RESUMO: Amostras de leite foram coletadas de tanques de refrigeração (após 48h de refrigeração) em cinco fazendas de produção e do respectivo caminhão tanque (leite de conjunto, LC) ao chegar à indústria beneficiadora. Análises físico químicas de rotina e quantificação das populações de bactérias psicrotróficas ( Pseudomonas spp. e P. fluorescens ) e aeróbios mesófilos (AM) foram realizadas. Apenas os valores de densidade relativa e acidez titulável de amostras de leite de três fazendas estavam de acordo com a legislação. No LC, apenas o teor de proteína não atingiu o valor mínimo estabelecido por lei, e a contagem foi realizada para AM (>105 unidades formadoras de colônias (UFC) mL-1) e psicrotróficos (2,8x106UFC mL-1). A contagem de Pseudomonas spp. correspondeu a 17,9% da população de psicrotróficos, e 3,4% da contagem de Pseudomonas spp. eram da espécie P. fluorescens . Nas amostras de leite das fazendas de produtoras, as contagens foram variáveis para AM (3,4x105a 3,7x107UFC mL-1), psicrotróficos (4,0x104 a 3,1x106UFC mL-1), Pseudomonas spp. (2,3x104 a 1,8x105UFC mL-1) e P. fluorescens (62 a 8,4x103UFC mL-1). Para as populações estudadas, nenhuma diferença estatística (P>0,05) foi observada entre as contagens encontradas nas amostras de leite coletadas nas fazendas (tanques de resfriamento) e do LC. Portanto, o gênero Pseudomonas spp. e a espécie P. fluorescens não foram os psicrotróficos mais frequentes nesta linha de transporte de leite estudada.

ABSTRACT: Raw milk samples were collected from cooling tanks (after they cooled for 48 h) in five dairy farms and the corresponding bulk tank (bulk milk transportation, BMT) when they arrived to the industry. Routine physical chemical analyzes and quantification of psychrotrophic ( Pseudomonas spp. and P. fluorescens ) and aerobic mesophilic (AM) populations were performed. Only relative density and titratable acidity values for samples of milk from three farms were in agreement to the quality parameters required by law. In the BMT, only the protein content has not reached the minimum value established by law, and counting was performed for AM (>105 colony forming units (CFU) mL-1) and psychrotrophic bacteria (2.8x106CFU mL-1). Pseudomonas spp. counting corresponded to 17.9% of the psychrotrophic population, and P. fluorescens was 3.4% of Pseudomonas spp . count. In milk samples from dairy farms, counts were variable for AM (3.4x105 to 3.7 x107CFU mL-1), psychrotrophic (4.0x104 to 3.1x106CFU mL-1), Pseudomonas spp. (2.3x104 to 1.8x105CFU mL-1), and P. fluorescens (62 to 8.4x103CFU mL-1). For the populations studied, no statistical difference (P>0.05) was observed between counts reported in milk samples collected in dairy farms (cooling tanks) and BMT. Therefore, the genera Pseudomonas spp. and P. fluorescens were not the most frequent psychrotrophic bacteria in this studied milk transportation line.

The use of efficient methods for the early diagnosis of subclinical mastitis is of great importance in milk production. By using an electrical conductivity meter (EC), the efficiency of subclinical mastitis diagnosis was evaluated in dairy farms in northern Parana, Brazil, and the results were compared with those obtained by using the California Mastitis Test and the Somatic Cell Count (SCC). Samples from 941 quarters of 259 cows of the Holstein and Jersey breeds were analyzed in four dairy farms between June and July 2014. The EC method correctly evaluated 54.8% of the samples (264 samples with subclinical mastitis) and 250 without infection when compared with the diagnosis by CMT. Of the 445 samples diagnosed as positive by EC, 19.7% were classified by CMT with score 2 and 24.7% with score 3. Of the samples with negative results (496), most of them had scores 0 and 1 (50.4% and 21.4 %). The correlations between EC and SCC (r = 0.14) and EC and CMT (r = 0.17) were positive but low, which generated false positive and false negative results of subclinical mastitis in the herd.

