis, measurement of cytokine and estrogen levels before and after sepsis, and experiment 3 (n=10) was performed to evaluate bacterial growth by colony counts of peritoneal fluid. In all experiments, treated animals were exposed to a 10% ethanol/water solution (v/v) as the single drinking source, while untreated animals were given tap water. After 4 weeks, sepsis was induced in the rats by ip injection of feces. In experiment 1, mortality in ethanol-exposed animals was delayed compared with those that drank water (48 h; P=0.0001). Experiment 2 showed increased tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and decreased interleukin-6 (IL-6) and macrophage migration inhibitory factor in septic animals exposed to ethanol compared to septic animals not exposed. Sepsis also increased TNF-α and IL-6 levels in both ethanol- and water-exposed groups. Biochemical analysis showed higher creatinine, alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase and decreased glucose levels in septic animals that were exposed to ethanol. In experiment 3, septic animals exposed to ethanol showed decreased numbers of colony-forming units than septic animals exposed to water. These results suggest that ethanol consumption delays the mortality of female rats in estrus phase after sepsis induction. Female characteristics, most probably sex hormones, may be involved in cytokine expression.

O objetivo deste estudo foi isolar microrganismos produtores de lipase e avaliar a eficiência de remoção de DQO no tratamento de soro de leite sob diferentes condições operacionais. Os microrganismos foram isolados a partir do soro de queijo e de um produto comercial,e foram selecionados os três microrganismos que obtiveram a melhor resposta no teste da atividade lipolítica, através do índice enzimático. Em seguida, inocularam-se os micro-organismos em amostras de soro de queijo esterilizado, para dois valores de pH (6,2 e 7,0), incubaram-se a 35 ºC e 150 rpm em shaker e mensuram-se em dois períodos de tempo (24 e 48 h) a atividade lipásica e a eficiência de remoção de DQO.Após a incubação, observou-se que os tratamentos apresentaram boa eficiência de remoção de DQO para o pré-tratamento,e o microrganismo (S1) isolado a partir do soro de queijo apresentou a maior produção de lipase. Com relação às variáveis pH e tempo, não houve efeito significativo entre os dois fatores avaliados. Entre todos os tratamentos aplicados, T2 (S1, pH 7,0 e 24 h) foi o que obteve maior produção enzimática (4,87 U mL-1).

The aim of this study was to isolate microorganisms that produce lipase and to assess the efficiency of COD removal intreatment of cheese whey under different operating conditions. The microorganisms were isolated from cheese whey and a commercial product; it was selectedthreemicroorganisms that obtained the best response to the lipolytic activity test through the enzyme index. Then, the microorganisms were inoculated in sterilized cheese whey samples, for two pH values (6.2 and 7.0), incubated at 35 °C and 150 rpm in shaker and the lipolityc activity and the efficiency of COD removal were measured in two time periods (24 and 48h). After incubation, it was observed that the treatments showed a good removal efficiency of COD for the pre-treatment and the isolated microorganism (S1) from the cheese whey showed the highest lipase production. Regarding the pH and time variables, there was not significant effect between the two evaluated factors. Among all treatments, T2 (S1, pH 7.0 and 24h) obtained more enzyme production (4.87 U mL-1).

Uma cadela da raça Pinscher Miniatura foi medicada pelo proprietário com enrofloxacina, na dose de 50mg/kg, uma vez ao dia, por dois dias (dose diária 10 vezes maior que a prescrita). Ao exame clínico o animal apresentou-se deprimido, em cifose lombar, hipotérmico, com mucosas pálidas, dispnéia, sialorréia, vômitos e anúria, evoluindo para parada respiratória, convulsões e coma. Foi realizado tratamento sintomático. O fluxo urinário retornou ao normal em 12 horas e as convulsões foram controladas, mas o animal permaneceu em coma, morrendo 72 horas após o início do tratamento. A necropsia e o histopatológico confirmaram insuficiência renal e hepática agudas, e choque hipovolêmico, compatível com intoxicação por enrofloxacina.

A Miniature Pinscher bitch was treated by the owner with enrofloxacin at dose of 50 mg/kg, once a day, for two days (daily dose rate 10 times greater than prescribed). Physical examination showed depression, lumbar cifosis, hipotermia, pale mucosa, dispneia, drewling, vomiting and anuria, followed by respiratory failure, seizures, and coma. Symptomatic treatment was performed, and the urinary flow returned to normal in 12 hours, and seizures were controlled. However, the animal stayed in coma, and died 72 hours after the beginning of the treatment. Acute renal and hepatic failure, and hipovolemic shock, compatible with enrofloxacin intoxication, were observed through necropsia and histopatology.

As infecções dos espaços cervicais profundos, embora raras, associam-se a alta morbi-mortalidade. A abordagem cirúrgica faz-se necessária na maioria dos casos e se baseia no conhecimento da complexa anatomia das fáscias cervicais e dos espaços cervicais profundos. OBJETIVO. Apresentar considerações anatômicas de interesse prático sobre fáscias e espaços do pescoço, sua conceituação e nomenclatura, relatando, a título de exemplo, quatro casos de infecções dos espaços cervicais profundos. MATERIAL E MÉTODO. São apresentados um caso de angina de Ludwig complicada com mediastinite, pericardite, pneumonia, empiema pleural, fístula esofágica e choque séptico, um caso de abscesso cervical espontâneo em paciente diabético, um caso de abscesso de loja submandibular e um caso de abscesso parafaríngeo iniciado após manipulação dentária. Nos quatro casos, a documentação imagenológica é rica e, em dois deles, evidencia o comprometimento de mais de um espaço profundo do pescoço. CONCLUSÕES. A literatura enfatiza morbidade e mortalidade elevadas, etiologia diversificada (infecções dentárias, uso de drogas endovenosas, infecções do trato aerodigestivo alto e outras), a necessidade de traqueostomia em cerca de 50% dos casos e o emprego da terapêutica combinada (antibioticoterapia e abordagem cirúrgica do pescoço). Os métodos imagenológicos, como a tomografia computadorizada, são imprescindíveis no estudo de infecções dos espaços profundos do pescoço, tanto para a avaliação do sítio e extensão da afecção, como para o planejamento terapêutico.

BACKGROUND. Although rare, deep neck space infections are associated with high morbidity and mortality rates. The surgical approach is necessary in the majority of the cases, and the surgeon must know the complex anatomy of the cervical fasciae and deep neck spaces. PURPOSE. The anatomy of the cervical fasciae and deep neck spaces is reviewed. As an illustration, a series of deep neck space infections is presented. MATERIAL AND METHOD. Four clinical cases are reported: 1) a case of Ludwig's angina with several complications (mediastinitis, pericarditis, pneumonia, pleural effusion and empyema, esophageal fistula and septic shock), 2) a case of cervical abscess that appeared without apparent cause, in a young diabetic patient, 3) a case of abscess of the submandibular triangle, and 4) a case of parapharyngeal abscess that came forth after a dental treatment. Data from history taking, physical examination, X-rays, echography, CT scan and treatment and the follow-up are presented. The image tests were valuable and, in two of the cases, they demonstrated that more than one deep neck space were affected. CONCLUSIONS. The literature reinforces the high mortality and morbidity rates, the diversified etiology (dental infection, intravenous drug abuse, infections of the upper aerodigestive tract and others), and the tracheostomy indication made in about half of the cases. It stresses also the need for combined therapy (antibiotics and surgery). Evaluation with CT scan and other radiologic methods is indispensable to determine the site and extent of the process and to plan properly the treatment.