El uso de métodos eficientes para el diagnóstico rápido de la mastitis subclínica es de gran importancia en la producción de leche. Mediante el empleo de un medidor de conductividad eléctrica (CE), se evaluó la eficacia del diagnóstico de mastitis subclínica en granjas de leche del norte de Paraná, en Brasil, y se compararon los resultados con la Prueba de California para Mastitis (CMT, del inglés California Mastitis Test) y con el conteo de células somáticas (CCS). Se analizaron 941 cuartos mamarios, obtenidos de 259 vacas de las razas Holstein y Jersey en cuatro granjas lecheras, entre junio y julio de 2014. La CE evaluó correctamente 54,8% de las muestras (264 muestras con mastitis subclínica) y 250 sin infección en comparación con el diagnóstico de CMT. De las 445 muestras diagnosticadas como positiva para EC, 19,7% se clasificaron por la CMT, con una puntuación de 2 y 24,7% con una puntuación de 3. Entre los resultados negativos (496 muestras), la mayoría de las muestras tuvieron una puntuación entre 0 y 1 (50,4% y 21,4%). Hubo una correlación positiva (p <0.001); sin embargo, resultó baja entre CE y CCS (r = 0.14) y CE y CMT (r = 0.17), por lo que generaron resultados falsos positivos y falsos negativos de la mastitis subclínica en el hato.

The main components in milk from cows that are affected by mastitis can be in different amounts according to the racial characteristics. Thus, the association between the somatic cell counts (SCC) and these components may also differ in milk from Jersey cows. This study evaluated the effect of the SCC in milk from Jersey cows on milk production and its physicochemical composition. For 71 months, data from 3244 milking and 300 cows were evaluated considering the effect of the SCC on milk production (kg cow day-1), percentage of fat, protein, lactose, total solids, and nonfat solids. The probable factors associated with fluctuation in milk production based on somatic cell score, lactation number and rainfall were also evaluated by regression models. Milk composition was changed according to the SCC. In general, the higher the SCC in milk, the lower the contents of lactose, fat, and solids, with exception of the protein content, which increased. Losses in milk production of Jersey cows were observed for milk with counts above 50,000 somatic cells per ml.

Los principales componentes de la leche en vacas que tienen mastitis pueden estar en diferentes cantidades de acuerdo con la raza. Por lo tanto, la asociación entre el recuento de células somáticas (RCS) y estos componentes también pueden diferir en la leche de vacas Jersey. Este estudio evaluó el efecto del RCS en leche de vacas Jersey en la productividad y la composición físico-química. Durante 71 meses se evaluaron los datos de 300 vacas y 3 244 ordeños; para ello se consideraron el efecto de RCS en la producción de leche (kg/vaca/día), el porcentaje de grasa, la proteína, la lactosa, los sólidos totales y los sólidos no grasos. Los probables factores asociados con las fluctuaciones en la producción de leche, sobre la base de la puntuación de células somáticas, número de lactaciones y precipitación de lluvia; también se evaluaron por regresión lineal. La composición de la leche estuvo influenciada por el RCS. En general, cuanto mayor fue el número de células somáticas en la leche, menor fue el contenido de lactosa, de grasa y de sólidos, con excepción del contenido de proteínas que se incrementó. Se observaron pérdidas en la producción de leche en vacas Jersey para la leche con recuentos superiores a 50 000 células somáticas/ml.

Sheep milk is the third most consumed milk in Brazil. It is much appreciated for its nutritional status and is important for children that have problems with cow milk. Little information is known about the chemical, physical and microbiological composition of sheep milk from South Brazil. Thus, the aim of this study was to describe chemical and microbiological characteristics of sheep milk produced on two rural properties located in southern Brazil (Paraná and Rio Grande do Sul). The chemical composition of sheep milk was 17.32 g/100 g total solids, 5.86 g/100 g total protein, 4.46 g/100 g casein, 1.08 g/100 g whey protein, 7.28 g/100 g fat, 0.93 g/100 g ash, and 3.41 g/100 g lactose. High somatic cell count (1.7x106 cells/mL), total mesophilic bacterias (16.0x106 CFU/mL) and psychrotrophics (5.8x106 CFU/mL) were observed. Growth of Staphylococcus aureus, enterobacteria and coliforms occurred in 100% of the samples, and 45% of the samples showed growth of Escherichia coli. The sheep milk physical-chemical and microbiology parameters are similar to those presented in the literature for other countries but somatic cell count presented high levels.

O leite de ovelha é o terceiro mais consumido no Brasil, e é muito apreciado devido ao seu aspecto nutricional. Pouca informação a respeito da composição química e microbiológica do leite de ovelha no Brasil é conhecida. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o leite ovino produzido em duas propriedades rurais localizadas no Sul do Brasil (Paraná e Rio Grande do Sul). A composição química do leite de ovelha foi 17,32 g/100 g de sólidos totais; 5,86 g/100 g de proteína total; 4,46 g/100 g de caseína; 1,08 g/100 g de soro proteico; 7,28 g/100 g de gordura; 0,93 g/100 g de cinzas e 3.41 g/100 g de lactose. Altas contagens de células somáticas (1,7x106 células/mL), bactérias mesófilas (16,0 x106 UFC/mL) e psicrotróficos (5,8x106 UFC/mL) foram observadas. Multiplicação de Staphylococcus aureus, enterobactérias e coliformes ocorreu em 100% das amostras, 45% de amostras apresentou multiplicação de Escherichia coli. Os parâmetros físico-químicos e microbiológicos do leite ovino deste estudo são semelhantes a literatura para outros países, porém, a contagem de células somáticas foi elevada.

Probiotics are live microorganisms capable of producing beneficial effects on its host when consumed in adequate amounts. To exert these effects, foods must contain probiotic microorganisms in populations above 106 CFU / g or mL throughout its shelf life. One of the strategies to ensure high population of probiotics in fermented milk is to add them during or after the fermentation process separately from the starter cultures. The objective of this study was to investigate the behavior of the probiotic microorganism Lactobacillus casei added to yoghurt in different stages of production. Yoghurts with L. casei were produced at different stages: before addition of starter (Streptococcus salivarius subsp. thermophilus and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus), added together with this culture and at the end of fermentation. Yoghurt without probiotic added was produced as a control. The products were stored at 4 °C and analyzed after 1, 7, 14 and 21 days of storage. In these periods, the populations of probiotic and starter cultures were enumerated and the parameters pH and acidity were analyzed. The results were evaluated using analysis of variance and Tukey's test, both at 5% significance level. L. casei remained viable in populations of more than 108 CFU / g during 21 days of storage, which is suitable to define the formulations as probiotics. When the different stages of the addition of probiotics in yoghurts were evaluated there was no statistical difference between the formulations (p<0.05) for populations of L. casei except for the first day of storage.

Probióticos são microrganismos capazes de produzir efeitos benéficos sobre seu hospedeiro, quando consumidos vivos e em quantidades adequadas. Para que exerçam esses efeitos, os alimentos probióticos devem conter tais microrganismos em populações acima de 106 UFC/g ou mL, durante toda sua validade. Uma das estratégias para garantir a alta população dos probióticos em leites fermentados é adicioná-los durante ou após o processo de fermentação separadamente das culturas starter. Assim, o objetivo deste trabalho foi verificar o comportamento do microrganismo probiótico Lactobacillus casei adicionado em iogurte natural, em diferentes etapas do processo de produção. Foram produzidos iogurtes com adição de L. casei em diferentes etapas: antes da suplementação com o starter (Streptococcus salivarius subsp. thermophilus e Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus), juntamente com essa cultura e após o término da fermentação. Além disso, um iogurte controle (sem probiótico) foi produzido. Os produtos foram estocados a 4°C e analisados após 1, 7, 14 e 21 dias de armazenamento. Nesses períodos, foram enumeradas as populações das culturas probiótica e starter e avaliados os parâmetros físico-químicos (pH e acidez). Os resultados obtidos foram avaliados através de análise de variância e teste de Tukey, ambos ao nível de 5% de significância.L. casei mantevese viável e em populações superiores a 108 UFC/g durante os 21 dias de armazenamento, suficientes para que as formulações fossem definidas como probióticas. Quando as diferentes etapas de adição do probiótico aos iogurtes foram avaliadas, com exceção do 1º dia, não houve diferença estatística entre as formulações (p<0,05) para as populações de L. casei.

The effect of the addition of lactoferrin on Staphylococcus aureus to Minas frescal cheese was evaluated. Three cheeses were made: control (S. aureus), Lf-2% (2% lactoferrin + S. aureus) and Lf-4% (4% lactoferrin + S. aureus). Cheeses were packaged and S. aureus populations were determined on days 1, 8, 15, 22 and 29 of storage at 6°C. The experiment was repeated three times. S. aureus population increased 1.3 logarithmic cycles in the control cheese during storage, while it decreased to numbers below the detection limit in cheeses containing lactoferrin, over the same period. Moreover, antimicrobial effect showed to be dose-dependent.

Ação antimicrobiana de lactoferrina sobre Staphylococcus aureus inoculado em queijo Minas frescal. O efeito da adição de lactoferrina sobre a viabilidade de Staphylococcus aureus inoculado em queijo Minas frescal foi avaliado. Três queijos foram produzidos: controle (S. aureus), Lf-2% (2% lactoferrina + S. aureus) e Lf-4% (4% lactoferrina + S. aureus). Os queijos foram armazenados e as populações de S. aureus foram determinadas durante o armazenamento refrigerado a 6°C nos dias 1, 8, 15, 22 e 29. Os experimentos foram realizados em triplicata. As populações de S. aureus aumentaram 1,3 ciclos logarítmicos nos queijos controle durante o armazenamento, enquanto que essas populações foram reduzidas abaixo do limite de detecção nos queijos contendo lactoferrina no mesmo período. Além disso, observou-se que o efeito antimicrobiano foi dose-dependente.

With the aim to evaluate the physico-chemical and microbiological quality of UHT milk commercialized in three countries of Mercosul, samples of four different brands were acquired in each city (Foz do Iguaçu - Brazil, Puerto Iguazú - Argentina and Ciudad del Este - Paraguay) and submitted to the following analysis: fat content, titratable acidity, milk ethanol stability (with the following ethanol concentrations: 68, 72, 76 and 80%), total dry extract and no fat dry extract, pH, density and freezing point. Counts of mesophilic and psychrotrophic microorganisms were already done. In the physico-chemical evaluation of UHT milk, a significant number of samples were in disagree with the established patterns for fat content, no fat dry extract, density and freezing point. Except one brand from Brazil, milk samples showed stability to 68% ethanol. pH averages of Brazilian milk were in agree with the patterns and highest values were observed in samples acquired on Paraguay. Observing the microbiological analysis, 37.5%, 62.5% and 12.5% of samples acquired from Brazil, Argentina and Paraguay, respectively, showed counts above the established patterns for mesophilic microorganisms. Counts of psychrotrophic microorganisms were in disagree with the established patterns in 50%, 50% and 100% of samples from Brazil, Argentina and Paraguay, respectively.

Com o objetivo de avaliar a qualidade físico-química e microbiológica do leite UHT comercializado em três países do Mercosul, as amostras de 04 marcas diferentes vendidas nas cidades de Foz do Iguaçu (Brasil), de Puerto Iguazú (Argentina) e de Ciudad del Este (Paraguai) foram submetidas a determinação de matéria gorda, acidez, estabilidade ao etanol 68%, 72%, 76% e 80%, extrato seco total e extrato seco desengordurado, pH, densidade e crioscopia, além da contagem de microrganismos mesófilos e psicrotróficos. Na avaliação físico-química do leite UHT conclui-se que um número significativo de amostras apresentou-se fora dos padrões de qualidade para gordura, extrato seco desengordurado, densidade e crioscopia; os leites analisados exibiram resistência (estabilidade) ao etanol a 68%, salvo uma das marcas do Brasil; médias de valores de pH estavam adequados para as marcas de leite do Brasil, e valores elevados nas marcas de leite do Paraguai. Quanto aos resultados das análises microbiológicas, 37,5% das amostras do Brasil, 62,5 % das amostras da Argentina e 12,5% das amostras do Paraguai apresentaram valores acima dos valores limites para microrganismos mesófilos. Quanto às análises de psicrotróficos, 50% das amostras do Brasil e da Argentina, assim como 100% das amostras do Paraguai apresentaram-se fora dos padrões estabelecidos pela legislação.

O Readycult™ - LMX é um método rápido, que permite resultados em 24h para detecção de coliformes totais e Escherichia coli. Indicado para detecção destes microrganismos em água, baseia-se em reações de enzimas específicas dos coliformes com nutrientes-indicadores do meio. O objetivo deste trabalho foi estudar sua utilização para enumeração de coliformes e E. coli em leite. 125 amostras de leite cru e pasteurizado coletadas na cidade de Londrina, PR, Brasil, foram submetidas à determinação do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e E. coli pela técnica de tubos múltiplos, utilizando-se simultaneamente o Caldo Lactosado Bile Verde Brilhante (CLBVB) e o Readycult™ - LMX. A análise estatística indicou uma correlação entre os resultados obtidos pelos dois métodos de 0,8224 para coliformes totais e de 0,8603 para E. coli. Observou-se que o Readycult™ - LMX e o CLBVB deram resultados semelhantes, mas o Readycult™ - LMX foi mais fácil de ser utilizado. Além disso, os resultados foram mais rapidamente obtidos (24h).

Readycult™ - LMX is a rapid method to test for the presence of total coliform bacteria and Escherichia coli in water, giving results in 24h. It is based on reactions of specific microbial enzymes or indicator nutrients of the medium. The goal of this paper was to study the use of Readycult™ - LMX to detect total coliform and E. coli in milk. One hundred twenty five samples of pasteurized and raw milk, collected in Londrina, PR, Brazil, were tested simultaneously by the most probable number (MPN) method using Brilliant Green Bile Lactose Broth (2%) (BRILA) and Readycult™ - LMX. The Readycult™ - LMX test was evaluated for sensitivity, simplicity, and speed of results. There was a significant correlation between the results obtained by the two methods for total coliforms (r: 0.8224) and for E. coli (r: 0.8603). The two methods yielded similar results, but Readycult™ - LMX was easier to use. In addition, results were available as early as 24h.

O sistema SimPlate™ TPC CI é um método rápido para enumeração de microrganismos aeróbios mesófilos (MAM) em alimentos que utiliza a resazurina como substância indicadora de crescimento bacteriano. Para avaliar sua eficiência em leite pasteurizado, 142 amostras (38 de leite tipo A, 43 de leite tipo B e 61 de leite tipo C) foram colhidas em Londrina, PR, e analisadas pelo SimPlate™ TPC CI e pelo método de contagem em placas com ágar padrão de contagem (PCA). As placas de ambos os sistemas foram incubadas a 35ºC e as leituras realizadas em 24 e 48h. Também foi verificada a presença de resultados falso-positivos e falso-negativos bem como a microbiota láctea predominante nas cavidades do SimPlate™ TPC CI e a capacidade redutora dos diversos grupos de microrganismos. Os resultados foram comparados através de correlação simples e variância média. Considerando a leitura em 24h do SimPlate™ TPC CI, os resultados obtidos apresentaram uma correlação (r) de 0,6811 (var. média: 0,7583) com os resultados do método padrão; na leitura em 48h, a correlação encontrada entre os dois métodos foi de 0,9126 (var. média: 0,0842). Considerando os diferentes tipos de leite, as leituras em 48h do SimPlate™ TPC CI apresentaram as seguintes correlações com o método padrão: leite tipo A, r: 0,9285 (var. média: 0,0817); leite tipo B, r: 0,9231 (var. média: 0,0466); leite C, r: 0,7209 (var. média: 0,1082). Nas amostras com altas contagens de MAM, verificou-se uma maior freqüência de cavidades falso-negativas e uma grande participação de microrganismos Gram positivos, que são pobremente detectados pelo sistema SimPlate™ TPC CI por crescerem lentamente e possuírem baixa capacidade redutora. Os resultados indicaram um melhor eficiência do sistema SimPlate™ TPC CI na leitura em 48h, além da influência direta da qualidade do leite analisado, ou seja, quanto melhor a qualidade microbiológica do leite, melhor o desempenho do sistema. A alta correlação entre os métodos indica que o SimPlate™ TPC CI pode ser utilizado como uma alternativa viável ao método padrão de contagem de MAM em leite pasteurizado tipos A e B, desde que a leitura seja realizada em 48h.

The SimPlate™ TPC CI system is a rapid method to count mesophilic aerobic microorganisms (MAM) in foods, based on the use of resazurine to indicate bacterial growth. Its efficiency in pasteurized milk was evaluated using 142 pasteurized milk samples (38 type A, 43 type B and 61 type C) collected in Londrina, PR. The standard plating method, using Plate Count Agar (PCA) was used for comparison. The plates of both systems were incubated at 35ºC and read after 24h and 48h. The occurrence of false-positive and false-negative wells and the predominant microorganisms in them were also evaluated. The results were compared by simple correlation and mean variance analyses. The correlation (r) and mean variance values were 0.6811 and 0.7583 for the results obtained after 24h, respectively, and 0.9126 and 0.0842 for the results obtained after 48h, respectively. These results indicate that the performance of the system increases when the plates are incubated for 48h. When the three types of milk were evaluated separately, these values were 0.9285 and 0.0817 for type A milk, 0.9231 and 0.0466 for type B milk and 0.7209 and 0.1082 for type C milk. These results indicate that the better the quality of the milk the better the performance of SimPlate™ TPC CI. False-negative wells, found more frequently in samples with high MAM counts, were caused by Gram positive microorganisms, poorly detected by the SimPlate™ TPC CI system because they grew slowly and had low reduction capacity. The results indicated a higher efficiency of the SimPlate™ TPC CI system in the reading at 48h.